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临床与实验病理学杂志 2014年第4期30卷 401-404页

作者：侯兴华徐洪涛李春杨金素芬中国医科大学附属第六临床学院鞍山市中心医院病理科鞍山114001 中国医科大学基础医学院病理学教研室沈阳110001

目的观察胸腔积液中Axin、β-catenin和p53的表达,探讨三者表达的关系及意义。方法采用免疫细胞化学SP法观察40例原发性肺腺癌患者恶性胸腔积液和40例肺良性疾病患者反应性胸腔积液中Axin、β-catenin和p53的表达。结果在原发性肺腺癌... 详细信息

目的观察胸腔积液中Axin、β-catenin和p53的表达,探讨三者表达的关系及意义。方法采用免疫细胞化学SP法观察40例原发性肺腺癌患者恶性胸腔积液和40例肺良性疾病患者反应性胸腔积液中Axin、β-catenin和p53的表达。结果在原发性肺腺癌胸腔积液中,Axin阳性率为30%(12/40),β-catenin细胞膜阳性率为15%(6/40),细胞质阳性率为60%(24/40),p53阳性率为57.5%(23/40)。Axin阳性率与β-catenin细胞膜表达呈正相关,与p53表达呈负相关。在肺良性疾病胸腔积液中Axin阳性率为77.5%(31/40),β-catenin无阳性表达,p53阳性率为1.25%(5/40)。结论在原发性肺腺癌胸腔积液中Axin表达降低,β-catenin细胞质阳性率高于细胞膜,差异有显著性(P<0.05),p53呈过表达。提示恶性胸腔积液中的癌细胞可能存在Wnt信号的激活。

关键词：肺肿瘤胸腔积液 Axin β-catenin 免疫细胞化学

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结直肠癌中COX I和COXⅢ的表达及临床意义

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临床与实验病理学杂志 2014年第10期30卷 1094-1098页

作者：孟媛宋敏许斌辽宁省抚顺市中心医院病理科中国医科大学基础医学院病理学教研室中国医科大学附属第一医院病理科

目的观察线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome coxidaseⅠ,COXⅠ)和线粒体细胞色素C氧化酶Ⅲ(cytochrome coxidaseⅢ,COXⅢ)在正常结直肠黏膜、结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)和结直肠癌组织中的表达,探讨COXⅠ和COXⅢ在结直肠癌早期... 详细信息

目的观察线粒体细胞色素C氧化酶Ⅰ(cytochrome coxidaseⅠ,COXⅠ)和线粒体细胞色素C氧化酶Ⅲ(cytochrome coxidaseⅢ,COXⅢ)在正常结直肠黏膜、结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)和结直肠癌组织中的表达,探讨COXⅠ和COXⅢ在结直肠癌早期诊断中的作用以及二者与结直肠癌患者预后的关系。方法采用免疫组化SP法检测20例结直肠正常黏膜、20例结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)和80例结直肠癌组织中COXⅠ和COXⅢ的表达,并分析二者表达与结直肠癌临床病理特征及患者预后的关系。结果 COXⅠ和COXⅢ在正常结直肠黏膜中的阳性率分别为75.0%(15/20)和70.0%(14/20),在结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)组织中的阳性率为35.0%(7/20)和25.0%(5/20),在结直肠癌组织中的阳性率为36.2%(29/80)和26.2%(21/80);COXⅠ和COXⅢ在正常结直肠黏膜和结直肠高级别上皮内瘤变(原位癌)中的阳性率差异有统计学意义(χ2=6.465,P=0.011;χ2=8.120,P=0.004),COXⅠ和COXⅢ在正常结直肠黏膜和结直肠癌组织中的阳性率差异有统计学意义(χ2=9.75,P=0.002;χ2=13.46,P<0.001)。COXⅠ的阳性率与结直肠癌组织学分级、临床分期相关;组织学分级越低,COXⅠ阳性率越高,Ⅲ+Ⅳ结直肠癌组中COXⅠ阳性率低于Ⅰ+Ⅱ组。COXⅢ的阳性率与结直肠癌临床分期相关,Ⅲ+Ⅳ期结直肠癌组中COXⅢ阳性率低于Ⅰ+Ⅱ期组。Kaplan-Meier生存分析表明COXⅠ和COXⅢ表达与结直肠癌患者预后相关(P=0.008,P=0.017)。结论 COXⅠ和COXⅢ高表达与结直肠癌组织学分级、临床分期、预后密切相关,联合检测二者表达可作为结直肠癌早期诊断及判断其生物学行为的重要指标。

关键词：结直肠肿瘤细胞色素C氧化酶Ⅰ 细胞色素C氧化酶Ⅲ 免疫组织化学

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不同年龄人体脂肪干细胞体外培养生长特点比较

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中华医学美学美容杂志 2014年第3期20卷 219-222页

