检索结果-内蒙古大学图书馆

现代肿瘤医学 2014年第6期22卷 1236-1238页

作者：张红艳张健李丹妮李彦姝刘芙蓉李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 中国医科大学

目的:构建人Elf5真核细胞表达质粒,并研究其在乳腺癌MCF7细胞中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人Elf5基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,构建含人Elf5基因的真核表达质粒pEGFPhElf5。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定... 详细信息

目的:构建人Elf5真核细胞表达质粒,并研究其在乳腺癌MCF7细胞中的亚细胞定位。方法:PCR扩增人Elf5基因,将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中,构建含人Elf5基因的真核表达质粒pEGFPhElf5。利用酶切鉴定,DNA测序,免疫印迹及免疫荧光方法鉴定Elf5真核表达质粒及Elf5蛋白的亚细胞定位。结果:经酶切鉴定、DNA测序、免疫印迹方法确认Elf5基因成功导入真核表达载体pEGFP-C1。瞬时转染MCF7细胞,Elf5蛋白表达在细胞核中。结论:pEGFP-Elf5真核表达质粒构建成功,Elf5定位在细胞核中。

关键词： Elf5 pEGFP-C1 亚细胞定位

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p57^(kip2)蛋白在乳腺癌组织和细胞系中的表达和定位

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现代肿瘤医学 2014年第3期22卷 506-509页

作者：李彦姝刘芙蓉张红艳李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:研究p57kip2在人乳腺癌组织和细胞系中的表达和定位。方法:免疫印迹法检测人乳腺肿瘤细胞系中p57kip2的表达。人乳腺肿瘤组织进行免疫组化染色,检测p57kip2在组织中的表达。激光共聚焦扫描显微镜检测内源p57kip2在MCF-7细胞中的定... 详细信息

目的:研究p57kip2在人乳腺癌组织和细胞系中的表达和定位。方法:免疫印迹法检测人乳腺肿瘤细胞系中p57kip2的表达。人乳腺肿瘤组织进行免疫组化染色,检测p57kip2在组织中的表达。激光共聚焦扫描显微镜检测内源p57kip2在MCF-7细胞中的定位。结果:p57kip2在乳腺癌细胞系内表达,免疫组化染色分析和激光共聚焦扫描显微镜证实p57kip2主要定位于细胞核内。结论:p57kip2在乳腺癌细胞内表达,p57kip2主要定位于乳腺癌组织细胞核内,可能是参与肿瘤细胞基因转录调控和蛋白表达的重要蛋白之一。

关键词： p57kip2 免疫组织化学激光共聚焦扫描显微镜定位

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先天性厚甲基因突变分析

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山西医药杂志 2014年第13期43卷 1515-1517页

作者：余平文曹丽华中国医科大学临床医学系沈阳110001 中国医科大学医学基因组学教研室细胞生物学卫生部重点实验室

先天性厚甲（PC）是一组常染色体显性遗传的外胚层发育不良性遗传病,特征为指/趾甲营养不良和掌趾角化,由Jadassohn和Lewmldowsky于1906年首次报道[1]。PC的特征性表现为指/趾甲显著增厚、掌跖过度角化、毛囊角化病,舌和口腔黏膜白斑,... 详细信息

先天性厚甲（PC）是一组常染色体显性遗传的外胚层发育不良性遗传病,特征为指/趾甲营养不良和掌趾角化,由Jadassohn和Lewmldowsky于1906年首次报道[1]。PC的特征性表现为指/趾甲显著增厚、掌跖过度角化、毛囊角化病,舌和口腔黏膜白斑,偶尔累及喉部引起声音嘶哑[2]。1 PC分型传统上按症状PC主要分为2型：PC-1型和PC-2型,此外,还有一些罕见的变异,

关键词：先天性厚甲基因突变分析常染色体显性遗传掌趾角化口腔黏膜白斑发育不良性甲营养不良毛囊角化病

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MiR-34家族通过TGF-β/Smads传导通路促进胎儿皮肤无瘢痕愈合

