检索结果-内蒙古大学图书馆

钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ质粒的构建和表达及其与Ca_(V)1.2通道结合的鉴定

中国医科大学学报 2025年第1期54卷 1-4,11页

作者：王红梅王祥卉张文竹何蕊廖天佐高青华郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110122 赤峰市医院药剂科内蒙古赤峰024000 中国医科大学继续教育学院综合办公室沈阳110001 中国医科大学生命科学学院发育细胞生物学教研室沈阳110122

目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)长片段的融合蛋白质粒,表达、提取、纯化,并鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞,摇床培养箱中培养12 h,添加异丙... 详细信息

目的构建钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)长片段的融合蛋白质粒,表达、提取、纯化,并鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合。方法将提取的pGEX-6p-1/CaMKⅡ长片段质粒转化到原核大肠杆菌BL21感受态细胞,摇床培养箱中培养12 h,添加异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,促进GST融合蛋白的表达。采用DTT联合超声破碎法,谷胱甘肽-琼脂糖凝胶4B(GS-4B)分离、纯化GST-CaMKⅡ长片段后,经过PreScission蛋白酶处理,切除GST标签,得到CaMKⅡ长片段蛋白。采用15%SDS-PAGE鉴定CaMKⅡ长片段蛋白的分子量和相对纯度;采用Bradford方法测定纯化后蛋白的浓度;采用pull-down结合Western blotting鉴定其与Ca_(V)1.2通道蛋白的结合能力。结果测序结果表明,CaMKⅡ长片段构建成功。通过DTT联合超声破碎法,得到了较高纯度和浓度的长片段CaMKⅡ蛋白,并能够与心肌Ca_(V)1.2钙通道末端CT1蛋白结合。结论本研究成功构建了CaMKⅡ长片段钙调蛋白激酶融合蛋白质粒,提取、纯化了能够与Ca_(V)1.2通道蛋白结合并具有生物活性的CaMKⅡ长片段蛋白,为深入研究CaMKⅡ蛋白的功能奠定了基础。

关键词：钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ 质粒构建分离纯化 pull-down

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川芎嗪开放外毛细胞钾通道的细胞内PKA机制

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中国药理学通报 2002年第6期18卷 711-712页

作者：崔桂英汤浩曹宇吴玉环中国医科大学生理学教研室沈阳110001

cAMPCa~(2+)K~+~[2]Ca~(2+)K~+(I_(K(Ca))K~+(I_k)K~+K~+K~+

关键词：川芎嗪 K^+通道外毛细胞膜片钳技术川芎

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三叉神经中脑核神经元膜的电学特性

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生理学报 1989年第6期41卷 543-554页

作者：郑谦东英穗井口敞惠西彰五郎中国医科大学生理教研室久留米大学医学部生理学教研室

用大鼠脑干脑片,给三叉神经中脑核79个神经元作了细胞内记录,测算了20个神经元膜的电学特性:静息电位-60.3±5.6mV;输入阻抗为10.5±5.4MΩ;时间常数1.3±0.5ms。电刺激可诱发动作电位,测算32个神经元的有关参数:阈电位-50... 详细信息

用大鼠脑干脑片,给三叉神经中脑核79个神经元作了细胞内记录,测算了20个神经元膜的电学特性:静息电位-60.3±5.6mV;输入阻抗为10.5±5.4MΩ;时间常数1.3±0.5ms。电刺激可诱发动作电位,测算32个神经元的有关参数:阈电位-50—-55mV;波幅69.5±6.1mV;超射11.9±3.6mV;波宽0.8±0.2ms。TTX(0.3μmol/L)或无钠使之消失。通以长时程矩形波电流可引起200—250Hz的2—15个重复放电,但在通电停止前终止,TEA或4-AP可延长放电。膜电位-60—-55mV时在动作电位之后可看到阈下电位波动,它不受TTX的影响,无钙时消失,TEA或4-AP使波幅增大。静息电位去极化可使45个神经元中的40个发生外向整流作用,并被TEA,4-AP或无钙抑制,超极化则发生内向整流作用,Cs或无钠抑制之。灌流液中加入各种钾通道阻断药时神经元的稳态I-V曲线发生相应变化,提示I_(DR),l_A,I_(K(Ca))及I_Q可能都与静息时的膜电导有关。

关键词：三叉神经中脑核神经元电学特性

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弓状核中阿片受体在细胞介素所致发热效应中的作用

引用

中国应用生理学杂志 1997年第1期13卷 57-59页

作者：赵书芬辛黎冯甲棣李亘松姜锡然张小玲聂志伟中国医科大学生理教研室

本研究旨在了解弓状核内的阿片受体在体温调节中的作用。研究使用细胞介素ＩＬ１β做致热源。以自动推进器向ＳＤ雄性大鼠弓状核微量注射１μ１ＩＬ１β。在给药前３０ｍｉｎ分别向弓状核微量注射通常阿片受体拮抗剂纳洛酮（Ｎａ... 详细信息

