检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2022年第7期42卷 62-68页

作者：姚芷昕李婉明中国医科大学生命科学学院沈阳110122 中国医科大学生命科学学院卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室分子细胞生物学教研室沈阳110122

乳腺癌是女性高发恶性肿瘤,三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)恶性程度极高,且发病机制复杂,是乳腺癌分型中预后最差的类型,但目前其早期筛查和诊断的敏感度仍处在较低水平。因此,亟须通过应用具有高度特异性的肿瘤标... 详细信息

乳腺癌是女性高发恶性肿瘤,三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)恶性程度极高,且发病机制复杂,是乳腺癌分型中预后最差的类型,但目前其早期筛查和诊断的敏感度仍处在较低水平。因此,亟须通过应用具有高度特异性的肿瘤标志物分子探针,实现其早期诊断和治疗。核酸适配体是在人工合成的随机单链核酸序列文库中,通过指数富集的配体系统进化技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)筛选获得的寡核苷酸序列。高效的分子识别能力使其成为最具潜力的生物靶向分子,在肿瘤诊断及治疗中具有广阔的应用前景。目前,通过筛选已获得了多种靶向TNBC细胞的核酸适配体。重点综述基于SELEX及其衍生技术筛选TNBC相关核酸适配体的新进展,以及核酸适配体在TNBC诊断和治疗中的应用,为相关研究提供参考。

关键词：三阴性乳腺癌核酸适配体指数富集的配体系统进化技术肿瘤诊断肿瘤治疗

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SARS冠状病毒S蛋白候选细胞受体氨基肽酶N的基因变异研究

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Acta Genetica Sinica 2003年第7期30卷 687-692页

作者：罗阳姜莉敖雪吕志刘恒丹徐岩敖杨任群鲁翀徐惠绵张学中国医科大学医学基因组学研究室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

氨基肽酶N是人类冠状病毒HCoV 2 2 9E的细胞受体 ,可能为SARS冠状病毒 (SARS CoV)S蛋白的受体。应用变性高效液相色谱 (DHPLC)技术筛查了正常无关个体中氨基肽酶N编码基因ANPEP的全部外显子及其两侧部分内含子序列。对筛查中DHPLC峰型... 详细信息

氨基肽酶N是人类冠状病毒HCoV 2 2 9E的细胞受体 ,可能为SARS冠状病毒 (SARS CoV)S蛋白的受体。应用变性高效液相色谱 (DHPLC)技术筛查了正常无关个体中氨基肽酶N编码基因ANPEP的全部外显子及其两侧部分内含子序列。对筛查中DHPLC峰型提示有基因变异存在的DNA片段行PCR产物直接测序 ,共发现 9种单核苷酸多态 (SNP) ,其中 4种为非同义SNP ,分别为T32 1M(96 2C >T)、S6 5 1L(195 2C >T)、S75 2N(2 2 5 5G >A)和G76 4R(2 2 90G >A) ;其余 5种SNP为T795T(2 385C >T)、IVS7+17G >A、IVS14 16A >G、IVS17+12C >G和IVS17+44C >T。这些SNP的发现 ,为SARS CoV的宿主遗传因素研究 ,特别是发现SARS CoV感染和SARS发病的易感基因或抗病基因 ,提供了遗传标记。

关键词： SARS冠状病毒氨基肽酶N 变性高效液相色谱单核苷酸多态

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维甲酸Ro 40-8757对人肿瘤细胞系的作用及其机制探讨

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癌症 2002年第10期21卷 1051-1056页

作者：吕晶宋今丹卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学分子生物学研究所辽宁沈阳110001

背景与目的:维甲酸类化合物对多种恶性肿瘤具有诱导分化、抑制增殖、诱导凋亡等作用。本文旨在研究一种新合成的维甲酸Ro40-8757对4种体外培养的人肿瘤细胞系生长增殖、形态结构及细胞周期的影响,并探讨其机制。方法:用MTT法测定Ro40-8... 详细信息

