检索结果-内蒙古大学图书馆

西安交通大学学报（医学版） 2002年第4期23卷 417-418页

作者：王兰谭会兵罗秀成宋天保周劲松陕西医学高等专科学校组织学与胚胎学教研室西安710068 中国医学科学院基础医学研究所.中国协和医科大学基础医学院解剖教研室北京100005 西安交通大学医学院组织学与胚胎学教研室西安710061

一氧化氮（NO）和NO合酶（NOS）广泛存在于大鼠下丘脑神经内分泌神经元，在调节神经内分泌功能、参与体内多种生理和病理活动方面均起一定作用。由于这些神经元或以核团形式存在或以分散状态出现，加之下丘脑结构复杂，在体研究难度较... 详细信息

一氧化氮（NO）和NO合酶（NOS）广泛存在于大鼠下丘脑神经内分泌神经元，在调节神经内分泌功能、参与体内多种生理和病理活动方面均起一定作用。由于这些神经元或以核团形式存在或以分散状态出现，加之下丘脑结构复杂，在体研究难度较大。目前国内已建立了下丘脑神经元分散培养技术，但有关NOS神经元的体外发育尚未见报道。本实验应用免疫细胞化学和图像分析技术，对不同培养时间的NOS免疫反应性（IR）神经元的形态进行了观察，以探讨其体外生长、发育和功能变化的规律。

关键词：一氧化氮合酶神经元下丘脑细胞培养免疫细胞化学新生大鼠免疫反应性

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VEGF在机械性TMR中促心肌血管再生与重建的实验研究

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中国临床解剖学杂志 2002年第3期20卷 214-217页

作者：张晓东曹润武李若凡程效东刘克李姗姗王冬曲彦明张平曹承刚张恩辉徐达传中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学解剖组胚学系北京100005 解放军第306医院心胸外科北京100101 第一军医大学解剖学教研室广东广州510515

目的:从形态学角度观察血管内皮细胞生长因子（VEG）在机械性TMR（transmyocardialrevascularization）管道内促血管再生与重建的作用。方法:利用高速空心钻头在家兔左室前壁进行TMR,形成透室壁性心肌管道。实验组的TMR管道内注射VEGF;... 详细信息

目的:从形态学角度观察血管内皮细胞生长因子（VEG）在机械性TMR（transmyocardialrevascularization）管道内促血管再生与重建的作用。方法:利用高速空心钻头在家兔左室前壁进行TMR,形成透室壁性心肌管道。实验组的TMR管道内注射VEGF;对照组仅做单纯机械性TMR。动物术后不同时间处死,利用组织切片染色法,对照观察实验组和对照组TMR管道内血管再生与重建的状况。结果:术后2周,实验组和对照组的TMR管道内新生小血管的密度/数量分别为（24.20±0.98）条/10 ×4倍和（8.41±0.59）条/10×4倍,P<0.001;术后6～8周,分别为（11.08±0.96）条/10×4倍和（3.31±0.57）条/10×4倍,P<0.001。结论:VEGF对机械性TMR管道内血管的再生与重建具有非常明显的促进作用。

关键词：机械性TMR VEGF 血管生成机械心肌管道

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VEGF在激光TMLR中促心肌血管生成的实验研究

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解剖学报 2002年第2期33卷 204-207页

作者：张晓东曹润武李若凡程效东王冬曲彦明张平徐达传中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系北京100005 中国人民解放军第306医院心胸外科北京100101 第一军医大学解剖学教研室广州510515

目的　从形态学角度观察血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在激光透室壁性心肌血管重建术 (transmyocardiallaserrevascularization ,TMLR)中 ,促TMLR孔道内血管生成的作用 ,探讨优化TM LR的可行性方案。　... 详细信息

目的　从形态学角度观察血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在激光透室壁性心肌血管重建术 (transmyocardiallaserrevascularization ,TMLR)中 ,促TMLR孔道内血管生成的作用 ,探讨优化TM LR的可行性方案。　方法　采用高能CO2 激光照射家兔左室前壁 ,形成透室壁性激光心肌孔道。实验组TMLR孔道内注射VEGF ;对照组TMLR孔道内注射相同剂量的生理盐水。动物于术后不同时间处死 ,利用组织切片染色法 ,对照观察实验组和对照组的TMLR孔道内血管生成状况。　结果　应用VEGF实验组和未应用VEGF对照组的TMLR孔道内血管生成的密度 /数量具有显著性差异 ,P <0 0 0 1。

