检索结果-内蒙古大学图书馆

癌症 2002年第6期21卷 630-635页

作者：赵欣宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室辽宁沈阳110001

背景与目的:国外有研究表明克霉唑可通过持续耗竭细胞内钙库来抑制肿瘤细胞生长。本研究旨在研究克霉唑诱导人结肠癌细胞凋亡的作用。方法:将不同浓度的克霉唑作用于体外培养的人结肠癌CCL229细胞。利用荧光显微镜、电子显微镜观察细胞... 详细信息

背景与目的:国外有研究表明克霉唑可通过持续耗竭细胞内钙库来抑制肿瘤细胞生长。本研究旨在研究克霉唑诱导人结肠癌细胞凋亡的作用。方法:将不同浓度的克霉唑作用于体外培养的人结肠癌CCL229细胞。利用荧光显微镜、电子显微镜观察细胞的形态变化,流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体比例,并利用TUNEL法进行凋亡的分子生物学检测。结果:25～35μmol/L的克霉唑均可诱导CCL229细胞凋亡,其诱导作用表现为时间和剂量依赖性。荧光显微镜及电镜下观察到凋亡小体形成等典型的形态学改变。DNA直方图上显示亚二倍体峰,亚二倍体比例随剂量及时间的增加而增加。相应地,G1期细胞比例下降。TUNEL法观察到棕褐色着染的凋亡阳性细胞。结论:克霉唑对人结肠癌细胞系CCL229有明显的凋亡诱导作用,并且能特异地诱导G1期细胞凋亡。

关键词：克霉唑诱导结肠癌细胞凋亡细胞周期 CCL229细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

超抗原葡萄球菌肠毒素与抗人大肠癌单链抗体ND-1 scFv融合基因的构建、表达及活性分析

引用

细胞与分子免疫学杂志 2012年第4期28卷 400-403页

作者：陈航李莉方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:构建并表达超抗原葡萄(SEA)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的融合蛋白,以提高SEA的靶向杀伤作用。方法:构建超抗原SEA和鼠抗人大肠癌单链抗ND-1scFv的融合基因ND-1 scFv/SEA的表达载体,转化到大肠杆菌*** M15中进行诱导表达。Ni-... 详细信息

目的:构建并表达超抗原葡萄(SEA)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的融合蛋白,以提高SEA的靶向杀伤作用。方法:构建超抗原SEA和鼠抗人大肠癌单链抗ND-1scFv的融合基因ND-1 scFv/SEA的表达载体,转化到大肠杆菌*** M15中进行诱导表达。Ni-NTA亲和层析对表达产物进行分离、纯化。间接免疫荧光法检测融合蛋白的靶向结合活性,MTT法检测靶向杀伤效率。结果:成功构建了融合基因ND-1scFv/SEA,实现功能性表达,纯化的ND-1scFv/SEA融合蛋白与表达有ND-1相应抗原的大肠癌细胞CCL-187有高度亲和活性,通过激活外周血单核细胞,可特异性杀伤靶细胞,在4μg/mL浓度下对CCL-187的杀伤率达到91%,明显优于SEA的杀伤活性。结论:融合蛋白ND-1 scFv/SEA对大肠癌细胞CCL-187具有靶向结合和杀伤活性,为SEA用于靶向性的大肠癌治疗奠定了基础。

关键词： ND-1单克隆抗体单链抗体Fv 葡萄球菌肠毒素A 大肠癌

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A的克隆表达及血清学分析

引用

细胞与分子免疫学杂志 2013年第4期29卷 414-417页

作者：陈航方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室辽宁沈阳110001

目的构建并表达功能性的脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A(NspA)的重组蛋白,并检测流行性脑脊髓膜炎(流脑)恢复期患者血清中的抗NspA抗体水平,探讨NspA作为新的流脑抗原疫苗的意义。方法从流脑患者流行株中克隆NspA基因构建原核表达载体,在大肠... 详细信息

