检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2012年第5期18卷 427-430,434页

作者：刘琦刘杏高锦兰胡西华罗阳中国医科大学医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室暨教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的构建人DOC-1R基因重组逆转录病毒表达载体,实现该基因在体外培养细胞中的大量表达,从而研究表达蛋白的功能。方法通过重组技术将含有FLAG标签序列的DOC-1R cDNA编码区全长克隆至逆转录病毒载体pLXSN,菌落PCR鉴定、限制性内切酶... 详细信息

目的构建人DOC-1R基因重组逆转录病毒表达载体,实现该基因在体外培养细胞中的大量表达,从而研究表达蛋白的功能。方法通过重组技术将含有FLAG标签序列的DOC-1R cDNA编码区全长克隆至逆转录病毒载体pLXSN,菌落PCR鉴定、限制性内切酶双酶切及测序验证重组载体的构建。将重组载体转染至GP-293细胞进行病毒包装并以所包装的病毒感染HeLa细胞,通过Western blot及间接免疫荧光染色检测重组DOC-1R蛋白的表达及细胞内定位。结果测序结果表明重组载体中插入的重组片段序列及开放阅读框架正确,逆转录病毒表达载体pLXSN-FLAG-DOC-1R成功构建。Western blot及间接免疫荧光染色结果证实,逆转录病毒介导的重组DOC-1R蛋白在HeLa细胞中高效表达,表达效率明显高于真核表达载体介导的重组蛋白表达。结论 DOC-1R基因逆转录病毒表达载体成功构建,重组蛋白在体外培养细胞正确高效表达。

关键词： DOC-1R 逆转录病毒表达载体外源表达转染

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PI3K和ROCK信号通路在MSC穿过人脑微血管内皮细胞单层中发挥作用

PI3K和ROCK信号通路在MSC穿过人脑微血管内皮细胞单层中发挥作用

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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：尚德淑蔺美娜孙伟李波许欣方文刚赵伟东陈誉华中国医科大学细胞生物学系发育细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳市110001

骨髓间充质干细胞(MSC)不仅能分化成中胚层来源的细胞,而且还能跨胚层分化为内胚层来源的肝细胞、肺泡上皮细胞和外胚层的神经细胞.MSC代表了一种非常有前景的细胞治疗手段.在糖尿病、肝损伤、心肌梗死等疾病动物模型中,以MSC介导的细... 详细信息

骨髓间充质干细胞(MSC)不仅能分化成中胚层来源的细胞,而且还能跨胚层分化为内胚层来源的肝细胞、肺泡上皮细胞和外胚层的神经细胞.MSC代表了一种非常有前景的细胞治疗手段.在糖尿病、肝损伤、心肌梗死等疾病动物模型中,以MSC介导的细胞治疗取得了显著的效果.将MSC通过外科手段直接注射到某些神经退行性疾病动物模型的脑室中,发现MSC可以分化成神经胶质细胞和神经元,并且能够分泌一些营养因子以缓解疾病症状,可是这种方法容易引起脑水肿,具有较大危险性,静脉移植则相对比较安全,但由于血脑屏障的存在,移植效率比较低.因此了解MSC穿过血脑屏障的机制对于通过静脉移植治疗神经退行性疾病具有重要意义.

关键词： MSC PI3K ROCK 人脑微血管内皮细胞

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p57^(kip2)蛋白在乳腺癌组织和细胞系中的表达和定位

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现代肿瘤医学 2014年第3期22卷 506-509页

作者：李彦姝刘芙蓉张红艳李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:研究p57kip2在人乳腺癌组织和细胞系中的表达和定位。方法:免疫印迹法检测人乳腺肿瘤细胞系中p57kip2的表达。人乳腺肿瘤组织进行免疫组化染色,检测p57kip2在组织中的表达。激光共聚焦扫描显微镜检测内源p57kip2在MCF-7细胞中的定... 详细信息

目的:研究p57kip2在人乳腺癌组织和细胞系中的表达和定位。方法:免疫印迹法检测人乳腺肿瘤细胞系中p57kip2的表达。人乳腺肿瘤组织进行免疫组化染色,检测p57kip2在组织中的表达。激光共聚焦扫描显微镜检测内源p57kip2在MCF-7细胞中的定位。结果:p57kip2在乳腺癌细胞系内表达,免疫组化染色分析和激光共聚焦扫描显微镜证实p57kip2主要定位于细胞核内。结论:p57kip2在乳腺癌细胞内表达,p57kip2主要定位于乳腺癌组织细胞核内,可能是参与肿瘤细胞基因转录调控和蛋白表达的重要蛋白之一。

