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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：郑倩倩刘彩红郭文东冯艳玲朱亚勤教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001 中国医科大学心血管研究所沈阳110001

肠三叶因子3(TrefoilFactor3,TFF3)是三叶因子家族的成员,主要分布于杯状细胞,并在上丘脑发现其表达.研究表明,TFF3除作为粘膜保护肽,对上皮组织起到损伤修复作用外,最近发现它具有抗凋亡活性;临床研究发现它可能作为新的炎症、免疫关... 详细信息

肠三叶因子3(TrefoilFactor3,TFF3)是三叶因子家族的成员,主要分布于杯状细胞,并在上丘脑发现其表达.研究表明,TFF3除作为粘膜保护肽,对上皮组织起到损伤修复作用外,最近发现它具有抗凋亡活性;临床研究发现它可能作为新的炎症、免疫关联疾病候选分子.病理状态下,TFF3常表现为上调表达,我们的研究也证实这一现象.本实验小组前期研究表明,不同于经典的TNFα激活NF-κB,TFF3瞬时激活NF-κB p65同源二聚体可能由Twist蛋白介导的负性调节作用,从丽抑制过度炎性应答发生.

关键词： TFF3 Twist p65 炎症应答上游分子

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hβ-arrestin2基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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现代肿瘤医学 2015年第9期23卷 1198-1200页

作者：刘彩红毛琪郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞病理生物学研究室细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院免疫教研室黑龙江大庆163319

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测... 详细信息

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测序公司检测正确后瞬时转染人胚肾细胞HEK293,Western blot检测融合蛋白表达。激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在HEK293细胞中的分布。结果:hβ-arrestin2编码序列被成功克隆至p EGFP-C1中,Western blot检测到融合蛋白表达,分子量约为77k Da,p EGFP-C1-β-arrestin2定位于HEK293细胞的细胞质中。结论:成功构建hβ-arrestin2基因真核表达载体,证实了融合蛋白定位在HEK293的细胞质中。

关键词： hβ-arrestin2基因蛋白质印记绿色荧光蛋白

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DNA损伤修复因子(ARAP1)参与调控雄激素受体AR介导的基因转录及其表观遗传学机制

DNA损伤修复因子(ARAP1)参与调控雄激素受体AR介导的基因转录及其...

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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：王春玉周婷婷孙洪邈邹仁龙孙士莹王胜利佟昌慈吴怡罗昊林琳高鹏焦娇赵越中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

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小细胞肺癌细胞诱发人脑微血管内皮细胞紧密连接的开放

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解剖科学进展 2009年第2期15卷 183-187,191页

作者：赵晓云李波曹立业方文刚朱莉陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院微生物和细胞生物学教研室沈阳110016

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌... 详细信息

目的小细胞肺癌易发生脑转移,但其机制尚不完全清楚,本文探讨小细胞肺癌细胞对人脑微血管内皮细胞单层细胞间紧密连接开放的作用。方法应用免疫荧光技术观察人脑微血管内皮细胞间紧密连接结构改变;应用Western blot技术分析小细胞肺癌细胞与微血管内皮细胞单层共培养时紧密连接蛋白occludin的可溶性片段和不可溶性片段在内皮细胞紧密连接处的分布情况;应用跨内皮迁移实验及辣根过氧化物酶渗漏实验分析小细胞肺癌细胞与内皮细胞单层共培养后其跨内皮细胞单层的迁移能力和内皮单层渗透性的改变;利用ROCK特异性抑制剂Y27632,分析Rho/ROCK信号通路是否参与小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结果小细胞肺癌细胞能够通过人脑微血管内皮细胞单层迁移,在0h到12h之间随培养时间的延长小细胞肺癌细胞的迁移率逐渐增加;共培养8h时人脑微血管内皮细胞紧密连接处紧密连接结构蛋白(ZO-1和occludin)表达减少,通透性明显增加;ROCK特异性抑制剂Y27632能够阻断小细胞肺癌细胞引起的内皮细胞间紧密连接处紧密连接结构蛋白ZO-1和occludin表达减少、内皮单层通透性的增加及小细胞肺癌细胞跨内皮单层迁移。结论小细胞肺癌细胞与人脑微血管内皮细胞单层共培养诱发人脑微血管内皮细胞间紧密连接的开放,利于小细胞肺癌细胞的跨内皮单层迁移。