目的构建并表达功能性的脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A(NspA)的重组蛋白,并检测流行性脑脊髓膜炎(流脑)恢复期患者血清中的抗NspA抗体水平,探讨NspA作为新的流脑抗原疫苗的意义。方法从流脑患者流行株中克隆NspA基因构建原核表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,GSTrap FF亲和层析纯化出具有生物活性的NspA融合蛋白。采用纯化得到的NspA融合蛋白检测流脑恢复期患者血清中的抗NspA抗体。结果成功表达了功能性NspA蛋白,相对分子质量(Mr)为44 000。并用NspA融合蛋白检测到患者恢复期血清中存在有抗NspA抗体,且滴度为1∶40时,阳性率为90%。结论成功表达了NspA重组蛋白,并检测到自然感染流脑患者恢复期血清中的NspA抗体。

关键词：脑膜炎奈瑟氏菌脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A 脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A抗体血清学分析

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

RUNX3全长和不同结构域原核表达载体的构建及其重组蛋白表达

引用

吉林大学学报（医学版） 2013年第6期39卷 1112-1115页

作者：宋艳艳王桂玲中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白。方法:以pcDNA3.1-myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶(GST)融合表... 详细信息

目的:构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白。方法:以pcDNA3.1-myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌(***)BL21中诱导其融合蛋白表达,SDS-PAGE电泳检测其蛋白表达情况。结果:EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后得到与预期大小相符的FL(1 245bp)、ΔRunt(843bp)、Nter(159bp)、Runt(402bp)和Cter(684bp)5个载体片段。SDS-PAGE电泳检测,RUNX3全长及各个结构域截短GST-RUNX3截短融合蛋白(GST-FL、GST-Runt、GST-Nter和GST-Cter)相对分子质量分别为72 000、40 000、32 000和51 000。结论:成功构建RUNX3全长和各个结构域截短的GST标签的原核表达载体,并实现其重组蛋白在原核细胞中的表达。

关键词： RUNX3 载体蛋白诱导蛋白表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

Cyclin G2抑制肿瘤细胞增殖的研究

引用

癌症 2002年第6期21卷 577-581页

作者：田玉楼刘芙蓉刘洁姜莉罗阳张学中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

背景与目的:周期蛋白(cyclin)是调节细胞周期活动的重要蛋白质,是细胞增殖的正调节因子。CyclinG2可能不同于其它周期蛋白,其表达可被DNA损伤和抑癌基因VHL诱导,对细胞增殖可能起负性调节作用。此外,我们在对口腔鳞癌进行基因表达谱研... 详细信息

背景与目的:周期蛋白(cyclin)是调节细胞周期活动的重要蛋白质,是细胞增殖的正调节因子。CyclinG2可能不同于其它周期蛋白,其表达可被DNA损伤和抑癌基因VHL诱导,对细胞增殖可能起负性调节作用。此外,我们在对口腔鳞癌进行基因表达谱研究时发现,癌组织中cyclinG2表达降低。本研究的目的是为了弄清cyclinG2表达究竟是促进还是抑制肿瘤细胞体外增殖。方法:应用RT-PCR扩增获得cyclinG2基因cDNA,将其插入到真核表达载体pIRESneo的BamHI和BstXI酶切位点处,获得重组表达质粒,命名为pIRES-G2。通过脂质体介导将pIRES-G2转染肿瘤细胞系HeLa,经G418筛选2周,观察细胞集落形成情况并计数形成的集落数。结果:实验组集落的数量显著少于对照组,而且所形成的集落大小也明显比对照组小,细胞皱缩、形态不规则,胞质内颗粒增多、出现空泡。pIRESneo空载体对照组的集落数为76.7±24.8;实验组的集落数为18±10.4,占对照组的23.4%。结论:CyclinG2基因高表达对HeLa细胞的体外增殖和生长有显著抑制作用。