MiR-34家族通过TGF-β/Smads传导通路促进胎儿皮肤无瘢痕愈合

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：赵峰庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室

目的：探讨miR-34家族在胎儿皮肤无瘢痕愈合过程中的作用.方法：利用Solexa测序技术分析人孕中期和孕晚期胎儿表皮角质形成细胞中microRNA测序及差异miRNA靶基因预测，并利用实时定量PCR检测验证.应用Targetscan Release 6.2及miRanda预... 详细信息

目的：探讨miR-34家族在胎儿皮肤无瘢痕愈合过程中的作用.方法：利用Solexa测序技术分析人孕中期和孕晚期胎儿表皮角质形成细胞中microRNA测序及差异miRNA靶基因预测，并利用实时定量PCR检测验证.应用Targetscan Release 6.2及miRanda预测miR-34家族各成员可能作用的靶基因.

关键词：无瘢痕愈合 miR-34 TGF-β Smad 皮肤

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新候选microRNA-12对皮肤无瘢痕愈合作用机制的研究

新候选microRNA-12对皮肤无瘢痕愈合作用机制的研究

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：郎宏鑫庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室沈阳110001

目的：探讨新候选microRNA-12对皮肤无瘢痕愈合的作用,为microRNA作为一种新型治疗手段应用于临床创伤修复提供科学理论基础。方法：通过高通量测序得到人胚胎中期和晚期显著差异表达的新候选microRNA-12,并通过实时荧光定量PCR的方法... 详细信息

目的：探讨新候选microRNA-12对皮肤无瘢痕愈合的作用,为microRNA作为一种新型治疗手段应用于临床创伤修复提供科学理论基础。方法：通过高通量测序得到人胚胎中期和晚期显著差异表达的新候选microRNA-12,并通过实时荧光定量PCR的方法进行验证。将新候选microRNA-12的模拟物瞬时转染人永生化表皮细胞系(HaCaT),观察其对HaCaT的生物学作用。

关键词：新候选microRNA 无瘢痕愈合 PDGFB 皮肤

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microRNA调控MMP14抑制人羊膜间充质干细胞迁移的新机制

microRNA调控MMP14抑制人羊膜间充质干细胞迁移的新机制

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：谭丽萍施萍庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室沈阳110001

目的：探讨新microRNA-69调控MMP14抑制hAMSCs迁移的机制。方法：采用酶消化法分离原代hAMSCs,利用脂质体转染的方法将新microRNA-69模拟物导入hAMSCs;用100μg/L EGF培养hAMSCs,用划痕实验方法检测转染新miRNA-69模拟物后hAMSCs迁移能力。

关键词：表皮生长因子人羊膜间充质干细胞细胞迁移 microRNA

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磁纳米颗粒作为基因载体重编程人脂肪间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的研究

磁纳米颗粒作为基因载体重编程人脂肪间充质干细胞向胰岛素分泌细...

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：王瑞施萍庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室沈阳110001

目的：观察聚乙烯亚胺包被的SPIO作为基因载体共转染hADSCs,重编程hADSCs分化为胰岛前体细胞的能力。方法：PEI-SPIO标记hADSCs;用普鲁士蓝、台盼蓝染色和MTT法检测对细胞增殖及分化;PEI-SPIO和脂质体作为基因载体对细胞活性的影响;免... 详细信息

目的：观察聚乙烯亚胺包被的SPIO作为基因载体共转染hADSCs,重编程hADSCs分化为胰岛前体细胞的能力。方法：PEI-SPIO标记hADSCs;用普鲁士蓝、台盼蓝染色和MTT法检测对细胞增殖及分化;PEI-SPIO和脂质体作为基因载体对细胞活性的影响;免疫荧光法检测基因载体时的转染效率和瞬时干扰效率检测;实时定量PCR法检测hADSCs共转染REST-siRNA和SHH-siRNA后胰岛细胞相关基因表达。

