检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈原稼 A.Vortmeyer Z.Zhuang R.T.Jensen 中国协和医科大学北京协和医院消化内科 100730 分子病理实验室 NINDS 消化科 NIDDKNIH美国马里兰州

胃泌素瘤是胰腺内分泌肿瘤(pancreatic endocrinetumors，PETs)中最常见的肿瘤，研究显示约60％的胃泌素瘤呈恶性进展型。若能确定某些预后指标来准确的预测胃泌素瘤的生长行为，则能针对预后差的每个患者早期地采用积极的治疗方案。本... 详细信息

胃泌素瘤是胰腺内分泌肿瘤(pancreatic endocrinetumors，PETs)中最常见的肿瘤，研究显示约60％的胃泌素瘤呈恶性进展型。若能确定某些预后指标来准确的预测胃泌素瘤的生长行为，则能针对预后差的每个患者早期地采用积极的治疗方案。本研究测试足够数量的X染色体位点，显微切割肿瘤组织以保证肿瘤DNA的纯度，所有患者均系前瞻性研究，每年随访并接受多种影像检查。因而相当长期完善的临床资料及肿瘤特征可用于ChrXLOH的相关性分析。

关键词：胃泌素瘤 X染色体杂合缺失生长机理

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谷胱甘肽的生理意义及其各种测定方法比较、评价

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中国临床营养杂志 2003年第2期11卷 136-139页

作者：樊跃平于健春余跃张琳中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院外科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

谷胱甘肽是一种非常特殊的氨基酸衍生物,广泛存在于动、植物细胞,在生物体内有许多重要的生理作用。人类组织中GSH的浓度的研究还不广泛。谷胱甘肽的测定有许多方法,目前还没有一种既快速、稳定、特异,又十分灵敏、经济的测定方法。本... 详细信息

谷胱甘肽是一种非常特殊的氨基酸衍生物,广泛存在于动、植物细胞,在生物体内有许多重要的生理作用。人类组织中GSH的浓度的研究还不广泛。谷胱甘肽的测定有许多方法,目前还没有一种既快速、稳定、特异,又十分灵敏、经济的测定方法。本文对谷胱甘肽的生理意义及其各种测定方法作一综述。

关键词：谷胱甘肽生理意义测定比较评价高效液相色谱法酶循环法

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人肿瘤坏死因子-α基因真核表达载体的构建

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肿瘤防治杂志 2003年第2期10卷 121-124页

作者：冯凤芝张卫光向阳刘芝华杨秀玉中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科北京100730 北京大学医学部解剖学与组织胚胎学系北京100083 中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室北京100021

目的 :构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF α)基因的真核表达载体。方法 :应用RT PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中 ,扩增出hTNF αcDNA ,连接至载体pMD 18 Tvec tor中 ,经酶切鉴定与序列测定证实后 ,以亚克隆法构... 详细信息

目的 :构建可在真核细胞内表达人肿瘤坏死因子alpha(hTNF α)基因的真核表达载体。方法 :应用RT PCR的方法从足月妊高征患者的胎盘组织中 ,扩增出hTNF αcDNA ,连接至载体pMD 18 Tvec tor中 ,经酶切鉴定与序列测定证实后 ,以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3.1 myc his(- )A ,B ,C的相应酶切位点 ,通过RT PCR方法检测其在体外转导绒癌耐药细胞后hTNF α基因的表达。结果 :自胎盘中克隆的hTNF αcDNA经序列测定证实 ,与Genbank的序列完全一致 ;用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定证实 ,克隆基因正确插入载体pcDNA3 1 myc his(- )A ,B ,C。经脂质体介导转导绒癌耐药细胞后 ,检测到其在转导的细胞中稳定表达。结论 :通过DNA重组技术成功地构建了可在体外稳定表达hTNF

关键词：肿瘤坏死因子 DNA 基因疗法聚合酶链反应妊娠高血压综合症

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谷胱甘肽的生理意义及其各种测定方法比较、评价

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中华糖尿病杂志 2003年第2期 139-139页

谷胱甘肽是一种非常特殊的氨基酸衍生物,广泛存在于动、植物细胞,在生物体内有许多重要的生理作用.人类组织中GSH的浓度的研究还不广泛.谷胱甘肽的测定有许多方法,目前还没有一种既快速、稳定、特异,又十分灵敏、经济的测定方法.本文对... 详细信息

谷胱甘肽是一种非常特殊的氨基酸衍生物,广泛存在于动、植物细胞,在生物体内有许多重要的生理作用.人类组织中GSH的浓度的研究还不广泛.谷胱甘肽的测定有许多方法,目前还没有一种既快速、稳定、特异,又十分灵敏、经济的测定方法.本文对谷胱甘肽的生理意义及其各种测定方法作一综述.