关键词：血管内皮细胞生长因子透室壁性激光心肌血管重建术血管生成激光孔道动物实验

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133名商业性服务男性受供者16PF测评

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中国心理卫生杂志 2002年第1期16卷 48-48页

作者：左群张孔来李贞洁刘德辉周小辉河北省职工医学院预防医学系流行病学与卫生统计学教研室 071000 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室河北省职工医学院附属医院检验科香港中文大学临床流行病学中心广东省深圳市收容教育所

国内外研究已经证明, 参与商业性服务是HIV/AIDS (爱滋病病毒/ 爱滋病)发生与传播的主要危险社会行为.有关资料显示, 与商业性服务有关的HIV感染比例不断增加已成为我国目前HIV/AIDS流行发展的一个重要特征, 近年来, 除了从事商业性服... 详细信息

国内外研究已经证明, 参与商业性服务是HIV/AIDS (爱滋病病毒/ 爱滋病)发生与传播的主要危险社会行为.有关资料显示, 与商业性服务有关的HIV感染比例不断增加已成为我国目前HIV/AIDS流行发展的一个重要特征, 近年来, 除了从事商业性服务提供的女性不断增加外, 商业性服务男性受供者数量也呈不断上升趋势.

关键词：商业性服务男性受供者 AIDS 人格特征卡特尔16人格因素量表

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mm-LDL激活ECV304 BK_(Ca)及丹参与川芎嗪的干预作用

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中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 386-389页

作者：林琳郑永芳屈金河鲍光宏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目的观察轻度氧化低密度脂蛋白（mm-LDL）对人脐静脉内皮细胞株ECV304的大电导钙激活钾通道（BK_(Ca)）活动的影响，以及丹参(radix salviae miltiorrhizae)水溶提取物764-3和川芎嗪对其效应的干预。方法细胞贴附式膜片箝技术。结果 m... 详细信息

目的观察轻度氧化低密度脂蛋白（mm-LDL）对人脐静脉内皮细胞株ECV304的大电导钙激活钾通道（BK_(Ca)）活动的影响，以及丹参(radix salviae miltiorrhizae)水溶提取物764-3和川芎嗪对其效应的干预。方法细胞贴附式膜片箝技术。结果 mm-LDL(100μg/ml) 可增强ECV304 BK_(Ca)的活动；764-3(30μg/ml)和川芎嗪(200μg/ml)可削弱mm-LDL的激活效应。结论 mm-LDL激活BK_(Ca)的活动，从而增大静息钙内流的电化学驱动力，升高胞内钙浓度，致内皮细胞功能障碍。764-3和川芎嗪通过削弱这一作用而对内皮细胞起到保护作用。

关键词：钙激活钾通道轻度氧化低密度脂蛋白血管内皮细胞丹参川芎嗪

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褪黑素抑制由 17-β-雌二醇诱发的垂体催乳素瘤的生长

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中国医学科学院学报 2001年第1期23卷 49-53页

作者：高列许荣焜何淑芬许建萍单惠敏彭树勋中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

观察整体条件下褪黑素 (melatonin, MLT)抑制由 17-β-雌二醇 (E2)诱发的垂体催乳素 (prolactin, PRL)瘤的生长，并初步探讨其作用机制。方法以雄性 Sprague- Dawley大鼠皮下埋植 E2药泵，诱发 PRL瘤。实验组大鼠分 5组，在诱瘤之前每... 详细信息