作者：刘学晖郭澍于艳秋孙海峰郭家妍王晨超孙强王迪中国医科大学附属第一医院整形外科沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理教研室

目的观察不同年龄段人体脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）体外培养的生长特点.方法健康志愿者24例,年龄为26～45岁,按年龄分为4组：第1组6例,26～30岁;第2组6例,31～35岁;第3组6例,36～40岁;第4组6例,41～45岁.于不同... 详细信息

目的观察不同年龄段人体脂肪干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）体外培养的生长特点.方法健康志愿者24例,年龄为26～45岁,按年龄分为4组：第1组6例,26～30岁;第2组6例,31～35岁;第3组6例,36～40岁;第4组6例,41～45岁.于不同年龄人体腹部皮下取用等量脂肪组织,胶原酶消化法分离、提取ADSCs,计数原代单核细胞数,记录细胞传代时间,观察传代细胞体外生长特点及检测细胞周期和细胞增殖活性.结果 4组不同年龄段原代单核细胞计数差异无统计学意义（P＞0.05）,而细胞生长至80％融合时所需时间,第2组短于第3组、第3组短于第4组（P＜0.05）;第3组细胞处于增殖期的比例明显高于第4组（P＜0.05）;前3组与第4组相比,四甲基偶氮噻唑蓝细胞活性较好,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论不同年龄段人体ADSCs体外培养细胞特性存在差异,随着年龄的增加细胞的增殖能力降低,其中＞40岁者的ADSCs增殖能力与年龄较小者相比,明显降低.

关键词：皮下脂肪脂肪干细胞年龄因素细胞增殖培养

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Rsf-1在非小细胞肺癌中的表达及意义

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现代肿瘤医学 2014年第11期22卷 2597-2599页

作者：张秀伟谢玲玲郝凤霞付琳董千泽李庆昌中国医科大学基础医学院病理教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第四医院病理科辽宁沈阳110032

目的:分析Rsf-1在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理因素的关系。方法:应用Real-time PCR和免疫组化法检测非小细胞肺癌中Rsf-1的mRNA及蛋白表达情况。结果:有84%(21/25)肺癌组织病例中Rsf-1的mRNA含量明显高于对应的正常肺组织(P<0.... 详细信息

目的:分析Rsf-1在非小细胞肺癌中的表达及与临床病理因素的关系。方法:应用Real-time PCR和免疫组化法检测非小细胞肺癌中Rsf-1的mRNA及蛋白表达情况。结果:有84%(21/25)肺癌组织病例中Rsf-1的mRNA含量明显高于对应的正常肺组织(P<0.001),肿瘤组织中Rsf-1的mRNA平均值是其癌旁正常肺组织均值的2.37倍。免疫组化结果显示68.4%(67/98)病例存在Rsf-1蛋白过表达,其过表达与肺癌患者的年龄、性别、肿瘤类型、原发肿瘤分级和淋巴结转移等未发现明显的相关性,而与肺癌的低分化和高p-TNM分期呈正相关(P=0.001;P=0.020)。结论:肺癌中存在Rsf-1基因的扩增和蛋白的高表达,并与低分化和高p-TNM分期相关。

关键词：染色质重塑因子非小细胞肺癌实时PCR 免疫组织化学

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RNF146真核表达载体的构建及其对非小细胞肺癌细胞系生物学行为的影响

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山西医药杂志 2014年第7期43卷 723-726,I0001页

作者：高英惠林萍宋成洋徐慧慧王睿田大力邱雪杉王恩华中国医科大学附属第四医院病理科沈阳110032 中国医科大学附属第四医院中心实验室沈阳110032 中国医科大学附属第四医院胸外科沈阳110032 中国医科大学基础医学院病理学教研室中国医科大学附属第一医院病理科

目的构建E3泛素连接酶环指蛋白146(RNF146)基因真核表达载体,研究RNF146对非小细胞肺癌细胞系体外生物学行为的影响。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法筛选RNF146低表达细胞系。构建pEX4-RNF146真核表达载体,经酶切和... 详细信息

目的构建E3泛素连接酶环指蛋白146(RNF146)基因真核表达载体,研究RNF146对非小细胞肺癌细胞系体外生物学行为的影响。方法采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法筛选RNF146低表达细胞系。构建pEX4-RNF146真核表达载体,经酶切和测序后瞬时转染LTE细胞,荧光显微镜观察、蛋白印迹法检测转染效率。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色实验检测肿瘤细胞体外增殖能力,划痕实验评价肿瘤细胞体外迁移能力,Buyden小室实验检测肿瘤细胞体外侵袭能力。结果酶切和基因测序证实重组质粒pEX4构建正确。MTT比色实验显示转染pEX4-RNF146组细胞增殖速度明显高于转染空载体组和未转染组(P<0.05)。划痕实验显示转染组细胞24h迁移率明显高于空载体组和未转染组(P<0.05)。Buyden小室实验结果表明转染组比空载体组和未转染组穿膜数目明显增多(P<0.05)。结论 RNF146基因转染能促进非小细胞肺癌LTE细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力,可能是一个潜在的促肿瘤增殖、侵袭和转移的相关基因。

