检索结果-内蒙古大学图书馆

microRNA-223对糖基化终产物诱导人脂肪间充质干细胞凋亡和氧化应激影响的体外研究

中国动脉硬化杂志 2017年第1期25卷 1-6页

作者：王哲张殿宝杨向红中国医科大学盛京医院病理科辽宁省沈阳市110004 中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室干细胞与再生医学研究室辽宁省沈阳市110001

目的观察microRNA-223(miR-223)对糖基化终产物(AGE)诱导人脂肪间充质干细胞(h ADSC)凋亡和氧化应激的影响。方法采用酶消化法分离培养h ADSC,并应用流式细胞术对表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)进行... 详细信息

目的观察microRNA-223(miR-223)对糖基化终产物(AGE)诱导人脂肪间充质干细胞(h ADSC)凋亡和氧化应激的影响。方法采用酶消化法分离培养h ADSC,并应用流式细胞术对表面抗原CD14、CD34、CD45、CD90、CD105和人类白细胞抗原DR(HLA-DR)进行检测。将h ADSC分为牛血清白蛋白(BSA)对照组、AGE修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)作用组、miR-223模拟物转染组、miR-223模拟物转染+AGE-BSA组、miR-223抑制物转染组和miR-223抑制物转染+AGE-BSA组。应用CCK-8法和TUNEL染色检测各组细胞存活率和凋亡率,Western blot检测Cleaved Caspase3蛋白表达水平,应用双氯荧光素(DCFH-DA)试剂盒检测各组细胞活性氧(ROS)含量。结果流式细胞术检测结果表明,原代培养的h ADSC高表达CD14、CD90和CD105,不表达CD34、CD45和HLADR。CCK-8法、TUNEL染色、Western blot和DCFH-DA法检测结果表明,与BSA对照组相比,AGE-BSA作用组h ADSC凋亡率、miR-223表达水平、Cleaved Caspase3蛋白表达水平、ROS生成显著升高,而细胞存活率下降(P<0.05);与AGE-BSA作用组相比,miR-223模拟物转染能够进一步上调AGE-BSA引起的h ADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,下调AGE-BSA引起的h ADSC存活率减少(P<0.05);与AGE-BSA作用组相比,miR-223抑制物转染能够抑制h ADSC凋亡率、Cleaved Caspase3蛋白表达水平和ROS生成增加,拮抗AGEBSA引起的h ADSC存活率减少(P<0.05)。结论 miR-223高表达能够促进AGE-BSA引起的h ADSC细胞凋亡和ROS生成,其可能作为调控h ADSC促进糖尿病创伤愈合的新靶点。

关键词：糖基化终产物人脂肪间充质干细胞 microRNA-223 凋亡氧化应激

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医学院校开设研究生流式细胞术实验课的探索与实践

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基础医学教育 2017年第12期19卷 962-964页

作者：李婉明刘芙蓉程雅洁张莹于淼方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室沈阳110122 中国医科大学科学实验中心三部

流式细胞术是一门具有广泛科研以及临床应用价值的技术。在研究生教学中开设针对性的流式细胞术实验课,对研究生加深该技术的理解和掌握并有效用于课题研究具有重要意义。为此中国医科大学细胞生物学教研室在研究生细胞生物学实验课教... 详细信息

流式细胞术是一门具有广泛科研以及临床应用价值的技术。在研究生教学中开设针对性的流式细胞术实验课,对研究生加深该技术的理解和掌握并有效用于课题研究具有重要意义。为此中国医科大学细胞生物学教研室在研究生细胞生物学实验课教学中设置了流式细胞术检测5-FU对大肠癌细胞系HCT116的细胞周期抑制作用和流式细胞术检测CD44在大肠癌细胞系HCT116中的表达情况两个教学范例。研究生通过亲自参与细胞的收集,荧光的标记,样本的上机操作以及数据的分析等,不仅提高了研究生的动手操作能力,还培养了研究生的科研分析能力,为研究生在未来的科研和医疗工作中利用该技术奠定了基础。