观察整体条件下褪黑素 (melatonin, MLT)抑制由 17-β-雌二醇 (E2)诱发的垂体催乳素 (prolactin, PRL)瘤的生长，并初步探讨其作用机制。方法以雄性 Sprague- Dawley大鼠皮下埋植 E2药泵，诱发 PRL瘤。实验组大鼠分 5组，在诱瘤之前每日定时分别皮下注射 0.05、 0.25、 0.50、 1.00和 2.00 mg MLT，共 90 d;对照组大鼠皮下注射等体积 4％乙醇－生理盐水。结果 (1)给予 0.05、 0.25、 0.50、 1.00和 2.00 mg MLT处理组 PRL瘤重量分别较对照组降低 25.91％ (P >0.05)、 48.78％ (P< 0.01)、 36.78％ (P< 0.05)、 31.04％ (P >0.05)和 35.22％ (P > 0.05); (2)Northern Blot分析表明，注射 0.05、 0.25、 0.50 mg MLT组 PRL瘤细胞 PRL mRNA表达水平分别比对照组降低 33.67％ (P< 0.05)、 25.51％ (P< 0.05)和 41.84％ (P< 0.01)；原代培养的 PRL瘤细胞原位杂交实验也获得类似结果 ; (3)激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示， 0.05、 0.25和 0.50 mg MLT组 PRL瘤细胞 DNA的相对含量分别较对照组降低 40.73％ (P< 0.001)、 51.15％ (P< 0.001)和 60.23％ (P< 0.001); (4)紫外分光光度法测定显示， 0.05、 0.25、 0.50、 1.00和 2.00 mg MLT组血浆过氧化脂质水平分别比对照组降低 26.45％ (P< 0.05)、 23.97％ (

关键词：褪黑素垂体催乳素瘤催乳素基因 DNA含量

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西沙必利对消化间期MMC前列腺素E释放及胃粘膜细胞保护作用

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基础医学与临床 2001年第Z1期21卷 87-88页

作者：周吕张春玥王玲田瑞中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目的我们曾报导(1999)西沙必利可作用于肌间神经丛胃动素神经元释放胃动素增强消化间期移行性复合运动(MMC)和电活动.根据我们最近关于前列腺素E2(prosta glandin E2,PGE2)与胃动素释放相关的工作表明,西沙必利很可能是启动PGE2释放 , ... 详细信息

目的我们曾报导(1999)西沙必利可作用于肌间神经丛胃动素神经元释放胃动素增强消化间期移行性复合运动(MMC)和电活动.根据我们最近关于前列腺素E2(prosta glandin E2,PGE2)与胃动素释放相关的工作表明,西沙必利很可能是启动PGE2释放 , 由PGE2激发胃动素释放进而促进MMC运动.已知PGE2是强力细胞保护物质,西沙必利还可能通过PGE2介导降低胃粘膜炎症作用.本文观察西沙必利对PGE2释放作用及其与胃动素释放关系,并探讨西沙必利对胃粘膜的消炎作用.方法用清醒Wister大鼠进行慢性实验,埋植高灵敏度应力传感器于胃窦, 用多导生理记录仪记录胃MMC.在颈外静脉放一硅胶管,通过皮肤穿出体外,供给药及取血样品用.用放射免疫分析法测定血中PGE2和胃动素含量.用肌注消炎痛(15mg/kg)诱发胃粘膜损伤,按Guth方法计算损伤指数.结果 1.正常大鼠胃窦MMC活动及血中PGE2和胃动素含量大鼠消化间期周期性出现MMC活动,Ⅲ相活动期收缩力为34 .6 7±8.45g(n=8).Ⅲ相高峰期血中PGE2含量125.42±18.31pg/mL(n=8),胃动素含量104 .56±9.64(n=8).MMC转入恢复期Ⅳ相时胃动素水平下降(78.24±9.64pg/mL),而PGE 2水平仍保持Ⅲ相的水平(118.25±13.67pg/mL).2.西沙必利对PGE2及胃动素的释放作用在大鼠胃窦MMC Ⅰ相时,静脉注射西沙必利2mg/kg可激发MMC Ⅲ相活动,其收缩力比对照组增加(235.41±80.23)%(P＜0.001).同时也使血中PGE2和胃动素浓度升高 ,分别比对照组升高(147.24±20.62)%和(190.27±13.24)%(均P＜0.01,均n=8) .PGE2高峰出现在胃动素高峰之前,表明胃动素释放可能由PGE2激发.3.胃粘膜损伤对胃窦MMC活动及血中PGE2和胃动素的影响消炎痛致胃粘膜损伤,其损伤指数为19.35± 6.85时,胃运动显示MMC Ⅰ相和Ⅱ相时程延长,Ⅲ相时程缩短,并出现阵发性不规则收缩波,胃窦收缩力比正常对照组下降(54.27±12.41)%(n=8,P＜0.05).血中PGE2和胃动素含量比正常对照组分别下降(81.17±15.24)%和(79.24±13.79)%(均n=8,均P ＜0.05).4.西沙必利对胃粘膜损伤抑制胃运动及PGE2、胃动素释放以及预防胃粘膜损伤作用的影响给大鼠口服西沙必利5mg/kg/d ,15天后肌注消炎痛(15mg/kg).结果表明, 西沙必利能有效地预防消炎痛造成的胃粘膜损伤,损伤指数只有2.12±0.54(n=8),与单独消炎痛组比较,损伤指数下降(89.18±6.24)%(P＜0.001).同时显著增加胃窦收缩力以及增加血中PGE2及胃动素含量,分别比单独消炎痛组增加(81.45±24.25)%、(78 .23±19.37)%和(85.14±27.63)(均P＜0.01).在另一组实验中,先给消炎痛6h后 ,在胃粘膜出现损伤时,给静脉灌流西沙必利2mg/kg/h.结果发现,西沙必利可使损伤指数下降,细胞修复.血中PGE2和胃动素浓度回升至接近正常水平.结论西沙必利可促进PGE2和胃动素释放进而促进MMC收缩活动.西沙必利可抑制胃粘膜损伤是通PGE2介导,实现对胃粘膜的细胞保护作用.

