检索结果-内蒙古大学图书馆

解剖科学进展 2022年第2期28卷 197-199,203页

作者：张瑞佳邵秀丽朱荣利张晓琳孙旋旋郝丽英封瑞中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

目的制备与纯化心肌Kv7.1钾通道IQ1基序的蛋白,为研究钾离子通道蛋白片段与钙调蛋白(calmodulin,CaM)的相互作用做准备,为明确相关心血管疾病发病机制奠定基础。方法采用基因重组技术,将IQ1基因片段插入pGEX-6p-1质粒,并将重组质粒转... 详细信息

目的制备与纯化心肌Kv7.1钾通道IQ1基序的蛋白,为研究钾离子通道蛋白片段与钙调蛋白(calmodulin,CaM)的相互作用做准备,为明确相关心血管疾病发病机制奠定基础。方法采用基因重组技术,将IQ1基因片段插入pGEX-6p-1质粒,并将重组质粒转化入大肠杆菌,使其在大肠杆菌中诱导表达IQ1蛋白,再采用酶裂解、超声破碎法提取IQ1蛋白,使用SDS-PAGE电泳确认制备蛋白的浓度与纯度,Pull-down assay方法检测蛋白的结合能力。结果本研究制备了较高浓度与纯度的心肌Kv7.1钾通道的IQ1蛋白,且在2mM的Ca;浓度下,CaM与IQ1的结合可能呈浓度依赖性,说明制备的IQ1蛋白具有很好的结合能力。结论采用基因重组技术与超声破碎方法能提取纯化心肌Kv7.1通道IQ1基序蛋白,并且浓度和结合能力均很好,可用来进一步的深入实验研究。

关键词：钾离子通道基因重组钙调蛋白 IQ基序蛋白长QT综合征

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豚鼠心室肌细胞中镁离子对L型钙通道易化与失活作用

豚鼠心室肌细胞中镁离子对L型钙通道易化与失活作用

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中国生理学会张锡钧基金会第十三届全国青年优秀生理学学术论文交流及评奖会议、中国生理学会第十一届全国青年生理学工作者学术会议

作者：赵美眯李卓郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室

本实验拟研究细胞内镁离子对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的调节机制。采用膜片钳单通道记录模式,记录不同细胞内镁离子浓度(intracellular Mgconcentration,[Mg])下,L型钙通道的单通道电流。结果发现,细胞内存在1.4 uM钙调蛋白（calmodulin... 详细信息

本实验拟研究细胞内镁离子对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的调节机制。采用膜片钳单通道记录模式,记录不同细胞内镁离子浓度(intracellular Mgconcentration,[Mg])下,L型钙通道的单通道电流。结果发现,细胞内存在1.4 uM钙调蛋白（calmodulin,CaM）和3 mM ATP的情况下,当游离[Mg]为0,10,10,10,10,和10M时,钙通道活性分别恢复至细胞贴附模式的44%,117%,202%,181%,147%和20%,呈现"钟形"的浓度依赖性曲线。并且

关键词：钙通道心室肌细胞镁离子失活作用

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Ca2+/CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对CaM与心肌Cav1.2钙通道结合作用的影响

Ca2+/CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)对CaM与心肌Cav1.2钙通道结合...

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：王红梅封瑞邵冬雪孙雪菲孙威刘书源赵舞阳雷明毛楠胡慧媛赵美眯郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室

目的:研究Ca MKⅡ(calmodulin-dependent protein kinase)磷酸化作用对calmodulin(Ca M)及其钙离子结合位点突变体Ca M12、Ca M34和Ca M1234与心肌Ca V1.2钙通道C末端(CT1)结合作用的影响。方法:通过质粒转化筛选获得转化成功的BL21菌... 详细信息