背景与目的:维甲酸类化合物对多种恶性肿瘤具有诱导分化、抑制增殖、诱导凋亡等作用。本文旨在研究一种新合成的维甲酸Ro40-8757对4种体外培养的人肿瘤细胞系生长增殖、形态结构及细胞周期的影响,并探讨其机制。方法:用MTT法测定Ro40-8757对4种人肿瘤细胞系(人结肠癌细胞系CCL-187和CCL-229、人胰腺癌细胞系JF-305和AsPC-1)的增殖抑制作用;用光镜和电镜观察其对敏感细胞系CCL-187细胞形态的影响;用流式细胞术研究其对细胞周期的影响;最后,用Westernblot法检测在给药前后CCL-187细胞周期蛋白p16、p21和p27的变化情况,以探讨其可能的机制。结果:Ro40-8757对4种细胞系均有显著的生长抑制作用,并具有时间、浓度依赖性;显微镜观察未见细胞有明显的细胞毒性、凋亡和分化特征性改变;药物作用后4种肿瘤细胞系细胞周期阻滞于G0/G1期;Ro40-8757作用12h后CCL-187细胞系p21和p27同时升高,24、48h逐渐下降,72h又再次升高144h升至最高;p16在加药前后始终阴性表达。结论:Ro40-8757对人结肠癌细胞系CCL-187和CCL-229、人胰腺癌细胞系JF-305和AsPC-1有明显的增殖抑制作用,并呈时间、浓度依赖性;这种抑制作用是通过将细胞周期阻滞于G0/G1期发挥作用的,细胞周期蛋白p21和p27在其中起作用引起细胞周期阻滞。

关键词：维甲酸 Ro40-8757 肿瘤增殖抑制细胞周期 MTT法结肠癌胰腺癌

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卵巢癌患者血液中RASSF1A基因甲基化的检测及其意义

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中华病理学杂志 2005年第12期34卷 785-787页

作者：马琳刘芙蓉张淑兰中国医科大学附属第二临床学院妇产科沈阳110013 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室

目的探讨循环肿瘤DNA中RASSF1A基因的甲基化及其与卵巢癌的关系。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)方法,对51名正常健康人、51例卵巢癌患者和51例卵巢良性肿瘤患者循环DNA RASSF1A基因的甲基化进行了检测。结果51名正常健康人和51例卵巢良... 详细信息

目的探讨循环肿瘤DNA中RASSF1A基因的甲基化及其与卵巢癌的关系。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)方法,对51名正常健康人、51例卵巢癌患者和51例卵巢良性肿瘤患者循环DNA RASSF1A基因的甲基化进行了检测。结果51名正常健康人和51例卵巢良性肿瘤患者循环DNA RASSF1A基因甲基化的发生率均为0;51例卵巢癌患者循环肿瘤DNA RASSF1A甲基化的发生率为43·1%(22/51,P<0·05)。RASSF1A甲基化与卵巢癌组织学类型无明显相关性(P>0·05)。临床Ⅰ期和Ⅱ期循环肿瘤DNA RASSF1A基因甲基化的发生率明显低于临床Ⅲ期和Ⅳ期(P<0·05);高和中分化组RASSF1A基因甲基化的发生率低于低分化组(P<0·05)。结论RASSF1A基因甲基化在卵巢癌的发生和发展过程中起重要作用。卵巢癌患者的循环肿瘤DNA中可以检测到RASSF1A基因的甲基化,与卵巢癌的临床分期和组织学分级有关。循环肿瘤DNA中RASSF1A甲基化的检测有助于卵巢癌的诊断和预后判定。

关键词：卵巢肿瘤 DNA甲基化基因抑制肿瘤

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移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠糖尿病的研究

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中国组织化学与细胞化学杂志 2007年第1期16卷 104-109页

作者：刘弘光夏鲲刘晓玉庞希宁中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室

目的通过移植骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的方法试治疗大鼠糖尿病。方法贴壁生长的MSC与大鼠胰腺的细胞共培养以检测其向胰岛细胞分化的潜能。并将体外培养扩增的MSC移植入糖尿病大鼠体内,观测其能否改善糖尿病病情及... 详细信息

目的通过移植骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)的方法试治疗大鼠糖尿病。方法贴壁生长的MSC与大鼠胰腺的细胞共培养以检测其向胰岛细胞分化的潜能。并将体外培养扩增的MSC移植入糖尿病大鼠体内,观测其能否改善糖尿病病情及其在大鼠体内微环境中的分化情况。结果共培养法可使MSC分化为胰岛样细胞。对大鼠的MSC移植能明显缓解糖尿病病情。结论MSC移植的方法对大鼠糖尿病有一定的治疗作用。

