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植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响与补充外源性17β-雌二醇的比较(英文)

中国临床康复 2005年第27期9卷 195-197页

作者：王雯朱广瑾首都医科大学病理生理学教研室北京市100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京市100005

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用... 详细信息

背景:天然植物雌激素α-玉米赤霉醇具有与雌激素类似的抗动脉粥样硬化作用,且副作用明显低于雌激素,有一定的应用前景。目的:探讨补充外源性17β-雌二醇及植物雌激素α-玉米赤霉醇对去卵巢大鼠凝血及纤溶功能的影响,并对二者的药物作用进行比较分析。设计:观察对比实验。单位:首都医科大学病理生理学教研室和中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系。材料:实验于2003-07/09在首都医科大学实验动物科学部完成。选择36只12周龄健康雌性Wistar大鼠,体质量(250±10)g,清洁级,随机分为4组,假手术对照组、去卵巢组、去卵巢+17β-雌二醇组及去卵巢+α-玉米赤霉醇组各9只。方法:假手术对照组开腹而不摘除卵巢。去卵巢组在无菌条件下摘除双侧卵巢复制去卵巢动物模型。去卵巢+17β-雌二醇组和去卵巢+α-玉米赤霉醇组分别在去卵巢14d后肌注17β-雌二醇(1mg/kg)和α-玉米赤霉醇(1mg/kg),3d注射1次,共35d。实验结束后大鼠经颈总动脉采血,分离血浆备用。用凝固法测定血浆凝血酶原时间及活化部分凝血活酶时间。用全自动生化分析仪测定血浆纤维蛋白原水平。用酶联免疫吸附法测定血浆组织因子水平。组织型纤溶酶原激活剂及纤溶酶原激活剂抑制物活性测定均采用发色底物法。同时分离子宫,计算子宫质量与体质量的比值。主要观察指标:①血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、血浆纤维蛋白原水平、血浆组织因子水平、组织型纤溶酶原激活剂活性及纤溶酶原激活剂抑制物活性。②子宫质量/体质量的比值。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①凝血酶原时间变化:去卵巢组显著短于假手术对照组(P<0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后长于去卵巢组(P<0.05～0.01)。②纤维蛋白原和组织因子水平变化:去卵巢组显著高于假手术对照组(P<0.05～0.01);补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后低于去卵巢组(P<0.05～0.01)。③组织型纤溶酶原激活剂活性变化:去卵巢组显著低于假手术对照组犤(0.33±0.33)μkat/L,(4.00±1.50)μkat/L,(q=9.43,P<0.01)犦。补充17β-雌二醇和补充α-玉米赤霉醇后犤(1.83±0.67)μkat/L,(1.17±0.83)μkat/L犦显著高于去卵巢组(q=13.50,P<0.01;q=5.00,P<0.05)。④纤溶酶原激活剂抑制物活性变化:去卵巢组显著高于假手术对照组犤(2.33±0.67)μkat/L,(1.17±0.33)μkat/L,(q=10.5,P<0.01)犦。⑤子宫质量/体质量比值:去卵巢+α-玉米赤霉醇组明显低于去卵巢+17β-雌二醇组犤0.66,1.96,(q=14.67,P<0.01)犦。结论:补充外源性17β-雌二醇或α-玉米赤霉醇后,均可使去卵巢大鼠重新建立起凝血-纤溶的动态平衡,表明α-玉米赤霉醇具有同17β-雌二醇相似的心血管保护作用,且其致子宫增生的副作用明显小于17β-雌二醇,是一种有一定应用前景的雌激素替代药物。

关键词：卵巢切除术雌二醇凝血酶原纤维蛋白溶酶原

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北京市1990-2003年急性乙型肝炎疫情报告病例的流行病学分析

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中国病毒病杂志 2006年第3期 181-183页

作者：龚晓红王富珍李辉刘立荣王晨王化勇苏彦平孙晓云张海艳韩庆英北京市疾病预防控制中心传染病、地方病控制所北京市护士学校中国协和医科大学基础医学院流行病教研室北京市宣武区疾病预防控制中心北京市密云县疾病预防控制中心北京市通州区疾病预防控制中心北京市西城区疾病预防控制中心北京市东城区疾病预防控制中心北京市大兴区疾病预防控制中心

目的了解北京市乙型肝炎流行趋势。方法整理分析历年来传染病疫情报告资料,并通过漏报率调查来校正乙肝报告发病率。结果北京市急性乙型肝炎报告年平均发病率为18.51/10万,校正报告发病率为22.21/10万。1990-2003年病毒性肝炎总发病数... 详细信息

