检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：尚德淑姜静宜方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

大肠杆菌ibcB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞的相关基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用.前期研究发现,ibeB基因稳定转染的鼠ES细胞AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子——nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生长端样... 详细信息

大肠杆菌ibcB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞的相关基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用.前期研究发现,ibeB基因稳定转染的鼠ES细胞AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子——nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生长端样结构.为研究ibeB基因诱导AB2.1向神经前体样细胞分化的机制,利用酵母双杂交筛选AB2.1中IbeB靶蛋白.获得的80个阳性克隆中有5个为组织蛋白酶A(CathepsinA)基因,同源性达98％.为此,进一步鉴定IbeB蛋白与Cathepsin A的相互作用,酵母体内小量杂交结果表明,Cathepsin A和IbeB蛋白具有阳性相互作用;TNT(R)快速转录/翻译耦联系统对ibeB进行表达,同时构建GST-Cathepsin A表达载体,并用IPTG在大肠杆菌BL21中诱导表达,GST-pull down法验证两者可以结合,反之,用体外转录翻译体系表达小鼠Cathepsin A蛋白,用IPTG在BL21中诱导表达GST-IbeB,GSTpull down法同样表明两者可以结合;免疫荧光显示共转染ibeB和CathepsinA的HEK293细胞中两者存在共定位,免疫共沉淀结果表明两者在真核细胞中具有相互作用.Cathepsin A是一种溶酶体蛋白水解酶,主要在细胞内环境稳定方面发挥作用.我们的结果提示,IbeB可能与Cathepsin A结合诱导AB2.1向神经前体细胞分化,其机制还需进一步探讨.本研究结果可望为加深了解神经细胞分化调控机制及通过人工干预手段得到定向分化的神经前体细胞积累资料.

关键词： ibeB ES细胞神经分化 Cathepsin A

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基于量子点标记技术的大肠癌肿瘤相关抗原LEA的检测

基于量子点标记技术的大肠癌肿瘤相关抗原LEA的检测

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第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议

作者：王蒴方瑾何慰明中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

量子点(quantum dots,QD)是由半导体材料制成的直径为2-10nm的纳米晶体,是一种新型的荧光染料。与传统的有机荧光染料相比,量子点具有很多优良的光学特性,如良好的光学稳定性;较高的荧光强度;超强的抗光漂白能力:较宽的激发光谱和较窄... 详细信息

量子点(quantum dots,QD)是由半导体材料制成的直径为2-10nm的纳米晶体,是一种新型的荧光染料。与传统的有机荧光染料相比,量子点具有很多优良的光学特性,如良好的光学稳定性;较高的荧光强度;超强的抗光漂白能力:较宽的激发光谱和较窄的发射光谱等。更为重

关键词：量子点大肠癌 LEA ND-1

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人p21活化激酶6基因真核表达质粒的构建及其亚细胞定位

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东南大学学报（医学版） 2013年第3期32卷 297-300页

作者：刘彤李丹妮李洋李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室/教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 中国医科大学

目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)真核细胞表达质粒,并研究其在人胚肾真核细胞HEK293中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人PAK6基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1HisC中,构建含人PAK6基因的真核表达质粒pcDNA3.1HisC-PAK6。利用酶切鉴定,DN... 详细信息

目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)真核细胞表达质粒,并研究其在人胚肾真核细胞HEK293中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人PAK6基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1HisC中,构建含人PAK6基因的真核表达质粒pcDNA3.1HisC-PAK6。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定PAK6真核表达质粒及PAK6蛋白的亚细胞定位。结果:经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认PAK6基因成功导入真核表达载体pcDNA3.1HisC。瞬时转染HEK293细胞,PAK6蛋白表达在细胞浆中。结论:PAK6真核表达质粒构建成功,PAK6定位于细胞浆中。

关键词： PAK6 真核细胞 pcDNA3 1HisC 亚细胞定位

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基于转移性乳腺癌特异性核酸适配子的循环肿瘤细胞靶向捕获研究

基于转移性乳腺癌特异性核酸适配子的循环肿瘤细胞靶向捕获研究

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第三届中国核酸适配体学术研讨会

作者：李婉明周琳琳方瑾教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院细胞生物教研室沈阳110001

在肿瘤转移的过程中,脱离原发肿瘤、侵袭并进入循环系统的肿瘤细胞被称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)。许多研究表明,对外周血中的CTCs进行检测分析,有助于早期发现肿瘤的微转移、转移风险的预测和判断,以及评估预后和...

