检索结果-内蒙古大学图书馆

卫生研究 2005年第4期34卷 400-403页

作者：高明奇孙黎光张天彪滕赞刘素媛中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院药理教研室

目的探讨铅对小鼠学习记忆和海马细胞内钙库Ca2+释放的影响。方法用水迷宫实验测定小鼠的空间学习记忆能力;采用低浓度胰蛋白酶消化法分离小鼠海马细胞,用IP3敏感钙库和IP3非敏感钙库的特异性拮抗剂肝素和普鲁卡因刺激海马细胞,以弗拉吐... 详细信息

目的探讨铅对小鼠学习记忆和海马细胞内钙库Ca2+释放的影响。方法用水迷宫实验测定小鼠的空间学习记忆能力;采用低浓度胰蛋白酶消化法分离小鼠海马细胞,用IP3敏感钙库和IP3非敏感钙库的特异性拮抗剂肝素和普鲁卡因刺激海马细胞,以弗拉吐(Fura2)作Ca2+荧光探针测定铅对海马细胞[Ca2+]i的影响。结果在水迷宫实验中,结果表明慢性铅暴露可明显损伤仔鼠的空间定位航行能力,损伤程度与饮用铅的浓度成正相关。与对照组比较,25μmol·L-1铅可致分离的小鼠海马细胞在胞外无钙静息状态下[Ca2+]i显著性增高(P<0.05);而30μg·ml-1的三磷酸肌醇(IP3)敏感钙库特异性拮抗剂Heparin和0.1mg·ml-1的非IP3敏感钙库的特异性拮抗剂procaine可拮抗铅引起的海马细胞[Ca2+]i增高。结论慢性铅暴露可致小鼠空间学习记忆能力下降;高水平的铅可促进小鼠海马细胞内IP3敏感和非IP3敏感的两种内质网钙库释放,致海马细胞在胞外无钙静息状态下[Ca2+]i升高。

关键词：海马细胞铅 IP3敏感钙库非IP3敏感钙库 [Ca^2+]i

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血小板生长因子在NIH3T3成纤维细胞和MT3转化细胞应答中的作用

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中国医科大学学报 1993年第5期22卷 321-325页

作者：于爱鸣于秉治中国医科大学基础医学部生物化学教研室

血小板生长因子(PDGF)通过促进细胞外Ca^(2+)内流,增加细胞内Ca^(2+)浓度,但在亲代NIH3T3成纤维细胞和转化的MT3细胞中,却表现出不同的作用。在亲代NIH3T3成纤维细胞中,PDGF能够抑制舒缓激肤介导的细胞内Ca^(2+)浓度增加,未能见到细胞内... 详细信息

血小板生长因子(PDGF)通过促进细胞外Ca^(2+)内流,增加细胞内Ca^(2+)浓度,但在亲代NIH3T3成纤维细胞和转化的MT3细胞中,却表现出不同的作用。在亲代NIH3T3成纤维细胞中,PDGF能够抑制舒缓激肤介导的细胞内Ca^(2+)浓度增加,未能见到细胞内Ca^(2+)波动现象;而在转化的MT3细胞中,PDGF丧失了对舒缓激肽介导的细胞内Ca^(2+)浓度增加的抑制作用,常常引起细胞内Ca^(2+)波动现象。对于DNA的合成,PDGF在两种细胞中,也表现出有时程的差异。

关键词：血小板生长因子钙离子 DNA合成

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转化前后K-562细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性及内源性底物的研究

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中国医科大学学报 1992年第S1期 32-35,43页

作者：孙茜王殿鸿郑博中国医科大学基础医学部生物化学教研室

对丁酸钠转化前后的人红白血病细胞林K-562的表面胰岛素受体数量、胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性及细胞内源性底物进行了研究。结果表明:丁酸钠转化后的K-562细胞酪氨酸蛋白激酶活性降低,胰岛素受体数量减少,K-562细胞酪氨酸蛋白激酶的... 详细信息

对丁酸钠转化前后的人红白血病细胞林K-562的表面胰岛素受体数量、胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性及细胞内源性底物进行了研究。结果表明:丁酸钠转化后的K-562细胞酪氨酸蛋白激酶活性降低,胰岛素受体数量减少,K-562细胞酪氨酸蛋白激酶的内源性底物,分子量为67KD—底物蛋白在转化后消失。说明该底物及胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶在胰岛素调控的K-562细胞的增殖中起重要作用。