关键词： CyclinG2 肿瘤细胞增殖基因转染

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

抗人大肠癌单链抗体基因的克隆与表达

引用

癌症 2002年第7期21卷 740-744页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

背景与目的:单链抗体相对于完整抗体具有免疫源性低、对肿瘤组织穿透力强的特点,日益成为肿瘤诊断和治疗的良好导向载体。本研究的目的是将抗人大肠癌单克隆抗体ND-1的重链可变区VH和轻链可变区VL基因借助一短肽序列(Gly4Ser)3进行重组... 详细信息

背景与目的:单链抗体相对于完整抗体具有免疫源性低、对肿瘤组织穿透力强的特点,日益成为肿瘤诊断和治疗的良好导向载体。本研究的目的是将抗人大肠癌单克隆抗体ND-1的重链可变区VH和轻链可变区VL基因借助一短肽序列(Gly4Ser)3进行重组,构建单链抗体基因ND-1scFv,并使其在大肠杆菌中表达。方法:采用RT-PCR技术从能够分泌ND-1单抗的鼠杂交瘤细胞中扩增VH和VL基因,通过重叠延伸拼接PCR在VH和VL基因间引入连接短肽,体外构建ND-1scFv基因,经过常规转化和筛选,将其克隆至PET-28a(+)表达载体,由IPTG诱导在大肠杆菌BL21中表达为ND-1scFv与His-Tag的融合蛋白。表达产物用Ni-NTAresin亲和层析方法纯化,并采用ELISA方法检测其免疫活性。结果:序列分析表明,ND-1scFv基因全长732bp,VH354bp位于上游;VL330bp位于下游。SDS-PAGE显示,重组蛋白相对分子量30kDa,与预期结果一致。scFv表达产物以不溶性包涵体形式存在,经亲和层析纯化后蛋白纯度达94%。ELISA结果显示scFv保留了与亲本抗体ND-1相似的免疫活性,结论:成功地构建了抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv,并在大肠杆菌中获得了较高水平的功能性表达。

关键词：克隆单链抗体大肠肿瘤基因表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

小鼠DOC-1R反义重组载体的构建及表达的研究

引用

癌症 2002年第3期21卷 240-244页

作者：周伟强姜莉生秀杰张学中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

背景与目的:DOC-1R(deletedinoralcancer-1related)基因是一个候选的抑癌基因,它与CDK2特异性结合后,抑制CDK2与cyclin形成复合物,进而对细胞周期进行调控。本研究拟构建DOC-1R反义重组质粒,并研究该基因表达受到抑制后对正常细胞增殖... 详细信息

背景与目的:DOC-1R(deletedinoralcancer-1related)基因是一个候选的抑癌基因,它与CDK2特异性结合后,抑制CDK2与cyclin形成复合物,进而对细胞周期进行调控。本研究拟构建DOC-1R反义重组质粒,并研究该基因表达受到抑制后对正常细胞增殖产生的影响。方法:小鼠DOC-1R基因筛选后构建pcDNA3-DOC-1R反义重组质粒,经细胞转染,通过细胞增殖能力测定、软琼脂培养观察DOC-1R对细胞生长状态的影响。结果:小鼠DOC-1R基因转染的NIH3T3细胞较空载体转染的细胞生长速度有较明显的差异。正义重组体pcDNA3-DOC-1R+可明显抑制细胞增殖,而反义重组体pcDNA3-DOC-1R-则促进细胞的增殖。在软琼脂培养中,正义重组体在软琼脂培养基中成集落能力下降,一方面克隆形成率下降,另一方面形成的集落也普遍较小;而反义重组体明显增加了成集落能力,克隆形成率也较正义重组体有明显的增加。结论:小鼠DOC-1R基因可明显抑制细胞的生长速度和成集落能力,这一作用有助于进行正常细胞生长、增殖规律和肿瘤治疗、预防方面的研究。

