检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2001年第3期30卷 164-165,168页

作者：房凯赵彦艳孙开来中国医科大学基础医学院分子遗传学教研室沈阳110001

目的 :分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法 :应用RT -PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,克隆于pGEM T载体上 ,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果 :获得长白山白眉蝮蛇类... 详细信息

目的 :分离和纯化长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,为克隆全长类凝血酶cDNA奠定基础。方法 :应用RT -PCR方法获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段 ,克隆于pGEM T载体上 ,进行测序和NCBI数据库同源性分析。结果 :获得长白山白眉蝮蛇类凝血酶cDNA片段长度为 2 89bp ,该片段与其他种蝮蛇类凝血酶DNA片段有同源性。结论 :本实验克隆了长白山白眉蝮蛇类凝血酶基因片段。根据不同种属蛋白质家族成员的保守性和同源性设计引物可以有效地克隆家族成员的DNA片段。

关键词：类凝血酶基因克隆蛇毒基因特异性 cDNA片段制备

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WNK4激酶在肾脏离子转运中的作用及机制

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中华高血压杂志 2015年第3期23卷 227-230页

作者：张铁凝吕晶玉中国医科大学基础医学院遗传学教研室辽宁沈阳110001

家族性高血钾性高血压（familial hyperkalemic hypertension,FHH）,又称Gordon综合征或Ⅱ型假性低醛固酮血症（pusedohypoaldosteronism typeⅡ,PHAⅡ）,是一种少见的常染色体显性遗传病,临床主要表现为高血压、高血钾、高血氯、低肾... 详细信息

家族性高血钾性高血压（familial hyperkalemic hypertension,FHH）,又称Gordon综合征或Ⅱ型假性低醛固酮血症（pusedohypoaldosteronism typeⅡ,PHAⅡ）,是一种少见的常染色体显性遗传病,临床主要表现为高血压、高血钾、高血氯、低肾素以及代谢性酸中毒。通过对FHH患病家系的连锁分析,发现染色体1、17和12的相关位点与该疾病紧密连锁。

关键词：离子转运 hypertension 常染色体显性遗传病 Gordon综合征肾脏激酶低醛固酮血症代谢性酸中毒

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X-连锁遗传病家系PCR-RFLP连锁分析策略

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中国医科大学学报 1992年第S1期 50-52页

作者：张学孙开来中国医科大学基础医学部医学遗传学教研室

RFLP连锁分析作为间接方法是致病基因尚未分离成功或致病基因突变未知的遗传病DNA诊断的有效途径。尽管各种DNA分析技术相继引入遗传病基因诊断领域,RFLP连锁分析法却沿用至今。

关键词：聚合酶涟式反应-限制性片段长度多态性连锁分析 X-连锁遗传病

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BAX对Hep2细胞系的凋亡及化疗敏感性的影响

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中国肿瘤临床 2010年第8期37卷 426-428,432页

作者：刘佳郭艳孙开来富伟能中国医科大学基础医学院遗传学教研室沈阳市110001 中国医科大学附属口腔医院中心实验室

目的:研究BAX基因对人喉鳞状细胞癌Hep2细胞系凋亡和对化疗药5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)敏感性的影响。方法:通过溴化二甲噻唑二苯四氨唑(MTT)比色法检测5-Aza-CdR对喉癌Hep2细胞体外增殖的影响。采用脂质体转染方法将BAX基因转入H... 详细信息

目的:研究BAX基因对人喉鳞状细胞癌Hep2细胞系凋亡和对化疗药5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)敏感性的影响。方法:通过溴化二甲噻唑二苯四氨唑(MTT)比色法检测5-Aza-CdR对喉癌Hep2细胞体外增殖的影响。采用脂质体转染方法将BAX基因转入Hep2细胞后,应用RT-PCR法检测BAX基因在Hep2细胞中的表达。用流式细胞术检测Hep2细胞凋亡以及细胞周期变化情况。结果:通过用不同浓度的5-Aza-CdR处理喉Hep2细胞发现,5-Aza-CdR能抑制Hep2细胞体外生长,且呈时间与剂量依赖性,发现体外增殖的半数抑制浓度(IC50)为4μmol/L。通过流式细胞术检测发现5-Aza-CdR和BAX均可以使Hep2细胞发生G_1/S期细胞阻滞,并且能促进细胞凋亡。5-Aza-CdR处理后,与对照组相比,Hep2细胞G_0/G_1期的细胞数量明显增加,由对照组的51.57%增高到71.17%,凋亡率也由对照组的1.67%增加到13.96%。转染BAX后,RT-PCR结果显示转染BAX基因的喉鳞状细胞癌Hep2细胞中BAX表达显著增加(P<0.05),S期Hep2细胞百分比由空白对照组的33.29%、转染空载体组的32.42%分别减少至16.07%和13.58%,细胞凋亡率相对于空白对照组的1.67%、转染空载体组2.04%,转染BAX基因组的7.13%增加到23.74%,具有显著性差异(P<0.05)。本研究结果还表明同时转染BAX基因及加药组的喉鳞状细胞癌Hep2细胞凋亡率明显增加。结论:转染BAX基因能诱导Hep2细胞的凋亡,并能增加Hep2细胞对药物5-Aza-CdR杀伤作用的敏感性。

