检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2025年

作者：程雅洁周雪彤王瑞方瑾中国医科大学生命科学学院医学细胞生物学教育部重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室细胞生物学教研室青岛大学附属妇女儿童医院病理科中国医科大学基础医学院干细胞与再生医学教研室

目的探讨大肠癌LoVo细胞来源的外泌体（LoVo-Exos）对肿瘤血管生成的影响，并探讨其促血管生成的可能分子机制。方法超速离心法提取LoVo-Exos，共聚焦显微镜观察其内化进入受体HUVEC细胞，体外管状形成实验分析LoVo-Exos对血管生成的... 详细信息

目的探讨大肠癌LoVo细胞来源的外泌体（LoVo-Exos）对肿瘤血管生成的影响，并探讨其促血管生成的可能分子机制。方法超速离心法提取LoVo-Exos，共聚焦显微镜观察其内化进入受体HUVEC细胞，体外管状形成实验分析LoVo-Exos对血管生成的影响；采用小鼠体内基质胶塞实验，体内分析LoVo-Exos对血管生成的影响。为探讨LoVo-Exos促血管生成的分子机制，Western blot分析LoVo-Exos携带活化型表皮生长因子受体（phosphorylated epidermal growth factor receptor，pEGFR）进入受体细胞。Western blot及ELISA方法分析EGFR-ERK通路关键信号蛋白及下游血管生成核心分子表达情况，并观察敲减EGFR及细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulatory protein kinase，ERK）抑制剂处理对血管生成的影响。结果共聚焦显微镜观察到LoVo-Exos内化进入HUVEC内皮细胞；体外血管生成实验显示，LoVo-Exos能够显著促进HUVEC细胞管状结构的形成。小鼠皮下基质胶塞实验显示LoVo-Exos能够促进血管样结构的形成。进一步研究发现LoVo-Exos递送pEGFR到HUVEC中，激活EGFR-ERK通路，促进血管生成。分析LoVo-Exos对下游血管生成核心分子表达的影响，发现LoVo-Exos能够促进HUVEC细胞白介素-8（interleukin-8，IL-8）的分泌，敲减EGFR的LoVo-Exos该促进作用降低，且该促进作用能够被MEK1/2抑制剂U0126抑制。结论 LoVo-Exos能够在体内外促进血管生成，其可能机制为LoVo-Exos递送pEGFR到HUVEC中，通过EGFR-ERK途径上调IL-8分泌水平，从而促进HUVEC血管生成能力，为癌症的转移提供新机制。

关键词：外泌体血管生成表皮生长因子受体大肠癌

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辐射性脑损伤机制及与神经退变再生关系探讨

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生命科学 2025年

作者：韩颢雪李彦姝中国医科大学第二临床学院中国医科大学附属盛京医院中国医科大学生命科学学院分子细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫健委细胞生物学重点实验室

电离辐射导致的辐射性脑损伤（radiation-induced brain injury， RBI）是颅内肿瘤放射治疗后常见的一种慢性并发症，具有潜在不可逆性。其主要特征包括脑萎缩、脑组织坏死及认知功能障碍，显著影响肿瘤患者的生活质量及预后。当前学科... 详细信息

电离辐射导致的辐射性脑损伤（radiation-induced brain injury， RBI）是颅内肿瘤放射治疗后常见的一种慢性并发症，具有潜在不可逆性。其主要特征包括脑萎缩、脑组织坏死及认知功能障碍，显著影响肿瘤患者的生活质量及预后。当前学科研究对神经再生与退变的动态交互机制关注不足，本文首次提出基于辐射脑损伤与其之间协同调控的治疗策略、具体机制及未来展望，以期为临床提供新的辐射脑损伤治疗思路和方法。

关键词：电离辐射脑损伤神经退变与再生神经细胞治疗策略

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外泌体在子宫内膜癌诊断和治疗中的作用

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生命的化学 2025年第2期45卷 277-282页

作者：程雅洁李婉明刘西林青岛大学附属妇女儿童医院病理科青岛266000 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室分子细胞生物学教研室沈阳110122