目的:研究Ca MKⅡ(calmodulin-dependent protein kinase)磷酸化作用对calmodulin(Ca M)及其钙离子结合位点突变体Ca M12、Ca M34和Ca M1234与心肌Ca V1.2钙通道C末端(CT1)结合作用的影响。方法:通过质粒转化筛选获得转化成功的BL21菌株。进一步采用IPTG诱导GST融合蛋白表达,利用能识别并结合GST的GS-4B beads进行CT1和Ca M及其突变体Ca M12、Ca M34和Ca M1234融合蛋白的分离纯化。采用GST pull-down assay实验方法,检测不同[Ca2+]存在的情况下,Ca MKⅡ磷酸化对Ca M及其突变体与心肌CT1钙通道片段结合作用的影响。结果:本研究实验结果表明,在[Ca2+]为100 n M(静息钙离子浓度)时Ca M在0.7、1.4、2.1、3.5μM浓度时,其与Ca MKⅡ处理的CT1的结合作用显著升高(p﹤0.05),并以在较低Ca M浓度下磷酸化所致的差别最明显。在[Ca2+]为2m M时Ca M在0.7、1.4、2.1、3.5μM浓度时,其与Ca MKⅡ处理的CT1的结合作用显著升高(p﹤0.05),并以Ca M在较高浓度下磷酸化所致的差别明显。Ca M钙结合位点突变体Ca M12、Ca M34、Ca M1234与CT1的结合主要也受磷酸化和自身浓度的影响。结论:Ca MKⅡ介导的磷酸化作用可增加Ca M及其突变体与心肌Ca V1.2钙通道C末端片段CT1的结合作用,并且这种促进作用同时受[Ca2+]和Ca M及其突变体本身浓度的影响。

关键词：钙通道 Cav1.2 calmodulin 钙调蛋白激酶

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生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：封瑞印丹丹胡慧媛高青华孙瑞康丹阳张勇张正孙宇王红梅郭凤赵美眯郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室

目的检测生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及Ca MKⅡ蛋白表达的变化,探讨雌激素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与Ca MKⅡ信号通路的关系。方法实验共分7组,雄性大鼠3组,分别Control组、Male组以及Male+E2组,雌性大鼠4组,... 详细信息

目的检测生理周期对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的影响及Ca MKⅡ蛋白表达的变化,探讨雌激素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及与Ca MKⅡ信号通路的关系。方法实验共分7组,雄性大鼠3组,分别Control组、Male组以及Male+E2组,雌性大鼠4组,分为PE组(动情前期,动情期)、PE+E2组、MD组(动情后期,间期)和MD+E2组。观察各组心率(HR),测定灌流液中LDH和CK漏出量。Western blot方法检测不同生理周期Ca MKⅡ蛋白表达的改变。结果实验结果表明,与MD组比较,MD+E2组再灌注期间的HR明显升高(P<0.05),CK的漏出量减少(P<0.05),LDH的漏出量显著减少(P<0.05),与PE组比较,PE+E2组再灌注期间的HR、LDH、CK的漏出量均无明显改变。与对照组比较,MD组心肌梗死面积最大,MD+E2梗死面积下降(P<0.05)。与对照组比较,MD组P-Ca MKⅡ蛋白水平升高(P<0.05),而总Ca MKⅡ蛋白表达不变,P-Ca MKⅡ与Ca MKⅡ的比值增高;与MD组比较,MD+E2组的P-Ca MKⅡ蛋白表达下降(P<0.05)。结论雌激素对心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能与Ca MKⅡ信号传导通路相关。

关键词：缺血再灌注损伤生理周期雌激素信号通路

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网络PBL在药物毒理学教学中的应用及实践体会

网络PBL在药物毒理学教学中的应用及实践体会

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第八次全国药理学教学学术会议

作者：郝丽英郭凤封瑞胡慧媛赵金生赵美眯孙雪菲蔡际群中国医科大学药学院药物毒理学教研室

药物毒理学是临床药学专业的特色课程之一,其知识贯穿制药、药物安全性评价,新药审批,临床合理用药及不良反应监测的全过程。通过药物毒理学教学可以培养学生的专业意识及责任感。然而,药物毒理学涉及知识面广,内容繁琐、学生普遍反应... 详细信息

