检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：尚德淑曼淑梅李曼刘怿君蔺美娜赵伟东李波方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

老年痴呆症(AD)是发病率较高的神经退行性疾病。近年来已从AD患者血浆中分离鉴定出20余种具有临床预测和诊断价值的蛋白成分。我们应用基因芯片技术分析了AD患者和同龄对照人群的血液T细胞及单核细胞中的基因表达差异,结合应用血脑屏障... 详细信息

老年痴呆症(AD)是发病率较高的神经退行性疾病。近年来已从AD患者血浆中分离鉴定出20余种具有临床预测和诊断价值的蛋白成分。我们应用基因芯片技术分析了AD患者和同龄对照人群的血液T细胞及单核细胞中的基因表达差异,结合应用血脑屏障体外模型和AD模型鼠,发现并证明AD患者外周血T细胞高表达MIP-1α和CXCR2,CXCR2的作用是促使AD模型鼠中的T细胞在脑微血管内皮细胞(BMEC)上的黏附;AD鼠脑内β-淀粉样蛋白(Aβ)的"沉积信息"能够被BMEC提呈给循环中的T细胞,T细胞通过其高表达的MIP-1α与BMEC上CCR5的相互作用,打开血脑屏障,从而使T细胞由血液迁移进入脑实质。

关键词：老年痴呆症免疫细胞骨髓干细胞血脑屏障细胞治疗

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外源性IbeB蛋白在小鼠ES细胞中互作蛋白Cathepsin A的鉴定

外源性IbeB蛋白在小鼠ES细胞中互作蛋白Cathepsin A的鉴定

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：尚德淑姜静宜方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

大肠杆菌ibcB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞的相关基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用.前期研究发现,ibeB基因稳定转染的鼠ES细胞AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子——nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生长端样... 详细信息

大肠杆菌ibcB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞的相关基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用.前期研究发现,ibeB基因稳定转染的鼠ES细胞AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子——nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生长端样结构.为研究ibeB基因诱导AB2.1向神经前体样细胞分化的机制,利用酵母双杂交筛选AB2.1中IbeB靶蛋白.获得的80个阳性克隆中有5个为组织蛋白酶A(CathepsinA)基因,同源性达98％.为此,进一步鉴定IbeB蛋白与Cathepsin A的相互作用,酵母体内小量杂交结果表明,Cathepsin A和IbeB蛋白具有阳性相互作用;TNT(R)快速转录/翻译耦联系统对ibeB进行表达,同时构建GST-Cathepsin A表达载体,并用IPTG在大肠杆菌BL21中诱导表达,GST-pull down法验证两者可以结合,反之,用体外转录翻译体系表达小鼠Cathepsin A蛋白,用IPTG在BL21中诱导表达GST-IbeB,GSTpull down法同样表明两者可以结合;免疫荧光显示共转染ibeB和CathepsinA的HEK293细胞中两者存在共定位,免疫共沉淀结果表明两者在真核细胞中具有相互作用.Cathepsin A是一种溶酶体蛋白水解酶,主要在细胞内环境稳定方面发挥作用.我们的结果提示,IbeB可能与Cathepsin A结合诱导AB2.1向神经前体细胞分化,其机制还需进一步探讨.本研究结果可望为加深了解神经细胞分化调控机制及通过人工干预手段得到定向分化的神经前体细胞积累资料.

关键词： ibeB ES细胞神经分化 Cathepsin A

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大肠杆菌侵袭基因ibeB对人脑微血管内皮细胞生物学特性的影响及其机制

大肠杆菌侵袭基因ibeB对人脑微血管内皮细胞生物学特性的影响及其...

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：赵伟东陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌是新生儿化脓性脑膜炎最常见的致病菌。引起大肠杆菌性脑膜炎的关键步骤是：播散入血的大肠杆菌必须穿过主要由脑微血管内皮细胞组成的血脑屏障。ibeB 基因是我室人员在大肠杆菌中克隆的一个与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞(h... 详细信息

大肠杆菌是新生儿化脓性脑膜炎最常见的致病菌。引起大肠杆菌性脑膜炎的关键步骤是：播散入血的大肠杆菌必须穿过主要由脑微血管内皮细胞组成的血脑屏障。ibeB 基因是我室人员在大肠杆菌中克隆的一个与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)、穿越血脑屏

关键词： ibeB 大肠杆菌人脑微血管内皮细胞

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人IKKγ基因重组载体的构建及在原核体内的表达纯化

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解剖科学进展 2013年第1期19卷 71-74页

作者：郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞生物学教育部重点实验室细胞病理生物学研究室辽宁沈阳110001

目的构建重组原核表达载体pGEX-5X-1-IKKγ,诱导GST-IKKγ融合蛋白的表达并以GST-pulldown方法得到纯化的融合蛋白。方法应用PCR技术,以M6P8载体为模板扩增得到IKKγ全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5X-1载体中。经酶切、测序鉴定... 详细信息

