检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2010年第4期16卷 302-306页

作者：张惠丹单连峰王晓楠任辉方瑾中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 中国医科大学基础医学院数学教研室沈阳110001 沈阳市肛肠医院大肠外科沈阳110002

目的建立一种定量检测大肠癌中K-ras基因突变比例的方法,并分析其与临床病理参数之间的关系。方法利用微流控温度梯度毛细管电泳(Chip-based temperature gradient electrophoresis,Chip-basedTGCE)对4例代表性大肠癌组织切片中的K-ras... 详细信息

目的建立一种定量检测大肠癌中K-ras基因突变比例的方法,并分析其与临床病理参数之间的关系。方法利用微流控温度梯度毛细管电泳(Chip-based temperature gradient electrophoresis,Chip-basedTGCE)对4例代表性大肠癌组织切片中的K-ras基因突变进行检测,通过AutoCAD软件计算出K-ras基因突变比例,结果经克隆测序校正后获得线性回归方程。应用该方法定量检测84例石蜡包埋大肠癌组织中的K-ras基因突变比例,并探讨其与临床病理参数的关系。结果 Chip-based TGCE检测K-ras基因突变比例与克隆测序检测K-ras突变比例的线性回归方程为y=0.993x-1.387,K-ras基因突变比例与肿瘤部位和浸润深度有显著相关性(P<0.05),检测获得的最低K-ras突变比例达到2.51%。结论该研究显示Chip-based TGCE是一种快速、灵敏、便捷、经济的基因突变比例定量分析方法。

关键词：微流控芯片温度梯度毛细管电泳点突变检测 K-ras基因定量

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Flt-1受体在*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞过程中的作用

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第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议

作者：刘巍赵伟东方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌K1株(Escherichia coli K1,*** K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)是其跨越血脑屏障播散入脑致病的关键步骤。我们前期工作发现PI3K是参与*** K1侵袭HBMEC的重要信号分子并... 详细信息

大肠杆菌K1株(Escherichia coli K1,*** K1)是引起新生儿细菌性脑膜炎最常见的病原体之一。*** K1侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)是其跨越血脑屏障播散入脑致病的关键步骤。我们前期工作发现PI3K是参与*** K1侵袭HBMEC的重要信号分子并证明Src激酶是*** K1侵袭HBMEC过程中PI3K的上游分子。最近发现在*** K1

关键词： Flt-1 Src 大肠杆菌K1株人脑微血管内皮细胞

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小鼠胚胎干细胞中外源性ibeB基因靶蛋白的筛选及分析鉴定

小鼠胚胎干细胞中外源性ibeB基因靶蛋白的筛选及分析鉴定

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第十一届中国细胞生物学学术大会暨2009西安细胞生物学国际会议

作者：尚德淑姜静宜方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室

大肠杆菌ibeB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞相关的基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用。前期研究发现ibeB基因稳定转染的鼠胚胎干细胞(ES)AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子-nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生... 详细信息

大肠杆菌ibeB基因是其侵袭人脑微血管内皮细胞相关的基因,在细菌侵袭真核细胞过程中进入真核细胞发挥作用。前期研究发现ibeB基因稳定转染的鼠胚胎干细胞(ES)AB2.1特异性表达神经前体细胞标志分子-nestin,细胞有较长突起,呈类似神经生长端样结构。

关键词： ibeB ES细胞神经分化 Cathepsin A

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DNA损伤修复因子(ARAP1)参与调控雄激素受体AR介导的基因转录及其表观遗传学机制

DNA损伤修复因子(ARAP1)参与调控雄激素受体AR介导的基因转录及其...

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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：王春玉周婷婷孙洪邈邹仁龙孙士莹王胜利佟昌慈吴怡罗昊林琳高鹏焦娇赵越中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

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环境污染物PFOS可引起大鼠海马干细胞的增殖

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辽宁大学学报（自然科学版） 2010年第4期37卷 294-297页

作者：王昕陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:观察全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)大鼠海马干细胞增殖情况.方法:利用大鼠腹腔内连续注射不同剂量的PFOS 14天,建立动物模型.以Brdu作标记物,利用免疫组织化学染色的方法检测不同剂量PFOS作用下大鼠海马干细胞增殖情况.结果:以Brdu... 详细信息

目的:观察全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS)大鼠海马干细胞增殖情况.方法:利用大鼠腹腔内连续注射不同剂量的PFOS 14天,建立动物模型.以Brdu作标记物,利用免疫组织化学染色的方法检测不同剂量PFOS作用下大鼠海马干细胞增殖情况.结果:以Brdu作标记物,高剂量PFOS作用下大鼠海马内可检测到大量阳性细胞存在,对照组和低剂量PFOS作用下无此阳性结果产生.结论:推测PFOS可引起大鼠海马干细胞的增殖.