关键词：喉癌 BAX 细胞凋亡 5-Aza-CdR

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WNK4基因启动子结构初探

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中国医科大学学报 2009年第6期38卷 405-406,409页

作者：孙志军李英慧李妍丁茜赵彦艳中国医科大学附属盛京医院心内科沈阳110004 中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001

目的鉴定WNK4基因启动子结构,初步探讨WNK4基因表达的调节机制。方法应用5′RACE方法确定WNK4基因转录起始点;构建WNK4基因启动子报告基因载体,并应用ELISA法检测启动子活性;应用软件分析预测WNK4基因启动子区顺式作用元件。结果初步确... 详细信息

目的鉴定WNK4基因启动子结构,初步探讨WNK4基因表达的调节机制。方法应用5′RACE方法确定WNK4基因转录起始点;构建WNK4基因启动子报告基因载体,并应用ELISA法检测启动子活性;应用软件分析预测WNK4基因启动子区顺式作用元件。结果初步确定了WNK4基因转录起始位点;构建了WNK4基因启动子报告基因载体,并通过ELISA方法确定了转录起始点上游1 275 bp具有高转录活性,并且软件预测该区域内存在多个顺式作用元件,初步证明该区域为WNK4基因的启动子序列。结论鉴定了WNK4基因的启动子区,并对其功能进行了初步鉴定。

关键词： WNK4基因启动子表达高血压

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低氧模拟剂氯化钴对胃癌细胞BGC823中S100A4基因表达的影响

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遗传 2008年第12期30卷 1563-1566页

作者：滑君付浩张瑞秀陈丹琦闫扬陈芳杰孙开来孙秀菊中国医科大学医学遗传学教研室沈阳110001 沈阳医学院生物化学教研室沈阳110046

S100A4基因是肿瘤侵袭转移相关的重要基因,该基因高表达与胃癌浸润、淋巴结转移及胃癌细胞体外侵袭力密切相关。为探讨S100A4基因高表达的机制,文章应用低氧模拟剂氯化钴处理胃癌细胞BGC823,RT-PCR、免疫组化、免疫荧光及Westernblottin... 详细信息

S100A4基因是肿瘤侵袭转移相关的重要基因,该基因高表达与胃癌浸润、淋巴结转移及胃癌细胞体外侵袭力密切相关。为探讨S100A4基因高表达的机制,文章应用低氧模拟剂氯化钴处理胃癌细胞BGC823,RT-PCR、免疫组化、免疫荧光及Westernblotting方法分别检测BGC823细胞中S100A4mRNA及蛋白表达情况。结果显示,氯化钴处理胃癌BGC823细胞后,S100A4mRNA及蛋白表达明显增加。提示低氧模拟剂氯化钴可促进胃癌细胞BGC823中S100A4基因表达。

关键词：胃癌低氧氯化钴 S100A4基因

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扩增ZFX/ZFY基因—一个可靠的性别鉴定系统

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中国医科大学学报 1993年第2期22卷 97-99页

作者：张学孙开来中国医科大学基础医学部医学遗传学教研室

应用PCR技术扩增人ZFX和ZFY基因特异性DNA顺序,在男性DNA中检测到ZFX基因特异和ZFY基因特异的两种扩增产物,在女性DNA中仅检测到ZFX基因特异的一种扩增产物。采用ZFX/ZFY扩增系统进行性别鉴定的优点为:①检测X、Y两条性染色体,无假阴性... 详细信息

应用PCR技术扩增人ZFX和ZFY基因特异性DNA顺序,在男性DNA中检测到ZFX基因特异和ZFY基因特异的两种扩增产物,在女性DNA中仅检测到ZFX基因特异的一种扩增产物。采用ZFX/ZFY扩增系统进行性别鉴定的优点为:①检测X、Y两条性染色体,无假阴性结果;②ZFY基因位于Y染色体短臂,不受Y染色体长臂正常变异影响;③ZFY基因邻接TDF基因,适于性反转受检者;④扩增产物可经电泳直接区分。

关键词： PCR ZFX基因 ZFY基因性别鉴定

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东北汉族人群7p14-15区域内9个STR位点的遗传多态分析

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中国医科大学学报 2007年第2期36卷 113-115页