关键词：胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶内源性底物 K-562细胞

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α_1-抗胰蛋白酶等对修饰胰蛋白酶的作用

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中国医科大学学报 1992年第3期12卷 175-178页

作者：卢四方杨云焕中国医科大学基础医学部生物化学教研室

用葡聚糖T2000修饰的胰蛋白酶,对α_1-抗胰蛋白酶的抑制作用、对尿素的变性作用以及对胃蛋白酶的消化作用的耐受力均高于天然胰蛋白酶。

关键词：修饰 α_1-抗胰蛋白酶胰蛋白酶

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胰岛素受体蛋白质水解活性的研究

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中国医科大学学报 1991年第S1期20卷 58-59页

作者：潘忠诚王殿鸿中国医科大学基础医学部生物化学教研室

胰岛素与受体结合后可引起两方面的效应:①引起受体β亚基自身磷酸化,从而激活β亚基的酪氨酸蛋白激酶活性,进而引起一系列细胞内的反应。②生成低分子介体,此介体可引起丙酮酸脱氢酶脱磷酸而激活。但是,关于介体的来源、化学本质及其... 详细信息

胰岛素与受体结合后可引起两方面的效应:①引起受体β亚基自身磷酸化,从而激活β亚基的酪氨酸蛋白激酶活性,进而引起一系列细胞内的反应。②生成低分子介体,此介体可引起丙酮酸脱氢酶脱磷酸而激活。但是,关于介体的来源、化学本质及其存在尚有争论。

关键词：胰岛素受体 125I标记酪蛋白蛋白质水解活性

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昆明系小鼠体外受精方法及一种新培养基的应用

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中国医科大学学报 1999年第1期28卷 8-10页

作者：刘莹武迪迪宗志宏张杰于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室

目的：为研究受精卵早期发育机理提供大量、同步分裂的受精卵；寻找一种更好的受精卵体外培养基。方法：小白鼠超排取卵，附睾取精，建立体外受精模型。并比较不同培养液对受精卵发育的影响。结论：建立了昆明系小鼠的体外受精模型。受... 详细信息

目的：为研究受精卵早期发育机理提供大量、同步分裂的受精卵；寻找一种更好的受精卵体外培养基。方法：小白鼠超排取卵，附睾取精，建立体外受精模型。并比较不同培养液对受精卵发育的影响。结论：建立了昆明系小鼠的体外受精模型。受精２４ｈ后，Ｍ１６和ＫＳＯＭ分别有３１．５％和４８．７％发育到２－细胞期；受精４８ｈ后，则分别有１５．７％和５３．６％发育到４－细胞期。结论：ＫＳＯＭ在一定程度上克服“二细胞阻滞”

关键词：体外受精培养基二细胞阻滞

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aFGF对肺腺癌AGZY-83A细胞株TPK、PKC活性及Ca^(2+)浓度的影响

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中国医科大学学报 1998年第6期27卷 562-565页

作者：孙黎光邢伟中国医科大学基础医学院生物化学教研室

目的：观察ａＦＧＦ与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径，探讨ａＦＧＦ导致细胞增殖的机理。方法：以不同浓度的ａＦＧＦ处理ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞，利用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白... 详细信息

目的：观察ａＦＧＦ与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径，探讨ａＦＧＦ导致细胞增殖的机理。方法：以不同浓度的ａＦＧＦ处理ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞，利用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶活性（ＴＰＫ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性；用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：随着ａＦＧＦ浓度增加，ＴＰＫ及ＰＫＣ活性随之升高。当ａＦＧＦ浓度为１．１２μｇ／ｍｌ时ａＦＧＦ处理组的ＴＰＫ是对照组的４倍；膜ＰＫＣ活性也是对照组的４倍，胞浆ＰＫＣ活性是对照组的１．７５倍。［Ｃａ２＋］ｉ是对照组的３倍。结论：该细胞株中ａＦＧＦ受体具有ＴＰＫ活性。ＴＰＫ激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化，而使ＰＫＣ活性及［Ｃａ２＋］ｉ升高，即ＰＫＣ和Ｃａ２＋是ＴＰＫ的下游信号分子，进一步促进ｃ－ｆｏｓ、ｊｕｎ基因表达增加。