关键词：小细胞肺癌细胞人脑微血管内皮细胞共培养紧密连接

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应用凝集素芯片对细胞膜表面糖链进行检测

应用凝集素芯片对细胞膜表面糖链进行检测

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2008年全国糖生物学学术会议

作者：何群张艳宋春阳赵雨杰中国医科大学生物芯片中心教育部“细胞生物学”重点实验室沈阳医学院细胞生物教研室

制备出一种含22种凝集素的凝集素芯片,利用凝集素与细胞膜表面糖链的特异亲和性对已经标记荧光的细胞进行自动捕获,对细胞膜表面糖链结构进行凝集素识别分析。芯片捕获的细胞可用激光扫描仪进行高通量检测,也可以进行常规染色在光镜下... 详细信息

制备出一种含22种凝集素的凝集素芯片,利用凝集素与细胞膜表面糖链的特异亲和性对已经标记荧光的细胞进行自动捕获,对细胞膜表面糖链结构进行凝集素识别分析。芯片捕获的细胞可用激光扫描仪进行高通量检测,也可以进行常规染色在光镜下观察。使用凝集素芯

关键词：凝集素芯片细胞膜

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铅对星形胶质细胞谷氨酸代谢的影响及其机制的研究

铅对星形胶质细胞谷氨酸代谢的影响及其机制的研究

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：林琳廖英俊中国医科大学基础医学院细胞生物学卫生部重点实验室染色质生物学研究室中国医科大学基础医学院生理学教研室

铅是具有很强神经毒性的重金属污染物。迄今为止,铅对学习记忆损害方面的研究主要以神经元作为研究对象,而以神经胶质细胞作为研究对象的相关研究却少有报道。星形胶质细胞(astrocyte,AS)是脑内数量最多、分布最广的一类细胞,它对神经... 详细信息

铅是具有很强神经毒性的重金属污染物。迄今为止,铅对学习记忆损害方面的研究主要以神经元作为研究对象,而以神经胶质细胞作为研究对象的相关研究却少有报道。星形胶质细胞(astrocyte,AS)是脑内数量最多、分布最广的一类细胞,它对神经元起支持、营养及促进神经再生与修复等作用。谷氨酸(glutamate,Glu)是主要的兴奋性神经递质。细胞外液中过量Glu的累积,将导致谷氨酸能受体的过度刺激,引起神经元的兴奋性毒性损伤。AS上表达两种高亲和力的谷氨酸转运体GLAST(Glutamate/Aspartate transporter)和GLT-1(Glutamate transporter-1),同时AS内具有谷氨酰胺合成酶(Glutamine Synthetase,GS)。因此,AS不仅能快速清除突触间隙的Glu,而且能对摄入的Glu进行代谢转化。本研究主要探讨铅暴露对AS谷氨酸代谢的影响及其可能机制。实验以原代培养的AS为研究对象,经细胞纯度鉴定后,进行铅暴露72 h。实验结果显示,随铅暴露浓度的增加细胞形态发生改变,且各铅暴露组的AS活力均显著降低。各铅暴露组AS内GS活力与对照组相比均明显下降;GLT-1和GS蛋白表达呈下降趋势,但GLAST蛋白表达无显著性差异;GLT-1和GS的m-RNA水平与蛋白表达趋势一致。各铅暴露组转运体功能与对照组相比均显著下降。实验结果提示铅对GLT-1蛋白表达的影响可能是导致AS对Glu转运能力下降的主要原因,铅对GLT-1和GS蛋白表达的影响可明显抑制突触间隙Glu的转运与代谢,导致Glu在突触间隙的蓄积。

关键词：铅星形胶质细胞谷氨酸转运体 GLT-1

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3D打印技术在医学领域中的应用

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解剖科学进展 2016年第3期22卷 351-354,358页

作者：于敏张曙光邵海波中国医科大学基础医学院分子细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110122 中国医科大学附属第一医院胸外科沈阳110001 中国医科大学附属第一医院介入科沈阳110001

3D打印技术是新型的快速打印技术,它结合了三维扫描、计算机辅助数字化成型等技术,实现高精度、高效率、低费用地打印立体结构。在医学领域,3D打印通过对骨骼、肌肉、血管、神经等解剖结构进行高仿真地精确打印,用于辅助解剖学、病理学... 详细信息

