检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：刘巍赵伟东延锦春任志远方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

在新生儿细菌性脑膜炎的致病机理中,脑膜炎大肠杆菌(*** K1株)穿过血脑屏障的主要组成部分——人脑微血管内皮细胞(HBMEC)是很关键的环节。我们前期工作发现在 *** K1侵袭 HBMEC 过程中,涉及 HBMEC 的 P13K→Akt/Rock→LIMK→Cofilin ... 详细信息

在新生儿细菌性脑膜炎的致病机理中,脑膜炎大肠杆菌(*** K1株)穿过血脑屏障的主要组成部分——人脑微血管内皮细胞(HBMEC)是很关键的环节。我们前期工作发现在 *** K1侵袭 HBMEC 过程中,涉及 HBMEC 的 P13K→Akt/Rock→LIMK→Cofilin 信号通路的活化,以及细胞骨架肌动蛋白微丝的重排。Src

关键词： Src 激酶大肠杆菌人脑微血管内皮细胞

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3*Flag-hPAK4重组质粒的构建及其在COS7细胞中的表达与定位

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东南大学学报（医学版） 2011年第6期30卷 869-873页

作者：张红艳王春玉李彦姝王迪李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室辽宁沈阳110001

目的:构建3*Flag-hPAK4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内的表达与定位,并纯化PAK4蛋白。方法:提取人乳腺癌细胞MCF-7 mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hPAK4全长编码基因,亚克隆至含有3*Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并... 详细信息

目的:构建3*Flag-hPAK4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内的表达与定位,并纯化PAK4蛋白。方法:提取人乳腺癌细胞MCF-7 mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增hPAK4全长编码基因,亚克隆至含有3*Flag标签的真核表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到非洲绿猴肾成纤维细胞COS7中,提取细胞蛋白进行Western blotting检测,同时利用共聚焦激光扫描显微镜观察3*Flag-hPAK4在COS7细胞内定位。使用免疫沉淀的方法纯化PAK4蛋白。结果:hPAK4全长基因序列克隆到了真核表达载体3*Flag中,酶切鉴定片段为1 800 bp。Western blotting检测到了融合蛋白3*Flag-hPAK4的表达,分子质量约为68 kDa,3*Flag-hPAK4在COS7细胞中表达定位在细胞浆中,成功纯化了PAK4蛋白。结论:成功地构建了3*Flag-hPAK4真核表达质粒,同时鉴定了3*Flag-hPAK4融合蛋白的表达,并纯化了PAK4蛋白。3*Flag-hPAK4蛋白主要定位在细胞浆中。

关键词：人P21活化激酶4 蛋白质印记免疫沉淀

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PLGF介导小细胞肺癌细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层的研究

PLGF介导小细胞肺癌细胞穿过人脑微血管内皮细胞单层的研究

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：李波王淳赵晓云曹立业方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大约有20％的脑转移肿瘤是小细胞肺癌脑转移,其具有恶性度高,脑转移发生时间早的特点。目前针对该疾病的治疗主要是放化疗及手术切除单发的脑转移病灶,但这种治疗手段对疾病预后无明显改善, 患者的平均生存期为两年左右。因此,探讨小细... 详细信息

大约有20％的脑转移肿瘤是小细胞肺癌脑转移,其具有恶性度高,脑转移发生时间早的特点。目前针对该疾病的治疗主要是放化疗及手术切除单发的脑转移病灶,但这种治疗手段对疾病预后无明显改善, 患者的平均生存期为两年左右。因此,探讨小细胞肺癌脑转移的分子机制对于小细胞肺癌的防治具有重要的意义。

