检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞与分子免疫学杂志 2011年第5期27卷 568-570页

作者：徐小燕夏蒲邢亚楠张东晗高野康雄郑华川中国医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理学与病理生理学研究所辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院肿瘤外科辽宁沈阳110001 大连医科大学口腔医学院辽宁大连116044 日本神奈川县癌中心临床研究所日本241-0815

目的:研究胃癌患者血清和胃癌细胞培养液上清中分泌型REIC含量及重组REIC对胃癌细胞增殖的影响。方法:ELISA检测血清和细胞上清中的REIC表达;WST-8法检测胃癌细胞的增殖。结果:REIC在胃癌患者中的分泌水平比正常健康人明显降低(P<0.0... 详细信息

目的:研究胃癌患者血清和胃癌细胞培养液上清中分泌型REIC含量及重组REIC对胃癌细胞增殖的影响。方法:ELISA检测血清和细胞上清中的REIC表达;WST-8法检测胃癌细胞的增殖。结果:REIC在胃癌患者中的分泌水平比正常健康人明显降低(P<0.05),并且与肿块大小呈负相关(P<0.05);胃癌细胞系培养液上清中的REIC表达低于正常的胃黏膜细胞(P<0.05);胃癌AGS细胞系转染REIC后,细胞培养液上清中的REIC浓度升高(P<0.05);加入外源性融合的REIC可以抑制胃癌细胞AGS和BGC-823的增殖(P<0.05)。结论:分泌型的REIC在胃癌细胞中表达降低,重组REIC蛋白可抑制胃癌细胞的增殖,REIC蛋白可以作为胃癌早诊、生物学和基因治疗的靶点。

关键词： REIC 胃癌 ELISA 血清

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植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响与补充外源性17β-雌二醇的比较(英文)

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中国临床康复 2005年第27期9卷 195-197页

作者：王雯朱广瑾首都医科大学病理生理学教研室北京市100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京市100005

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用... 详细信息

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用进行比较分析。设计:观察对比实验。单位:首都医科大学病理生理学教研室和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系。材料:实验于2003-07/09在首都医科大学实验动物科学部完成。选择36只12周龄健康雌性Wistar大鼠,体质量(250±10)g,清洁级,随机分为4组,假手术对照组、去卵巢组、去卵巢+17β-雌二醇组及去卵巢+α-玉米赤霉醇组各9只。方法:假手术对照组开腹而不摘除卵巢。去卵巢组在无菌条件下摘除双侧卵巢复制去卵巢动物模型。去卵巢+17β-雌二醇组和去卵巢+α-玉米赤霉醇组分别在去卵巢14d后肌注17β-雌二醇(1mg/kg)和α-玉米赤霉醇(1mg/kg),3d注射1次,共35d。实验结束后大鼠经颈总动脉采血,分离血浆备用。用凝固法测定血浆凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。用全自动生化分析仪测定血浆纤维蛋白原水平。用酶联免疫吸附法测定血浆组织因子水平。组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活剂抑制物活性测定均采用发色底物法。同时分离子宫,计算子宫质量与体质量的比值。主要观察指标:①血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、血浆纤维蛋白原水平、血浆组织因子水平、组织型纤溶酶原激活剂活性及纤溶酶原激活剂抑制物活性。②子宫质量/体质量的比值。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①凝血酶原时间变化:去卵巢组显著短于假手术对照组(P<0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后长于去卵巢组(P<0.05～0.01)。②纤维蛋白原和组织因子水平变化:去卵巢组显著高于假手术对照组(P<0.05～0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后低于去卵巢组(P<0.05～0.01)。③组织型纤溶酶原激活剂活性变化:去卵巢组显著低于假手术对照组犤(0.33±0.33)μkat/L,(4.00±1.50)μkat/L,(q=9.43,P<0.01)犦。补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后犤(1.83±0.67)μkat/L,(1.17±0.83)μkat/L犦显著高于去卵巢组(q=13.50,P<0.01;q=5.00,P<0.05)。④纤溶酶原激活剂抑制物活性变化:去卵巢组显著高于假手术对照组犤(2.33±0.67)μkat/L,(1.17±0.33)μkat/L,(q=10.5,P<0.01)犦。⑤子宫质量/体质量比值:去卵巢+α-玉米赤霉醇组明显低于去卵巢+17β-雌二醇组犤0.66,1.96,(q=14.67,P<0.01)犦。结论:补充外源性17β-雌二醇或α-玉米赤霉醇后,均可使去卵巢大鼠重新建立起凝血-纤溶的动态平衡,表明α-玉米赤霉醇具有同17β-雌二醇相似的心血管保护作用,且其致子宫增生的副作用明显小于17β-雌二醇,是一种有一定应用前景的雌激素替代药物。