本研究旨在了解弓状核内的阿片受体在体温调节中的作用。研究使用细胞介素ＩＬ１β做致热源。以自动推进器向ＳＤ雄性大鼠弓状核微量注射１μ１ＩＬ１β。在给药前３０ｍｉｎ分别向弓状核微量注射通常阿片受体拮抗剂纳洛酮（Ｎａｌ）、阿片受体μ、δ和κ各自特异性拮抗剂ＣＴＡＰ、ＮＴＩ和ｎｏｒＢＮＩ做预处理，用生理盐水（Ｓａｌ）做对照。结果表明：ＩＬ１β所致的升体温效应能被Ｎａｌ和ＣＴＡＰ阻断，提示弓状核中的阿片受体（主要是μ受体）参与或介导了ＩＬ１β的致热效应；δ和κ受体特异性拮抗剂阻断ＩＬ１β所致的体温升高效应不明显。提示δ和κ阿片受体参与体温调节的可能性较小。对照ＡＲＨ和ＰＯＡＨ中阿片受体在ＩＬ１β所致发热中的作用可发现：二者作用极为相似，这一结果有力地支持了弓状核是体温调节中枢重要组成部分的观点。

关键词：下丘脑弓状核可片受体体温调节

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丹参注射液对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗NOS异构体表达的影响

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中国应用生理学杂志 2011年第2期27卷 246-249页

作者：王爱梅汤浩宝东艳于利辽宁医学院生理学教研室锦州121001 中国医科大学生理学教研室辽宁沈阳110001

目的:研究丹参注射液(SM)对庆大霉素(GM)耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮合酶(NOS)异构体表达的影响,探讨SM对GM耳毒性的防护机制。方法:40只豚鼠随机分成对照组、GM组、SM组和GM+SM组,应用SABC免疫组织化学方法及显微图像分析技术,观察NOS三型... 详细信息

目的:研究丹参注射液(SM)对庆大霉素(GM)耳中毒豚鼠耳蜗一氧化氮合酶(NOS)异构体表达的影响,探讨SM对GM耳毒性的防护机制。方法:40只豚鼠随机分成对照组、GM组、SM组和GM+SM组,应用SABC免疫组织化学方法及显微图像分析技术,观察NOS三型异构体在豚鼠耳蜗的表达;同时结合听脑干反应(ABR)测试,观察用药前后豚鼠听阈的变化。结果:GM+SM组豚鼠耳蜗诱导型NOS(iNOS/NOSⅡ)表达和ABR阈值均明显低于GM组(P<0.01);且iNOS表达变化与ABR阈值改变高度相关(|r|>0.7,P<0.01);而各组豚鼠耳蜗神经元型NOS(nNOS/NOSⅠ)和内皮型NOS(eNOS/NOSⅢ)表达均无显著性差异。结论:SM对GM耳中毒后豚鼠耳蜗nNOS和eNOS表达无影响,但可通过抑制GM所致iNOS高表达,以减少NO的过量生成,从而对GM的耳毒性损伤发挥防护作用。

关键词：丹参注射液庆大霉素一氧化氮合酶耳蜗

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葛根素、生石膏配伍对致热原作用下猫POAH温敏神经元放电的影响

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中国应用生理学杂志 1997年第1期13卷 71-74页

作者：范书铎孙丽华吴玉环赵红艳中国医科大学生理教研室

应用微电极细胞外记录技术，在３４只猫ＰＯＡＨ区记录了温敏神经元单位放电，研究中药葛根素和生石膏解热可能的中枢机制。致热原使１４例热敏神经元放电频率减少；使１１例冷敏神经元放电频率增加。注射等量葛根素和生石膏能反转上述... 详细信息

应用微电极细胞外记录技术，在３４只猫ＰＯＡＨ区记录了温敏神经元单位放电，研究中药葛根素和生石膏解热可能的中枢机制。致热原使１４例热敏神经元放电频率减少；使１１例冷敏神经元放电频率增加。注射等量葛根素和生石膏能反转上述作用。致热原及二药对５例温度不敏感神经元放电无影响。结果显示，葛根素和生石膏是影响致热原作用下ＰＯＡＨ区温敏神经元的电活动而解热的。二者配伍使用对冷敏神经元放电频率的影响比单独使用作用强，提示在中枢水平二者有协同作用。

关键词：中药葛根素生石膏 POAH 温度敏感神经元药理学

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缓激肽诱导胶质瘤细胞内cAMP反应元件结合蛋白磷酸化的实验研究

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中国药理学通报 2006年第12期22卷 1444-1447页

作者：王振华薛一雪刘丽波王萍中国医科大学生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学神经生物学教研室辽宁沈阳110001

目的观察缓激肽作用下,大鼠C6胶质瘤细胞中转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element bind-ing protein,CREB)磷酸化的动态变化,并探讨其可能的意义。方法应用免疫细胞化学和Western blot方法,观察1μmol.L-1缓激肽作用C6胶... 详细信息