外泌体作为信息交流的载体,携带蛋白质、脂质、DNA、mRNA以及非编码RNA等生物活性物质进入人体体液,在细胞间信息交流中发挥巨大作用。外泌体在肿瘤细胞的增殖、上皮-间质转化和肿瘤微环境的形成中发挥了关键作用。近年来,外泌体在子宫... 详细信息

外泌体作为信息交流的载体,携带蛋白质、脂质、DNA、mRNA以及非编码RNA等生物活性物质进入人体体液,在细胞间信息交流中发挥巨大作用。外泌体在肿瘤细胞的增殖、上皮-间质转化和肿瘤微环境的形成中发挥了关键作用。近年来,外泌体在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)诊断、治疗中的作用逐渐成为研究的热点。研究发现,外泌体直接或间接介导了EC细胞的生长、转移,可作为EC诊断和预后的标志物,并可作为EC治疗的靶点。本文对外泌体在EC的诊断和治疗的研究进展进行综述,以期为EC的诊断和治疗提供新的思路。

关键词：子宫内膜癌外泌体肿瘤标志物肿瘤治疗

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肿瘤相关成纤维细胞在结直肠癌发生发展中的作用

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生命的化学 2025年第1期45卷 104-110页

作者：马一诺王群巴微李鑫孙诗涵李婉明中国医科大学卫生健康委员会细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室生命科学学院分子细胞生物学教研室沈阳110122

肿瘤的发生发展不仅与自身携带的基因有关,且与其生存场所——肿瘤微环境密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤微环境中最主要的基质细胞,它可以通过分泌各种因子和细胞外基质等方式参与肿瘤的发生... 详细信息

肿瘤的发生发展不仅与自身携带的基因有关,且与其生存场所——肿瘤微环境密切相关。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)是肿瘤微环境中最主要的基质细胞,它可以通过分泌各种因子和细胞外基质等方式参与肿瘤的发生发展过程。研究发现,CAFs通过与结直肠癌细胞相互作用,影响结直肠癌细胞增殖、侵袭转移、免疫逃逸和耐药等。本文总结了CAFs的来源及其在结直肠癌的发生发展中影响肿瘤细胞的多个方面,对目前CAFs的研究做了分析归纳,并提出了CAFs可以作为未来肿瘤治疗新靶点的可能性,以期为后续研究提供理论参考。

关键词：肿瘤相关成纤维细胞结直肠癌肿瘤微环境

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核酸适配子探针对转移性大肠癌细胞的多靶点成像及其靶标的定量分析

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高等学校化学学报 2016年第7期37卷 1262-1268页

作者：李婉明方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室沈阳110122

利用核酸适配子对肿瘤细胞的高亲和力靶向识别功能以及量子点的高荧光发射强度和光稳定性等特性,制备了识别不同靶点的核酸适配子探针,将其联合使用实现了对肿瘤细胞的多靶点成像及其靶标的定量分析.使用通过Cell-SELEX技术筛选得到的... 详细信息

利用核酸适配子对肿瘤细胞的高亲和力靶向识别功能以及量子点的高荧光发射强度和光稳定性等特性,制备了识别不同靶点的核酸适配子探针,将其联合使用实现了对肿瘤细胞的多靶点成像及其靶标的定量分析.使用通过Cell-SELEX技术筛选得到的可特异性识别转移性大肠癌细胞系Lo Vo的7个核酸适配子,分别与量子点QD605偶联制备分子探针.基于流式细胞术的竞争实验结果表明,7个探针可特异性识别靶细胞的不同靶点,相互之间无识别干扰.对靶细胞的荧光成像表明,与单一探针相比,多个探针联合使用可明显提高细胞表面的荧光信号强度,且阳性细胞检出率明显增多,显示出更高的检测灵敏度.使用流式细胞术及荧光成像定量方法分析了7个探针对不同转移特性大肠癌细胞系的识别能力,结果表明,多个探针联合使用可有效评价大肠癌细胞的转移潜能.本研究证实通过多个核酸适配子探针的联合使用可有效提高对靶细胞识别的灵敏度和准确性,为核酸适配子的广泛应用及大肠癌的靶向诊断提供了新的思路和手段.