关键词：谷胱甘肽生理意义测定方法

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采用多药耐药基因mRNA转染人单个核血细胞提高对化疗药物耐药性的体外研究

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中华医学杂志 2002年第12期82卷 848-851页

作者：李雷向阳田芳杨秀玉任彤中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科军事医学科学院肿瘤分子实验室

目的　采用将人多药耐药基因 (MDR1)mRNA导入人单个核血细胞的方法 ,观察跨膜糖蛋白 (P gp)在转染后单个核血细胞中的表达和功能情况 ,并初步探讨此方法中影响P gp表达和功能的因素。方法　体外分别合成无 5′和 3′UTR(非翻译区 )的MDR... 详细信息

目的　采用将人多药耐药基因 (MDR1)mRNA导入人单个核血细胞的方法 ,观察跨膜糖蛋白 (P gp)在转染后单个核血细胞中的表达和功能情况 ,并初步探讨此方法中影响P gp表达和功能的因素。方法　体外分别合成无 5′和 3′UTR(非翻译区 )的MDR1mRNA[pGEM5Zf(+) MDR1]和使用Xenopusβ globin的 5′和 3′UTR替代野生型 5′和 3′UTR的MDR1mRNA(pT7TS MDR1) ,从而构成两个试验组。然后利用脂质体为介质转染富含造血细胞的人单个核血细胞 ,使用流式细胞技术对MDR1基因的翻译产物P gp的表达和功能进行检测。结果　转染后 12h人单个核血细胞P gp的表达 :阴性对照组为 2 16 % ,pGEM5Zf(+) MDR1组为 8 94 % ,pT7TS MDR1组为 19 14 % ;转染后 72h人单个核血细胞P gp的表达 :阴性对照组为 2 12 % ,pGEM5Zf(+) MDR1组为 6 12 % ,pT7TS MDR1组为 10 71%。转染后 12h的Rhodamine 12 3排泌实验 :阴性对照组为 19 2 0 % ,pGEM5Zf(+) MDR1组为 2 5 2 9% ,pT7TS MDR1组为 35 0 2 %。结论　转染后 12h及 72h两试验组都表现出P gp的高表达 ,并且以pT7TS MDR1组为优 ;转染后细胞对P gp的表达及存在可以维持至少 72h ;表达的P gp具有外排泵功能。

关键词：多药耐药基因 mRNA 化疗药物体外研究单个核血细胞妇科肿瘤

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EGF抑制BT325细胞生长的相关基因分离、克隆

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中华神经外科杂志 2002年第2期18卷 112-115页

作者：周明锐任祖渊王欣黄秉仁苏长保王任直蔡良婉中国医学科院中国协和医科大学北京协和医院神经外科 100730 中国医学科院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室 100730

目的　寻找抑制胶质瘤细胞生长的新的相关基因。方法　应用mRNA差异显示技术与cDNAarray反向Northern杂交相结合 ,分离、克隆表皮生长因子 (EGF ,10 0ng/ml)作用后生长抑制的人脑多形性胶质母细胞瘤BT32 5细胞与对照组 (不加EGF)相比新... 详细信息

目的　寻找抑制胶质瘤细胞生长的新的相关基因。方法　应用mRNA差异显示技术与cDNAarray反向Northern杂交相结合 ,分离、克隆表皮生长因子 (EGF ,10 0ng/ml)作用后生长抑制的人脑多形性胶质母细胞瘤BT32 5细胞与对照组 (不加EGF)相比新表达或表达明显上调的基因。结果克隆了 6个BT32 5细胞生长抑制后表达明显增高的EST (expressedsequencetag) ,其中 1个为新基因序列 ,另 5个分别与CGI 5 1、转醛缩酶 (Transaldolase、TAL)、核糖蛋白L35a、 4 0s核糖相关蛋白基因及BC 2蛋白mRNA有不同程度的同源性 ,其中功能分析提示TAL表达增加可诱导细胞凋亡。 6个EST均投递GenBank ,分别获得了接受号 :AW4 0 884 4～ 4 0 884 8。结论　所分离、克隆的基因可能与胶质瘤的生长抑制有关。