关键词：癌,非小细胞肺泛素蛋白连接酶类 RNF146 增殖 RNF146

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shRNA沉默环指蛋白146基因对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及其相关蛋白表达的影响

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现代肿瘤医学 2014年第6期22卷 1245-1249页

作者：高英王睿徐慧慧李锐惠林萍邱雪杉王恩华中国医科大学附属第四医院病理科辽宁沈阳110032 中国医科大学附属第四医院中心实验室辽宁沈阳110032 中国医科大学基础医学院病理教研室及附属第一医院病理科辽宁沈阳110001

目的:shRNA沉默环指蛋白146(RNF146)基因,观察非小细胞肺癌细胞中RNF146沉默对肺癌细胞迁移和侵袭及其相关蛋白表达的影响。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法用于筛选RNF146高表达肺癌细胞系。构建shRNA-RNF146真核... 详细信息

目的:shRNA沉默环指蛋白146(RNF146)基因,观察非小细胞肺癌细胞中RNF146沉默对肺癌细胞迁移和侵袭及其相关蛋白表达的影响。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法用于筛选RNF146高表达肺癌细胞系。构建shRNA-RNF146真核表达载体,瞬时转染A549和H1299肺癌细胞,Western blot检测转染效率。划痕实验评价肺癌细胞体外迁移能力;Buyden小室实验检测肺癌细胞体外侵袭能力。Western blot检测肺癌细胞中迁移和侵袭相关蛋白的表达。结果:RT-PCR和Western blot方法筛选RNF146高表达肺癌细胞系,显示A549和H1299细胞中RNF146蛋白均高于其它细胞系。shRNA-RNF146转染A549和H1299细胞系后,划痕实验显示转染组细胞24小时迁移率明显低于空载体组和未转染组(P<0.01)。Buyden小室实验结果表明转染组比空载体组和未转染组穿膜细胞数目明显减少(P<0.05)。Western blot检测与细胞迁移和侵袭相关的调控蛋白(MMP2、MMP7、MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等)的表达情况,结果显示干扰RNF146后A549细胞中MMP2和MMP7表达明显减少,而MMP9、RhoA、RhoB、RhoC、Rock1、TIMP-1等蛋白的表达变化不明显。结论:RNF146可能通过调控MMP2和MMP7的蛋白水平促进肺癌细胞迁移和侵袭。

关键词：非小细胞肺癌 RNF146 E3泛素连接酶迁移侵袭

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非小细胞肺癌中过表达RNF146对Axin和β-catenin表达和定位的影响

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现代肿瘤医学 2014年第4期22卷 737-741页

作者：高英徐慧慧李锐王睿惠林萍邱雪杉王恩华中国医科大学附属第四医院病理科辽宁沈阳110032 中国医科大学附属第四医院中心实验室辽宁沈阳110032 中国医科大学基础医学院病理教研室及附属第一医院病理科辽宁沈阳110001

目的:观察E3泛素连接酶RNF146表达对Axin和β-catenin蛋白表达的影响,探讨RNF146与Wnt/β-catenin信号通路在非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学EnVision法检测133例NSCLC患者肺癌中RNF146、Axin和β-catenin... 详细信息

目的:观察E3泛素连接酶RNF146表达对Axin和β-catenin蛋白表达的影响,探讨RNF146与Wnt/β-catenin信号通路在非小细胞肺癌(NSCLC)发生发展中的作用。方法:应用免疫组织化学EnVision法检测133例NSCLC患者肺癌中RNF146、Axin和β-catenin的表达。构建RNF146过表达质粒,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot和细胞免疫荧光方法研究RNF146在肺癌细胞株A549和LTE中过表达对Axin和β-catenin表达及定位的影响。结果:NSCLC患者肺癌组织中RNF146高表达72例(54.1%)中49例(68.1%)显示Axin表达减弱或缺失,19例(26.4%)出现β-catenin细胞核阳性表达;RNF146低表达61例(45.9%)中只有26例(42.6%)显示Axin表达减弱或缺失,7(11.5%)例出现β-catenin细胞核阳性。RNF146与Axin的表达呈明显的负相关(P=0.003),与β-catenin的细胞核表达呈正相关(P=0.047)。肺癌细胞系中过表达RNF146能够下调Axin蛋白的表达,诱导β-catenin蛋白表达和核内分布,但对Axin和β-catenin mRNA水平没有影响。结论:RNF146可能通过Wnt/β-catenin通路参与肺癌的发生发展。

