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circ_0006577在TGF-β1诱导的HK-2细胞和新生小鼠单侧输尿管梗阻中的表达

中华小儿外科杂志 2023年第4期44卷 350-355页

作者：于晓寒范旭李雪艳刘华建刘舸刘鑫杨屹中国医科大学附属盛京医院小儿泌尿外科沈阳110004

目的:探讨circ_0006577在TGF-β1诱导的HK-2细胞和新生小鼠单侧输尿管梗阻中的表达和影响,并利用生物信息学方法预测其潜在的功能。方法:使用重组蛋白TGF-β1(终质量浓度为10 ng/ml)诱导HK-2细胞作为肾纤维化细胞模型,将细胞分为对照组... 详细信息

目的:探讨circ_0006577在TGF-β1诱导的HK-2细胞和新生小鼠单侧输尿管梗阻中的表达和影响,并利用生物信息学方法预测其潜在的功能。方法:使用重组蛋白TGF-β1(终质量浓度为10 ng/ml)诱导HK-2细胞作为肾纤维化细胞模型,将细胞分为对照组、TGF-β1诱导48 h、96 h及144 h后的实验组四组,采用qRT-PCR检测各组细胞中circ_0006577的表达水平。使用新生小鼠单侧输尿管梗阻作为先天性肾积水模型,将动物分为SHAM组和UUO组两组,每组各3只,分别于术后第5天和第14天取左侧肾脏。采用qRT-PCR检测小鼠肾脏中circ_0006577的表达水平,蛋白质印迹法检测E-cadherin、α-SMA、BCL-2、BAX的表达,HE染色和MASSON染色分别用于观察组织形态学和纤维化程度。将细胞分为nc+TGF-β1和si+TGF-β1两组,构建circ_0006577的siRNA表达载体,于HK-2细胞贴壁生长达30%时加入,转染48 h后收集细胞。采用qRT-PCR检测转染后细胞中circ_0006577的表达水平,蛋白质印迹法检测E-cadherin、α-SMA、BCL-2、BAX的表达情况,应用CCK-8实验检测细胞增殖率。利用circbank和targetscan8.0数据库预测circ_0006577与RSU-1mRNA可能共同结合的microRNA。符合正态分布的计量资料以±s表示,组间比较采用独立样本t检验。结果:qRT-PCR结果表明circ_0006577分别在TGF-β1诱导48 h、96 h、144 h后的实验组中表达上调(48 h表达量为1.757±0.269,t=-3.12,P=0.035;96 h表达量为2.519±0.381,t=-5.31,P=0.006;144 h表达量为3.121±0.660,t=-4.99,P=0.008)。与同一天数SHAM组相比,新生小鼠UUO组中circ_0006577的表达在第5天和第14天时表达上调(2.805±0.109,t=-24.33,P<0.001;4.121±0.104,t=-27.71,P<0.001)。蛋白质印迹法结果表明,沉默circ_0006577后,与nc+TGF-β1组相比,si+TGF-β1组中α-SMA(表达量为0.363±0.059)、BAX(表达量为0.394±0.114)的表达减少,而E-cadherin(表达量为3.307±1.045)、BCL-2(表达量为4.051±0.705)的表达水平上调,且差异均具有统计学意义(均P<0.05)。通过CCK-8分析测定,沉默circ_0006577在转染48 h后抑制细胞增殖率(相对吸光度值为0.093±0.019比0.179±0.058),差异具有统计学意义(t=2.78,P=0.032)。根据circbank和targetscan8.0数据库预测到circ_0006577与RSU-1mRNA可能共同结合的10个microRNA。结论:circ_0006577参与先天性梗阻性肾病的发生发展,沉默circ_0006577可改善TGF-β1诱导的HK-2细胞纤维化和凋亡,这或可成为治疗先天性梗阻性肾病一种新的思路和方法。

关键词：输尿管梗阻干扰小RNA 纤维化

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儿童肾盂输尿管连接处梗阻手术并发症的认识与思考

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临床小儿外科杂志 2024年第4期23卷 305-309页

作者：刘鑫杨屹中国医科大学附属盛京医院小儿泌尿外科沈阳110004

肾盂输尿管连接处梗阻是儿童最常见的先天性上尿路梗阻,离断式肾盂输尿管成形术是治疗该病的金标准,手术成功率达90%以上。然而如何避免手术并发症(特别是严重并发症)仍然充满了挑战。随着外科技术的不断创新,外科医师应在更精准把握手... 详细信息