关键词： PLGF 小细胞肺癌人脑微血管内皮细胞

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原核表达载体GST-RUNX3的构建及其在大肠杆菌表达

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解剖科学进展 2011年第4期17卷 375-377页

作者：王桂玲王孝会都田赵陈薇姜佩家中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法利用Kpn1和Xho1位点酶切pcDNA3.1-RUNX3质粒,将获得的1300bpRUNX3编码序列插入到pGEX-4T-2中,构建pGEX-4T-2-RUNX3质粒,并转化*** DH5α,筛选阳性重组子,酶切鉴... 详细信息

目的构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法利用Kpn1和Xho1位点酶切pcDNA3.1-RUNX3质粒,将获得的1300bpRUNX3编码序列插入到pGEX-4T-2中,构建pGEX-4T-2-RUNX3质粒,并转化*** DH5α,筛选阳性重组子,酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入BL21中,经IPTG诱导表达后SDS-PAGE电泳鉴定。结果酶切pGEX-4T-2-RUNX3质粒获得1300bpRUNX3片段,经测序后获得的DNA序列与GenBank进行同源性比对,证实pGEX-4T-2-RUNX3构建成功。在*** BL21用IPTG进行诱导表达后,SDS-PAGE电泳方法证实了GST-RUNX3融合蛋白表达。结论成功构建了RUNX3原核表达载体,其融合蛋白在大肠埃希菌表达,为进一步纯化RUNX3蛋白和研究RUNX3的生物学功能奠定了基础。

关键词： pGEX-4T-2-RUNX3质粒原核表达融合蛋白大肠埃希菌

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胃癌SGC-7901细胞中人RIPX—GFP融合蛋白载体构建及表达定位

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医学分子生物学杂志 2011年第1期8卷 36-39页

作者：王桂玲王孝会周颖陈薇姜佩佳中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳市110001

目的构建真核表达载体pEGFP—RIPX，并鉴定RIPX在胃癌细胞中的定位，并检测外源性RIPX的表达。方法以pBluescriptR—RIPX为模板，采用PCR法进行人RIPX编码序列（CDS）的扩增，并将其克隆至真核表达载体pEGFP—C1中。将pEGFP—RIPX质粒... 详细信息

目的构建真核表达载体pEGFP—RIPX，并鉴定RIPX在胃癌细胞中的定位，并检测外源性RIPX的表达。方法以pBluescriptR—RIPX为模板，采用PCR法进行人RIPX编码序列（CDS）的扩增，并将其克隆至真核表达载体pEGFP—C1中。将pEGFP—RIPX质粒瞬时转染到胃癌SGC-7901细胞中，用Western印迹方法检测GFP—RIPX融合蛋白的表达；用激光扫描共聚焦显微镜观察RIPX的定位。结果人的RIPX编码序列被成功克隆至真核表达载体pEGFP—C1中；证实了GFP—RIPX融合蛋白的表达；转染***后，在胃癌SGC-7901细胞胞质内可见明亮的绿色荧光。结论成功地构建了pEGFP-RIPX载体，鉴定了外源性RIPX的表达；同时证实在胃癌SGC-7901细胞中RIPX主要定位于细胞质，为进一步研究RIPX的生物学特性及其信号转导通路奠定了基础。

关键词： RIPX 绿色荧光蛋白蛋白表达及定位胃癌SGC-7901细胞

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阿尔茨海默病人外周血T淋巴细胞高表达CXCR2：CXCR2在外周血T淋巴细胞穿过血脑屏障中的作用

阿尔茨海默病人外周血T淋巴细胞高表达CXCR2：CXCR2在外周血T淋巴...