关键词：核酸适配子转移性大肠癌多靶点量子点靶向成像

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基于双向浓度梯度的微流控芯片系统对肿瘤细胞侵袭能力的多重分析

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高等学校化学学报 2019年第12期40卷 2494-2501页

作者：王洁张宇于敏方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室生命科学学院

利用微流控芯片易于模拟体内生理环境、流体控制精确及易于集成等优势,将基于扩散原理的浓度梯度形成结构与经典的圣诞树形浓度梯度发生器相集成,建立了在垂直和水平方向上形成连续、双向浓度梯度的微流控芯片系统,采用该系统对不同类... 详细信息

利用微流控芯片易于模拟体内生理环境、流体控制精确及易于集成等优势,将基于扩散原理的浓度梯度形成结构与经典的圣诞树形浓度梯度发生器相集成,建立了在垂直和水平方向上形成连续、双向浓度梯度的微流控芯片系统,采用该系统对不同类型细胞(HEK-293,MCF-7,SGC-7901)的侵袭力进行了定量分析;通过在垂直方向上施加血清浓度梯度,在水平方向上施加抗肿瘤药物十字孢碱浓度梯度,分析了在连续药物浓度作用下的人胃癌SGC-7901细胞侵袭能力被抑制的情况,同时观察并定量评价了伴随细胞侵袭力变化过程中细胞增殖能力受抑制的情况.研究结果表明,该系统可形成稳定的双向物质浓度梯度;在血清浓度梯度存在情况下,伴随十字孢碱浓度梯度的升高,肿瘤细胞侵袭(P<0.0001)和增殖能力(P<0.001)均呈现浓度依赖性的连续降低.建立的双向浓度梯度微流控芯片系统可用于评价复杂环境对细胞的多重影响,也为研究细胞间相互作用、多种药物联用及药物筛选等提供了良好的研究平台.

关键词：微流控芯片浓度梯度肿瘤侵袭药物筛选

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基于微流控芯片的温度梯度毛细管电泳检测大肠癌石蜡标本中K-ras基因突变

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生物化学与生物物理进展 2010年第7期37卷 794-800页

作者：张惠丹王晓楠周喆马倩方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室沈阳110001

K-ras基因突变检测可用于大肠癌的早期筛查与诊断,并有利于筛选出抗表皮生长因子受体靶向药物治疗有效的大肠癌患者,以实现肿瘤的个体化治疗.采用以倾斜式热辐射原理建立的微流控温度梯度毛细管电泳(temperature gradient capillary ele... 详细信息

K-ras基因突变检测可用于大肠癌的早期筛查与诊断,并有利于筛选出抗表皮生长因子受体靶向药物治疗有效的大肠癌患者,以实现肿瘤的个体化治疗.采用以倾斜式热辐射原理建立的微流控温度梯度毛细管电泳(temperature gradient capillary electrophoresis,TGCE)基因突变检测系统,实现了对98例石蜡包埋大肠癌组织中K-ras基因突变的高灵敏度筛查,突变阳性检出率为47.96%,显著高于PCR产物直接测序的23.47%.克隆测序显示该方法至少能检测到2.08%的K-ras基因突变体.K-ras基因突变与临床病理学参数的关系分析显示,直肠癌中K-ras基因突变率明显高于结肠癌(P<0.05),而与年龄、性别、组织学类型和肿瘤分期等无显著相关性.该检测方法为肿瘤早期诊断和指导临床用药提供了一种灵敏度高、检测速度快、便于大规模筛查的有效手段.

关键词：微流控芯片温度梯度毛细管电泳(TGCE) K-ras基因突变大肠癌石蜡包埋组织

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核酸适配体功能化磁珠在转移性大肠癌细胞富集中的应用

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分析化学 2021年第5期49卷 710-717页

作者：李婉明方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室生命科学学院

基于核酸适配体对转移性肿瘤细胞高亲和力和高特异性的靶向识别功能,采用生物素-链霉亲和素的交联方法,将核酸适配体W3修饰在磁珠微球上,形成特异性识别转移性大肠癌细胞的功能化磁珠（W3-beads）,实现对转移性大肠癌细胞的靶向捕获和... 详细信息

