检索结果-内蒙古大学图书馆

细胞—生命的基础——中国细胞生物学学会2013年全国学术大会·武汉

作者：尚德淑蔺美娜孙伟李波许欣方文刚赵伟东陈誉华中国医科大学细胞生物学系发育细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室教育部医学细胞生物学重点实验室

骨髓间充质干细胞(MSC)不仅能分化成中胚层来源的细胞,而且还能跨胚层分化为内胚层来源的肝细胞、肺泡上皮细胞和外胚层的神经细胞。MSC代表了一种非常有前景的细胞治疗手段。在糖尿病、肝损伤、心肌梗死等疾病动物模型中,以MSC介导的... 详细信息

骨髓间充质干细胞(MSC)不仅能分化成中胚层来源的细胞,而且还能跨胚层分化为内胚层来源的肝细胞、肺泡上皮细胞和外胚层的神经细胞。MSC代表了一种非常有前景的细胞治疗手段。在糖尿病、肝损伤、心肌梗死等疾病动物模型中,以MSC介导的细胞治疗取得了显著的

关键词： MSC P13K ROCK 人脑微血管内皮细胞

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PAK4的核浆穿梭调控β-catenin的定位及信号转导

PAK4的核浆穿梭调控β-catenin的定位及信号转导

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：李妍邵阳光佟雨鑫李丰中国医科大学细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

P21活化激酶4(PAK4)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,作为小Rho GTP酶Cdc42下游靶蛋白,在细胞迁移、细胞存活、细胞生长和转录调控中发挥重要作用.通过对PAK4在细胞定位中的研究,我们发现PAK4是一个核浆穿梭蛋白,其中利用Tetra-GFP系统和Rev-GF... 详细信息

P21活化激酶4(PAK4)是一种丝/苏氨酸蛋白激酶,作为小Rho GTP酶Cdc42下游靶蛋白,在细胞迁移、细胞存活、细胞生长和转录调控中发挥重要作用.通过对PAK4在细胞定位中的研究,我们发现PAK4是一个核浆穿梭蛋白,其中利用Tetra-GFP系统和Rev-GFP系统及各种突变体,发现了PAK4具有2个核定位信号(NLSs)和3个核输出信号(NESs).GST-pull down和IP实验表明PAK4与入核蛋白家族成员直接结合,从细胞浆进入细胞核,并且这种结合依赖于其NLSs;LMB刺激后PAK4定位的变化表明PAK4从核到浆的穿梭是由出核蛋白CRM1介导的.进一步的研究表明PAK4能结合β-catenin,并且影响β-catenin的亚细胞定位;real-time PCR和报告基因检测表明PAK4的核输入能正向调控β-catenin依赖的基因转录;染色质免疫沉淀实验进一步证实了PAK4能与转录复合体TCF/LEF结合,调控β-catenin下游靶基因.另一方面PAK4能磷酸化β-catenin从而影响其稳定性.这些结果表明,PAK4在细胞浆与细胞核中穿梭,发挥多种重要作用,并且调控β-catenin的定位及其信号转导.

关键词： PAK4 β-catenin 核浆穿梭信号转导

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PAK6通过磷酸化依赖的泛素化负向调节前列腺癌细胞雄激素受体信号通路

PAK6通过磷酸化依赖的泛素化负向调节前列腺癌细胞雄激素受体信号...

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：刘彤李洋顾卉朱戈李丰中国医科大学细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

雄激素受体在前列腺癌细胞的生长和转移中具有重要的生物学功能,已报道P21活化激酶6(PAK6)能够下调雄激素受体的转录活性,但具体的分子机制目前尚不清楚.Mdm2是一个含有RING结构域的泛素化E3连接酶,它能够结合并诱导底物雄激素受体的泛... 详细信息

雄激素受体在前列腺癌细胞的生长和转移中具有重要的生物学功能,已报道P21活化激酶6(PAK6)能够下调雄激素受体的转录活性,但具体的分子机制目前尚不清楚.Mdm2是一个含有RING结构域的泛素化E3连接酶,它能够结合并诱导底物雄激素受体的泛素化降解.在本研究中我们证实了PAK6可以通过结合并磷酸化Mdm2,促进雄激素受体的泛素化降解.我们进一步发现PAK6可通过直接磷酸化雄激素受体,延迟其转位进核,促进其在胞质溶胶中的泛素化降解,从而下调雄激素受体的转录活性,抑制细胞的生长及迁移.本研究首次报道了PAK6通过磷酸化依赖的泛素化降解雄激素受体,阐明了PAK6作为抑制因子负向调节前列腺癌细胞雄激素受体信号通路的功能及其机制,为前列腺癌的药物靶点提供理论依据.