关键词：胶质瘤生长抑制基因表达新基因发现表皮生长因子脑肿瘤

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中国北方汉族人群人类白细胞抗原-DQA1,-DQB1基因多态性与支气管哮喘遗传易感性的关系

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中华医学杂志 2002年第6期82卷 379-383页

作者：高金明林耀广邱长春刘怡雯马毅高君刘英中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院呼吸科 100730 医学分子生物学国家重点实验室

目的　探讨人类白细胞抗原 (HLA) DQA1, DQB1基因多态性与我国北方汉族支气管哮喘患者的相关及连锁关系。方法　采用引物序列特异性聚合酶链反应的方法检测了 12 5例无血缘关系的长期居住在北京及其附近地区的汉族哮喘患者和 12个哮喘... 详细信息

目的　探讨人类白细胞抗原 (HLA) DQA1, DQB1基因多态性与我国北方汉族支气管哮喘患者的相关及连锁关系。方法　采用引物序列特异性聚合酶链反应的方法检测了 12 5例无血缘关系的长期居住在北京及其附近地区的汉族哮喘患者和 12个哮喘家系成员 183例及 96名健康个体HLA DQA1, DQB1基因型 ;用放射变应原吸附法测定哮喘患者血清总IgE(TigE)、常见过敏原特异性IgE (户尘螨d1,粉尘螨d2 ) ,并进行了哮喘患者支气管舒张试验、乙酰甲胆碱 (Mch)气道激发试验。结果　HLA DQA1 0 10 4基因和HLA DQB1 0 2 0 1基因频率在哮喘组 (分别为 0 2 0 4 ,0 2 84 )明显高于健康对照组 (分别为 0 0 89,0 0 96 ;P <0 0 1) ,优势比 (OR)分别为 3 2 0 3(95 %CI 1 6 99～ 6 0 37)和 5 32 8(95 %CI 2 883 9 84 9)。相反 ,HLA DQA1 0 30 1基因和HLA DQB1 0 30 1基因频率在哮喘组 (0 14 8,0 2 0 )明显低于健康对照组 (0 2 5 ,0 2 82 ;P <0 0 1,P <0 0 5 )。HLA DQA1 0 10 4基因与哮喘发病的独立危险因素分析显示P <0 0 5 ,OR为 5 0 94 2 (95 %CI1 2 2 5 2～ 2 1 1813)。HLA DQA1 0 10 4基因和HLA DQB1 0 2 0 1基因与特应质的相关系数分别为 0 183,0 2 89,P <0 0 1;而HLA1 DQA 0 30

关键词：支气管哮喘白细胞抗原 DQA1 DQB1 基因多态性遗传易感性聚合酶链反应汉族中国

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全反式维甲酸与单纯疱疹病毒胸苷激酶基因对胶质瘤的协同杀伤作用

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癌症 2002年第5期21卷 473-479页

作者：张雪峰任祖渊方福德左瑾苏长保王任直马文斌中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院神经外科北京100730 基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

背景与目的:细胞间缝隙连接通讯(gapjunctionalintercellularcommunication,GJIC)是介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpessimplixvirusthymidinekinase,HSV-tk)基因治疗中旁观者效应的重要机制。全反式维甲酸(all-trans-retinoticacid,ATRA)可能通过上调胶质瘤细胞GJIC和抑制肿瘤细胞生长的双重作用,促进HSV-tk基因治疗的疗效。本研究的目的在于证实HSV-tk和ATRA联合应用对胶质瘤细胞的协同杀伤作用。方法:分别以1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L3种浓度的ATRA作用于培养的大鼠C6胶质瘤细胞,并研究ATRA对C6胶质瘤细胞分化、增殖、GJIC及connexin43(Cx43)基因转录等方面的影响。将C6细胞与稳定表达HSV-tk基因的C6tk细胞按不同比例混合,分别在含GCV和不同浓度ATRA或仅含GCV的培养基中培养,并于药物作用7天后用MTT法检测旁观者效应。结果:经3种浓度的ATRA作用后,C6胶质瘤细胞均显示出细胞分化的形态学特征。C6细胞的增殖也明显受到ATRA的抑制,绝大多数的活细胞都静止于G1期,100μmol/LATRA对C6细胞增殖的抑制尤其明显,并诱导细胞凋亡。经3种浓度的ATRA分别作用后,C6细胞的GJIC也明显提高,而Cx43基因的转录未受明显影响。旁观者效应实验的结果显示,3种浓度的ATRA均可以明显增强旁观者效应。