基于核酸适配体对转移性肿瘤细胞高亲和力和高特异性的靶向识别功能,采用生物素-链霉亲和素的交联方法,将核酸适配体W3修饰在磁珠微球上,形成特异性识别转移性大肠癌细胞的功能化磁珠（W3-beads）,实现对转移性大肠癌细胞的靶向捕获和富集。核酸适配体W3在室温条件和人血浆环境下可保持对靶细胞的特异性结合能力,制备的修饰磁珠W3-beads可在不同比例的靶细胞/非靶细胞混合细胞中有效捕获靶细胞。W3-beads对不同靶细胞数进行捕获时,在细胞数量超过10～3 cell/mL时捕获效率超过75%,实际检出限达到50 cell/mL;初始细胞数量与捕获细胞数量之间的校准公式为y=0.7253x-5.1199 （R2=0.9967）。将靶细胞掺入全血中模拟循环肿瘤细胞,W3-beads可对全血中靶细胞实现有效地捕获和富集。本研究构建的W3-beads对转移性大肠癌细胞具有良好的靶向捕获、分离和富集能力,可为大肠癌患者血样中循环肿瘤细胞的富集提供有效简便的工具。

关键词：循环肿瘤细胞适配体磁珠富集转移性大肠癌

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基于热阻梯度加热系统的温度梯度芯片毛细管电泳用于DNA突变检测

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高等学校化学学报 2010年第4期31卷 667-671页

作者：徐章润李娜张惠丹樊晓峰方瑾东北大学分析科学研究中心沈阳110004 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室沈阳110001

建立了一种简单、可靠的空间温度梯度芯片毛细管电泳DNA突变分析系统,制作了热阻呈梯度均匀变化的硅橡胶(PDMS)基片,利用其热阻变化对热传导的影响,在基片表面形成稳定的空间温度梯度.通过改变PDMS基片的厚度差,可得到范围不同的温度梯... 详细信息

建立了一种简单、可靠的空间温度梯度芯片毛细管电泳DNA突变分析系统,制作了热阻呈梯度均匀变化的硅橡胶(PDMS)基片,利用其热阻变化对热传导的影响,在基片表面形成稳定的空间温度梯度.通过改变PDMS基片的厚度差,可得到范围不同的温度梯度,且形成的温度梯度在6h内保持稳定.利用该温度梯度加热装置对玻璃微流控芯片进行加热,在10℃温度梯度范围内对209bp的DNA突变标准样品进行分离检测,单次样品分析时间为8.3min,并成功用于3例大肠癌患者石蜡组织切片中K-ras基因突变的检测.

关键词：微流控芯片毛细管电泳温度梯度基因突变

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超抗原葡萄球菌肠毒素与抗人大肠癌单链抗体ND-1 scFv融合基因的构建、表达及活性分析

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细胞与分子免疫学杂志 2012年第4期28卷 400-403页

作者：陈航李莉方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:构建并表达超抗原葡萄(SEA)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的融合蛋白,以提高SEA的靶向杀伤作用。方法:构建超抗原SEA和鼠抗人大肠癌单链抗ND-1scFv的融合基因ND-1 scFv/SEA的表达载体,转化到大肠杆菌*** M15中进行诱导表达。Ni-... 详细信息

目的:构建并表达超抗原葡萄(SEA)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的融合蛋白,以提高SEA的靶向杀伤作用。方法:构建超抗原SEA和鼠抗人大肠癌单链抗ND-1scFv的融合基因ND-1 scFv/SEA的表达载体,转化到大肠杆菌*** M15中进行诱导表达。Ni-NTA亲和层析对表达产物进行分离、纯化。间接免疫荧光法检测融合蛋白的靶向结合活性,MTT法检测靶向杀伤效率。结果:成功构建了融合基因ND-1scFv/SEA,实现功能性表达,纯化的ND-1scFv/SEA融合蛋白与表达有ND-1相应抗原的大肠癌细胞CCL-187有高度亲和活性,通过激活外周血单核细胞,可特异性杀伤靶细胞,在4μg/mL浓度下对CCL-187的杀伤率达到91%,明显优于SEA的杀伤活性。结论:融合蛋白ND-1 scFv/SEA对大肠癌细胞CCL-187具有靶向结合和杀伤活性,为SEA用于靶向性的大肠癌治疗奠定了基础。

关键词： ND-1单克隆抗体单链抗体Fv 葡萄球菌肠毒素A 大肠癌

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