关键词： PAK6 雄激素受体磷酸化泛素化迁移

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医学院校开设研究生流式细胞术实验课的探索与实践

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基础医学教育 2017年第12期19卷 962-964页

作者：李婉明刘芙蓉程雅洁张莹于淼方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室沈阳110122 中国医科大学科学实验中心三部

流式细胞术是一门具有广泛科研以及临床应用价值的技术。在研究生教学中开设针对性的流式细胞术实验课,对研究生加深该技术的理解和掌握并有效用于课题研究具有重要意义。为此中国医科大学细胞生物学教研室在研究生细胞生物学实验课教... 详细信息

流式细胞术是一门具有广泛科研以及临床应用价值的技术。在研究生教学中开设针对性的流式细胞术实验课,对研究生加深该技术的理解和掌握并有效用于课题研究具有重要意义。为此中国医科大学细胞生物学教研室在研究生细胞生物学实验课教学中设置了流式细胞术检测5-FU对大肠癌细胞系HCT116的细胞周期抑制作用和流式细胞术检测CD44在大肠癌细胞系HCT116中的表达情况两个教学范例。研究生通过亲自参与细胞的收集,荧光的标记,样本的上机操作以及数据的分析等,不仅提高了研究生的动手操作能力,还培养了研究生的科研分析能力,为研究生在未来的科研和医疗工作中利用该技术奠定了基础。

关键词：流式细胞术实验教学研究生教育

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PAK4负调控胃癌细胞TGF-β1/Smads信号通路

PAK4负调控胃癌细胞TGF-β1/Smads信号通路

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：王春玉李彦姝张红艳李丰中国医科大学细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室暨卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001

PAK4是一种丝苏氨酸蛋白激酶，它在多种肿瘤细胞系中高表达，在细胞生长、迁移及侵袭过程中起作用.我们发现了3个新的PAK4互作蛋白：Smad2、Smad3及Smad4.首先，利用体内体外试验证实了它们的相互作用，并确定了其相互作用的关键结构域... 详细信息

PAK4是一种丝苏氨酸蛋白激酶，它在多种肿瘤细胞系中高表达，在细胞生长、迁移及侵袭过程中起作用.我们发现了3个新的PAK4互作蛋白：Smad2、Smad3及Smad4.首先，利用体内体外试验证实了它们的相互作用，并确定了其相互作用的关键结构域.我们进一步发现过表达PAK4能够抑制TGF-β1刺激引起的Smad2/3的磷酸化改变、Smad2/3/4转录复合体的形成及C末端磷酸化的Smad2/3的核转位;利用RNA干涉技术沉默PAK4能够增强TGF-β1刺激引起的Smad2/3的磷酸化改变.进而我们利用荧光素酶双报告基因检测系统证实过表达PAK4能够抑制Smad2/3反应元件的转录活性，利用RT-PCR证实过表达PAK4能够抑制TGF-β1下游基因PAI1的mRNA水平，并证实沉默PAK4能够增强TGF-β1刺激引起的细胞周期相关蛋白的改变及过表达PAK4能够抑制TGF-β1刺激引起的细胞周期相关蛋白的改变.综上，我们证实了PAK4通过与Smads直接相互作用抑制TGF-β1/Smads通路，从而帮助胃癌细胞逃避TGF-β11/Smads引起的生长抑制.

关键词： PAK4 Smad2/3/4 TGF-β1 胃癌

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USP22在转录调控及肿瘤发生中的作用

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生命的化学 2012年第5期32卷 400-403页

作者：刘琪王胜利赵越中国医科大学基础医学院细胞生物学系卫生部细胞生物学重点实验室暨教育部医学细胞生物学重点实验室染色质生物学研究室沈阳110001

泛素特异性蛋白酶22(ubiquitin specific protease 22,USP22)是一种组蛋白去泛素化酶,在核受体介导的基因转录调控中起增强转录活性的作用。USP22在肿瘤发生、发展中发挥着重要作用,影响癌基因c-Myc介导的基因转录,从而促进肿瘤的增殖... 详细信息

泛素特异性蛋白酶22(ubiquitin specific protease 22,USP22)是一种组蛋白去泛素化酶,在核受体介导的基因转录调控中起增强转录活性的作用。USP22在肿瘤发生、发展中发挥着重要作用,影响癌基因c-Myc介导的基因转录,从而促进肿瘤的增殖和生长;另一方面,USP22可改变远上游识别序列结合蛋白1(far upstream element-binding protein 1,FBP1)的泛素化水平,从而影响FBP1下游的抑癌基因p21的表达。USP22与胃癌、大肠癌、乳腺癌及膀胱癌等肿瘤的病理进程相关。此外,USP22在端粒稳态的维持中起作用。本文主要综述USP22参与核受体介导的基因转录调控的表观遗传学机制及其在肿瘤发生中的作用。

关键词： USP22 转录调控表观遗传学机制肿瘤的发生发展

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GST-LMO1融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

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中国医科大学学报 2011年第11期40卷 961-963,978页