目的构建重组原核表达载体pGEX-5X-1-IKKγ,诱导GST-IKKγ融合蛋白的表达并以GST-pulldown方法得到纯化的融合蛋白。方法应用PCR技术,以M6P8载体为模板扩增得到IKKγ全长序列,并亚克隆至带有GST标签的pGEX-5X-1载体中。经酶切、测序鉴定后,重组载体转化至原核细胞中并进行诱导表达,以SDS-PAGE凝胶电泳染色鉴定融合蛋白的表达。融合蛋白经GSTbeads沉降后,Western blot分析、鉴定融合蛋白的表达及纯化情况。结果将人IKKγ亚克隆至原核表达载体pGEX-5X-1,酶切、测序鉴定无误。经诱导得到高表达的融合蛋白,经SDS-PAGE电泳染色后可见高表达条带。Westernblot鉴定经GSTbeads沉降后的蛋白,在74kD鉴定出融合蛋白的特异性条带。结论成功构建了原核表达载体pGEX-5X-1-,并在原核细胞内表达,融合蛋白可以经GSTbeads沉降用于GST-pulldown实验。

关键词： IKKγ基因载体构建诱导表达

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溶酶体组织蛋白酶A在小鼠脑海马发育过程中发生核转位

溶酶体组织蛋白酶A在小鼠脑海马发育过程中发生核转位

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：尚德淑姜静宜方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室

前期研究发现大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞相关基因—ibeB可诱导小鼠ES细胞向神经前体细胞分化。利用酵母双杂交筛选AB2.1中IbeB靶蛋白,经验证表明组织蛋白酶A(CathepsinA)和IbeB蛋白在真核细胞发生相互作用。提示Cathepsin A也可能... 详细信息

前期研究发现大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞相关基因—ibeB可诱导小鼠ES细胞向神经前体细胞分化。利用酵母双杂交筛选AB2.1中IbeB靶蛋白,经验证表明组织蛋白酶A(CathepsinA)和IbeB蛋白在真核细胞发生相互作用。提示Cathepsin A也可能定位在细胞核,并在神经前体细胞分化过程中发挥作用。为确定Cathepsin A的功能,选择发育期小鼠脑探讨是否Cathepsin A在发育的脑中表达。Western Blot结果表明,CathepsinA随发育成熟表达降低。进一步,细胞组分抽提实验表明胚胎期小鼠脑中,有一部分CathepsinA在细胞核表达。由于IbeB与CathepsinA可以相互作用,IbeB具有诱导神经前体细胞分化的作用,因此我们选取神经前体细胞丰富的海马进行研究,以初步确定Cathepsin A在神经前体细胞分化和海马发育过程中的表达定位。免疫组化结果表明,在海马发育过程中,CathepsinA的表达发生了核转位。CathepsinA是一种溶酶体蛋白水解酶,主要在细胞内环境稳定方面发挥作用。我们发现在小鼠脑发育过程中部分CathepsinA也在细胞核表达,提示它可能具有基因表达调控的功能。对Cathepsin A功能的深入研究可为揭示Cathepsin A的新功能积累资料。

关键词： ibeB 神经分化 Cathepsin A

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基于转移性乳腺癌特异性核酸适配子的循环肿瘤细胞靶向捕获研究

基于转移性乳腺癌特异性核酸适配子的循环肿瘤细胞靶向捕获研究

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第三届中国核酸适配体学术研讨会

作者：李婉明周琳琳方瑾教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院细胞生物教研室沈阳110001

在肿瘤转移的过程中,脱离原发肿瘤、侵袭并进入循环系统的肿瘤细胞被称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)。许多研究表明,对外周血中的CTCs进行检测分析,有助于早期发现肿瘤的微转移、转移风险的预测和判断,以及评估预后和...

在肿瘤转移的过程中,脱离原发肿瘤、侵袭并进入循环系统的肿瘤细胞被称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)。许多研究表明,对外周血中的CTCs进行检测分析,有助于早期发现肿瘤的微转移、转移风险的预测和判断,以及评估预后和监测复发[1]。高效富集外周血中含量稀少的CT℃是临床应用的关键问题,但目前基于CTC上皮特性的富集方法难以富集到失去上皮特性如发生上皮间质转化(EMT)的细胞群体,有可能遗失最具有诊断意义的信息[2]。因此,发现新的特异性更高的肿瘤转移相关标志物以提高CTC的检测有效性,对于转移性肿瘤的早期诊断和早期治疗具有重要的科学意义和临床价值。

关键词：

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N端标记GFP-TFF3蛋白在非洲绿猴肾成纤维细胞表达和定位

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解剖科学进展 2013年第4期19卷 351-353,357页

作者：毛琪朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室辽宁沈阳110001 中国医科大学心血管研究所辽宁沈阳110001

目的构建pEGFP-N1-TFF3融合蛋白表达载体,并检测其在非洲绿猴肾成纤维细胞(COS7细胞)内的表达和定位。方法提取HT29细胞的mRNA,反转录为cDNA;以此为模板PCR扩增hTFF3(286bp-462bp)基因;通过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点将hTFF3基因定向插入... 详细信息

