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中华皮肤科杂志 2009年第5期42卷 305-307页

作者：祝立丽高兴华李晓东马远平王雅坤王晓琴齐瑞群陈洪铎中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室沈阳110001

目的探讨不同温热条件对HPV感染皮损中E6／E7基因表达的影响。方法采用PCR法确定6例尖锐湿疣标本HPV型别。利用37℃，42℃，45qc不同的温热条件处理置于培养液中的离体尖锐湿疣皮损，采用实时定量PCR法检测HPV-6／11型早期基因E6／E7mRN... 详细信息

目的探讨不同温热条件对HPV感染皮损中E6／E7基因表达的影响。方法采用PCR法确定6例尖锐湿疣标本HPV型别。利用37℃，42℃，45qc不同的温热条件处理置于培养液中的离体尖锐湿疣皮损，采用实时定量PCR法检测HPV-6／11型早期基因E6／E7mRNA的表达水平。结果6例标本中，各有1例分别感染HPV-6、HPV-11，4例同时感染HPV-6和HPV-11。E6、E7 mRNA的表达水平均随温度升高而逐渐减少。HPV-6 E6 mRNA的相对表达量分别为37℃（1．00±0．00），42℃（0．61±0．17），45℃（0．27±0．15）；HPV-6 E7 mRNA的相对表达量分别为37℃（1．00±0．00），42℃（0．56±0．21），45℃（0．16±0．11）；HPV-11 E6 mRNA的相对表达量分别为37℃（1．00±0．00），42℃（0．60±0．22），45℃（0．16±0．08）；HPV-11 E7 mRNA相对表达量分别为37℃（1．00±0．00），42℃（0．55±0．15），45℃（0．24±0．06）。组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论温热对HPV-6／11型E6和E7基因表达的抑制作用可能是感染消退的机制之一。

关键词：人乳头瘤病毒6 人乳头瘤病毒11 发热乳头瘤病毒E7蛋白质类

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黄芩素联合阿维A酸对皮肤鳞状细胞癌细胞SCL-12凋亡及caspases的影响

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中国免疫学杂志 2014年第3期30卷 353-356页

作者：刘梅曲乐尹新江朱红金光玉陈洪铎何春涤中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室沈阳110001

目的:探讨黄芩素联合阿维A酸对人皮肤鳞状细胞癌细胞SCL-12的凋亡诱导作用及对caspases的影响。方法:以体外培养的SCL-12细胞为研究对象,采用酶联免疫分析法(ELISA)检测凋亡的诱导情况;吖啶橙染色证实凋亡的发生;流式细胞仪检测细胞周期... 详细信息

目的:探讨黄芩素联合阿维A酸对人皮肤鳞状细胞癌细胞SCL-12的凋亡诱导作用及对caspases的影响。方法:以体外培养的SCL-12细胞为研究对象,采用酶联免疫分析法(ELISA)检测凋亡的诱导情况;吖啶橙染色证实凋亡的发生;流式细胞仪检测细胞周期;Western印迹分析caspase-8,caspase-9和caspase-3表达。结果:黄芩素、阿维A酸单独及联合应用均能不同程度的诱导SCL-12细胞凋亡及阻滞细胞周期的进程,将细胞阻滞于G1期;活化caspase-8,caspase-9和caspase-3;其中黄芩素联合阿维A酸作用最为显著,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论:黄芩素、阿维A酸单独及联合应用均能诱导SCL-12细胞凋亡,两种药物的联合应用对SCL-12细胞具有协同效应,这一效应可能是通过外源性死亡受体途径和内源性线粒体途径共同介导执行。

关键词：黄芩素阿维A酸癌,鳞状细胞细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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新型强脉冲光治疗酒渣鼻的疗效观察

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中华皮肤科杂志 2009年第3期42卷 171-174页

作者：刘梅李远宏何春涤高兴华陈洪铎中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室沈阳110001

目的观察新型强脉冲光（IPL）治疗酒渣鼻的临床疗效。方法应用IPL治疗仪（Lumenis One^TM，美国科医人公司）治疗85例酒渣鼻患者，其中红斑毛细血管扩张型32例，丘疹脓疱型53例。每3周治疗1次，4次为1疗程。每次治疗前皮损照相以评估治... 详细信息

目的观察新型强脉冲光（IPL）治疗酒渣鼻的临床疗效。方法应用IPL治疗仪（Lumenis One^TM，美国科医人公司）治疗85例酒渣鼻患者，其中红斑毛细血管扩张型32例，丘疹脓疱型53例。每3周治疗1次，4次为1疗程。每次治疗前皮损照相以评估治疗效果。测定患者治疗过程中及治疗后6个月皮肤黑素指数、红斑指数、皮脂分泌、角质层含水量的变化情况。结果治疗结束时及治疗后6个月，有效率分别为81．18％和78．82％。治疗结束时，红斑毛细血管扩张型和丘疹脓疱型酒渣鼻有效率分别为75％和84．91％。治疗结束时与治疗前比较，患者面部黑素指数、红斑指数及皮脂分泌显著降低，而角质层含水量无显著变化。随访6个月，各客观评价指标均保持在治疗结束时水平。无患者出现炎症后色素沉着及色素减退。结论新型IPL治疗酒渣鼻疗效显著、副作用小。