关键词：胃粘膜细胞消化间期前列腺素女用避孕药西沙必利 MMC

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Cajal间质细胞介导胃动素兴奋胃起搏区运动的作用

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基础医学与临床 2001年第Z1期21卷 84-85页

作者：周吕袁勃田瑞王礼建中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目的胃肠壁内的Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是胃肠慢波电位的启动者.本研究旨在观察大鼠ICC在胃起搏区收缩活动的特殊作用,以及兴奋性脑肠肽胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩活动的调节.方法采用大鼠胃体上1/3起搏... 详细信息

目的胃肠壁内的Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICC)是胃肠慢波电位的启动者.本研究旨在观察大鼠ICC在胃起搏区收缩活动的特殊作用,以及兴奋性脑肠肽胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩活动的调节.方法采用大鼠胃体上1/3起搏区及胃窦环行肌3×10mm2肌条在95%O2,5 %CO2的恒温37℃灌流Kreb液中,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动. 结果 1.带有ICC的胃肌正常自发收缩活动胃肌条孵育60min后出现稳定的收缩活动.胃体起搏区和胃窦收缩频率分别为3.9 2±0. 63次/min和4.14±0.50次/min.收缩振幅分别为0.25±0.05g和0.32±0.09g(均n=18) .胃窦收缩频率和振幅较胃体起搏区分别增高(5.61±0.84)%和(28.00±7.92)%.2.胃动素对带有ICC胃环行肌的作用胃动素0.0 3、0.06和0.12μg/mL明显增加胃体起搏区和胃窦的收缩频率和振幅,呈剂量依赖性增加 .在胃动素0.12μg/mL时,胃体起搏区比生理盐水对照组(NS)频率增加(30.84±6.52)% ,振幅增加(387.41±53.25)%.胃窦比NS组频率增加(14.62±3.71)%,振幅增加(135. 56±25.14)%(均P＜0.01,均n=18).结果显示,同剂量的胃动素对胃体起搏区的收缩作用比胃窦区强,两者差异显著(P＜0.01),表明胃体起搏区对胃动素较胃窦有较高的敏感性.3.破坏ICC对胃肌收缩活动的影响用化学药物美蓝(50μmol/L)+光照(50mW/cm2)破坏胃环肌层ICC细胞后,胃体起搏区平滑肌自发收缩频率和振幅急剧下降,分别比破坏ICC前下降(82.35±12.54)%和(85.41±1 4.37)%.而胃窦平滑肌的频率和振幅则分别下降(73.24±16.31)%和(75.82±11.33)%( 均P＜0.001,均n=18).结果显示胃体起搏区比胃窦区动力下降更明显,表明胃体起搏区平滑肌细胞更受ICC的控制.4.破坏ICC对胃动素增强胃动力的影响破坏环行肌ICC后几乎完全阻断胃动素对胃体起搏区和胃窦平滑肌的收缩作用.结论 ICC对胃平滑肌细胞的机械运动有直接的起搏作用,并通过脑肠肽胃动素进行化学调控,在胃体的起搏区其作用更为明显,证明胃体上1/3区域是胃运动的原动力部位.