关键词：流式细胞术实验教学研究生教育

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形成性评价在医学细胞生物学教学中的应用

形成性评价在医学细胞生物学教学中的应用

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中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：于敏方瑾邵阳光李想李晓东刘彤李彦姝张健李婉明刘芙蓉张成宏中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室分子细胞生物学教研室沈阳110122

教学效果评价是教学过程的重要环节，一般包括终结性评价和形成性评价。终结性评价是在教学过程结束后通过考试评价学生的学习效果，形成性评价是在教学过程中，为了解教学效果和需要采取的改进措施而进行的评价，通过调查问卷、课堂讨... 详细信息

教学效果评价是教学过程的重要环节，一般包括终结性评价和形成性评价。终结性评价是在教学过程结束后通过考试评价学生的学习效果，形成性评价是在教学过程中，为了解教学效果和需要采取的改进措施而进行的评价，通过调查问卷、课堂讨论、师生评估等形式，较前者更能全面反映整个教学过程的动态情况，为正在进行的教育活动提供反馈信息，从而提高教学活动质量，挖掘学生的学习潜能，目前已得到日益广泛的重视和应用。

关键词：形成性评价细胞生物学

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一种转移性大肠癌特异性核酸适配体的分析鉴定及其在循环肿瘤细胞捕获中的应用

一种转移性大肠癌特异性核酸适配体的分析鉴定及其在循环肿瘤细胞...

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中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：李婉明王蒴周琳琳程雅洁方瑾医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳 110001

转移是肿瘤患者死亡的主要原因.研究表明，对外周血中的循环肿瘤细胞(CTCs)进行检测分析，有助于早期发现肿瘤的微转移、转移风险的预测和判断，以及评估预后和监测复发.核酸适配体是利用指数富集的系统进化技术(SELEX)从一个库容量达1... 详细信息

转移是肿瘤患者死亡的主要原因.研究表明，对外周血中的循环肿瘤细胞(CTCs)进行检测分析，有助于早期发现肿瘤的微转移、转移风险的预测和判断，以及评估预后和监测复发.核酸适配体是利用指数富集的系统进化技术(SELEX)从一个库容量达1018的随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶细胞高亲和力和高特异性结合的寡核苷酸序列.W3是本课题组在前期工作中以转移性大肠癌细胞系LoVo为靶细胞，通过消减Cell-SELEX技术筛选得到的能与转移性肿瘤细胞特异性结合的核酸适配体.

关键词：核酸适配体转移性大肠癌靶向成像循环肿瘤细胞

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CUEDC2通过活化PI3K/Akt信号通路促进乳腺癌细胞的生长

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现代肿瘤医学 2017年第2期25卷 183-185页

作者：李彦姝高云玲张红艳汤丽娜刘芙蓉李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白在人乳腺癌细胞中的生物学作用。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白检测磷酸化Akt和总Akt的表达变化。利用CCK-8检测过表达CUEDC2后... 详细信息

目的:探讨CUE结构域2(CUE domain-containing 2,CUEDC2)蛋白在人乳腺癌细胞中的生物学作用。方法:人乳腺肿瘤细胞MCF-7转染的Myc-CUEDC2真核表达载体,提取转染细胞的总蛋白检测磷酸化Akt和总Akt的表达变化。利用CCK-8检测过表达CUEDC2后MCF-7细胞的生长。结果:CUEDC2能够活化Akt,使磷酸化Akt表达增加,能够促进人乳腺癌细胞生长。结论:当乳腺癌中CUEDC2表达增高时,能够引起PI3K/Akt信号通路活化,促进肿瘤细胞生长。

关键词：乳腺肿瘤 CUEDC2 细胞生长

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P190调控Na+-K+-ATP酶定位于细胞膜的机制研究

P190调控Na+-K+-ATP酶定位于细胞膜的机制研究

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中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：张淑红刘东鑫赵伟东张虎方文刚秦小雪陈誉华中国医科大学细胞生物学系发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110001