目的了解北京市乙型肝炎流行趋势。方法整理分析历年来传染病疫情报告资料,并通过漏报率调查来校正乙肝报告发病率。结果北京市急性乙型肝炎报告年平均发病率为18.51/10万,校正报告发病率为22.21/10万。1990-2003年病毒性肝炎总发病数逐年呈明显下降趋势(下降幅度为70.78%),而急性乙肝逐年发病水平下降较慢(下降幅度为25.46%),急性乙肝报告病例数占病毒性肝炎发病总报告数的百分比却呈上升趋势。急性乙肝主要发病集中在20~40岁之问的中青年男性。结论目前本市乙肝已成为病毒性肝炎的主要构成,应注重阻断乙肝母婴传播以外的其他途径的乙肝病毒传播。

关键词：肝炎病毒乙型流行病学

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植物雌激素α-玉米赤霉醇对HUVEC组织因子基因表达的转录调控作用

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基础医学与临床 2005年第6期25卷 539-542页

作者：王雯刘伟祖淑玉朱广瑾张立克首都医科大学病理生理学教研室北京100054 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4... 详细信息

目的探讨植物雌激素α玉米赤霉醇(ZAL)影响血管内皮细胞组织因子(TF)基因表达的转录调控机制,并与内源性动物类雌激素17β联雌二醇(17β联estradiol,E2)进行比较分析。方法进行人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代培养,利用基因重组技术构建4个含人TF基因5′上游不同长度序列的荧光素酶报告基因质粒,用脂质体转染法分别转入以下6组细胞:①正常对照组;②10-7molLE2刺激组;③10-7molLZAL刺激组;④10-6molLAngⅡ刺激组;⑤10-7molLE2+10-6molLAngⅡ刺激组;⑥10-7molLZAL+10-6molLAngⅡ刺激组;测定细胞裂解液中荧光素酶比活性(relativeluciferaseactivity,RLA)的变化。结果转染pGL3TF171+71的各组细胞RLA均较低,不同刺激组之间无显著差异;AngⅡ可使质粒pGL3TF593+71,pGL3TF316+71,pGL3TF236+71荧光素酶表达大量增加,E2、ZAL均可不同程度地抑制AngⅡ的上述效应,2者间无显著差异。结论含有1个NFκB位点和2个AP1位点的-236bp～-171bp区域在E2或ZAL影响TF基因转录中有重要作用。

关键词： α-玉米赤霉醇植物雌激素基因表达 HUVEC 调控作用血管内皮细胞组织因子 estradiol mol/L 人脐静脉内皮细胞 activity 转录调控机制报告基因质粒基因重组技术脂质体转染法荧光素酶表达抑制AngⅡ 正常对照组细胞裂解液

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风湿痛的相关危险因素研究:汕头地区流行病学调查

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中华流行病学杂志 2005年第9期26卷 711-715页

作者：曾庆馀肖征宇陈肃标陈韧林秋强王庆文黄少弼谢素和林昆许敬才张乃峥汕头大学医学院第一附属医院风湿病研究室 515041 广东省澄海市人民医院汕头大学医学院第一附属医院卫生学教研室 515041 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院

目的验证中国南、北方风湿痛患病率是否存在差异,探讨风湿痛的相关危险因素。方法采用中国-国际抗风湿联盟(ILAR-China)协作的风湿病流行病学调查或COPCORD的程序,分别于1987、1992、1995和1999年对4个人群16岁以上成人共10 638人进行调... 详细信息

目的验证中国南、北方风湿痛患病率是否存在差异,探讨风湿痛的相关危险因素。方法采用中国-国际抗风湿联盟(ILAR-China)协作的风湿病流行病学调查或COPCORD的程序,分别于1987、1992、1995和1999年对4个人群16岁以上成人共10 638人进行调查,收集分析有关风湿痛资料。结果4次调查风湿痛患病率分别为11.6%、12.5%、16.0%和19.8%。虽然十多年来风湿痛患病率有所升高,但仍显著低于北京1987年ILAR-China调查的结果。最常见的受累部位是腰,其次为膝和颈;腰痛多见于农村居民,颈痛则多见于教师人群;无电梯的楼房居民膝痛患病率显著高于平房居民;本地区人群骨密度峰值高于包括北京在内的13省市;风湿痛患病率高的人群求医意识较强,但各人群残疾率的差异无统计学意义。结论汕头地区风湿痛患病率低于北京市;社会经济环境、纬度、性别、年龄、职业、人体功效学、营养、骨密度以及求医意识等,可能是风湿痛的相关危险因素。

关键词：风湿痛流行病学相关危险因素流行病学调查汕头地区危险因素研究骨密度峰值农村居民社会经济环境患病率

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干扰素抗病毒机制及其抗病毒性肝炎中的作用

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中国公共卫生 2005年第7期21卷 890-891页

作者：李洪权刘英李辉中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病教研室北京100005

干扰素(interferon,IFN)是一种具有广谱抗病毒、抗肿瘤、抑制细胞增长和免疫调节作用的细胞因子.目前IFN已经被广泛地应用到慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎、白血病、淋巴瘤等疾病的治疗中.本文着重阐述IFN-α的抗病毒作用.