药物毒理学是临床药学专业的特色课程之一,其知识贯穿制药、药物安全性评价,新药审批,临床合理用药及不良反应监测的全过程。通过药物毒理学教学可以培养学生的专业意识及责任感。然而,药物毒理学涉及知识面广,内容繁琐、学生普遍反应难学。同时,教学和学习

关键词：临床药师临床药学专业 PBL 实践体会教学中的应用

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Ca_V1.2和钙调蛋白在自发性遗传性癫痫大鼠小脑中的异常表达

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解剖科学进展 2013年第1期19卷 27-31页

作者：马丽华吕昕瞳刘雅静徐晓雪闵冬雨程晓茜杨春宇蔡际群郭凤中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110001

目的研究自发性遗传性癫痫大鼠(Tremor,TRM)小脑组织中CaV1.2与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)蛋白表达与共定位情况。方法应用Westernblot技术检测CaV1.2与CaM蛋白表达,应用免疫荧光技术定位CaV1.2与CaM蛋白的分布,应用激光共聚焦显微镜检测... 详细信息

目的研究自发性遗传性癫痫大鼠(Tremor,TRM)小脑组织中CaV1.2与钙调蛋白(Calmodulin,CaM)蛋白表达与共定位情况。方法应用Westernblot技术检测CaV1.2与CaM蛋白表达,应用免疫荧光技术定位CaV1.2与CaM蛋白的分布,应用激光共聚焦显微镜检测[Ca2+]。结果 TRM大鼠小脑内CaV1.2的蛋白表达低于正常iWistar大鼠(P<0.05),而CaM的蛋白表达高于正常Wistar大鼠(P<0.05);荧光定位显示CaV1.2与CaM共定位的阳性细胞比率较之正常组表达降低(P<0.01)。与正常的Wistar大鼠相比,急性分离的TRM大鼠小脑神经元中[Ca2+]明显增强。结论 TRM大鼠小脑内CaV1.2和CaM蛋白表达异常可能是癫痫的发病机制之一。

关键词：钙调蛋白遗传性癫痫电压门控性钙通道小脑大鼠

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CSL与CaV 1.2钙通道N末端的相互结合作用

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解剖科学进展 2020年第6期26卷 622-625,629页

作者：薛迎春张峰慧雷帅周诗晏珊严玲邵冬雪苏敬阳胡慧媛郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验... 详细信息

目的探讨钙蛋白酶抑素结构域L(CSL)与CaV1.2钙通道N末端(NT)之间的相互结合作用。方法利用I-TASSER同源建模服务器,对豚鼠CaV 1.2钙通道N末端和人源CSL蛋白进行同源建模,利用MOE软件预测CSL和NT蛋白之间的结合,并采用GST pull-down实验研究CSL和NT蛋白的结合特点。结果与MOE软件预测出CSL和NT蛋白可以结合,且在NT蛋白上存在两个结合位点;Pull-down实验进一步证实二者可以直接结合,且该结合具有CSL浓度依赖性。结论 CSL可以与NT蛋白结合,为进一步揭示CaV1.2钙通道的调节机制奠定了基础。

关键词： CaV1.2钙通道钙蛋白酶抑素 MOE GST pull-down

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豚鼠钙调蛋白2基因编码区及3'端非编码区序列分析

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解剖科学进展 2015年第1期21卷 10-13页

作者：封瑞刘彦胡慧媛郭凤赵美眯赵金生郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

目的比较分析豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,获得丰富的豚鼠CaM2基因生物遗传学信息。方法基因测序获得豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,通过genebank数据库获得不同种属CaM核苷酸序列,采用DNASTAR软件对CaM2不... 详细信息