作者：娄毅邱广蓉辛娜刘红波孙桂凤孙开来中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学公共卫生学院卫生统计学教研室

目的:分析东北汉族人群中7p14-15区域内9个短串联重复序列(STR)位点的遗传多态性。方法:采用荧光标记PCR扩增技术和毛细管电泳方法,对7p14-15区域内9个STR多态位点在100名随机选取的无血缘关系的东北汉族人群中的遗传多态性进行分析。结... 详细信息

目的:分析东北汉族人群中7p14-15区域内9个短串联重复序列(STR)位点的遗传多态性。方法:采用荧光标记PCR扩增技术和毛细管电泳方法,对7p14-15区域内9个STR多态位点在100名随机选取的无血缘关系的东北汉族人群中的遗传多态性进行分析。结果:在东北汉族人群中,7p14-15区域的D7S526、D7S690、D7S2252、D7S817、D7S683、D7S656、D7S484、D7S2250、D7S2251位点分别检测出6、6、8、6、4、6、7、8和7个等位基因,17、19、29、17、10、17、24、27和22种基因型,杂合度分别为84%、85%、79%、82%、79%、85%、89%、88%和83%。结论:7p14-15区域的9个STR位点的基因频率和基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡,并在东北汉族人群中呈现较好的遗传多态性。

关键词：短串联重复序列遗传多态性 Hardy—Weinberg平衡 7p14—15区域

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microRNA-24对人喉鳞癌Hep2细胞增殖及侵袭的影响

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中国医科大学学报 2011年第7期40卷 616-618页

作者：郭艳尚超孙开来钟鸣富伟能中国医科大学口腔医学院中心实验室沈阳110002 中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001

目的探讨microRNA-24(miR-24)对喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep2细胞增殖、侵袭的影响。方法应用LipofectamineTM2000瞬时转染上调Hep2细胞中miR-24的表达,并通过荧光定量PCR验证;然后采用相差显微镜观察和MTT法分析miR-24对Hep2细胞增殖情况的... 详细信息

目的探讨microRNA-24(miR-24)对喉鳞状细胞癌(LSCC)Hep2细胞增殖、侵袭的影响。方法应用LipofectamineTM2000瞬时转染上调Hep2细胞中miR-24的表达,并通过荧光定量PCR验证;然后采用相差显微镜观察和MTT法分析miR-24对Hep2细胞增殖情况的影响;Transwell小室法检测miR-24对Hep2细胞侵袭能力的作用。结果 pre-miR-24转染Hep2细胞36h时miR-24表达明显增强。与转染control miR组和空白对照组相比,转染pre-miR-24能明显降低Hep2细胞的增殖能力;同时,转染pre-miR-24能明显抑制Hep2细胞的局部侵袭能力,Hep2细胞的跨膜细胞数由转染pre-miR-24组的(12.37±0.52),降低至转染control miR组的(32.48±0.95)和空白对照组(34±1.25),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-24异常表达与LSCC Hep2细胞的生物学行为密切相关。

关键词：喉鳞癌 microRNA-24 细胞增殖侵袭

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人类单纯性先天性心脏病患者Nkx2-5基因突变及表达的研究

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中国医科大学学报 2001年第5期30卷 321-324页

作者：孙淼邱广蓉孙桂凤袁翼华孙开来中国医科大学基础医学院医学遗传学教研室沈阳110001 中国医科大学第一临床学院心脏外科沈阳110001

目的 :研究Nkx 2 5基因在人类单纯性先天性心脏病患者中的突变及表达情况。方法 :应用PCR SSCP方法和DNA测序技术在 5 8个单纯性先天性心脏病核心家系 183名成员中检测Nkx 2 5基因的突变情况 ;以 β actin作为内对照对 11个室间隔缺... 详细信息

目的 :研究Nkx 2 5基因在人类单纯性先天性心脏病患者中的突变及表达情况。方法 :应用PCR SSCP方法和DNA测序技术在 5 8个单纯性先天性心脏病核心家系 183名成员中检测Nkx 2 5基因的突变情况 ;以 β actin作为内对照对 11个室间隔缺损患者心肌标本和 2个非先天性心脏病患者 (正常对照 )心肌标本进行RT PCR扩增和定量分析 ,观察mRNA表达水平。结果 :发现Nkx 2 5基因同源结构域中 (CCA)三碱基缺失 ;与非先天性心脏病患者 (正常对照 )相比 ,室间隔缺损患者的Nkx 2 5基因mRNA表达呈下降趋势。结论 :Nkx 2 5基因与人类单纯性先天性心脏病密切相关 ,其同源结构域内的基因突变可能是人类单纯性先天性心脏病发病的重要遗传基础。Nkx 2

关键词：先天性心脏病 Nkx2-5基因基因表达基因突变

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