关键词：卵巢切除术雌二醇凝血酶原纤维蛋白溶酶原

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植物雌激素α-玉米赤霉醇对HUVEC组织因子基因表达的转录调控作用

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 539-542页

作者：王雯刘伟祖淑玉朱广瑾张立克首都医科大学病理生理学教研室北京100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4... 详细信息

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4个含人TF基因5′上游不同长度序列的荧光素酶报告基因质粒,用脂质体转染法分别转入以下6组细胞:①正常对照组;②10-7molLE2刺激组;③10-7molLZAL刺激组;④10-6molLAngⅡ刺激组;⑤10-7molLE2+10-6molLAngⅡ刺激组;⑥10-7molLZAL+10-6molLAngⅡ刺激组;测定细胞裂解液中荧光素酶比活性(relativeluciferaseactivity,RLA)的变化。结果转染pGL3TF171+71的各组细胞RLA均较低,不同刺激组之间无显著差异;AngⅡ可使质粒pGL3TF593+71,pGL3TF316+71,pGL3TF236+71荧光素酶表达大量增加,E2、ZAL均可不同程度地抑制AngⅡ的上述效应,2者间无显著差异。结论含有1个NFκB位点和2个AP1位点的-236bp～-171bp区域在E2或ZAL影响TF基因转录中有重要作用。

关键词： α-玉米赤霉醇植物雌激素基因表达 HUVEC 调控作用血管内皮细胞组织因子 estradiol mol/L 人脐静脉内皮细胞 activity 转录调控机制报告基因质粒基因重组技术脂质体转染法荧光素酶表达抑制AngⅡ 正常对照组细胞裂解液

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PTSD样大鼠中缝背核神经元细胞凋亡及其TMP活性表达变化的研究

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中国医科大学学报 2011年第11期40卷 983-985,1000页

作者：刘冬娟肖冰王恩华韩芳石玉秀中国医科大学基础医学院电子显微学研究室沈阳110001 中国医科大学病理学与病理生理学研究所沈阳110001 中国医科大学基础医学院组织胚胎学教研室沈阳110001

目的研究创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠中缝背核神经元细胞凋亡及三偏磷酸酶(TMP)活性的表达变化。方法采用SPS刺激方法,建立PTSD样大鼠SPS模型,随机分为SPS刺激后1 d、7 d、14 d和正常对照组,应用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术、透... 详细信息

目的研究创伤后应激障碍(PTSD)样大鼠中缝背核神经元细胞凋亡及三偏磷酸酶(TMP)活性的表达变化。方法采用SPS刺激方法,建立PTSD样大鼠SPS模型,随机分为SPS刺激后1 d、7 d、14 d和正常对照组,应用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术、透射电镜和酶组化方法,分别对各组中缝背核神经元细胞凋亡及其TMP活性变化的观察和定量检测。结果 SPS刺激后1 d、7 d、14 d中缝背核神经元出现了细胞凋亡的特征性形态学改变、其凋亡率明显增加、TMP活性表达明显比正常对照组增强,并于7 d达到高峰。结论 PTSD样大鼠中缝背核神经元细胞出现凋亡,凋亡率增加的同时TMP活性增强,提示TMP参与了中缝背核神经元细胞的凋亡产物的降解与处理过程,脑桥体积缩小可能与中缝背核神经元细胞凋亡有关。

关键词： PTSD 中缝背核神经元细胞凋亡 TMP

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AP-1在血管内皮细胞PAI-1表达中的作用

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中国医学科学院学报 2003年第3期25卷 307-311页

作者：李晓冬祖淑玉王雯朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

目的研究核转录因子激活蛋白-1(activatorprotein-1,AP-1)在肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF-α)、弱氧化修饰低密度脂蛋白(minimalmodifiedlowdensitylipoprotein,mmLDL)诱导血管内皮细胞PAI-1基因表达中的转录调控机制。方法进行人脐静脉内皮细胞(humanvascularendothelialcells,HUVECs)的培养和鉴定。采用基因重组技术,构建4个含人PAI-1基因不同长度5'上游序列的荧光素酶报告基因质粒,并结合瞬时转染分析实验,初步确定PAI-1基因上游具有调控作用的是位于-823到-553之间的AP-1元件。为进一步确证AP-1元件的调控作用,采用PCR法对该元件进行定点突变。结果TNF-α能明显诱导构建质粒pGL3-PAI-1-823/+90荧光素酶的表达,但对质粒pGL3-PAI-1-823/+90的3个突变体诱导作用明显降低;mmLDL也能明显诱导质粒pGL3-PAI-1-823/+90荧光素酶表达,但对质粒pGL3-PAI-1-823/+90的3个突变体的诱导作用不明显。结论在TNF-α、mmLDL作用下,内皮细胞转录表达PAI-1基因过程中,3个AP-1元件起着重要的作用。