肾盂输尿管连接处梗阻是儿童最常见的先天性上尿路梗阻,离断式肾盂输尿管成形术是治疗该病的金标准,手术成功率达90%以上。然而如何避免手术并发症(特别是严重并发症)仍然充满了挑战。随着外科技术的不断创新,外科医师应在更精准把握手术指征、全面认识和正确处理手术并发症上提高认识,从而使患儿从手术治疗中最大化获益。本文阐述肾盂输尿管连接处梗阻患儿肾盂输尿管成形术后并发症的类型、病因、预防和处理,并对相关危险因素提出思考。

关键词：肾盂输尿管连接处梗阻手术中并发症手术后并发症诊断治疗儿童

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经皮经肝胆道镜技术的发展及其治疗胆石症的特点比较

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临床肝胆病杂志 2024年第5期40卷 1062-1067页

作者：王晟宇吴硕东中国医科大学附属盛京医院第二普通外科沈阳110004

肝内胆管结石是胆道系统疾病的一种类型,其病情复杂、易复发,传统手术治疗并发症多且对手术标准要求较高。经皮经肝胆道镜技术(PTCS)取石高效且应用广泛,但同时也存在其他治疗胆石症的医疗技术。本文主要探讨经皮经肝胆道镜技术自身发... 详细信息

肝内胆管结石是胆道系统疾病的一种类型,其病情复杂、易复发,传统手术治疗并发症多且对手术标准要求较高。经皮经肝胆道镜技术(PTCS)取石高效且应用广泛,但同时也存在其他治疗胆石症的医疗技术。本文主要探讨经皮经肝胆道镜技术自身发展的不断改变以及PTCS与其他胆石症治疗技术的效果比较。

关键词：胆石内窥镜检查治疗学

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盐酸特拉唑嗪片联合呋塞米注射液治疗ESWL后患者的病例分析

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中国临床药理学杂志 2024年第10期40卷 1517-1519页

作者：任晖英焦海鑫李大鹏中国医科大学附属盛京医院第一泌尿外科辽宁电力中心医院泌尿外科

体外冲击波碎石为输尿管上段结石重要的治疗方法，治疗过程中会发生排出的结石碎块刺激输尿管，使其黏膜水肿，导致结石碎块无法排出的情况。碎石后药物的应用是辅助结石排出的关键。本文对1例输尿管上段结石碎石治疗患者进行报道，分... 详细信息

体外冲击波碎石为输尿管上段结石重要的治疗方法，治疗过程中会发生排出的结石碎块刺激输尿管，使其黏膜水肿，导致结石碎块无法排出的情况。碎石后药物的应用是辅助结石排出的关键。本文对1例输尿管上段结石碎石治疗患者进行报道，分析实施盐酸特拉唑嗪片联合呋塞米注射液治疗的过程，讨论碎石后药物辅助排石效果。在碎石治疗效果不理想，结石无法完全排出时，临床药师协助临床医师在输尿管上段结石术后应用盐酸特拉唑嗪片联合呋塞米注射液治疗，缓解输尿管痉挛情况，减轻疼痛，促进结石碎块顺利排出。

关键词：盐酸特拉唑嗪片呋塞米注射液输尿管上段结石手术

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经鼻胆管引流管注水超声检查:一种检测内镜下胆管取石术后残留结石的新方法

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中华消化杂志 2024年第1期44卷 44-49页

作者：吴晓东唐少珊吴硕东中国医科大学附属盛京医院第二普通外科沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院超声科沈阳110004

目的观察经内镜鼻胆管引流管注射0.9%氯化钠溶液后的腹部超声检查(以下简称注水超声)对内镜逆行胰胆管造影(ERCP)取石后胆管残余结石的检出能力。方法纳入2015年1月至2023年6月在中国医科大学附属盛京医院第二普通外科诊断为胆总管结石... 详细信息

目的观察经内镜鼻胆管引流管注射0.9%氯化钠溶液后的腹部超声检查(以下简称注水超声)对内镜逆行胰胆管造影(ERCP)取石后胆管残余结石的检出能力。方法纳入2015年1月至2023年6月在中国医科大学附属盛京医院第二普通外科诊断为胆总管结石并经ERCP取石同时留置内镜鼻胆管引流管的342例患者, 所有患者在接受ERCP取石术后, 分别行胆道造影、常规腹部超声和注水超声检查。以二次取石手术取出结石为真阳性, 比较胆道造影、常规腹部超声和注水超声检查对胆管残余结石的检出能力。统计学方法采用卡方检验。结果胆道造影检查结果提示35例患者怀疑存在胆管残留结石, 其中28例被证实为真阳性, 灵敏度为50.9%, 特异度为97.6%;常规腹部超声结果提示15例患者怀疑存在胆管残留结石, 其中13例被证实为真阳性, 灵敏度为23.6%, 特异度为99.3%;注水超声结果提示56例患者怀疑存在胆道残留结石, 其中50例被证实为真阳性, 灵敏度为90.9%, 特异度为97.9%。注水超声检查的真阳性患者数分别多于胆道造影和常规腹部超声检查, 灵敏度分别高于胆道造影和常规腹部超声检查, 差异有统计学意义(χ^(2)=21.33、50.85、38.77、92.53, 均P<0.001);注水超声检查的特异度与胆道造影和常规腹部超声检查比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论注水超声检查可有效提升ERCP后残余胆管结石的检出率。