在肿瘤转移的过程中,脱离原发肿瘤、侵袭并进入循环系统的肿瘤细胞被称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)。许多研究表明,对外周血中的CTCs进行检测分析,有助于早期发现肿瘤的微转移、转移风险的预测和判断,以及评估预后和监测复发[1]。高效富集外周血中含量稀少的CT℃是临床应用的关键问题,但目前基于CTC上皮特性的富集方法难以富集到失去上皮特性如发生上皮间质转化(EMT)的细胞群体,有可能遗失最具有诊断意义的信息[2]。因此,发现新的特异性更高的肿瘤转移相关标志物以提高CTC的检测有效性,对于转移性肿瘤的早期诊断和早期治疗具有重要的科学意义和临床价值。

关键词：

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大肠杆菌侵袭基因ibeB对人脑微血管内皮细胞生物学特性的影响及其机制

大肠杆菌侵袭基因ibeB对人脑微血管内皮细胞生物学特性的影响及其...

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：赵伟东陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌是新生儿化脓性脑膜炎最常见的致病菌。引起大肠杆菌性脑膜炎的关键步骤是：播散入血的大肠杆菌必须穿过主要由脑微血管内皮细胞组成的血脑屏障。ibeB 基因是我室人员在大肠杆菌中克隆的一个与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞(h... 详细信息

大肠杆菌是新生儿化脓性脑膜炎最常见的致病菌。引起大肠杆菌性脑膜炎的关键步骤是：播散入血的大肠杆菌必须穿过主要由脑微血管内皮细胞组成的血脑屏障。ibeB 基因是我室人员在大肠杆菌中克隆的一个与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞(human brain microvascular endothelial cells,HBMEC)、穿越血脑屏

关键词： ibeB 大肠杆菌人脑微血管内皮细胞

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铅对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运体的影响

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环境与健康杂志 2014年第3期31卷 193-196,F0003页

作者：林琳廖英俊赵凤红王艳唐漫许亚婷王达金亚平中国医科大学基础医学院生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室细胞生物学卫生部重点实验室中国医科大学公共卫生学院劳动卫生学教研室中国医科大学药学院临床药理学教研室

目的探讨铅暴露对星形胶质细胞（AS）中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1-3dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养，以胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色鉴定细胞纯度后，进行0（对照组）、50、100、200及400μmol... 详细信息

目的探讨铅暴露对星形胶质细胞（AS）中GLAST和GLT-1蛋白表达及转运体功能的影响。方法取出生1-3dWistar大鼠的仔鼠星形胶质细胞进行原代培养，以胶质纤维酸性蛋白（GFAP）染色鉴定细胞纯度后，进行0（对照组）、50、100、200及400μmol／L乙酸铅染毒，染毒时间为72h。倒置显微镜下观察细胞形态并采集图像；以AlamarBlue法检测细胞活力；以Westernblot法检测GLAST和GLT-1蛋白的表达；以同位素标记法测定谷氨酸转运体功能。结果50和100μmol／L铅暴露组的细胞形态与对照组相比，未见明显改变；200μmol／L铅暴露72h后，少量细胞开始脱壁，细胞间隙增大；400μmol／L铅暴露组细胞变大，突起变短或消失，脱壁细胞数量明显增多。与对照组相比，各浓度铅暴露组的AS活力均降低（P〈0．05），100、200和400μmol／L铅暴露组的GLT-1蛋白含量下降（P〈0．05），但各浓度铅暴露组的GLAST蛋白含量无显著改变。100、200和400μmol／L铅暴露组的3FI—Glu放射性低于对照组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论铅暴露可明显抑制AS中GLT-1蛋白的表达，并导致AS的Glu转运体功能下降。

关键词：星形胶质细胞铅谷氨酸谷氨酸转运体-1

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DNA损伤修复因子(ARAP1)参与调控雄激素受体AR介导的基因转录及其表观遗传学机制

DNA损伤修复因子(ARAP1)参与调控雄激素受体AR介导的基因转录及其...