关键词：胃动素胃起搏 Cajal 间质细胞介导

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比较西沙必利与莫沙必利对胃和结肠运动及平滑肌细胞的收缩作用

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基础医学与临床 2001年第Z1期21卷 86-87页

作者：周吕袁勃王玲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目的已知西沙必利(cisapride)和莫沙必利(mosapride citrate)均为新一代胃肠促动力剂,两者都是苯甲酰胺衍生物,均作用于胃肠5-HT4受体促进乙酰胆碱释放 ,从而增强胃肠运动.本研究拟采用大鼠在体、离体及胃肠单个平滑肌细胞技术,比较西... 详细信息

目的已知西沙必利(cisapride)和莫沙必利(mosapride citrate)均为新一代胃肠促动力剂,两者都是苯甲酰胺衍生物,均作用于胃肠5-HT4受体促进乙酰胆碱释放 ,从而增强胃肠运动.本研究拟采用大鼠在体、离体及胃肠单个平滑肌细胞技术,比较西沙必利和莫沙必利促进胃和结肠动力作用的异同及其作用机制.方法 1.在体实验,采用清醒大鼠进行慢性实验(n=8),埋植高灵敏度应力传感器记录胃结肠消化间期移行性复合运动(MMC).应力传感器分别位于胃窦和远端结肠. 用多导生理记录仪记录、处理和分析.2.离体实验,采用大鼠离体胃窦和远端结肠的肌条( n=12)动力测定技术.用特制灌流肌槽,加进西沙必利或莫沙必利分别作用于胃窦和远端结肠的肌条,其收缩活动通过张力换能器记录在X-Y记录仪上.3.细胞实验,采用胶原酶技术分离大鼠胃窦和远端结肠的单个平滑肌细胞(n=12),观察西沙必利或莫沙必利对细胞的直接收缩作用,并比较二者作用的异同.结果 1.西沙必利与莫沙必利对胃窦和远端结肠MMC作用的比较空腹时,大鼠胃窦和远端结肠可以记录到典型的MMC活动.正常MMC Ⅲ相平均振幅为25.12±4.25g.当分别静脉给予不同剂量西沙必利或莫沙必利0.125、0 .25、0.5、1.0、2.0mg/kg时均增强胃窦和远端结肠MMC Ⅲ相收缩,两者均随剂量增加而使运动振幅逐渐增加:在胃窦,西沙必利组按上述剂量比对照组分别增加:(11.66±1. 64)%、(29.14±3.17)%、(65.68±8.95)%、(110.10±15.21)%、(142.29±18.55)% (均P＜0.01).莫沙必利组按上述相同剂量比对照组分别增加:(4.0±0.54)%、(9. 5±2.35)%、(29.89±4.67)%、(72.90±11.24)%、(81.64±14.97)%(均P＜0.0 5).在远端结肠,西沙必利组(同上述剂量)比对照组运动振幅分别增加:(38.11±3.34)% 、(62.79±7.41)%、(86.51±8.24)%、(114.41±10.34)%、(151.62±12.64)%(均 P ＜0.01).莫沙必利组(同上述剂量)比对照组分别增加:(2.31±0.81)%、(3.14±0. 60)%、(6.27±0.47)%(P＜0.05)、(8.83±1.64)%(P＜0.05)、(26.62±0. 98)%(P＜0.01).结果表明,西沙必利与莫沙必利对增加胃和结肠MMC收缩均有剂量效应关系,但西沙必利对胃窦和远端结肠的促动力作用强于莫沙必利.2.西沙必利与莫沙必利对胃窦和远端结肠平滑肌收缩活动的比较胃窦和远端结肠平滑肌正常自发收缩波振幅分别为0.32±0.07g和0.21±0.04g.西沙必利引起胃窦和远端结肠平滑肌收缩的阈浓度为0.05mg/mL,最大反应浓度为0.6mg/mL.莫沙必利的阈反应浓度为0.1mg/mL,最大反应浓度为0.6mg/mL.阈浓度时,西沙必利增加胃窦和远端结肠振幅分别为(45.16±12.25)%和(85.71±20.15)%(均P＜0.01).莫沙必利增加胃窦和远端结肠振幅分别为(25.80±6.15)%和(23.65±5.45)%(均P＜0.05).给予最大反应浓度时,西沙必利增加胃窦和远端结肠分别为(187.09±16.24)%和(328.57±46.19)% (均P＜0.01).莫沙必利增加胃窦和远端结肠分别为(125.80±21.42)%、(95.23±2 7 .36)%(均P＜0.05).结果表明,西沙必利和莫沙必利二者均可增加胃窦和远端结肠平滑肌收缩活动,但莫沙必利阈浓度比西沙比利高,莫沙必利对胃特别是远端结肠的促动力作用明显低于西沙必利.3.西沙必利与莫沙必利对胃窦和远端结肠单个平滑肌细胞作用的比较在倒置显微镜下,游离的大鼠胃窦和结肠平滑肌细胞平均长度为98μm,直径为15μm.给予促动力剂西沙必利或莫沙必利均可使平滑肌细胞长度大大缩小.西沙比利和莫沙必利引起平滑细胞收缩的阈反应浓度分别为0.125mg/mL和0.25mg/m L,最大反应浓度均为2mg/mL.二者随剂量增加而肌细胞收缩反应逐渐增加,有剂量依赖性 .在阈浓度时,西沙必利(0.125mg)引起胃肌细胞收缩(13.42±3.62)%(P＜0.01), 结肠肌细胞收缩(19.42±3.51)%(P＜0.01).莫沙必利(0.25mg)引起胃肌细胞收缩( 8.46±1.63)%(P＜0.05),结肠细胞收缩(4.86±0.96)%(P＜0.05).最大浓度时,西沙必利(2mg)增加胃肌细胞收缩(45.24±7.71)%(P＜0.01),增加结肠肌细胞收缩(51.25±6.54)%(均P＜0.01).莫沙必利(2mg)增加胃肌细胞