关键词：强脉冲光痤疮,红斑治疗结果

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三种黄芩提取物诱导人皮肤鳞状细胞癌SCL-1细胞凋亡的研究

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中华皮肤科杂志 2014年第9期47卷 650-653页

作者：刘梅周春林朱红金光玉陈洪铎何春涤中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室沈阳110001

目的探讨黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素3种黄芩提取物对人皮肤鳞状细胞癌细胞株SCL-1细胞凋亡的影响.方法将培养的SCL-1细胞分别用浓度为12.5、25、50、75、100μmol/L的3种黄芩提取物作用12、24、48 h后,噻唑蓝（MTT）法检测上述药物对SC... 详细信息

目的探讨黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素3种黄芩提取物对人皮肤鳞状细胞癌细胞株SCL-1细胞凋亡的影响.方法将培养的SCL-1细胞分别用浓度为12.5、25、50、75、100μmol/L的3种黄芩提取物作用12、24、48 h后,噻唑蓝（MTT）法检测上述药物对SCL-1细胞的生长抑制作用.膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙锭双染法和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测SCL-1细胞凋亡率.流式细胞仪检测细胞周期.应用线性内差法,测定半数抑制浓度（IC50）;两样本均数比较用Student t检验;多样本均数比较采用方差分析,各样本之间多重比较采用SNK-q检验.结果 3种黄芩提取物均可抑制SCL-1细胞的生长,并具有浓度及时间依赖性（均P＜0.01）;在相同的药物浓度及作用时间下,黄芩素对SCL-1细胞生长抑制作用最强,黄芩苷抑制作用最弱,汉黄芩素抑制作用介于二者之间,差异具有统计学意义（均P＜ 0.01）.12.5 μmol/L黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素分别作用SCL-1细胞48 h均可诱导SCL-1细胞凋亡并阻滞细胞周期的进程,其中G1期细胞比例分别为56.37％±177;2.41％、74.23％±177;2.02％、64.15％±177;1.87％,早期凋亡率分别为8.09％±177;1.02％、24.13％±177;0.76％、14.45％±177;1.57％,与对照组（45.04％±177;1.93％,4.12％±177;0.29％）比较,差异均有统计学意义（F=83.29,186.37,均P＜0.01）;其中黄芩素作用最强,其次为汉黄芩素,黄芩苷作用最弱.结论黄芩能抑制SCL-1细胞生长并诱导其凋亡,为皮肤鳞状细胞癌的中药治疗开拓新的思路.

关键词：黄芩黄芩苷黄芩素汉黄芩素癌鳞状细胞细胞凋亡

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Bcl-2对皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1细胞Fas凋亡通路调控的研究

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中华皮肤科杂志 2007年第7期40卷 424-427页

作者：金鑫宋智琦王雅坤肖汀陈光姜奕陈洪铎何春涤中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室(中国医科大学) 沈阳110001

目的建立稳定转染bcl-2的鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系,研究人皮肤鳞癌细胞凋亡的相关通路。方法应用脂质体介导的基因转染法.将含有bcl-2 cDNA的逆转录病毒表达载体pIRESneo质粒导入皮肤鳞癌细胞系SCL-1细胞中.并以空质粒作为对照。经过G-41... 详细信息

目的建立稳定转染bcl-2的鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系,研究人皮肤鳞癌细胞凋亡的相关通路。方法应用脂质体介导的基因转染法.将含有bcl-2 cDNA的逆转录病毒表达载体pIRESneo质粒导入皮肤鳞癌细胞系SCL-1细胞中.并以空质粒作为对照。经过G-418筛选后获得转入目的基因的细胞克隆,细胞扩大培养后用细胞免疫荧光染色法、RT-PCR和免疫蛋白印迹检测bcl-2的表达情况。然后用C_2-ceramide和抗Fas单克隆抗体诱导细胞株凋亡,利用ELISA法检测可溶性DNA-组蛋白复合物,分析其凋亡的差异。结果转染了pIRESneo-bcl-2的SCL-1细胞bcl-2蛋白和mRNA表达阳性,而转染了pIRESneo空载体的SCL-1细胞为阴性。不同浓度的C_2-ceramide对SCL-1/bcl-2凋亡的诱导差异均无统计学意义,而对SCL-1/vector诱导的凋亡差异均有统计学意义。抗Fas单克隆抗体对SCL-1/bcl-2和SCL-1/vector诱导的凋亡.差异均有统计学意义,P<0.01。结论用基因转染法成功地建立了稳定高表达bcl-2蛋白的SCL-1细胞系,C_2-ceramide诱导的SCL-1凋亡基本可以被bcl-2阻滞,而Fas所诱导的调亡仅部分被阻滞,即SCL-1细胞系在被阻断了线粒体途径后,还可以经由死亡受体通路进行凋亡。