关键词： DOC-1R 细胞周期调控反义核酸小鼠重组载体肿瘤

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

基质金属蛋白酶及其组织抑制物在卵巢肿瘤中的表达

引用

癌症 2002年第1期21卷 91-94页

作者：蔡威宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

背景与目的:有研究表明,基质金属蛋白酶(metalloproteinases,MMPs)与肿瘤的发生发展,尤其是肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。本研究探讨基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其组织抑制物(tissueinhibitorofmetalloproteinases-2,TIMP-2)与卵巢癌侵袭及卵巢癌生物学行为的关系。方法:采用免疫组化S-P法对128例卵巢肿瘤组织MMP-2、MMP-9及TIMP-2蛋白表达进行检测,并用χ2检验进行统计学分析。结果:免疫组化结果表明,MMP-2、MMP-9及TIMP-2在卵巢癌组织中阳性表达率明显高于卵巢囊腺瘤(P<0.01)。MMP-2及MMP-9在卵巢癌临床分期Ⅲ-Ⅳ期病例中的阳性表达率明显高于Ⅰ-Ⅱ期者,病理学分级3级病例中的表达率明显高于1-2级者(P<0.01),有淋巴结转移病例中的表达率明显高于无淋巴结转移者(P<0.01)。而TIMP-2的阳性表达与MMP-2及MMP-9相反。结论:MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达与卵巢癌的临床分期、病理分级及淋巴结转移有关,MMP-2及MMP-9蛋白的高表达可作为判断卵巢癌具有转移倾向的临床参考指标。

关键词：卵巢肿瘤基质金属蛋白酶金属蛋白酶组织抑制物免疫组织化学

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

增殖细胞核抗原在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其临床病理意义

引用

中国实用妇科与产科杂志 1997年第3期13卷 149-150页

作者：潘伯臣宋今丹中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

应用免疫组织化学方法检测了５９例上皮性卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，以探讨卵巢肿瘤中ＰＣＮＡ蛋白表达的临床病理意义。结果：ＰＣＮＡ在良、恶性上皮性卵巢瘤中均有表达，但卵巢癌中ＰＣＮＡ的阳性率（８０．９％... 详细信息

应用免疫组织化学方法检测了５９例上皮性卵巢肿瘤中增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达，以探讨卵巢肿瘤中ＰＣＮＡ蛋白表达的临床病理意义。结果：ＰＣＮＡ在良、恶性上皮性卵巢瘤中均有表达，但卵巢癌中ＰＣＮＡ的阳性率（８０．９％）明显高于良性卵巢瘤中的阳性率（２５％，Ｐ＜０．０１）。卵巢癌中，高分化卵巢癌ＰＣＮＡ的阳性指数评分低于中、低分化卵巢癌（Ｐ＜０．００１），ＰＣＮＡ阳性指数评分与分化程度之间呈负相关，ｒｓ＝－０．５０（Ｐ＜０．０１）。Ⅰ／Ⅱ期卵巢癌ＰＣＮＡ指数阳性指数评分低于Ⅲ／Ⅳ期卵巢癌（Ｐ＜０．０５），ＰＣＮＡ阳性指数评分与临床期别之间呈正相关，ｒｓ＝０．４３（Ｐ＜０．０１）。结果提示，分化程度低、临床期别高的卵巢癌细胞增殖快，ＰＣＮＡ的检测有助于鉴别上皮性卵巢肿瘤的良、恶性，并有可能作为上皮性卵巢癌的预后指标。

关键词：卵巢肿瘤免疫组织化学增殖细胞核抗原病理

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

正交试验考查MTT方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素

引用

癌症 1997年第6期16卷 459-460页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室

正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报... 详细信息

正交试验考查ＭＴＴ方法在测定大肠癌细胞药物敏感性实验中的影响因素方瑾宋今丹关键词大肠肿瘤正交试验ＭＴＴ法药敏实验中图号Ｒ７３０．５ＭＴＴ法是一种简便易行，并已被广泛应用的能客观定量反映细胞存活情况的实验方法。但文献报道的具体做法各不相同，且实验结果受...

关键词：大肠肿瘤正交试验 MTT法药敏实验

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：