关键词：非小细胞肺癌 E3泛素连接酶 RNF146 Axin B-catenin

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E3泛素连接酶Iduna在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

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中国医师进修杂志 2014年第14期37卷 54-58页

作者：高英宋成洋惠林萍田野田大力邱雪杉王恩华中国医科大学附属第四医院病理科沈阳110032 中国医科大学附属第四医院胸外科沈阳110032 中国医科大学附属第四医院中心实验室沈阳110032 中国医科大学附属第一医院病理科及基础医学院病理学教研室

目的探讨E3泛素连接酶Iduna mRNA和蛋白在非小细胞肺癌组织和癌旁肺组织中的表达及其与临床病理因素和预后的关系.方法应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western-Blot和免疫组织化学（EnVision）方法检测分析非小细胞肺癌组织和癌... 详细信息

目的探讨E3泛素连接酶Iduna mRNA和蛋白在非小细胞肺癌组织和癌旁肺组织中的表达及其与临床病理因素和预后的关系.方法应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western-Blot和免疫组织化学（EnVision）方法检测分析非小细胞肺癌组织和癌旁肺组织中Iduna mRNA和蛋白的表达,并分析其与临床病理因素和预后的关系.结果 RT-PCR及Western-Blot结果显示非小细胞肺癌组织中Iduna mRNA和蛋白表达水平分别为0.468±0.086和2.554±0.544,明显高于癌旁肺组织的0.203±0.070和1.570±0.316,差异均有统计学意义（P＜0.05）;免疫组织化学结果显示：Iduna在肺泡上皮细胞中呈阴性,在正常支气管黏膜上皮中呈阴性或弱阳性,在非小细胞肺癌组织中呈不同程度的阳性表达.Iduna的高表达率与肿瘤分化程度呈负相关（P=0.002）,与肿瘤大小（P=0.044）、TNM分期（P=0.015）、淋巴结转移（P=0.009）呈正相关,并与Ⅰ期非小细胞肺癌患者的预后有关（P=0.016）.结论 Iduna的高表达可能与非小细胞肺癌的侵袭、转移过程密切相关,有可能是提示非小细胞肺癌患者预后不良的指标.

关键词：癌非小细胞肺肿瘤转移预后 Iduna

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推进学校转型发展的临床应用型病理学专业人才培养模式改革探索

推进学校转型发展的临床应用型病理学专业人才培养模式改革探索

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辽宁省高等教育学会2014年学术年会

作者：孙丽梅曲波孙宝志邱雪杉王恩华中国医科大学基础医学院病理学教研室和附属第一医院病理科中国医科大学医学教育研究中心

病理学人才培养模式为传统基础医学教育提供了许多值得借鉴的方法。立足于传统的病理学教学,比较改革培养人才模式在其教学内容、教学方法、辅助教学、辅助教学资料、病理学第二课堂及考试等方面提出如何将改革的有益经验应用于传统病... 详细信息

病理学人才培养模式为传统基础医学教育提供了许多值得借鉴的方法。立足于传统的病理学教学,比较改革培养人才模式在其教学内容、教学方法、辅助教学、辅助教学资料、病理学第二课堂及考试等方面提出如何将改革的有益经验应用于传统病理学的教学方案。

关键词：学校转型教学改革病理学

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体外扩增培养对兔脂肪来源干细胞的衰老及成骨分化能力的影响

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中国美容整形外科杂志 2014年第8期25卷 492-495页

作者：张天媛郭澍于艳秋王晨超孙强中国医科大学附属第一医院整形外科辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理生理教研室

目的探讨体外扩增培养对兔脂肪来源干细胞的衰老及成骨分化能力的影响.方法分离提取兔脂肪来源干细胞,取第5、10、15代细胞进行成骨诱导,并采用茜素红染色法比较不同代数细胞的成骨能力,β-半乳糖苷酶染色法比较不同代数细胞的衰老程... 详细信息

目的探讨体外扩增培养对兔脂肪来源干细胞的衰老及成骨分化能力的影响.方法分离提取兔脂肪来源干细胞,取第5、10、15代细胞进行成骨诱导,并采用茜素红染色法比较不同代数细胞的成骨能力,β-半乳糖苷酶染色法比较不同代数细胞的衰老程度.结果早期代数的细胞经成骨诱导后,出现矿化结节的时间较早,且在同一诱导时间下,与晚期代数的细胞相比,形成的结节数量最多、体积最大.随传代次数的增加,细胞外基质钙盐沉积量呈下降趋势,衰老细胞所占的比例呈上升趋势,差异具有统计学意义（P＜0.05）.结论随体外扩增培养,兔脂肪来源干细胞成骨分化能力减弱,细胞发生衰老程度增强.

关键词：脂肪来源干细胞扩增衰老成骨

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