P190为我们前期研究中发现的定位于脑微血管内皮细胞(BMEC)血管腔侧的分子量为190KD的穿膜蛋白。为探讨BMEC表达P190的生理学意义,我们以P190胞内段结构域为诱饵蛋白,通过酵母双杂交技术从小鼠胎脑cDNA文库中筛选到与P190互作的Na+-K+-... 详细信息

P190为我们前期研究中发现的定位于脑微血管内皮细胞(BMEC)血管腔侧的分子量为190KD的穿膜蛋白。为探讨BMEC表达P190的生理学意义,我们以P190胞内段结构域为诱饵蛋白,通过酵母双杂交技术从小鼠胎脑cDNA文库中筛选到与P190互作的Na+-K+-ATP酶β3亚基,CO-IP实验结果显示,人BMEC中,P190蛋白胞内段与未糖基化的β3亚基存在相互作用。在共转P190蛋白胞内段与β3亚基的293T细胞中,P190蛋白胞内段也能够与未糖基化的β3亚基发生相互作用;并且,P190蛋白胞内段能够增加β3亚基的糖基化修饰。在人BMEC中稳定干扰P190蛋白后,Na+-K+-ATP酶的β3亚基及催化亚基α1均发生蛋白表达下调及细胞膜定位的减少。

关键词： HBMEC P190 Na+/K+-ATP酶 β3/α1亚基

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单个囊泡kiss-and-run过程中磷脂分子PI(4,5)P2的动态变化

单个囊泡kiss-and-run过程中磷脂分子PI(4,5)P2的动态变化

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中国细胞生物学学会2017年全国学术大会

作者：赵伟东杨佳琳崔殿臣张雪薇中国医科大学发育细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室沈阳110122

囊泡是真核细胞内部的重要细胞器之一,例如,在神经突触中存在大量的突触囊泡,在神经内分泌腺体中存在大量的分泌囊泡。囊泡与细胞膜的融合导致了囊泡内贮存物质的释放,这对于神经系统以及神经内分泌系统的正常运行是必需的。本研究利用... 详细信息

囊泡是真核细胞内部的重要细胞器之一,例如,在神经突触中存在大量的突触囊泡,在神经内分泌腺体中存在大量的分泌囊泡。囊泡与细胞膜的融合导致了囊泡内贮存物质的释放,这对于神经系统以及神经内分泌系统的正常运行是必需的。本研究利用原代培养的肾上腺嗜铬细胞,以膜片钳技术进行全细胞记录,以去极化刺激引起分泌囊泡的胞吐(exocytosis)和胞吞(endocytosis)过程,同时利用共聚焦显微镜对单个囊泡的分泌行为进行监测。在此基础上,将PH-EGFP质粒转染至嗜铬细胞,将细胞质膜内层的磷脂酰肌醇二磷酸PI(4,5)P2标记为绿色荧光,在单个囊泡水平对囊泡与细胞膜融合过程中PI(4,5)P2的动态变化进行了分析。

关键词：囊泡胞吐胞吞 kiss-and-run 磷脂酰肌醇活细胞成像

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ADAM9在高侵袭转移MDA-MB-231乳腺癌细胞系中的表达

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现代肿瘤医学 2017年第2期25卷 171-173页

作者：孙舟彤李彦姝中国医科大学临床医学系辽宁沈阳110122 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110112

目的:探讨去整合素金属蛋白酶9(a disintegrin and metalloproteinase 9,ADAM9)蛋白在人乳腺癌细胞系中的表达。方法:提取人正常乳腺上皮细胞HBL100,人乳腺癌细胞系MCF-7,ZR-75-1,MDA-MB-231,HCC1937和Hs578T,小鼠乳腺癌细胞系4T1的总蛋白和总mRNA,提取细胞的总蛋白和总RNA进行蛋白免疫印迹和实时定量PCR检测ADAM9的表达。结果:在人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中ADAM9蛋白表达最高,在小鼠乳腺癌4T1细胞中ADAM9表达较低。结论:ADAM9在高侵袭的MDA-MB-231乳腺癌细胞中高表达。