关键词：结肠运动西沙必利收缩作用平滑肌细胞

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重组腺相关病毒转导外源基因入EB病毒转化的B淋巴细胞获长期表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第6期21卷 594-599页

作者：史耕先刘音李琳朱立平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室北京100005

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包... 详细信息

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包装后转导淋巴细胞 ,经G418筛选 ,用有限稀释法克隆转导成功的淋巴细胞。Northern杂交和RT PCR检测转导基因的mRNA表达水平。ConA结合试验检测细胞在转导基因后 6A8α 甘露糖苷酶活性的改变。结果　pAGX 反义6A8DNA及pAGX 正义 6A8DNA经包装获得了高复制滴度的重组AAV(rAAV)颗粒 ,藉助rAAV成功地把 6A8基因转导入EB病毒转化的B细胞株SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB。Northern杂交结果显示 ,转导的正义或反义 6A8DNA获得表达。经 1年余传代培养 ,RT PCR检测见BJAB和SKW6细胞中转导的正义或反义 6A8DNA的mRNA表达增加 ,新霉素抗性基因 (neoR)也获得表达 ,表明转导基因获得了长期表达。ConA结合强度在转导反义 6A8DNA的细胞升高 ,提示转导反义 6A8DNA可影响 6A8α 甘露糖苷酶的表达。结论　用AAV载体成功地把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB ,转导的基因获得长期表达 ,并干扰 6A8α 甘露糖苷酶的表达。

关键词：重组腺相关病病毒 EB病毒转化 B淋巴细胞外源基因转导

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