关键词：细胞凋亡癌鳞状细胞抗原 CD95 原癌基因蛋白质c—bcl-2 Ceramide

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新型强脉冲光治疗日光性雀斑样痣的体会

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中华皮肤科杂志 2008年第8期41卷 535-538页

作者：刘梅李远宏吴严何春涤高兴华陈洪铎中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室(中国医科大学)沈阳 110001

目的观察新型强脉冲光（intense pulsed light、IPL）治疗日光性雀斑样痣的临床疗效方法应用新型IPL治疗173例日比性雀斑样痣患者，其中小斑型（皮损直径≤1cm）113例，大斑型（皮损血径〉1cm）21例，小斑型＋大斑型（混合型）39例，每... 详细信息

目的观察新型强脉冲光（intense pulsed light、IPL）治疗日光性雀斑样痣的临床疗效方法应用新型IPL治疗173例日比性雀斑样痣患者，其中小斑型（皮损直径≤1cm）113例，大斑型（皮损血径〉1cm）21例，小斑型＋大斑型（混合型）39例，每3周治疗1次，4次为1疗程，每次治疗前皮损照相以评估治疗效果．采用5级分类法来统计改善率情况，同时评定医生和患者的主观满意程度，结果应用新型IPL治疗4次后，总有效率为92．49％（160例），其中74例（42．77％）日光性雀斑样痣临床改蚜率达76％～100％小斑型、大斑型、混合型总有效率分别为94．69％（107例）、85．71％（18例）、89．74％（35例），各型间总有效率差异无统计学意义（P值均〉0．05）；超过57例（50％）小斑型患者达到76％～100％临床改善率，173例患者中，医生满意率为95．38％（165例），患者满意牢为91．91％（159例），两者差异无统计学意义（F=1．75，P〉0．05），结论新型IPL治疗日光性雀斑样痣疗效显著。

关键词：雀斑样痣强脉冲光治疗结果

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皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌856例回顾性分析

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中国医科大学学报 2013年第12期42卷 1099-1101页

作者：刘梅朱红尹新江何春涤中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室沈阳110001

目的总结皮肤基底细胞癌和皮肤鳞状细胞癌的发病特点,为进一步提高皮肤恶性肿瘤的临床诊疗水平提供依据方法回顾性分析我院皮肤科自1980年1月至2009年12月经病理确诊的856例皮肤基底细胞癌和皮肤鳞状细胞癌的临床资料结果 494例皮肤基... 详细信息

目的总结皮肤基底细胞癌和皮肤鳞状细胞癌的发病特点,为进一步提高皮肤恶性肿瘤的临床诊疗水平提供依据方法回顾性分析我院皮肤科自1980年1月至2009年12月经病理确诊的856例皮肤基底细胞癌和皮肤鳞状细胞癌的临床资料结果 494例皮肤基底细胞癌患者中,男260例,女234例;平均(60.88±21.32)岁,≥50岁者占83.00%;肿瘤个数为1个者420例(85.02%);发病部位位于光暴露部位的肿瘤数为543个(91.57%)。362例皮肤鳞癌患者中,男217例,女145例;平均(62.96±27.86)岁,≥50岁者占87.85%;肿瘤个数为1个者340例(93.92%);发病部位位于光暴露部位的肿瘤个数为365个(94.07%)。结论皮肤基底细胞癌和皮肤鳞状细胞癌是最常见的非黑素性皮肤恶性肿瘤。

关键词：皮肤恶性肿瘤基底细胞癌鳞状细胞癌统计分析

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依曲替酸诱导皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1凋亡及其机制的初步研究

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中华肿瘤防治杂志 2008年第9期15卷 644-647页

作者：林秀英何春涤金鑫陈江王雅坤肖汀金光玉王凯波姜奕陈洪铎中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室辽宁沈阳110001

目的:探讨依曲替酸通过上调Fas基因表达诱导皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系SCL-1细胞凋亡的作用。方法:以体外培养的人皮肤鳞癌细胞系SCL-1为研究对象,MTT法观察依曲替酸对SCL-1细胞的生长抑制作用,Annxin V-FITC/PI法检测早期凋亡,流式细... 详细信息