3D打印技术是新型的快速打印技术,它结合了三维扫描、计算机辅助数字化成型等技术,实现高精度、高效率、低费用地打印立体结构。在医学领域,3D打印通过对骨骼、肌肉、血管、神经等解剖结构进行高仿真地精确打印,用于辅助解剖学、病理学教学、临床实习生的手术模拟、医生术前讨论与手术方案制定,也被作为植入体用于患者缺损组织的修补。通过将活细胞与仿生材料相结合进行的3D生物打印,可用于药物筛选、药效评价,还可实现组织器官再造、器官移植等。

关键词：医学领域临床实习生三维扫描器官移植仿生材料手术模拟植入体病理学教学药物筛选药效评价

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hLMO3基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位

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解剖科学进展 2011年第4期17卷 347-350页

作者：顾卉佟宇鑫刘彤李妍李丹妮袁正伟中国医科大学附属盛京医院实验研究中心辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室细胞生物学教育部卫生部重点实验室辽宁沈阳110001 中国医科大学临床医学系辽宁沈阳110001

目的构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进... 详细信息

目的构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO3在HEK293细胞内的定位。结果 hLMO3基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为440bp;Western blot检测到融合蛋白在HEK293细胞表达,分子量约为42kDa,pEGFP-LMO3在人HEK293细胞中主要定位于细胞核内。结论成功构建了hLMO3基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO3蛋白在HEK293细胞中主要定位于细胞核内。

关键词： hLMO3基因质粒构建基因表达与定位人HEK293细胞

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细胞紧密连接的结构组成及其调控的研究进展

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解剖科学进展 2010年第1期16卷 71-74页

作者：马怡然尚德淑方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院卫生部细胞生物学重点实验室发育生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院输血科辽宁沈阳110001

紧密连接(tight junction)位于相邻细胞间隙的顶端侧面,对于维持表皮和内皮细胞的选择渗透性屏障功能是非常关键的。紧密连接有两个主要功能:渗透性调节功能、维持细胞极性。本文综述了最新研究的紧密连接的蛋白质组成、紧密连接组装的... 详细信息

紧密连接(tight junction)位于相邻细胞间隙的顶端侧面,对于维持表皮和内皮细胞的选择渗透性屏障功能是非常关键的。紧密连接有两个主要功能:渗透性调节功能、维持细胞极性。本文综述了最新研究的紧密连接的蛋白质组成、紧密连接组装的信号调节、组成蛋白间的相互作用调控机制以及在生命活动中意义,为寻找某些疾病的治疗方案提供一定的理论基础。

关键词：细胞紧密连接结构组成调控蛋白质组成信号调节细胞间隙屏障功能内皮细胞

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小分子化合物G-052抑制胃癌细胞侵袭及其分子机制

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解剖科学进展 2016年第3期22卷 279-281页

作者：张健刘奇王健由良浩李丹妮李丰中国医科大学基础医学院细胞生物教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122 沈阳药科大学制药工程学院沈阳110016 中国医科大学附属第一医院肿瘤内科沈阳110001

目的研究小分子化合物G-052对于人胃癌细胞增殖和侵袭的影响及可能分子机制。方法用MTT检测不同浓度小分子化合物G-052对胃癌细胞BGC823和MKN-45增殖能力的影响。分别用0、20、40、60μmol/L浓度的G-052处理BGC823和MKN-45两种胃癌细胞... 详细信息

目的研究小分子化合物G-052对于人胃癌细胞增殖和侵袭的影响及可能分子机制。方法用MTT检测不同浓度小分子化合物G-052对胃癌细胞BGC823和MKN-45增殖能力的影响。分别用0、20、40、60μmol/L浓度的G-052处理BGC823和MKN-45两种胃癌细胞,应用Transwell小室检测其对上述胃癌细胞侵袭能力的抑制作用,Western Blot检测化合物对金属基质蛋白酶2(MMP2)表达及丝切蛋白(Cofilin)磷酸化水平的影响。结果化合物G-052以剂量依赖的方式抑制BGC823和MKN-45细胞的侵袭能力,但对增殖能力无明显影响。Western Blot结果显示G-052下调胃癌细胞BGC823中MMP2的表达及Cofilin的磷酸化水平。结论 G-052抑制胃癌细胞BGC823、MKN-45的侵袭可能与下调MMP2的表达及Cofilin磷酸化水平相关。

关键词： G-052 胃癌侵袭 MMP2 Cofilin

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