关键词：全氟辛烷磺酰基化合物(PFOS) 大鼠海马干细胞增殖

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小细胞肺癌细胞诱发人脑微血管内皮细胞紧密连接的开放

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解剖科学进展 2009年第2期15卷 183-187,191页

作者：赵晓云李波曹立业方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院微生物和细胞生物学教研室沈阳110016

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌... 详细信息

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌细胞与微血管内皮细胞单层共培养时紧密连接蛋白occludin的可溶性片段和不可溶性片段在内皮细胞紧密连接处的分布情况;应用跨内皮迁移实验及辣根过氧化物酶渗漏实验分析小细胞肺癌细胞与内皮细胞单层共培养后其跨内皮细胞单层的迁移能力和内皮单层渗透性的改变;利用ROCK特异性抑制剂Y27632,分析Rho/ROCK信号通路是否参与小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结果小细胞肺癌细胞能够通过人脑微血管内皮细胞单层迁移,在0h到12h之间随培养时间的延长小细胞肺癌细胞的迁移率逐渐增加;共培养8h时人脑微血管内皮细胞紧密连接处紧密连接结构蛋白(ZO-1和occludin)表达减少,通透性明显增加;ROCK特异性抑制剂Y27632能够阻断小细胞肺癌细胞引起的内皮细胞间紧密连接处紧密连接结构蛋白ZO-1和occludin表达减少、内皮单层通透性的增加及小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结论小细胞肺癌细胞与人脑微血管内皮细胞单层共培养诱发人脑微血管内皮细胞间紧密连接的开放,利于小细胞肺癌细胞的跨内皮单层迁移。

关键词：小细胞肺癌细胞人脑微血管内皮细胞共培养紧密连接

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TFF3-Twist-p65炎症应答信号调节的上游分子机制初探

TFF3-Twist-p65炎症应答信号调节的上游分子机制初探

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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：郑倩倩刘彩红郭文东冯艳玲朱亚勤教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001 中国医科大学心血管研究所沈阳110001

肠三叶因子3(TrefoilFactor3,TFF3)是三叶因子家族的成员,主要分布于杯状细胞,并在上丘脑发现其表达.研究表明,TFF3除作为粘膜保护肽,对上皮组织起到损伤修复作用外,最近发现它具有抗凋亡活性;临床研究发现它可能作为新的炎症、免疫关... 详细信息

肠三叶因子3(TrefoilFactor3,TFF3)是三叶因子家族的成员,主要分布于杯状细胞,并在上丘脑发现其表达.研究表明,TFF3除作为粘膜保护肽,对上皮组织起到损伤修复作用外,最近发现它具有抗凋亡活性;临床研究发现它可能作为新的炎症、免疫关联疾病候选分子.病理状态下,TFF3常表现为上调表达,我们的研究也证实这一现象.本实验小组前期研究表明,不同于经典的TNFα激活NF-κB,TFF3瞬时激活NF-κB p65同源二聚体可能由Twist蛋白介导的负性调节作用,从丽抑制过度炎性应答发生.

关键词： TFF3 Twist p65 炎症应答上游分子

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hβ-arrestin2基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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现代肿瘤医学 2015年第9期23卷 1198-1200页

作者：刘彩红毛琪郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞病理生物学研究室细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院免疫教研室黑龙江大庆163319

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测... 详细信息

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测序公司检测正确后瞬时转染人胚肾细胞HEK293,Western blot检测融合蛋白表达。激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在HEK293细胞中的分布。结果:hβ-arrestin2编码序列被成功克隆至p EGFP-C1中,Western blot检测到融合蛋白表达,分子量约为77k Da,p EGFP-C1-β-arrestin2定位于HEK293细胞的细胞质中。结论:成功构建hβ-arrestin2基因真核表达载体,证实了融合蛋白定位在HEK293的细胞质中。

关键词： hβ-arrestin2基因蛋白质印记绿色荧光蛋白

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肝癌SMMC-7721细胞系HSF4调控的靶基因图谱分析

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生命科学研究 2018年第3期22卷 201-207页

作者：马汝海王天骄潘忠诚赵雨杰何群中国医科大学公共基础学院化学教研室中国辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院教育部细胞生物学重点实验室中国辽宁沈阳110122