目的构建pEGFP-N1-TFF3融合蛋白表达载体,并检测其在非洲绿猴肾成纤维细胞(COS7细胞)内的表达和定位。方法提取HT29细胞的mRNA,反转录为cDNA;以此为模板PCR扩增hTFF3(286bp-462bp)基因;通过EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切位点将hTFF3基因定向插入真核表达载体pEGFP-N1中;将构建的重组质粒测序成功后,转染至人肾细胞(HEK293细胞)中,荧光显微镜观察GFP-TFF3融合蛋白的表达,并提取蛋白进行Western Blot检测;利用激光扫描共聚焦显微镜观察GFP-TFF3融合蛋白在COS7细胞内的定位情况。结果酶切及测序结果证明hTFF3基因成功克隆至真核表达载体pEGFP-N1中,Western Blot检测结果显示其融合蛋白分子量约为34kDa,激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示GFP-TFF3融合蛋白在COS7细胞内定位以细胞核为主,在细胞质内少量表达。结论成功构建了pEGFP-N1-TFF3真核表达载体,GFP-TFF3蛋白定位于COS7的细胞核和细胞质中。

关键词： hTFF3 融合蛋白非洲绿猴肾成纤维细胞(COS 7细胞) HEK293细胞 Ht29细胞

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Carvacrol抑制ADAM9在口腔鳞状细胞癌中的表达

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现代肿瘤医学 2018年第2期26卷 170-173页

作者：施昕琦卢昊孙弘昊鲍艺文巩亚伟李彦姝中国医科大学临床医学系辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的:探讨carvacrol对口腔鳞状细胞癌中ADAM9表达的影响。方法:蛋白印记法分析carvacrol处理的口腔鳞状细胞癌中的去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)蛋白表达。另外,提取40μmol/L carvacrol处理24小时的UM-SCC-23细胞系和Tca8113细胞系中总RN... 详细信息

目的:探讨carvacrol对口腔鳞状细胞癌中ADAM9表达的影响。方法:蛋白印记法分析carvacrol处理的口腔鳞状细胞癌中的去整合素金属蛋白酶9(ADAM9)蛋白表达。另外,提取40μmol/L carvacrol处理24小时的UM-SCC-23细胞系和Tca8113细胞系中总RNA进行反转录,利用实时定量PCR(real-time PCR)扩增检测ADAM9基因表达。结果:Carvacrol明显降低UM-SCC-23细胞系和Tca8113细胞系ADAM9的蛋白和基因表达。结论:研究揭示了carvacrol的重要机制,可能为口腔鳞状细胞癌治疗提供新的理论依据。

关键词：香芹酚口腔鳞状细胞癌去整合素金属蛋白酶9

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ADAM9在高侵袭转移MDA-MB-231乳腺癌细胞系中的表达

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现代肿瘤医学 2017年第2期25卷 171-173页

作者：孙舟彤李彦姝中国医科大学临床医学系辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110112

目的:探讨去整合素金属蛋白酶9(a disintegrin and metalloproteinase 9,ADAM9)蛋白在人乳腺癌细胞系中的表达。方法:提取人正常乳腺上皮细胞HBL100,人乳腺癌细胞系MCF-7,ZR-75-1,MDA-MB-231,HCC1937和Hs578T,小鼠乳腺癌细胞系4T1的总蛋白和总mRNA,提取细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测ADAM9的表达。结果:在人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ADAM9蛋白表达最高,在小鼠乳腺癌4T1细胞中ADAM9表达较低。结论:ADAM9在高侵袭的MDA-MB-231乳腺癌细胞中高表达。

关键词：乳腺肿瘤 ADAM9 蛋白表达

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KIF4A在多种肿瘤中作用的研究进展

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医学综述 2023年第17期29卷 3376-3381页

作者：史俊秀乔雪中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室暨国家卫健委细胞生物学重点实验室沈阳110122 中国医科大学口腔医学院•附属口腔医院口腔生物学教研室辽宁省口腔疾病重点实验室沈阳110002

肿瘤的发病机制复杂,目前多采用手术切除辅助放疗、化疗等联合治疗手段,但仍不能显著改善部分患者的生存预后,因此寻找潜在的肿瘤分子治疗靶点至关重要。驱动蛋白超家族蛋白(KIF)是一类分子马达家族,参与膜细胞器和蛋白质复合物的运输... 详细信息

肿瘤的发病机制复杂,目前多采用手术切除辅助放疗、化疗等联合治疗手段,但仍不能显著改善部分患者的生存预后,因此寻找潜在的肿瘤分子治疗靶点至关重要。驱动蛋白超家族蛋白(KIF)是一类分子马达家族,参与膜细胞器和蛋白质复合物的运输。其中,KIF4A序列保守,磷酸化KIF4A可通过与CondensinⅠ结合调控染色体的凝聚、纺锤体形态改变和染色体中板对齐,进而调节细胞的分裂。KIF4A还可通过乳腺癌易感基因2和DNA修复蛋白Rad51信号通路调节DNA损伤修复,其在消化道肿瘤、妇科肿瘤、泌尿系统肿瘤中的表达存在显著差异。因此,未来深入研究KIF4A在肿瘤中的作用或可为肿瘤的治疗提供新靶点。

关键词：肿瘤驱动蛋白超家族蛋白4A 有丝分裂 DNA损伤修复

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