目的观察缓激肽作用下,大鼠C6胶质瘤细胞中转录因子cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element bind-ing protein,CREB)磷酸化的动态变化,并探讨其可能的意义。方法应用免疫细胞化学和Western blot方法,观察1μmol.L-1缓激肽作用C6胶质瘤细胞在不同时相点(0,5,10,15,20,30min)CREB磷酸化的动态变化。结果1μmol.L-1缓激肽作用C6胶质瘤细胞的5到30min的各时相点均能检测到CREB的磷酸化(P<0.01),其中以15min的磷酸化最强(P<0.01)。结论缓激肽可促进大鼠C6胶质瘤细胞中转录因子CREB的磷酸化,此作用可能与其促进血肿瘤屏障的选择性开放有关。

关键词：神经胶质瘤缓激肽 cAMP反应元件结合蛋白

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人结直肠癌平滑肌组织毒蕈碱受体特性的变化

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中国药理学通报 2003年第2期19卷 225-226页

作者：郭政东王海波刘洪瑞韩雪松中国医科大学药理学教研室沈阳110001 中国医科大学病理生理学教研室沈阳110001

随着受体理论和研究技术的发展，人们开始从受体的变化去探寻疾病发生和发展的根源，并从受体水平诊治疾病。最近人们发现MACh-R与肿瘤之间关系密切。一方面，MACh-R过度活化可导致细胞增殖、恶性转化及肿瘤发生~[1]；另一方面，在肿瘤... 详细信息

随着受体理论和研究技术的发展，人们开始从受体的变化去探寻疾病发生和发展的根源，并从受体水平诊治疾病。最近人们发现MACh-R与肿瘤之间关系密切。一方面，MACh-R过度活化可导致细胞增殖、恶性转化及肿瘤发生~[1]；另一方面，在肿瘤状态下MACh-R的特性也发生变化。本文主要探讨肿瘤状态下MACh-R特性的变化。

关键词：人结直肠癌平滑肌组织毒蕈碱受体特性

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四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞跨膜内向Ca^(2+)电流的抑制作用(英文)

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中国药理学报 1996年第4期17卷 329-331页

作者：徐春孙明智李玉荣杨宝峰王丽娟李金鸣哈尔滨医科大学生理教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学药理教研室哈尔滨150086 中国医科大学药理教研室

目的:研究四氢巴马汀(THP)对豚鼠心室肌细胞膜Ca^(2+)通道的作用。方法:分离豚鼠心室肌细胞,利用膜片箝技术观察、记录心室肌细胞膜跨膜内向钙电流(I_(Ca))。结果:THP灌流5min后明显抑制豚鼠心室肌细胞内向I_(Ca),其作用呈现剂量-效应关... 详细信息

目的:研究四氢巴马汀(THP)对豚鼠心室肌细胞膜Ca^(2+)通道的作用。方法:分离豚鼠心室肌细胞,利用膜片箝技术观察、记录心室肌细胞膜跨膜内向钙电流(I_(Ca))。结果:THP灌流5min后明显抑制豚鼠心室肌细胞内向I_(Ca),其作用呈现剂量-效应关系,并具有频率依赖性。0.1,1,10μmol·L^(-1)的THP使I_(ca)从1.15±0.22,0.91±0.18,1.60±0.42nA(control,n=5)分别降低到0.90±0.21(P<0.01),0.56±0.21(P<0.01),0.83±0.21(P<0.05)nA,抑制率分别为22％,38％和48％,THP的作用易于洗脱。峰值电压为0mV,此时THP作用最明显,THP对较高频率刺激产生的电流抑制作用较强,2Hz时的抑制率高于0.1Hz时的抑制率(P<0.01)。结论:THP具有Ca^(2+)通道阻滞作用。

关键词：四氢巴马汀心肌钙通道膜片箝技术细胞培养

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人皮肤成纤维细胞在紫外线B照射后的TGF-β和HSP70表达

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中国应用生理学杂志 2002年第2期18卷 166-168页

作者：曹宇汤浩赵红艳张番杨宇中国医科大学生理教研室辽宁沈阳110001

目的和方法 :采用人体皮肤成纤维细胞 ,观察了紫外线照射后细胞TGF β表达与HSP70表达水平的相关性。结果 :①经不同剂量的紫外线B照射后 ,TGF βmRNA表达与HSP70表达水平呈正相关 (r =0 .90 6 ) ;②应用抗TGF βⅡ型受体抗体后 ,在紫外... 详细信息

目的和方法 :采用人体皮肤成纤维细胞 ,观察了紫外线照射后细胞TGF β表达与HSP70表达水平的相关性。结果 :①经不同剂量的紫外线B照射后 ,TGF βmRNA表达与HSP70表达水平呈正相关 (r =0 .90 6 ) ;②应用抗TGF βⅡ型受体抗体后 ,在紫外线B照射后细胞培养上清液中的TGF β含量与细胞HSP70表达水平呈负相关 (r =- 0 .995 )。结论 :在紫外线B照射诱导人皮肤成纤维细胞表达HSP70的反应过程中TGF

关键词：人皮肤成纤维细胞紫外线B照射 TGF-β HSP70 表达转化生长因子-β 热休克蛋白70

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