关键词：全反式维甲酸单纯疱疹病毒胸苷激酶丙氧鸟苷胶质瘤基因治疗

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小剂量亚硒酸钠和全反式维甲酸联合使用诱导NB4细胞的凋亡及分化

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中华血液学杂志 2002年第12期23卷 628-630页

作者：孙义民左路许彩民沈悌潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼... 详细信息

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,通过流式细胞术检测粒系分化细胞表面特异抗原CD11b表达 ,NBT还原实验检测细胞分化。结果　阴性对照组细胞PS外翻率为 1.2 % ,5 μmol/L亚硒酸钠处理NB4细胞 4 8h后PS外翻率为 0 .8% ,0 .1μmol/LATRA诱导 4 8h后PS外翻率为 2 .0 % ,与对照组相比 ,差异均无显著性 ,而两者联合作用NB4细胞 2 4 ,36 ,4 8h后的PS外翻率分别达到 18.3%、2 5 .9%、5 0 .0 % ,DNA电泳呈典型的梯形带。小剂量 (2 μmol/L)亚硒酸钠没有诱导NB4细胞分化的能力 ,但其与 0 .1μmol/L的ATRA联合使用同单独使用 0 .1μmol/L的ATRA相比 ,CD11b表达阳性细胞率进一步增加 ,NBT还原能力也进一步增强。结论　小剂量的亚硒酸钠与ATRA联合使用可诱导NB4细胞发生凋亡及分化。

关键词：亚硒酸钠全反式维甲酸细胞凋亡细胞分化 NB4细胞株急性白血病

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应用基因表达谱芯片研究人腹主动脉瘤细胞周期和细胞凋亡相关基因

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中华外科杂志 2002年第11期40卷 817-819,W003页

作者：郑月宏管珩李拥军刘昌伟刘暴盛齐缪时英中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院血管外科 100730 中国医学科学院基础医学研究所国家分子生物学重点实验室

目的　筛选腹主动脉瘤发生过程中与正常组织差异表达的细胞周期和细胞凋亡相关基因并作初步功能分析。　方法　应用Trizol一步法抽提 2块腹主动脉瘤壁及 2块正常主动脉组织总RNA后 ,OligotexmRNASpin Column操作法分离纯化组织mRNA ;经... 详细信息

目的　筛选腹主动脉瘤发生过程中与正常组织差异表达的细胞周期和细胞凋亡相关基因并作初步功能分析。　方法　应用Trizol一步法抽提 2块腹主动脉瘤壁及 2块正常主动脉组织总RNA后 ,OligotexmRNASpin Column操作法分离纯化组织mRNA ;经逆转录合成荧光分子 (Cy3/Cy5)标记cDNA探针 ,与微矩阵排列的含有 4 0 96种cDNA基因的表达谱芯片杂交 ,利用GenePixPro 3 0软件分析动脉瘤与正常组织中差异表达的基因 ,对所获得的基因进行分子生物信息学分析。　结果　腹主动脉瘤与正常组织间差异表达的细胞周期和细胞凋亡基因有 1 8条 ,占芯片基因总数的 0 44%。其中与细胞周期相关的基因 1 1条 ,与细胞凋亡相关的基因 7条。在动脉瘤组织中表达上调的基因 9条 ,平均Ratio值为 3 860 ,表达下调的 9条 ,平均Ratio值为 0 2 94。生物信息学分析显示 ,该 1 8条差异表达细胞周期和细胞凋亡基因与腹主动脉瘤中平滑肌细胞的生长和凋亡有关。　结论　腹主动脉瘤的发生、发展过程中存在多基因表达调控的改变 ,细胞周期和细胞凋亡基因与腹主动脉瘤中平滑肌细胞等的生长和凋亡有相关性。

关键词：基因表达谱芯片腹主动脉瘤细胞周期细胞凋亡相关基因脱噬作用发病机制

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