关键词： ERCP术后残余结石内镜鼻胆管引流管腹部超声

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术前γ-谷氨酰转移酶与白蛋白比值对BCLC分期0~A期肝细胞癌患者微波消融术后预后的影响

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中华肝胆外科杂志 2025年第1期31卷 17-22页

作者：刘晓琳徐锋孔凡创黄彦华周春晖陈静王晓光嘉兴市第二医院肝胆外科嘉兴314000 中国医科大学附属盛京医院肝胆脾外科沈阳110004

目的:探索术前γ-谷氨酰转移酶与白蛋白比值(GAR)对巴塞罗那肝癌临床(BCLC)分期0~A期肝细胞癌患者微波消融术后预后的影响。方法:回顾性分析2011年1月至2018年12月于嘉兴市第二医院和中国医科大学附属盛京医院接受微波消融治疗的201例B... 详细信息

目的:探索术前γ-谷氨酰转移酶与白蛋白比值(GAR)对巴塞罗那肝癌临床(BCLC)分期0~A期肝细胞癌患者微波消融术后预后的影响。方法:回顾性分析2011年1月至2018年12月于嘉兴市第二医院和中国医科大学附属盛京医院接受微波消融治疗的201例BCLC分期0~A期肝细胞癌患者临床资料,其中男性152例,女性49例,年龄(57.5±9.6)岁。采用X-tile软件将患者划分为低GAR组( n=84,GAR<0.9)和高GAR组( n=117,GAR≥0.9)。Kaplan-Meier法进行生存分析,生存率比较采用log-rank检验。采用单因素和多因素Cox回归分析GAR与患者预后的关系。结果:低GAR组和高GAR组术后1、3、5年累积生存率分别为98.7%、93.8%、78.5%和97.2%、87.1%、70.2%,前者术后累积生存率优于后者,差异有统计学意义( χ^(2)=11.89, P=0.001)。低GAR组和高GAR组术后1、3、5年的无复发生存率比较,差异无统计学意义( χ^(2)=1.70 , P=0.192)。多因素Cox回归分析显示,高GAR( HR=2.723,95% CI:1.508~4.914, P=0.001)是BCLC分期0~A期肝细胞癌患者微波消融术后总体生存的危险因素。男性( HR=1.959,95% CI:1.127~3.305, P=0.017)和肿瘤长径≥2 cm( HR=1.547,95% CI:1.008~2.373, P=0.046)为BCLC分期0~A期肝细胞癌患者微波消融术后复发的危险因素。单因素Cox回归分析GAR≥0.9与患者术后复发无关( HR=1.315,95% CI:0.869~1.989, P=0.195)。结论:术前高GAR(≥0.9)的肝细胞癌患者微波消融后生存预后更差,高GAR是BCLC分期0~A期肝细胞癌患者微波消融术后总体生存的危险因素。

关键词：癌,肝细胞 γ-谷氨酰转移酶与白蛋白比值消融技术预后

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输尿管镜碎石术后尿路感染病原学特征及与血清eNOS、Ghrelin水平关系分析

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中国病原生物学杂志 2024年第4期19卷 450-453,458页

作者：齐艳静金鹏中国医科大学附属盛京医院第三泌尿外科辽宁沈阳110020

目的探究输尿管结石患者血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、生长激素释放肽(Ghrelin)水平与输尿管镜碎石术后尿路感染的关系及病原学分析。方法选取2020年5月-2023年4月在本院收治的80例输尿管结石患者作为研究对象,根据输尿管结石患者输... 详细信息