关键词：骨髓间充质干细胞胰腺细胞共培养糖尿病细胞移植

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抗人大肠癌单链抗体的构建、表达及其体内外生物学活性的检测

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细胞与分子免疫学杂志 2002年第6期18卷 611-613页

作者：方瑾宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的　将抗人大肠癌单克隆抗体ND 1(mAb)的VH和VL 基因进行重组 ,构建和表达ND 1scFv ,并对其在体内外的生物学活性进行检测。方法　采用RT PCR技术 ,从能够分泌mAbND 1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH 和VL 基因 ,通过重叠延伸拼接PCR在VH 和VL... 详细信息

目的　将抗人大肠癌单克隆抗体ND 1(mAb)的VH和VL 基因进行重组 ,构建和表达ND 1scFv ,并对其在体内外的生物学活性进行检测。方法　采用RT PCR技术 ,从能够分泌mAbND 1的鼠杂交瘤细胞中扩增VH 和VL 基因 ,通过重叠延伸拼接PCR在VH 和VL 基因间引入连接短肽 ,体外构建ND 1scFv基因 ,并在大肠杆菌中表达。采用间接免疫荧光 (IFA)及ELISA法测定ND 1scFv的免疫学活性。用99Tcm 标记ND 1scFv后 ,将偶联物给予荷瘤裸鼠 ,观察其在动物体内的显像及生物学分布。结果　SDS PAGE显示 ,重组蛋白Mr 为 30 0 0 0 ,同预期结果一致。IFA及ELISA检测表明 ,ND 1scFv保留了与亲本抗体相近的免疫学活性 ,对表达相应抗原的靶细胞具有特异结合活性。体内放射免疫实验显示 ,99Tcm ND 1scFv在荷瘤小鼠体内的生物学分布 ,呈明显的肿瘤积聚趋向 ,注入体内 1h血中T/NT即达2 .6 1。结论　获得免疫学活性良好的ND 1scFv ,对荷瘤动物体内肿瘤的定位快速、准确。

关键词：大肠癌单链抗体生物学活性肿瘤诊断 ^99Tc^m

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全反式维甲酸诱导人卵巢癌细胞凋亡的实验研究

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中国肿瘤临床 2003年第2期30卷 99-103页

作者：蔡威宋今丹中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室沈阳市110001

目的:观察全反式维甲酸(All-transretinoicacid,ATRA)诱导人卵巢癌细胞CAOV3产生凋亡。方法:应用扫描电镜、透射电镜、DNA断裂分析及流式细胞术观察ATRA诱导人卵巢癌细胞CAOV3凋亡。结果:ATRA作用后电镜下细胞逐渐变圆,细胞表面微绒毛消... 详细信息

目的:观察全反式维甲酸(All-transretinoicacid,ATRA)诱导人卵巢癌细胞CAOV3产生凋亡。方法:应用扫描电镜、透射电镜、DNA断裂分析及流式细胞术观察ATRA诱导人卵巢癌细胞CAOV3凋亡。结果:ATRA作用后电镜下细胞逐渐变圆,细胞表面微绒毛消失,核染色质更加致密,浓缩分块,胞质中有空泡形成,细胞表面出泡,脱落形成膜包裹的凋亡小体。流式细胞术不同浓度ATRA对CAOV3细胞凋亡作用的结果显示在DNA直方图上均出现低于G1期二倍体DNA含量的亚二倍体峰,随药物浓度增加,亚二倍体细胞从10-8mol/LATRA时的18.7%增加到10-6mol/L的37.4%;10-6mol/LATRA作用24h即诱导CAOV3细胞产生典型的梯形DNA条带(DNAladder),大小约180bp的整数倍递增,随ATRA作用时间延长而逐渐加强。结论:ATRA可以诱导卵巢癌细胞产生细胞凋亡,呈时间和浓度依赖性。

关键词：卵巢癌全反式维甲酸 CAOV3细胞细胞凋亡扫描电镜透射电镜 DNA断裂分析法流式细胞术

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诱导胚胎干细胞向神经细胞分化方法的研究与探讨

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细胞生物学杂志 2004年第2期26卷 145-148页