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中国细胞生物学学会第九次会员代表大会暨青年学术大会

作者：刘怿君郭大文马怡然曼淑梅方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

近年研究表明,中枢神经系统并非传统意义上的免疫豁免区。在阿尔茨海默病(AD)患者的脑实质中, 发现有外周血 T 淋巴细胞,但这些 T 淋巴细胞是如何穿过血脑屏障(BBB)并发挥着怎样的病理生理学作用, 目前尚不清楚。经基因芯片筛选,我们发... 详细信息

近年研究表明,中枢神经系统并非传统意义上的免疫豁免区。在阿尔茨海默病(AD)患者的脑实质中, 发现有外周血 T 淋巴细胞,但这些 T 淋巴细胞是如何穿过血脑屏障(BBB)并发挥着怎样的病理生理学作用, 目前尚不清楚。经基因芯片筛选,我们发现 AD 患者外周血 T 淋巴细胞中的 CXCR2受体表达水平显著高

关键词：阿尔茨海默病 CXCR2 IL-8 TNF-α Aβ 血脑屏障迁移

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原核表达载体GST-RUNX3的构建及其在大肠杆菌中的表达

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解剖科学进展 2011年第3期17卷 284-286页

作者：王桂玲王孝会都田赵陈薇姜佩家中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-RUNX3为模板,通过Kpn1和Xho1酶切位点将RUNX3定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-RUNX3,并转化***5α,筛选阳性重组子,限制性内切... 详细信息

目的构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-RUNX3为模板,通过Kpn1和Xho1酶切位点将RUNX3定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-2-RUNX3,并转化***5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入***21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,鉴定。结果双酶切获得1300bp片段,证明RUNX3片段被成功导入pGEX-4T-2,并在测序后与GenBank进行同源性比对,比对进一步证实原核表达质粒pGEX-4T-2-RUNX3构建成功,并用IPTG诱导,SDS-PAGE方法证实了GST/RUNX3融合蛋白在大肠杆菌中的表达。结论成功构建了RUNX3原核表达载体,并证实了融合蛋白在大肠埃希菌中的表达,为进一步纯化RUNX3蛋白和研究RUNX3的生物学功能奠定了基础。

关键词：质粒原核表达融合蛋白

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一种转移性大肠癌特异性核酸适配子的分析鉴定及应用

一种转移性大肠癌特异性核酸适配子的分析鉴定及应用

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2015中国转化医学大会暨中国转化医学联盟成立大会

作者：李婉明王蒴周琳琳方瑾医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001

核酸适配子(aptamer)是利用指数富集的系统进化技术(the systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从一个库容量达1018的随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶细胞高亲和力和高特异性结合的寡核苷酸序列.W3...

核酸适配子(aptamer)是利用指数富集的系统进化技术(the systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从一个库容量达1018的随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶细胞高亲和力和高特异性结合的寡核苷酸序列.W3是本课题组在前期工作中以转移性大肠癌细胞系LoVo为靶细胞,通过消减Cell-SELEX技术筛选得到的能与转移性肿瘤细胞特异性结合的核酸适配子.为了进一步明确W3所结合的靶标是否具有转移性肿瘤标志物特性并探讨W3作为标志物检测探针的可能性,本研究首先采用流式分选技术对靶细胞LoVo进行基于W3结合特异性的分选,收集得到W3high和W3low细胞亚群.体外生物学行为分析显示W3high的体外增殖能力和单克隆形成能力与W3low相似,但是迁移和侵袭能力显著高于W3low,表明W3结合的靶分子与肿瘤的侵袭转移相关.裸鼠成瘤实验显示W3high的成瘤能力低于W3low,但肝转移能力明显高于W3low,这结果进一步说明W3结合的靶分子为转移性大肠癌的特异性生物标志物.为了探讨W3能否作为临床转移性大肠癌的靶向成像分子探针,我们将W3连接量子点构建量子点探针(W3-QD),对89例的大肠癌组织病理标本和15例的癌旁组织进行成像检测,结果发现W3-QD具有良好的肿瘤特异性,且荧光信号的强弱与淋巴结转移与否高度相关,表明W3可以作为转移性肿瘤的一个特异性分子探针,能够为肿瘤早期发生转移提供一个有效的诊断工具.同时,基于W3对转移性肿瘤细胞的高特异结合活性,本研究尝试将其用于含量稀少但具有良好诊断价值的循环肿瘤细胞的捕获,即利用W3建立基于微流控芯片的细胞捕获系统,成功实现了对混合细胞及人全血中肿瘤细胞的靶向捕获和富集,可望为大肠癌患者血样中的循环肿瘤细胞的检测提供有效简便的新方法.