作者：顾卉佟宇鑫刘彤李慧李丹妮袁正伟中国医科大学附属盛京医院实验研究中心沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室细胞生物学教育部、卫生部重点实验室沈阳110001 中国医科大学第94期临床医学系沈阳110001

目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pG... 详细信息

目的构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入*** BL21中,经异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定。结果酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-2-LMO1及其截短突变体,并用Western blot方法证实了GST-LMO1全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了LMO1全长及其截短突变体原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为LMO1结构与功能的研究提供了前提基础。

关键词： LMO1 截短突变体质粒原核表达

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转移性大肠癌特异性核酸适配体分子信标的构建及其靶向成像

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解剖科学进展 2022年第5期28卷 523-526页

作者：鲁妍兵李婉明方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室生命科学学院分子细胞生物学教研室辽宁沈阳110122

目的设计并构建靶向转移性大肠癌的核酸适配体分子信标(MAB),分析其生物活性并进行特异性成像研究,为转移性大肠癌的靶向成像提供新的方法。方法根据分子信标的设计原则在转移性大肠癌特异性核酸适配体的基础上构建MAB,采用流式细胞术对... 详细信息

目的设计并构建靶向转移性大肠癌的核酸适配体分子信标(MAB),分析其生物活性并进行特异性成像研究,为转移性大肠癌的靶向成像提供新的方法。方法根据分子信标的设计原则在转移性大肠癌特异性核酸适配体的基础上构建MAB,采用流式细胞术对MAB的特异性和亲和性进行分析,并对不同温度下(4℃、25℃和37℃)MAB与靶细胞的结合情况进行检测;采用激光共聚焦显微镜对MAB与靶细胞靶向成像进行观察。结果构建的MAB与转移性大肠癌细胞的结合具有高亲和性和高特异性,解离常数为(22.70±2.46)nM,且不受温度的影响,激光共聚焦显微镜观察结果表明MAB不需洗涤过程便可一步法实现转移性大肠癌细胞的靶向成像。结论成功构建出基于转移性大肠癌特异性核酸适配体的MAB,建立了一种快速、便捷的转移性大肠癌的靶向成像方法。

关键词：核酸适配体分子信标大肠癌靶向成像

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形成性评价在医学细胞生物学教学中的应用

形成性评价在医学细胞生物学教学中的应用

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中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：于敏方瑾邵阳光李想李晓东刘彤李彦姝张健李婉明刘芙蓉张成宏中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室分子细胞生物学教研室沈阳110122

教学效果评价是教学过程的重要环节，一般包括终结性评价和形成性评价。终结性评价是在教学过程结束后通过考试评价学生的学习效果，形成性评价是在教学过程中，为了解教学效果和需要采取的改进措施而进行的评价，通过调查问卷、课堂讨...

教学效果评价是教学过程的重要环节，一般包括终结性评价和形成性评价。终结性评价是在教学过程结束后通过考试评价学生的学习效果，形成性评价是在教学过程中，为了解教学效果和需要采取的改进措施而进行的评价，通过调查问卷、课堂讨论、师生评估等形式，较前者更能全面反映整个教学过程的动态情况，为正在进行的教育活动提供反馈信息，从而提高教学活动质量，挖掘学生的学习潜能，目前已得到日益广泛的重视和应用。

关键词：

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抗人大肠癌单链抗体与绿色荧光蛋白融合基因的构建和表达

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解剖科学进展 2012年第3期18卷 208-211页

作者：陈航廖生俊王蒴方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室辽宁沈阳110001 沈阳农业大学辽宁沈阳110001

目的构建并表达绿色荧光蛋白(GFP)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的融合蛋白,产生具有荧光的抗体。方法将鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的基因克隆到pET28a(+)-GFP的表达载体,转化到大肠杆菌BL21中进行融合基因ND-1-scFv/GFP诱导表达。... 详细信息

目的构建并表达绿色荧光蛋白(GFP)和鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的融合蛋白,产生具有荧光的抗体。方法将鼠抗人大肠癌单链抗体ND-1scFv的基因克隆到pET28a(+)-GFP的表达载体,转化到大肠杆菌BL21中进行融合基因ND-1-scFv/GFP诱导表达。Ni-NTA亲和层析对表达产物进行分离、纯化,免疫印迹和荧光显微镜方法验证融合蛋白的表达。结果 ND-1scFv被克隆到表达载体pET28a(+)-GFP中,诱导表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量为58kDa。SDS-PAGE灰度扫描结果显示纯化后的蛋白纯度为90%,荧光显微镜检测显示,表达有目的蛋白的大肠杆菌BL21具有明显的绿色荧光。结论成功构建并表达融合基因ND-1-scFv/GFP,为该单抗的肿瘤特异成像研究奠定了基础。E.

关键词： ND-1单克隆抗体单链抗体Fv 绿色荧光蛋白大肠癌

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