关键词：肺肿瘤腺癌酪氨酸蛋白激酶蛋白激酶C 钙

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bFGF促进肝癌Bel-7402细胞增殖的信号转导机制

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中国肿瘤临床 2006年第5期33卷 256-259页

作者：刘萍孙黎光唐玉海李新鸣中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳市110001

目的:分析肝癌细胞系Bel-7402中Ras-Raf-ERK1/2途径介导的bFGF对细胞周期素E(cyclinE)表达及细胞增殖的影响,以探讨肝癌细胞增殖的信号转导机制。方法:bFGF处理后用流式细胞术检测细胞增殖情况;Western印迹检测ERK1/2激酶的活化;RT-RCR... 详细信息

目的:分析肝癌细胞系Bel-7402中Ras-Raf-ERK1/2途径介导的bFGF对细胞周期素E(cyclinE)表达及细胞增殖的影响,以探讨肝癌细胞增殖的信号转导机制。方法:bFGF处理后用流式细胞术检测细胞增殖情况;Western印迹检测ERK1/2激酶的活化;RT-RCR方法检测cyclinE的基因表达。结果:FCM结果表明bFGF诱导细胞进入S期(27.49%±0.72%→42.45%±1.06%);bFGF时、量效依赖性地诱导Bel-7402细胞ERK1/2活性增高和cy-clinEmRNA表达。25ng/mlbFGF作用Bel-7402细胞10minERK1/2活性达高峰为对照组的3.84倍,作用8h后cyclinEmRNA表达达高峰为对照组的5.15倍;MEK1抑制剂PD98059可抑制bFGF的这些作用。结论:Ras-Raf-ERK1/2途径介导bFGF对cyclinEmRNA表达的诱导进而促进Bel-7402细胞的细胞周期进程,在肝癌增殖过程中bFGF信号转导发挥了重要的作用。

关键词：肝癌碱性成纤维细胞生长因子细胞外信号调节蛋白澈酶细胞周期素E 信号转导

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氢过氧化亚油酸与硒对人内皮细胞的影响

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中国医科大学学报 1991年第2期20卷 81-84页

作者：杨向红陈铁镇宋继谒王铁吉王跃中张亚加王殿鸿马朗中国医科大学基础医学部实验病理研究室中国医科大学基础医学部生物化学教研室

以氢过氧化亚油酸作为脂质过氧化物,亚硒酸钠作为抗氧剂,作用于培养的人脐带静脉内皮细胞,探讨脂质过氧化与抗氧化作用对细胞结构和功能的影响。结果表明,氢过氧化亚油酸能引起细胞收缩、生物膜系统损伤及前列环素合成减少;硒可使细胞... 详细信息

以氢过氧化亚油酸作为脂质过氧化物,亚硒酸钠作为抗氧剂,作用于培养的人脐带静脉内皮细胞,探讨脂质过氧化与抗氧化作用对细胞结构和功能的影响。结果表明,氢过氧化亚油酸能引起细胞收缩、生物膜系统损伤及前列环素合成减少;硒可使细胞脂质过氧化损伤程度减轻。提示:硒可能通过阻止内皮细胞脂质过氧化反应,起抗动脉粥样硬化病变发生的作用。

关键词：脂质过氧化物硒内皮细胞

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重组人睾丸精子结合蛋白对蛋白激酶A活性的影响

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生物医学工程学杂志 2007年第6期24卷 1334-1337,1342页

作者：宿文辉张哲张杰于秉治中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

为探讨人睾丸精子结合蛋白(TSBP)在精子获能及顶体反应中可能发挥的作用,检测了TSBP重组蛋白在体外转染细胞系中对蛋白激酶A活性的影响。构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B/tsbp,稳定转染HEK293细胞后,蛋白免疫印迹检测到培养细胞... 详细信息

为探讨人睾丸精子结合蛋白(TSBP)在精子获能及顶体反应中可能发挥的作用,检测了TSBP重组蛋白在体外转染细胞系中对蛋白激酶A活性的影响。构建真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)B/tsbp,稳定转染HEK293细胞后,蛋白免疫印迹检测到培养细胞中融合蛋白的表达。选择表达量高的细胞克隆,扩增并用金属亲和层析柱(IMAC)从细胞裂解液中纯化融合蛋白His6-TSBP。用放射自显影法检测HEK293细胞中蛋白激酶A(PKA)活性,发现重组质粒转染组PKA活性高于对照组,确定了TSBP对PKA活性的促进作用。

关键词：人睾丸精子结合蛋白蛋白纯化蛋白激酶A

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