关键词：人脂肪间充质干细胞聚乙烯亚胺超顺磁性氧化铁转染胰岛前体细胞

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一种简单扩增获得表皮干细胞的新方法

一种简单扩增获得表皮干细胞的新方法

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第九届全国创伤修复(愈合)与组织再生学术会议暨第二届中欧创面修复学术会议

作者：王喜良庞希宁中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室干细胞与再生医学研究室沈阳11000l

目的：寻找一种简单扩增表皮干细胞的方法,为皮肤组织工程提供充足的"种子细胞"。方法以中性蛋白酶和胰酶序贯消化表皮皮片,获得表皮单细胞悬液,接种到75cm2培养瓶中,20min后清除未贴壁细胞,使用Epilife低钙培养液培养。细胞... 详细信息

目的：寻找一种简单扩增表皮干细胞的方法,为皮肤组织工程提供充足的"种子细胞"。方法以中性蛋白酶和胰酶序贯消化表皮皮片,获得表皮单细胞悬液,接种到75cm2培养瓶中,20min后清除未贴壁细胞,使用Epilife低钙培养液培养。细胞生长到30％-50％汇合后,加大培养液的使用量,为常规培养用量的2-3倍(30-40ml),24小时换液一次。

关键词：表皮干细胞 involucrin loricrin miR-203

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脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A的克隆表达及血清学分析

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第4期29卷 414-417页

作者：陈航方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室辽宁沈阳110001

目的构建并表达功能性的脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A(NspA)的重组蛋白,并检测流行性脑脊髓膜炎(流脑)恢复期患者血清中的抗NspA抗体水平,探讨NspA作为新的流脑抗原疫苗的意义。方法从流脑患者流行株中克隆NspA基因构建原核表达载体,在大肠... 详细信息

目的构建并表达功能性的脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A(NspA)的重组蛋白,并检测流行性脑脊髓膜炎(流脑)恢复期患者血清中的抗NspA抗体水平,探讨NspA作为新的流脑抗原疫苗的意义。方法从流脑患者流行株中克隆NspA基因构建原核表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,GSTrap FF亲和层析纯化出具有生物活性的NspA融合蛋白。采用纯化得到的NspA融合蛋白检测流脑恢复期患者血清中的抗NspA抗体。结果成功表达了功能性NspA蛋白,相对分子质量(Mr)为44 000。并用NspA融合蛋白检测到患者恢复期血清中存在有抗NspA抗体,且滴度为1∶40时,阳性率为90%。结论成功表达了NspA重组蛋白,并检测到自然感染流脑患者恢复期血清中的NspA抗体。

关键词：脑膜炎奈瑟氏菌脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A 脑膜炎奈瑟氏菌表面蛋白A抗体血清学分析

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RUNX3全长和不同结构域原核表达载体的构建及其重组蛋白表达

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吉林大学学报（医学版） 2013年第6期39卷 1112-1115页

作者：宋艳艳王桂玲中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白。方法:以pcDNA3.1-myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶(GST)融合表... 详细信息

目的:构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白。方法:以pcDNA3.1-myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌(***)BL21中诱导其融合蛋白表达,SDS-PAGE电泳检测其蛋白表达情况。结果:EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切后得到与预期大小相符的FL(1 245bp)、ΔRunt(843bp)、Nter(159bp)、Runt(402bp)和Cter(684bp)5个载体片段。SDS-PAGE电泳检测,RUNX3全长及各个结构域截短GST-RUNX3截短融合蛋白(GST-FL、GST-Runt、GST-Nter和GST-Cter)相对分子质量分别为72 000、40 000、32 000和51 000。结论:成功构建RUNX3全长和各个结构域截短的GST标签的原核表达载体,并实现其重组蛋白在原核细胞中的表达。

关键词： RUNX3 载体蛋白诱导蛋白表达

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