目的比较分析豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,获得丰富的豚鼠CaM2基因生物遗传学信息。方法基因测序获得豚鼠CaM2基因编码区及3'端非编码区序列,通过genebank数据库获得不同种属CaM核苷酸序列,采用DNASTAR软件对CaM2不同部位序列进行多序列的比较分析。结果豚鼠CaM2基因编码区与人、小鼠和大鼠的同源率分别为96.7%、91.4%和90.5%,与人、小鼠、大鼠的CaMl和CaM3基因编码区序列的同源率在80%-85%之间。豚鼠CaM2基因3'端非编码区序列与人、小鼠和大鼠的同源率分别为94.2%、93.3%和90.0%,与人、小鼠、大鼠的CaM3基因3'端非编码区序列的同源率分别为26.8%、29.2%和25.9%,与CaMl的同源率在25%-63%之间。结论豚鼠CaM2基因编码区具有种属和亚型较高同源性特征,而CaM2基因3'端非编码区虽在不同种属中具有很高同源性,但在不同种属与其它亚型比对中同源性较低。

关键词：钙调蛋白豚鼠序列分析同源性

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病理性心肌肥厚中环状RNA研究的新进展

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解剖科学进展 2024年第1期30卷 109-112页

作者：周思雨举沅芷尹薇仪任欣雨张丹语赵美眯中国医科大学药学院药物毒理学教研室辽宁沈阳110122

环状RNA(circRNA)为一种共价键形成闭合环状结构的内源性非编码RNA,能吸附微小RNA、调控基因表达、调控蛋白质的生成、作为生物标志物等。病理性心肌肥厚是由心肌梗死、机械刺激、激素、细胞因子、生长因子和压力超负荷等因素引起的,其... 详细信息

环状RNA(circRNA)为一种共价键形成闭合环状结构的内源性非编码RNA,能吸附微小RNA、调控基因表达、调控蛋白质的生成、作为生物标志物等。病理性心肌肥厚是由心肌梗死、机械刺激、激素、细胞因子、生长因子和压力超负荷等因素引起的,其发病机制复杂,受多种细胞信号调控,其中包括新兴的circRNA等非编码RNA调控。某些circRNA的上调或下调可以促进或抑制病理性心肌肥厚,其作用方式主要集中于circRNA充当miRNA的内源性海绵吸附靶基因,进而影响心肌肥厚相关的信号通路蛋白。本文旨在对circRNA的生物学研究、病理性心肌肥厚的形成机制以及circRNA在病理性心肌肥厚中的研究新进展进行综述。

关键词：病理性心肌肥厚压力超负荷微小RNA 机械刺激生长因子非编码RNA 心肌梗死闭合环状

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钙/钙调蛋白激酶Ⅱ信号系统与心血管疾病

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国际病理科学与临床杂志 2011年第4期31卷 310-314页

作者：赵妍郝丽英中国医科大学药学院药物毒理学教研室沈阳110001 中国医科大学药学院药剂学教研室沈阳110001

CaMKⅡ是钙/钙调蛋白激酶(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase,CaMK)成员之一。心脏中的CaMK包括Ⅰ,Ⅱ和Ⅳ三种类型,CaMKⅡ含量最多。CaMKⅡ单体由氨基端的催化域、中间部分的调节域和羧基端的结合域组成。钙调蛋白(calmodulin,C... 详细信息

CaMKⅡ是钙/钙调蛋白激酶(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase,CaMK)成员之一。心脏中的CaMK包括Ⅰ,Ⅱ和Ⅳ三种类型,CaMKⅡ含量最多。CaMKⅡ单体由氨基端的催化域、中间部分的调节域和羧基端的结合域组成。钙调蛋白(calmodulin,CaM)与Ca2+结合后被激活,结合于CaMKⅡ调节域中的CaM结合区激活CaMKⅡ。CaMKⅡ富集于T管并靠近L-Ca2+通道,也存在于肌浆网和细胞核中。激活的CaMKⅡ通过多种途径调节细胞内Ca2+平衡,广泛参与心血管系统生理活动及病理变化的信号转导过程,与多种心血管系统疾病密切相关。目前研究认为,CaMKⅡ信号系统在心律失常、心肌肥厚、心力衰竭、缺血性心脏病和扩张性心肌病的发生和发展中起着重要作用。

关键词：钙调蛋白激酶Ⅱ 心律失常心肌肥厚心力衰竭缺血性心脏病扩张性心肌病

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