目的探究输尿管结石患者血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、生长激素释放肽(Ghrelin)水平与输尿管镜碎石术后尿路感染的关系及病原学分析。方法选取2020年5月-2023年4月在本院收治的80例输尿管结石患者作为研究对象,根据输尿管结石患者输尿管镜碎石术后是否发生尿路感染,分为感染组(60例)和未感染组(20例),选取同期在我院收治普通泌尿系统疾病的80例患者为对照组,普通泌尿系感染(58例)未感染(22例),并收集尿路感染患者中段尿液进行病原学分析,比较各组血清eNOS、Ghrelin水平。分析尿路感染患者病原学及构成比。受试者工作特征(ROC)曲线分析血清eNOS、Ghrelin水平预测输尿管结石患者输尿管镜碎石术后尿路感染的诊断价值。多因素Logistic回归分析影响输尿管结石患者输尿管镜碎石术后尿路感染的因素。结果尿路感染患者血清eNOS、Ghrelin水平比未感染患者高,差异有统计学意义(P<0.05)。结石组患者血清eNOS、Ghrelin水平比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。尿路感染患者结石直径比未感染患者大,差异有统计学意义(P<0.05)。培养出20株病原菌,其中革兰阴性菌16株(80%),革兰阳性菌4株(20%)。ROC曲线分析显示,血清eNOS、Ghrelin水平评估输尿管结石患者输尿管镜碎石术后尿路感染的曲线下面积(AUC)分别是0.817(95%CI:0.711~0.923)、0.823(95%CI:0.716~0.929),二者联合检测的AUC为0.916(95%CI:0.857~0.975)。Logistic分析显示,eNOS、Ghrelin是输尿管结石患者输尿管镜碎石术后发生尿路感染的影响因素(P<0.05)。结论输尿管镜碎石术后尿路感染患者血清eNOS、Ghrelin水平升高,二者联合对评估输尿管结石患者输尿管镜碎石术后尿路感染有一定的预测价值。

关键词：输尿管结石输尿管镜碎石术尿路感染内皮型一氧化氮合酶生长激素释放肽病原学分析

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荧光导航技术在防止胆道损伤、发现胆漏中的作用

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中华医学杂志 2023年第16期103卷 1242-1244页

作者：王潇宁吴硕东韩金岩邓天麟汪聪王瀚中国医科大学附属盛京医院第二普通外科沈阳110004

本文探讨了腹腔镜胆囊切除术(LC)以及腹腔镜胆总管探查术(LCBDE)应用吲哚菁绿(ICG)荧光胆道造影技术在防止胆道损伤(BDI)和发现胆漏中的临床价值。选取2020年6月至2022年9月于中国医科大学附属盛京医院第二普通外科收治的行荧光导航LC以... 详细信息

本文探讨了腹腔镜胆囊切除术(LC)以及腹腔镜胆总管探查术(LCBDE)应用吲哚菁绿(ICG)荧光胆道造影技术在防止胆道损伤(BDI)和发现胆漏中的临床价值。选取2020年6月至2022年9月于中国医科大学附属盛京医院第二普通外科收治的行荧光导航LC以及LCBDE的患者300例为研究对象,对典型病例、操作过程及治疗结果进行观察分析。其中男114例,女186例,年龄(50.7±14.0)岁,体质指数(BMI)(23.6±1.6)kg/m^(2)。300例荧光导航手术均成功完成,其中5例患者施行荧光导航LCBDE并给予一期缝合。研究结果发现应用ICG荧光胆道造影技术可有效防止BDI、避免胆汁渗漏的发生,同时有理由提出假设:当怀疑胆汁渗漏进行二次手术时,可使用ICG进行快速定位以及术毕前检查,预防胆漏的再次发生。

关键词：胆管吲哚菁绿胆道造影术腹腔镜

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经皮和腹腔镜微波消融治疗BCLC分期0~A期肝细胞癌患者的预后比较和对预后的影响

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中华肝胆外科杂志 2024年第9期30卷 646-651页

作者：刘晓琳徐锋孔凡创黄彦华周春晖陈静嘉兴市第二医院肝胆外科嘉兴314000 中国医科大学附属盛京医院肝胆脾外科沈阳110004

目的比较巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期0~A期肝细胞癌患者经皮与腹腔镜微波消融的预后以及两种治疗对预后的影响。方法回顾分析2011年1月至2018年12月于嘉兴市第二医院和中国医科大学附属盛京医院接受微波消融治疗的198例BCLC分期0~A期肝... 详细信息