关键词：抗病毒性肝炎干扰素抗病毒机制免疫调节作用慢性乙型肝炎慢性丙型肝炎抗病毒作用 IFN-α 细胞因子细胞增长抗肿瘤白血病淋巴瘤

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严重急性呼吸综合征家庭内传播特点及影响因素的研究

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首都医科大学学报 2005年第6期26卷 655-661页

作者：谢朝晖刘改芬单广良潘利乌正赉中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室

目的了解严重急性呼吸综合征(SARS)在家庭内传播的特点,分析影响其家庭内传播的可能因素,为制定相应的防控策略和措施提供科学依据。方法于2004年在北京市西城区和海淀区进行病例对照调查。以1户有2例或2例以上SARS病例的家庭为病例组,... 详细信息

目的了解严重急性呼吸综合征(SARS)在家庭内传播的特点,分析影响其家庭内传播的可能因素,为制定相应的防控策略和措施提供科学依据。方法于2004年在北京市西城区和海淀区进行病例对照调查。以1户有2例或2例以上SARS病例的家庭为病例组,以1户只有1例SARS病例的家庭为对照组,使用自制问卷,比较病例组与对照组的差异,包括病例及其家庭成员的基本情况、病例及其家庭成员之间的关系、接触时间、接触频率、接触方式,接触者发病情况(发病数、发病时间),以及家庭经济状况、卫生习惯、家庭成员易患性等。结果对照组与病例组的家庭人均居住面积差异无统计学意义(t=0.82,P=0.41)。病例组家庭内共同居住人数多于2人和3人的比例(38.89%和35.71%)高于对照组(30.43%和26.09%),但差异均无统计学意义。出现发热症状时,病例组有83.93%的人担心自己得了SARS,而对照组仅有16.07%,差异有统计学意义,但立即去医院就诊的比例2组的差异无统计学意义。对照组中有15.38%的患者认为不需要去医院,显著高于病例组的2.38%(P<0.05)。病例组或对照组的患者均有约90%认为是在医院感染SARS的,病例组中有10.71%的患者认为是在家庭内感染SARS的,显著高于对照组8.51%(P<0.05)。对照组有40.43%、病例组仅有21.82%的患者在发热后对居室进行消毒,对照组中44.68%的患者在发热后不再与家人共用餐具,而病例组中仅25.45%的患者这样做,差异有统计学意义(P<0.05)。本研究未显示避免与他人交往、与他人交谈时戴口罩、不与他人一起进餐3项措施的作用,也未显示中药及一些免疫增强剂对预防家庭内传播有作用。结论同家、同室居住人口少可减少SARS传播的机会,出现发热症状后及时采取隔离、消毒措施,有利于减少SARS家庭内传播。未见中药及一些免疫增强剂对预防家庭内传播有明显作用。

关键词：严重急性呼吸综合征病例对照家庭内传播免疫增强剂

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心肌特异表达基因p93的原核表达及鸡卵黄抗体的制备

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中华检验医学杂志 2005年第10期28卷 1060-1063页

作者：尤昕时娜赵秀文柳明洙刘冬青曹慧青孟宪敏中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院分子医学中心延边大学医学院生物化学与分子生物学教研室

目的在大肠杆菌中高效表达心肌特异表达基因p93,以此作为抗原免疫产蛋母鸡,制备抗p93蛋白鸡卵黄抗体(IgY)。方法将p93基因分别插入原核表达载体pGEX-5X-1、pBV220、pET28a(+)中,选取表达量最高的载体进行表达纯化,其产物免疫产蛋母鸡。... 详细信息

目的在大肠杆菌中高效表达心肌特异表达基因p93,以此作为抗原免疫产蛋母鸡,制备抗p93蛋白鸡卵黄抗体(IgY)。方法将p93基因分别插入原核表达载体pGEX-5X-1、pBV220、pET28a(+)中,选取表达量最高的载体进行表达纯化,其产物免疫产蛋母鸡。结果插入pET28a(+)中N端带有His标签的p93表达水平最高,且以包涵体形式存在,从含有pET28a-p93质粒的1L培养的菌液中可获得3mg纯化的p93蛋白。免疫产蛋母鸡,末次免疫后其卵黄抗体最高滴度达到1∶64000,Westernblot结果显示该抗体具有高度特异性。结论此抗体的制备为新基因p93的检测提供了良好的工具。

关键词：基因表达大肠杆菌蛋黄抗体

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缬沙坦对不同浓度C-反应蛋白诱导的单核细胞白细胞介素-6合成的影响