作者：顾文佳庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室发育生物学教研室沈阳110001

胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,... 详细信息

胚胎干细胞(ES细胞)是一种能够在体外进行不断自我更新,并具有多种分化潜能的细胞。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化的研究进展迅速,相关实验技术和理论也不断发展。总结了近年来各国研究者诱导小鼠和人胚胎干细胞向神经细胞分化的方法,分析了一些方法的原理并初步探讨其相关的分子机制,并提出一些可行性新方法。胚胎干细胞向神经细胞诱导分化因其体外的可操作性、来源的广泛性及质量可控性将有可能成为临床上治疗神经系统疾病的有效方法。

关键词：诱导胚胎干细胞神经细胞分化 ES细胞神经系统疾病

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人p21活化激酶6基因截短区域的GST标签原核表达质粒的构建及其重组蛋白的表达

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吉林大学学报（医学版） 2013年第3期39卷 437-440页

作者：刘彤李洋李丹妮耿楠希李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 中国医科大学

目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)的各个截短区域原核表达质粒,并诱导和鉴定其融合蛋白的表达,为探讨PAK6基因的生物学功能提供依据。方法:以真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-PAK6为模板,PCR扩增出PAK6基因的各个截短片段。所获得的各截短片段经... 详细信息

目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)的各个截短区域原核表达质粒,并诱导和鉴定其融合蛋白的表达,为探讨PAK6基因的生物学功能提供依据。方法:以真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-PAK6为模板,PCR扩增出PAK6基因的各个截短片段。所获得的各截短片段经EcoRⅠ/XhoⅠ双酶切后克隆至GST标签的原核表达载体pGEX-5X-1中。将构建的PAK6各截短质粒转化入*** BL21中,采用IPTG诱导PAK6基因截短融合蛋白表达,采用Western blotting法鉴定PAK6基因截短融合蛋白的表达。结果:EcoRⅠ/XhoⅠ双酶切后得到与预期大小相符的载体片段(5 000bp)和PAK6 1-55(165bp)、PAK6 56-210(465bp)、PAK6 211-410(600bp)及PAK6 385-681(891bp)4个片段。Western blotting检测,PAK6各截短区域质粒GST-PAK6截短融合蛋白相对分子质量分别为32 000、43 000、48 000和60 000。结论:成功构建PAK6基因各个截短区域GST标签原核表达质粒并表达其重组蛋白。

关键词： P21活化激酶截短区域原核表达质粒 GST融合蛋白

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内质网分子伴侣GRP78在小鼠脑发育过程中的时空表达

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实验生物学报 2003年第2期36卷 137-144页

作者：李波陈誉华中国医科大学发育生物学研究室沈阳110001 卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

多细胞生物体发育的实质是基因的选择性表达,表达蛋白的成熟有赖于分子伴侣的协助,但迄今分子伴侣特别是内质网分子伴侣在脑发育过程中的作用尚不清楚。本文应用RT-PCR、蛋白质免疫印迹和免疫组织化学的方法研究了小鼠发育不同阶段的脑... 详细信息

多细胞生物体发育的实质是基因的选择性表达,表达蛋白的成熟有赖于分子伴侣的协助,但迄今分子伴侣特别是内质网分子伴侣在脑发育过程中的作用尚不清楚。本文应用RT-PCR、蛋白质免疫印迹和免疫组织化学的方法研究了小鼠发育不同阶段的脑组织中GRP78的表达和定位分布随时间变化的情况。结果发现GRP78在小鼠脑发育过程中呈时空性表达:胚胎早期表达较高,胚胎发育末期逐渐下降,出生后逐渐升高,至生后一周时达到成年鼠的水平;在胚胎期GRP78蛋白在脑组织的表达呈现从端脑到后脑逐渐降低的趋势。研究结果还表明GRP78蛋白的免疫染色阳性产物在神经细胞中出现的时间早于神经胶质细胞。这些首次观察到的结果提示GRP78与脑的早期发生和形态建成有一定的关系。

关键词：内质网分子伴侣GRP78 脑发育过程时空性表达葡萄糖调节蛋白形态建成

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