关键词： p57kip2 免疫组织化学激光共聚焦扫描显微镜定位

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CUEDC2通过上皮-间质转化促进人乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移

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现代肿瘤医学 2016年第11期24卷 1681-1683页

作者：李彦姝汤丽娜张红艳高云凌李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白对人乳腺肿瘤细胞侵袭转移的作用机制。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测上皮-间质转化... 详细信息

目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白对人乳腺肿瘤细胞侵袭转移的作用机制。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测上皮-间质转化(EMT)标志物上皮-钙黏蛋白(E-cadherin)和转录因子SLUG的表达。结果:过表达CUEDC2蛋白能够下调E-cadherin蛋白和基因的表达,而上调转录因子SLUG基因和蛋白的表达。结论:CUEDC2可能参与调节乳腺肿瘤细胞发生上皮-间质转化,促进乳腺肿瘤侵袭转移的发生,CUEDC2可能是人乳腺肿瘤侵袭转移的治疗靶点。

关键词：乳腺肿瘤 CUE结构域2 上皮-间质转化侵袭转移

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野生型和突变型GDF5蛋白表达及亚细胞定位的研究

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解剖科学进展 2012年第6期18卷 530-533页

作者：刘杏王述森刘琦高锦兰罗阳中国医科大学医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室暨教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的研究人生长分化因子5基因(GDF5)c.1118T>G(p.L373R)突变对GDF5蛋白在HEK-293细胞系表达及其亚细胞定位的影响。方法构建pDsRed1-N1-GDF5-WT和pDsRed1-N1-GDF5-L373R载体,分别转染HEK-293细胞,细胞培养72h后通过荧光显微镜观察比较野生型和突变型GDF5蛋白荧光分布情况。结果 GDF5蛋白在HEK-293细胞中成功表达,在荧光显微镜下观察到转染野生型和突变型GDF5的细胞胞浆均匀发出红色荧光,而空载体组的红色荧光则弥散于全细胞,荧光强度均匀一致。结论野生型和突变型GDF5蛋白均定位于HEK-293细胞质。

关键词：生长分化因子5 基因突变蛋白表达 HEK-293细胞系

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PAK2真核表达载体的构建及在胃癌细胞内的表达与定位

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解剖学研究 2011年第3期33卷 202-204页

作者：刘芙蓉李晓东李家滨李丰中国医科大学细胞生物教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的构建PAK2真核表达载体及证实在胃癌细胞内的表达与定位。方法提取HeLa细胞的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增PAK2全长编码基因,克隆至pcDNA3.1A表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞SGC-7901中,Western blot检测蛋白表达,... 详细信息

目的构建PAK2真核表达载体及证实在胃癌细胞内的表达与定位。方法提取HeLa细胞的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增PAK2全长编码基因,克隆至pcDNA3.1A表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞SGC-7901中,Western blot检测蛋白表达,免疫荧光检测PAK2在胃癌细胞内的定位。结果 hPAK2全长基因序列克隆到了真核表达载体pcDNA3.1A中,酶切鉴定片段为2 000 bp。Western blot检测到重组质粒蛋白表达,分子量约为75 kDa。免疫荧光检测pcDNA3.1A-PAK2在胃癌细胞内的定位以细胞浆为主,细胞核内少许。结论成功构建hPAK2全长基因真核表达载体,重组质粒主要定位于胃癌细胞浆。

关键词： PAK2 真核表达免疫印记免疫荧光胃癌

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Aβ诱导脑微血管内皮细胞高表达MHC-I分子促进T淋巴细胞跨内皮迁移

Aβ诱导脑微血管内皮细胞高表达MHC-I分子促进T淋巴细胞跨内皮迁移

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中国细胞生物学学会2013年全国学术大会

作者：杨一鸣陈誉华中国医科大学细胞生物学系发育细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳市110001

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一种转移性大肠癌特异性核酸适配子的分析鉴定及应用

一种转移性大肠癌特异性核酸适配子的分析鉴定及应用

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2015中国转化医学大会暨中国转化医学联盟成立大会

作者：李婉明王蒴周琳琳方瑾医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001

核酸适配子(aptamer)是利用指数富集的系统进化技术(the systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从一个库容量达1018的随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶细胞高亲和力和高特异性结合的寡核苷酸序列.W3...