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细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉

作者：王春玉周婷婷孙洪邈邹仁龙孙士莹王胜利佟昌慈吴怡罗昊林琳高鹏焦娇赵越中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室染色质生物学研究室

雄激素受体(Androgen Receptor,AR)是核受体超家族成员,以配体依赖方式介导基因转录,并招募一系列辅调节因子调控其转录,发挥其生物学功能。AR及其辅调节因子分别在前列腺癌中扮演着重要角色。我们利用AR-PEV果蝇模型从数百种带有基因... 详细信息

雄激素受体(Androgen Receptor,AR)是核受体超家族成员,以配体依赖方式介导基因转录,并招募一系列辅调节因子调控其转录,发挥其生物学功能。AR及其辅调节因子分别在前列腺癌中扮演着重要角色。我们利用AR-PEV果蝇模型从数百种带有基因突变型的果蝇系统中筛选出ARAP1参与上调AR介导基因转录。ARAP1是参与DNA损伤修复的重要蛋白,并可能

关键词：雄激素受体(AR) 转录调控 ARAP1 组蛋白修饰前列腺癌

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大鼠海马内注射β淀粉样蛋白促进神经细胞增殖

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解剖科学进展 2008年第2期14卷 119-122页

作者：郭大文马怡然方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,AB)沉积对神经细胞增殖的影响。方法将Aβ_(1-42)定位注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。腹腔注射Brdu标记增殖细胞。用免疫组化和免疫荧光检测溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,B... 详细信息

目的观察脑内β淀粉样蛋白(β-amyloid,AB)沉积对神经细胞增殖的影响。方法将Aβ_(1-42)定位注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ_(42-1)或PBS。腹腔注射Brdu标记增殖细胞。用免疫组化和免疫荧光检测溴脱氧尿苷(Bromodeoxyuridine,Brdu)标记细胞和doublecortin(DCX)阳性细胞。结果海马内注射Aβ_(1- 42)后引起海马齿状回颗粒下层(subgranular zone,SGZ)和侧脑室下层(subventricular zone,SVZ)Brdu标记细胞及DCX阳性细胞显著增加(P<0.01)。双免疫荧光分析表明许多Brdu标记细胞表达DCX。结论Aβ沉积可以促进脑内的神经细胞增殖,提示这种现象可能为阿尔茨海默病的一种代偿性应答。促进神经细胞增殖的措施对于治疗阿尔茨海默病具有重要的价值。

关键词： β淀粉样蛋白神经细胞增殖阿尔茨海默病

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巨噬细胞炎症因子1α对人脑微血管内皮细胞通透性的影响

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解剖科学进展 2007年第4期13卷 330-333,337页

作者：尚德淑马怡然赵伟东方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋... 详细信息

目的研究巨噬细胞炎症因子1α(MIP-1α)是否具有开通血脑屏障的作用。方法以重组人MIP-1α直接作用于人脑微血管内皮细胞(HBMEC),免疫荧光方法检测紧密连接蛋白ZO-1的分布变化、跨内皮细胞电阻、HRP穿过HBMEC单层的改变、HBMEC细胞CC趋化因子受体5(CCR5)的表达,以及MIP-1α中和抗体和分泌MIP-1α的模式细胞(6T-CEM)与HBMEC单层共同温育时ZO-1的分布变化。结果MIP-1α作用下,HBMEC单层紧密连接结构被破坏,通透性增加,引起HBMEC细胞CCR5受体的表达,MIP-1α中和抗体阻断6T-CEM细胞对HBMEC单层ZO-1分布的改变。结论MIP-1α可能通过CCR5改变HBMEC单层通透性促进T淋巴细胞穿过血脑屏障。

关键词：巨噬细胞炎症因子1α 人脑微血管内皮细胞血脑屏障

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小胶质细胞和外周血T细胞对大鼠海马内β-淀粉样蛋白沉积的应答反应

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解剖科学进展 2006年第3期12卷 196-198,201,i0001页

作者：郭大文马怡然方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的观察海马内β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障及脑内小胶质活化的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42合成肽注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后7天,用免疫荧光和免疫组织... 详细信息

目的观察海马内β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积对外周血T细胞穿过血脑屏障及脑内小胶质活化的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42合成肽注射至大鼠双侧海马,对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后7天,用免疫荧光和免疫组织化学法检测CD3、CD11b及MHCⅡ类分子的表达。结果海马内注射Aβ1-42后7天大脑皮质深部和海马区出现大量CD3阳性T细胞,比对照组明显增多(P<0.01);CD11b和MHCⅡ类分子阳性小胶质细胞数量也显著高于对照组(P<0.01),表现为明显激活状态。结论大鼠海马内Aβ沉积引起外周血T细胞穿过血脑屏障进入脑内增多,并影响了小胶质细胞增生、活化。

关键词：阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白小胶质细胞 T细胞血脑屏障

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