目的比较巴塞罗那临床肝癌(BCLC)分期0~A期肝细胞癌患者经皮与腹腔镜微波消融的预后以及两种治疗对预后的影响。方法回顾分析2011年1月至2018年12月于嘉兴市第二医院和中国医科大学附属盛京医院接受微波消融治疗的198例BCLC分期0~A期肝细胞癌患者临床资料,其中男性149例,女性49例,年龄(57.4±9.6)岁。依据治疗方式不同198例患者分为经皮微波消融组(n=133)和腹腔镜微波消融组(n=65)。Kaplan-Meier法计算生存率,生存率比较采用log-rank检验。采用单因素和多因素Cox回归分析经皮和腹腔镜微波消融对预后的影响。结果经皮微波消融组和腹腔镜微波消融组的中位总生存期分别为54个月和77个月,术后1、3、5年累积生存率分别为95.6%、67.3%、47.4%和100.0%、79.9%、60.4%,后者术后累积生存率优于前者,差异有统计学意义(χ^(2)=4.53,P=0.033)。经皮微波消融组和腹腔镜微波消融组中位无复发生存期分别为27个月和52个月,术后1、3、5年的无复发生存率分别为67.4%、41.1%、32.8%和81.5%、58.1%、46.7%,后者术后无复发生存率优于前者,差异有统计学意义(χ^(2)=7.20,P=0.007)。多因素Cox回归分析,与腹腔镜微波消融比较,经皮微波消融的BCLC分期0~A期肝细胞癌患者死亡风险增加(HR=2.475,95%CI:1.423~4.305,P=0.001),复发风险增加(HR=1.996,95%CI:1.255~3.176,P=0.004)。结论BCLC分期0~A期的肝细胞癌患者腹腔镜微波消融治疗预后优于经皮微波消融,经皮微波消融是BCLC分期0~A期的肝细胞癌患者预后危险因素。

关键词：癌,肝细胞消融技术腹腔镜经皮治疗预后

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大鼠去分化脂肪细胞的天花板培养法和滤网培养法比较

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临床小儿外科杂志 2023年第1期22卷 72-78页

作者：陈晨刘鑫刘舸范旭杨屹中国医科大学附属盛京医院小儿泌尿外科沈阳110004

目的探讨大鼠去分化脂肪(dedifferentiated fat,DFAT)细胞天花板培养法和滤网培养法的差异,为DFAT细胞的原代培养提供研究基础。方法从8只4~6周SD(Sprague Dawley)大鼠腹股沟脂肪垫中分离出成熟脂肪细胞,应用天花板培养法和滤网培养法... 详细信息

目的探讨大鼠去分化脂肪(dedifferentiated fat,DFAT)细胞天花板培养法和滤网培养法的差异,为DFAT细胞的原代培养提供研究基础。方法从8只4~6周SD(Sprague Dawley)大鼠腹股沟脂肪垫中分离出成熟脂肪细胞,应用天花板培养法和滤网培养法体外去分化培养获得DFAT细胞,比较DFAT细胞形态、生长至首次传代需要的时间和完全培养基量,并通过流式细胞分析和细胞免疫荧光比较DFAT细胞纯度和体外诱导分化为平滑肌细胞的潜能。结果两种方法培养的DFAT细胞均呈成纤维样、梭形、峰谷样排列。天花板培养法和滤网培养法培养DFAT细胞生长至首次传代需要的时间分别为(16.00±1.41)d和(16.25±0.96)d,差异无统计学意义(P>0.05)。两种方法培养的DFAT细胞表面抗原表型均为CD29^(+)CD90^(+)CD31^(-)CD45^(-),天花板培养法培养的DFAT细胞流式细胞分析结果为CD29^(+)(97.63±3.15)%、CD90^(+)(98.63±0.83)%、CD31^(+)(0.11±0.12)%、CD45^(+)(0.18±0.11)%;滤网培养法培养的DFAT细胞流式细胞分析结果为CD29^(+)(96.93±3.61)%、CD90^(+)(98.65±0.84)%、CD31^(+)(0.16±0.13)%、CD45^(+)(0.16±0.10)%,差异均无统计学意义(P>0.05)。天花板培养法和滤网培养法培养的DFAT细胞在体外经诱导后均可分化为平滑肌细胞,表达α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,αSMA)和平滑肌肌球蛋白重链(smooth muscle myosin heavy chain,SMMHC),αSMA阳性细胞率分别为(73.67±8.04)%、(73.56±8.44)%,差异无统计学意义(P>0.05)。天花板培养法培养DFAT细胞生长至首次传代较滤网培养法需要更多的完全培养基,分别为93.75(90.00,93.75)mL、48.50(48.50,48.50)mL,差异有统计学意义(P<0.05)。结论天花板培养法和滤网培养法培养DFAT细胞在时间成本、细胞形态、细胞纯度及体外诱导分化为平滑肌细胞的潜能方面均无显著差异,但从经济成本考虑,滤网培养法稍有优势。

关键词：细胞培养技术去分化脂肪细胞原代细胞培养大鼠

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