关键词：乳腺肿瘤 ADAM9 蛋白表达

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Mu2蛋白亚细胞结构定位及其相互作用蛋白的筛选

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吉林大学学报（医学版） 2016年第6期42卷 1054-1058,I0011页

作者：霍云龙王春玉赵越中国医科大学盛京医院病理科辽宁沈阳110003 中国医科大学基础医学院染色质生物学研究室教育部医学细胞生物学重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的:采用果蝇S2细胞表达FLAG-Mu2蛋白,观察其亚细胞结构定位并纯化鉴定FLAG-Mu2质粒蛋白复合物,为Mu2蛋白的研究提供依据。方法:FLAG-Mu2转染果蝇S2细胞后表达FLAG-Mu2融合蛋白,共聚焦激光扫描显微镜下观察FLAG-Mu2蛋白的亚细胞定位,... 详细信息

目的:采用果蝇S2细胞表达FLAG-Mu2蛋白,观察其亚细胞结构定位并纯化鉴定FLAG-Mu2质粒蛋白复合物,为Mu2蛋白的研究提供依据。方法:FLAG-Mu2转染果蝇S2细胞后表达FLAG-Mu2融合蛋白,共聚焦激光扫描显微镜下观察FLAG-Mu2蛋白的亚细胞定位,并通过核浆分离蛋白提取实验观察细胞核提取物中FLAG-Mu2蛋白的表达情况;采用免疫沉淀技术沉淀FLAG-Mu2复合物,并对其进行纯化及质谱测序以确定蛋白复合物的组分。结果:共聚焦激光显微镜下观察,FLAG-Mu2蛋白主要表达于细胞核中。核浆分离蛋白提取检测,融合蛋白相对分子质量约为140 000,主要存在于细胞核提取物中。纯化FLAG-Mu2蛋白复合物并进行蛋白质质谱分析,FLAG-Mu2复合物中可能含有pif1A、CG31782、mip120、CG31690和G protein-sa60A。结论:FLAG-Mu2蛋白在果蝇S2细胞中主要定位于细胞核,FLAG-Mu2蛋白复合物中有5种可能的蛋白组分。

关键词： Mu2蛋白融合蛋白亚细胞结构定位相互作用蛋白筛选

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基于核酸适配子W3量子点探针的转移性大肠癌靶向成像

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中国组织化学与细胞化学杂志 2016年第3期25卷 205-210页

作者：李婉明王蒴周琳琳方瑾中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室医学细胞生物学教育部重点实验室细胞生物学教研室沈阳110001 沈阳农业大学分析测试中心沈阳110001

目的核酸适配子W3偶联量子点QD605制备特异性探针(W3-QD),并对大肠癌细胞以及临床大肠癌组织石蜡切片标本进行靶向成像。方法荧光显微镜分析W3-QD对混合培养细胞中靶细胞LoVo的特异性识别能力;利用W3-QD对不同种类细胞进行特异性成像并... 详细信息

目的核酸适配子W3偶联量子点QD605制备特异性探针(W3-QD),并对大肠癌细胞以及临床大肠癌组织石蜡切片标本进行靶向成像。方法荧光显微镜分析W3-QD对混合培养细胞中靶细胞LoVo的特异性识别能力;利用W3-QD对不同种类细胞进行特异性成像并扫描定量,同时利用流式细胞术对其进行验证;进一步利用W3-QD对临床大肠癌患者组织标本进行特异性成像。结果 W3-QD能够特异性识别混合细胞培养中的LoVo细胞,并能够对不同种类的细胞进行定量成像,与流式细胞术的结果一致;将W3-QD进一步用于临床患者组织标本上,能对转移性大肠癌患者的癌组织进行靶向成像作用。结论核酸适配子-量子点(W3-QD)探针荧光检测技术可应用于转移性大肠癌患者癌组织的靶向成像。

关键词：核酸适配子转移性大肠癌量子点靶向成像

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