关键词：

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构建具有学科特点的细胞生物学PBL教学模式

构建具有学科特点的细胞生物学PBL教学模式

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：方瑾李丰张惠丹于敏王桂玲李想李晓东刘彤李妍邵阳光中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

以问题为基础学习(problem-based learning,PBL)的教学方法是目前发达国家普遍采用并被广泛认同的一种医学课程模式,它是将问题作为基本因素,将课程的内容相互联系起来,使学生在不断的提出问题和解决问题中完成教学内容的学习,并实现教... 详细信息

以问题为基础学习(problem-based learning,PBL)的教学方法是目前发达国家普遍采用并被广泛认同的一种医学课程模式,它是将问题作为基本因素,将课程的内容相互联系起来,使学生在不断的提出问题和解决问题中完成教学内容的学习,并实现教学思想和教学目标,这种方法在培养学生分析问题和解决问题的能力,培养学生自主学习能力,并养成终生学习习惯方面具有极大的促进作用。近20年,该方法得到了迅速的发展,并被广泛采用,已逐步形成了较为规范的基本教学过程并成为医学教学模式改革的大趋势。

关键词： PBL 细胞生物学教学模式

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铅与幼鼠脑组织蛋白激酶C活性及记忆功能改变的关系(英文)

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中国临床康复 2005年第4期9卷 241-243页

作者：侯伟健孙黎光朱启文吴哲刘素媛邢伟中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室辽宁省沈阳市110001 中国医科大学基础医学院生物化学教研室辽宁省沈阳市110001 沈阳医学院生理教研室辽宁省沈阳市110031 中国医科大学附属第一医院神经内科辽宁省沈阳市110001

背景:铅暴露引起的动物学习记忆障碍与脑细胞中蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)活性改变是否有关系呢?目的:研究慢性铅暴露下发育期小鼠大脑组织PKC活性变化规律及其对小鼠记忆发育的影响。设计:以实验动物为研究对象,随机对照的验证性... 详细信息

背景:铅暴露引起的动物学习记忆障碍与脑细胞中蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)活性改变是否有关系呢?目的:研究慢性铅暴露下发育期小鼠大脑组织PKC活性变化规律及其对小鼠记忆发育的影响。设计:以实验动物为研究对象,随机对照的验证性实验研究。单位:卫生部细胞生物学重点实验室。材料:实验在中国医科大学生物化学与分子生物学实验室完成。选择五六周龄昆明种小白鼠72只。方法:以不同浓度的醋酸铅饲喂交配后的雌鼠,其幼崽通过哺乳和直接饮水接触铅。在幼崽生后1d(P1),8d(P8),15d(P15),22d(P22),30d(P30)将其分别处死,取出脑组织。采用犤γ-32P犦ATP放射性磷标记法于体外测定铅暴露小鼠大脑组织的PKC的活性;另外取暴露于不同浓度醋酸铅的发育期小鼠,通过被动回避反应实验进行记忆行为学训练和测试,观察不同浓度的铅对小鼠记忆的影响。主要观察指标:①不同浓度铅暴露对发育期小鼠大脑组织内PKC活性的影响。②不同浓度铅暴露对发育期小鼠记忆行为的影响。结果:对幼鼠脑PKC的活性测定显示:在发育初期铅暴露小鼠脑中PKC活性高于正常,发育后期则低于正常,高浓度铅对PKC活性抑制较强;记忆行为学测试可见低浓度铅使小鼠发育初期记忆曲线升高,而使中长期记忆曲线减低;铅浓度升高,记忆曲线降低。

关键词：铅小鼠记忆蛋白激酶C 被动回避反应

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