关键词：纤溶酶原激活物抑制剂内皮细胞激活蛋白-1元件

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斯钙素的研究进展

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生理科学进展 2008年第3期39卷 225-228页

作者：陈维娜朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

斯钙素(stanniocalcin,STC)是一种糖蛋白激素,最早在硬骨鱼中发现,起着调节钙/磷平衡的作用。近年来在人和其它哺乳动物中发现也存在STC,先后分别命名为STC1和STC2。STC1基因可以产生两种形式的STC:一个是分子量为50kD的多肽,被称作STC... 详细信息

斯钙素(stanniocalcin,STC)是一种糖蛋白激素,最早在硬骨鱼中发现,起着调节钙/磷平衡的作用。近年来在人和其它哺乳动物中发现也存在STC,先后分别命名为STC1和STC2。STC1基因可以产生两种形式的STC:一个是分子量为50kD的多肽,被称作STC50;另一种是一组分子量较大的不同形式的STC,被统称为big STC。STC1和STC2均可广泛表达于各种组织。STC成为一种新的肿瘤标志物,并且在心血管疾病、炎症细胞迁移、胚泡着床和子宫的蜕膜化等多方面都起重要作用。

关键词：斯钙素肿瘤缺氧预处理胚泡着床线粒体

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碱性螺旋-环-螺旋转录因子DEC2在乳腺癌细胞系MCF-7中对凋亡的调控作用

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解剖科学进展 2013年第2期19卷 133-137,141页

作者：刘洋曹红一林旭勇于涓瀚苗原王恩华中国医科大学病理学教研室病理学与病理生理学研究所辽宁沈阳110001

目的探讨DEC2(Differentiated embryonic chondrocyte express gene2,又称BHLHE41或Sharp1)在乳腺癌细胞系MCF-7中对凋亡的调控作用,及其在他莫昔芬(Tamoxifen)药物抵抗中的意义。方法应用siRNA下调内源性DEC2后,通过TUNEL assay和Hoechst33258染色,观察肿瘤细胞的凋亡有无明显改变,并通过Real-time PCR和Western blot检测凋亡相关因子(Fas,caspase-8,ADP核糖聚合酶(PARP)和(Bax)在mRNA和蛋白水平的改变。应用Tamoxifen处理MCF-7,寻找诱导凋亡的合适处理浓度,并观察DEC2的表达变化。联合应用Tamoxifen与DEC2siRNA处理MCF-7,通过Western blot检测凋亡相关因子的表达变化。结果通过siRNA下调内源性DEC2后,凋亡相关因子(Fas和Bax)以及caspase-8和PARP的裂解产物均显著上调,并促进肿瘤细胞的凋亡。Tamoxifen可以上调DEC2的表达,联合应用Tamoxifen与DEC2siRNA处理与单一使用DEC2siRNA处理MCF-7相比,PARP和caspase-8的裂解产物明显上调,同时明显促进凋亡。相反,联合应用Tamoxifen与DEC2过表达质粒处理MCF-7后,PARP和caspase-8的裂解产物明显下调,同时明显抑制凋亡。结论 DEC2具有抑制乳腺癌细胞凋亡的作用,并能抑制由Tamoxifen诱导的乳腺癌细胞MCF-7的凋亡。

关键词： DEC2 凋亡他莫昔芬乳腺癌MCF-7

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Claudin-1在TNF-α诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡中的调控作用

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解剖科学进展 2013年第3期19卷 275-281,289页

作者：刘洋唐娜林旭勇于涓瀚苗原王恩华中国医科大学病理学教研室病理学与病理生理学研究所辽宁沈阳110001

目的旨在探讨claudin-1在TNF-α诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡中的调控作用。方法应用梯度浓度的TNF-α处理MCF-7,用TUNELassay检测肿瘤细胞凋亡,通过Westernblot检测凋亡相关指标ADP核糖聚合酶(PARP)和caspase-8裂解产物的变化以寻找诱导... 详细信息