目的:探讨依曲替酸通过上调Fas基因表达诱导皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系SCL-1细胞凋亡的作用。方法:以体外培养的人皮肤鳞癌细胞系SCL-1为研究对象,MTT法观察依曲替酸对SCL-1细胞的生长抑制作用,Annxin V-FITC/PI法检测早期凋亡,流式细胞仪检测细胞膜表面Fas的表达情况,实时荧光定量RT-PCR方法检测Fas mRNA的表达。结果:依曲替酸能显著抑制SCL-1细胞的生长,并具有浓度及时间依赖性。浓度为1×10-5mol/L的依曲替酸能诱导凋亡,上调细胞膜表面Fas表达水平及Fas mRNA水平。结论:依曲替酸能抑制皮肤鳞癌细胞生长及诱导凋亡,上调Fas抗原表达可能是其分子机制之一。

关键词：皮肤肿瘤依曲替酸细胞凋亡癌鳞状细胞细胞系肿瘤

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绿茶提取物对光老化、光免疫抑制的防护作用

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中华皮肤科杂志 2009年第1期42卷 25-27页

作者：李远宏吴严徐宏慧贾丽丽董光辉高兴华陈洪铎中国医科大学附属第一医院皮肤科暨卫生部免疫皮肤病学重点实验室沈阳110001 中国医科大学公共卫生学院卫生统计教研室

目的探讨不同浓度的绿茶霜对光老化、光免疫抑制的防护作用。方法招募20名健康志愿者，在背部7个非曝光部位分别涂抹以不同浓度（2％～5％）的绿茶霜（保湿霜基质中添加不同浓度的绿茶提取物配制而成）或基质，并予1．5倍最小红斑量的... 详细信息

目的探讨不同浓度的绿茶霜对光老化、光免疫抑制的防护作用。方法招募20名健康志愿者，在背部7个非曝光部位分别涂抹以不同浓度（2％～5％）的绿茶霜（保湿霜基质中添加不同浓度的绿茶提取物配制而成）或基质，并予1．5倍最小红斑量的模拟日光照射。免疫组化染色观察细胞角蛋白5／6、16含量及CD1a、HLA—DR阳性细胞密度。结果2％及3％的绿茶霜可有效地防护模拟日光照射引起的明显的红斑及色素沉着。模拟日光照射后CK5／6阳性＋强阳性比例在只照光部位达50％，在3％绿茶霜的部位仅达25％。CK16阳性＋强阳性比例在只照光部位达69％，在2％绿茶霜的部位仅达31％。与正常人对照相比，只照光部位表皮CD1a^＋或HLA—DR^＋的朗格汉斯细胞密度下降75％以上。一定浓度的绿茶霜可较好地抑制这种密度下降，其中3％绿茶霜的防护效果最佳。结论绿茶提取物可以有效地防护皮肤光老化、光免疫抑制。最适合的添加浓度为2％或3％.

关键词：茶植物提取物光细胞衰老防护

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桥粒芯糖蛋白3刺激下寻常型天疱疮患者外周血T淋巴细胞增殖检测分析

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中华皮肤科杂志 2010年第7期43卷 474-477页

作者：胡婕魏仲香姜奕梁再赋耿龙中国医科大学附属第一医院皮肤科卫生部免疫皮肤病学重点实验室沈阳110001 中国医科大学实验技术中心一部

目的观察桥粒芯糖蛋白3（Dsg3）对寻常型天疱疮（PV）患者外周血T淋巴细胞增殖的影响.方法 PV患者12例,正常人22例,提取外周血单一核细胞（PBMC）,采用流式细胞仪技术分别检测Dsg3刺激下PBMC中T淋巴细胞亚群变化及T淋巴细胞增殖情况,分... 详细信息

目的观察桥粒芯糖蛋白3（Dsg3）对寻常型天疱疮（PV）患者外周血T淋巴细胞增殖的影响.方法 PV患者12例,正常人22例,提取外周血单一核细胞（PBMC）,采用流式细胞仪技术分别检测Dsg3刺激下PBMC中T淋巴细胞亚群变化及T淋巴细胞增殖情况,分析PV患者与正常人之间存在的差异.结果 PV患者PBMC在Dsg3刺激下Th2型T淋巴细胞所占比例为12.17%±5.32%,Th1型T淋巴细胞所占比例为4.08%±1.50%;未经Dsg3刺激的阴性对照组分别为9.84%±5.41%和3.91%±1.38%.PV患者PBMC在Dsg3刺激和无Dsg3刺激时的Th2型T淋巴细胞所占比例均显著高于正常人（P〈O.05）;Dsg3刺激下PV患者T淋巴细胞发生增殖,CD4^＋T淋巴细胞增殖率为4.65%±3.28%,显著高于正常人（P〈0.05）. 结论 Dsg3可诱导PV患者CD4^＋T淋巴细胞发生特异性增殖,且主要为Th2优势型.

关键词：天疱疮桥粒芯糖蛋白质3 T淋巴细胞 Th1细胞 Th2细胞

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