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中华老年心脑血管病杂志 2005年第4期7卷 263-265页

作者：陈学军刘治宴李建军长江大学医学院内科教研室湖北荆州434000 中国医学科学院中国协和医科大学阜外心血管病医院北京100037

目的通过研究缬沙坦对C-反应蛋白(CRP)诱导的正常人外周血单核细胞合成白细胞介素-6(IL-6)的影响,观察缬沙坦的抗炎作用。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,应用酶联免疫吸附试验分别观察CRP(15、、10及20 mg/L)刺激单核细... 详细信息

目的通过研究缬沙坦对C-反应蛋白(CRP)诱导的正常人外周血单核细胞合成白细胞介素-6(IL-6)的影响,观察缬沙坦的抗炎作用。方法采用密度梯度离心法分离人外周血单核细胞,应用酶联免疫吸附试验分别观察CRP(15、、10及20 mg/L)刺激单核细胞产生IL-6的时间及剂量效应,其峰值与缬沙坦抑制剂进行比较。结果CRP刺激单核细胞IL-6合成呈时间依赖性和剂量依赖性,20 mg/L CRP与5 mg/L CRP诱导IL-6合成开始的时间是4 h,在24 h达高峰,其峰值分别是(904±77)ng/L和(698±52)ng/L。高浓度缬沙坦(≥10-3mol/L)能抑制20 mg/LCRP诱导的单核细胞IL-6合成,较低浓度缬沙坦(1×10-6mol/L^1×10-3mol/L)能抑制5 mg/L CRP诱导的单核细胞IL-6合成。结论缬沙坦可用于轻度炎症时抗细胞因子治疗。

关键词：缬沙坦 C反应蛋白质白细胞介素6 单核细胞炎症

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抗Aβ人源融合抗体在毕赤酵母中的高效表达纯化及性质研究

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中国生物工程杂志 2005年第6期25卷 40-44页

作者：刘立颖许士奇赵雪梅杜洪震张伟梁平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学研究院病理室北京100005 承德医学院微生物与免疫学教研室承德067000

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受... 详细信息

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受严格调控的醇氧化酶启动子的控制下由甲醇诱导表达,并利用α因子前导肽引导融合抗体分泌。载体线性化后整合入甲醇营养型酵母Pichia pastoris(Pp)GS115基因组中,经鉴定表达单位具有良好的遗传稳定性。对筛选得到的高分泌表达融合抗体的细胞株进行表达和培养条件的优化,使诱导上清液中融合抗体的产量选到100mg/L。利用Protein A层析柱分离、纯化,获得纯度较高的融合抗体。经鉴定分析其具有正确的分子量和N末端,且融合抗体可与Aβ抗原结合并能吸引巨噬细胞吞噬和清除抗原抗体复合物,具有抗体生物学活性。这是首次利用甲醇营养型酵母表达系统成功实现了抗Aβ融合抗体的高效分泌表达及产物纯化鉴定,为进一步研究AD及其治疗提供了新的途径。

关键词：抗β-淀粉样多肽人源融合抗体甲醇营养型酵母表达系统阿尔茨海默病免疫治疗纯化性质

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钩端螺旋体OmpL1抗原表位预测、克隆和表达

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中国人兽共患病杂志 2005年第1期21卷 27-31页

作者：杨榆玲褚嘉祐郭晓奎石铁流黄小琴俞建昆中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所昆明650118 上海第二医科大学病原生物学教研室上海200025 中科院上海生命科学信息中心上海200032

目的　应用生物信息学方法预测钩体外膜蛋白OmpL1的表位 ,结合基因工程手段进行表位重组、表达和分离纯化。方法　用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测OmpL1的表位 ,PCR合成重组表位基因片段 ,克隆PCR产物构建表达质粒 pGEX/Omp Omp ,测... 详细信息

目的　应用生物信息学方法预测钩体外膜蛋白OmpL1的表位 ,结合基因工程手段进行表位重组、表达和分离纯化。方法　用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测OmpL1的表位 ,PCR合成重组表位基因片段 ,克隆PCR产物构建表达质粒 pGEX/Omp Omp ,测序验证。对含有该质粒的大肠杆菌BL2 1(DE3)进行诱导表达 ,表达产物westernblot分析并纯化融合蛋白。结果　预测到 2个既具有MHC结合肽特性又具有B细胞表位特征的肽段。重组表位基因序列与理论设计完全一致。IPTG诱导BL2 1(DE3)中高效表达Mr约 30 0 0 0的融合蛋白 ,纯化后蛋白纯度 >90 %。结论　成功构建原核表达质粒pGEX/Omp Omp ,并进行含重组表位的GST融合蛋白的分离纯化 ,为OmpL1的表位研究和应用于亚单位疫苗奠定了基础。

关键词： OmpL1 抗原表位钩端螺旋体

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