目的旨在探讨claudin-1在TNF-α诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡中的调控作用。方法应用梯度浓度的TNF-α处理MCF-7,用TUNELassay检测肿瘤细胞凋亡,通过Westernblot检测凋亡相关指标ADP核糖聚合酶(PARP)和caspase-8裂解产物的变化以寻找诱导凋亡的合适处理浓度,同时检测claudin-1,-4,-7的表达变化。在对照组和TNF-α处理组中分别敲除claudin-1,通过TUNELassay检测敲除claudin-1对凋亡的影响,并通过Westernblot检测凋亡相关因子的表达变化,同时应用免疫荧光,观察TNF-α及敲除claudin-1处理后,对Wnt信号通路相关蛋白β-catenin和E-cadherin定位的影响。通过核浆分离实验,检测胞核及胞浆中β-catenin和E-cadherin的表达情况,同时检测β-catenin下游基因cyclinD1的表达变化。结果 TNF-α在诱导凋亡的同时,可以上调claudin-1的表达,而对claudin-4,claudin-7的表达无影响。在对照组和TNF-α处理组中分别敲除claudin-1后,均导致凋亡增加,并且caspase-8及PARP裂解产物的数目也明显增多。另外,TNF-α处理后,可以激活Wnt信号通路,导致β-catenin的胞核表达。而敲除claudin-1可以稳定β-catenin的膜定位,抑制由TNF-α激活的Wnt通路,下调cyclinD1,诱发凋亡。结论 claudin-1在TNF-α诱导的乳腺癌的凋亡中起抑制作用。

关键词： claudin-1 E-cadherin β-catenin 凋亡 MCF-7 乳腺癌

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REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中的作用

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中国生物化学与分子生物学报 2011年第9期27卷 808-811页

作者：徐小燕夏蒲杨雪聂小毳郑华川中国医科大学基础医学院病理生理学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院病理与病理生理研究所沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室沈阳110001

REIC基因在永生化的细胞系和部分肿瘤细胞系中发现并且表达下调,在许多人的肿瘤组织中表达也减少.目前研究认为,REIC/Dkk-3表达下调可能与启动子的甲基化有关.异常REIC/Dkk-3表达所致细胞表型异常在恶性肿瘤发生和演进过程中发挥重要作... 详细信息

REIC基因在永生化的细胞系和部分肿瘤细胞系中发现并且表达下调,在许多人的肿瘤组织中表达也减少.目前研究认为,REIC/Dkk-3表达下调可能与启动子的甲基化有关.异常REIC/Dkk-3表达所致细胞表型异常在恶性肿瘤发生和演进过程中发挥重要作用.细胞浆型和分泌型REIC与靶蛋白作用后启动细胞信号传导,但是REIC/Dkk-3的生物学功能尚未深入阐述.对REIC/Dkk-3的研究在理论上可以大大推动肿瘤病因学的发展,为肿瘤的诊断和治疗提供一个新的分子靶点,对提高肿瘤患者生存率和生存质量具有很大的促进作用.如果能研发REIC/Dkk-3抗肿瘤重组多肽及增强REIC/Dkk-3作用的化疗药物,也将为肿瘤患者治疗开辟新的途径和思路.本文就REIC/Dkk-3蛋白在肿瘤发生发展中作用进行综述.

关键词： REIC/Dkk-3蛋白肿瘤甲基化分子靶点

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色谱保留时间在蛋白质组研究中的应用

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色谱 2010年第2期28卷 128-134页

作者：邵晨高友鹤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理和病理生理学系北京100005

液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)技术是蛋白质组学研究中的常见方法。保留时间作为独立于质谱信息的参数已经被用于蛋白质的鉴定和定量工作中。在多肽鉴定领域,多肽的色谱保留时间预测与常规的二级串联质谱数据库搜索算法结合可以提... 详细信息

液相色谱与串联质谱联用(LC-MS/MS)技术是蛋白质组学研究中的常见方法。保留时间作为独立于质谱信息的参数已经被用于蛋白质的鉴定和定量工作中。在多肽鉴定领域,多肽的色谱保留时间预测与常规的二级串联质谱数据库搜索算法结合可以提高鉴定的可信度。鉴定的灵敏度也可以通过匹配多次LC-MS实验中具有相同精确质量数和保留时间的峰而提高。另一方面,由于色谱条件的微小改变即会引起保留时间的变化,因此对多次实验结果进行保留时间比对是进行非标记定量的不可或缺的步骤。另外,联合保留时间偏移和质量数信息还可以进行蛋白质翻译后修饰(post-translational modification,PTM)的鉴定。

关键词：液相色谱-串联质谱保留时间预测保留时间比对多肽鉴定非标记定量翻译后修饰蛋白质组学

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