核酸适配子(aptamer)是利用指数富集的系统进化技术(the systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX)从一个库容量达1018的随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶细胞高亲和力和高特异性结合的寡核苷酸序列.W3是本课题组在前期工作中以转移性大肠癌细胞系LoVo为靶细胞,通过消减Cell-SELEX技术筛选得到的能与转移性肿瘤细胞特异性结合的核酸适配子.为了进一步明确W3所结合的靶标是否具有转移性肿瘤标志物特性并探讨W3作为标志物检测探针的可能性,本研究首先采用流式分选技术对靶细胞LoVo进行基于W3结合特异性的分选,收集得到W3high和W3low细胞亚群.体外生物学行为分析显示W3high的体外增殖能力和单克隆形成能力与W3low相似,但是迁移和侵袭能力显著高于W3low,表明W3结合的靶分子与肿瘤的侵袭转移相关.裸鼠成瘤实验显示W3high的成瘤能力低于W3low,但肝转移能力明显高于W3low,这结果进一步说明W3结合的靶分子为转移性大肠癌的特异性生物标志物.为了探讨W3能否作为临床转移性大肠癌的靶向成像分子探针,我们将W3连接量子点构建量子点探针(W3-QD),对89例的大肠癌组织病理标本和15例的癌旁组织进行成像检测,结果发现W3-QD具有良好的肿瘤特异性,且荧光信号的强弱与淋巴结转移与否高度相关,表明W3可以作为转移性肿瘤的一个特异性分子探针,能够为肿瘤早期发生转移提供一个有效的诊断工具.同时,基于W3对转移性肿瘤细胞的高特异结合活性,本研究尝试将其用于含量稀少但具有良好诊断价值的循环肿瘤细胞的捕获,即利用W3建立基于微流控芯片的细胞捕获系统,成功实现了对混合细胞及人全血中肿瘤细胞的靶向捕获和富集,可望为大肠癌患者血样中的循环肿瘤细胞的检测提供有效简便的新方法.

关键词：

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构建具有学科特点的细胞生物学PBL教学模式

构建具有学科特点的细胞生物学PBL教学模式

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：方瑾李丰张惠丹于敏王桂玲李想李晓东刘彤李妍邵阳光中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

以问题为基础学习(problem-based learning,PBL)的教学方法是目前发达国家普遍采用并被广泛认同的一种医学课程模式,它是将问题作为基本因素,将课程的内容相互联系起来,使学生在不断的提出问题和解决问题中完成教学内容的学习,并实现教... 详细信息

以问题为基础学习(problem-based learning,PBL)的教学方法是目前发达国家普遍采用并被广泛认同的一种医学课程模式,它是将问题作为基本因素,将课程的内容相互联系起来,使学生在不断的提出问题和解决问题中完成教学内容的学习,并实现教学思想和教学目标,这种方法在培养学生分析问题和解决问题的能力,培养学生自主学习能力,并养成终生学习习惯方面具有极大的促进作用。近20年,该方法得到了迅速的发展,并被广泛采用,已逐步形成了较为规范的基本教学过程并成为医学教学模式改革的大趋势。

关键词： PBL 细胞生物学教学模式

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核酸适配子-量子点探针对转移性大肠癌细胞的靶向成像及其靶标的定量分析

核酸适配子-量子点探针对转移性大肠癌细胞的靶向成像及其靶标的...

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2016中国转化医学大会

作者：李婉明方瑾医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001

核酸适配子(aptamer)是利用指数富集的系统进化技术(SELEX)从一个库容量达1018的随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶细胞高亲和力和高特异性结合的寡核苷酸序列.W3是前期利用Cell-SELEX技术筛选到的能够特异性识别转移性大肠癌细胞系...

核酸适配子(aptamer)是利用指数富集的系统进化技术(SELEX)从一个库容量达1018的随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶细胞高亲和力和高特异性结合的寡核苷酸序列.W3是前期利用Cell-SELEX技术筛选到的能够特异性识别转移性大肠癌细胞系LoVo的核酸适配子，与量子点QD605偶联制备分子探针(W3-QD).W3-QD能够特异性识别混合细胞中的LoVo细胞，并能够对不同类型的细胞进行定量成像.

关键词：

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