热休克转录因子4(heat shock transcription factor 4,HSF4)是热休克转录因子HSF家族成员,近年发现HSF4除发挥调控热休克蛋白(heat shock protein,HSP)表达的功能外,亦直接或间接调节许多非热休克基因的表达,参与细胞生长发育多种生理... 详细信息

热休克转录因子4(heat shock transcription factor 4,HSF4)是热休克转录因子HSF家族成员,近年发现HSF4除发挥调控热休克蛋白(heat shock protein,HSP)表达的功能外,亦直接或间接调节许多非热休克基因的表达,参与细胞生长发育多种生理病理过程。现通过染色质免疫共沉淀联合测序(chromatin immunoprecipitation sequencing,ChIP-Seq)方法对HSF4潜在的靶基因进行检测,并用GO(gene ontology)分析方法对这些靶基因进行分析,以探求HSF4发挥的生物学功能。ChIP-Seq结果显示:在肝癌SMMC-7721细胞系基因组DNA中共有1 726个HSF4结合区域,其中102个在启动子区。GO分析结果显示:这些潜在的靶基因分别参与细胞发育、增殖和对外部刺激应答的生物过程,具有与核酸和蛋白质结合及蛋白质激活的分子功能,参与药物和有害异物代谢以及化学致癌的信号传导通路。此外,MEME4.12.0软件推测出在SMMC-7721细胞系中HSF4与DNA启动子区结合的6种模式。分析HSF4在肝癌SMMC-7721细胞系中可能调控的靶基因图谱为进一步研究HSF4在肝癌发生机制中的作用提供了有效的实验数据和理论基础。

关键词：热休克转录因子4(HSF4) 肝肿瘤染色质免疫共沉淀联合测序(ChIP-Seq) 靶基因 GO分析

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应用凝集素芯片检测细胞膜表面糖链种属特异性

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中国医药生物技术 2011年第1期6卷 24-28页

作者：马汝海王天骄潘忠诚何群中国医科大学基础医学院化学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物芯片中心/教育部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的应用凝集素芯片检测小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链类型,探求不同物种间相同组织细胞膜表面糖复合物在种群免疫和细胞功能中的作用。方法选择22种凝集素,利用生物芯片点样仪制备芯片,选用牛血清白蛋白(BSA)为阴性质控,马铃薯凝集... 详细信息

目的应用凝集素芯片检测小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链类型,探求不同物种间相同组织细胞膜表面糖复合物在种群免疫和细胞功能中的作用。方法选择22种凝集素,利用生物芯片点样仪制备芯片,选用牛血清白蛋白(BSA)为阴性质控,马铃薯凝集素(STL)为阳性质控。分别用胶原酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ消化小鼠和兔的肾、脾、肝组织,制备细胞悬液,并加入吖啶橙荧光标记细胞。将细胞悬液分别滴加至凝集素芯片中,利用凝集素与糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测芯片中各凝集素位点的荧光信号强度,行常规HE染色后于荧光显微镜下观察各凝集素位点所捕获的细胞形态,并分析不同胶原酶消化对检测结果的影响。结果小鼠和兔相同组织的细胞膜表面糖链类型基本相同,仅个别位点略有不同。在GNA、LTL、HHL、NPL位点,兔脾细胞均为阴性,小鼠脾细胞均为阳性。在BPL、WFA位点,兔肾细胞均为阴性,小鼠肾细胞均为阳性;在MAL-I位点,兔肾细胞为阳性,小鼠肾细胞为阴性。MPL、WBA、LTL、SBA、BPL、WFA、MAL-I、AAL、BCL位点,兔肝细胞均为阳性,小鼠肝细胞均为阴性;在NPL位点,小鼠肝细胞为阳性,兔肝细胞为阴性。DSL、STL位点,小鼠和兔各组织细胞检测结果均为阳性;在EEL、DBA位点,小鼠和兔各组织细胞检测结果均为阴性。在GNA位点,兔脾组织经胶原酶Ⅱ消化后可见极少量细胞,经其他2种胶原酶消化后则未见捕获细胞。兔肾组织以及小鼠的脾和肾组织经3种胶原酶消化后,检测结果无明显差异。在BCL位点,兔肝组织经胶原酶IV消化后捕获细胞最多,其次为胶原酶Ⅱ,胶原酶Ⅰ最少。结论通过制备的凝集素芯片成功检测了小鼠和兔不同组织细胞膜表面的糖链特异性。小鼠和兔相同组织的细胞膜表面具有相同类型糖链,但不同组织之间细胞膜糖链类型也存在其特异性,这可能与组织分化及其功能密切相关。

关键词：细胞膜凝集素类动物实验

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