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6A8α-甘露糖苷酶酶解p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside

中国医学科学院学报 2001年第5期23卷 423-427页

作者：王壮志李琳史耕先刘音赵方萄朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后... 详细信息

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后的cDNA片段经测序完全符合6A8cDNA碱基顺序。转染重组表达载体pCDI-6A8的COS-7细胞的匀浆对p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用为转染空载体pCDI的细胞及野生型细胞的3～4倍,且这种酶解作用不能被swainsonine所抑制。Westernblot检测显示在相对分子质量(Mr)120000处有一明显蛋白带,此带的显影于转染pCDI-6A8cDNA的细胞明显深于转染空载pCDI及野生型细胞。结论6A8cDNA编码的蛋白质确为一种α-甘露糖苷酶,属于Ⅱ类α-甘露糖苷酶。

关键词： 6A8 α-甘露糖苷酶 COS-7细胞瞬时表达

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mm-LDL对內皮细胞转录因子NF-kB活性的影响

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中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 312-316页

作者：尹鸿操刘欣岩刘佩毛张华梁平王宗立佘铭鹏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理学教研室北京100005

目的研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白... 详细信息

目的研究轻微修饰低密度脂蛋白(mm-LDL)激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链(PDGFb)表达的调控作用。方法以FeSO4修饰法制备mm-LDL，以正常LDL(n-LDL)作对照，作用于培养内皮细胞后提取核蛋白，用凝胶阻滞实验检测转录因子NF-kB核转位及结合活性的变化。观察自由基清除剂probucol及PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB的影响。通过检测报告基因探讨核因子诱导激酶（NIK）和核因子-kB抑制亚基激酶(IKK)在激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径中的作用以及mm-LDL激活的NF-kB对PDGFb基因启动子的作用。结果 mm-LDL能激活培养内皮细胞转录因子NF-kB, 自由基清除剂probucol和PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB无明显抑制作用。变异型NIK及IKK能显著降低报告基因荧光素酶的活性，mm-LDL激活的NF-kB还能增加带有PDGFb基因上游调控序列（-189/＋43）的报告基因荧光素酶的活性。Slot blot结果显示变异型NIK能显著减少受mm-LDL刺激的内皮细胞 PDGFb mRNA含量。结论 mm-LDL可通过NIK-IKK途径激活内皮细胞转录因子NF-kB并促进PDGFb基因表达。

关键词：轻微修饰低密度脂蛋白动脉粥样硬化内皮细胞 NF-kB 核因子诱导激酶

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胃肠功能性动力疾病发病机制中的生理与病理生理

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中国实用内科杂志 2001年第10期21卷 577-578页

作者：周吕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

自20世纪80年代中期以来,国内外许多学者对胃肠功能性动力疾病非常重视,对其病因和发病机制进行了广泛的研究.于1999年又公布了经过修订的罗马Ⅱ(RomeⅡ)功能性胃肠障碍诊断标准,这对深入开展胃肠功能障碍的基础与临床研究具有重要意义... 详细信息

自20世纪80年代中期以来,国内外许多学者对胃肠功能性动力疾病非常重视,对其病因和发病机制进行了广泛的研究.于1999年又公布了经过修订的罗马Ⅱ(RomeⅡ)功能性胃肠障碍诊断标准,这对深入开展胃肠功能障碍的基础与临床研究具有重要意义.胃肠功能性动力疾病发病机制很复杂,本文从生理与病理生理角度试述4个问题.

关键词：胃肠功能性动力疾病发病机制病理生理

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胃肠动力与相关受体

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基础医学与临床 2001年第z1期21卷 13-15页

作者：周吕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目前,胃肠学家们开始把注意力集中在胃肠动力上,因为维持人体生命活动的营养物质的吸收除靠消化液的作用外,更有赖于最佳的胃肠运动状态以实施混合、碾磨和运送食物的任务 .当神经递质、肽类激素、单胺类物质以及生长因子等调节分子对... 详细信息

目前,胃肠学家们开始把注意力集中在胃肠动力上,因为维持人体生命活动的营养物质的吸收除靠消化液的作用外,更有赖于最佳的胃肠运动状态以实施混合、碾磨和运送食物的任务 .当神经递质、肽类激素、单胺类物质以及生长因子等调节分子对平滑肌细胞动力发挥其作用时,首先要与靶细胞上的特异受体结合.调节胃肠道的受体种类之多是惊人的,这与胃肠道具有多种类型的细胞及这些细胞具有多种调节因子有关.空腹和餐后胃肠运动模式的多样性及神经与肽类调控的复杂性要通过神经元和神经纤维以及平滑肌细胞上的受体才能产生效应.现就几种主要受体对胃肠动力调节及其相关药物的临床意义做一简介.

关键词：受体调节作用激动剂胃肠动力远端结肠多潘立酮结肠动力肠平滑肌细胞下食管胃动素西沙必利受体拮抗剂受体介导肠粘膜肌间神经丛奥尔巴克丛

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血管紧张素Ⅱ抑制ECV304细胞BK_(Ca)效应的细胞机制及银杏叶提取物的作用

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中国医学科学院学报 2001年第5期23卷 467-471页

作者：林琳郑永芳屈金河鲍光宏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngiotensinⅡAⅡ)抑制人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞的大电导钙激活钾通道(Maxi-conductancecalcium-activatedpotassiumchannelBKCa)效应与AⅡ受体、蛋白激酶C(ProteinKinaseCPKC)和一氧化氮(NitricOxideNO)的关系,以及中药银杏叶提取物Gingkoleafextract对AⅡ抑制BKCa效应的影响。方法细胞贴附式膜片箝技术。结果AⅡ受体拮抗剂saralasin(10-7mol/L)可对抗AⅡ(10-7mol/L)的抑制效应;PKC的激动剂佛波酯(5×10-8mol/LPhorbolester)可加重AⅡ的抑制效应;NO(10-10mol/L,sod-iumnitroprussideSNP)则削弱AⅡ的抑制作用。中药银杏叶提取物(800μg/ml)可激活BKCa并可对抗AⅡ的抑制效应。结论AⅡ对ECV304BKCa的抑制是由AⅡ受体介导的,PKC参与其中。NO与银杏叶提取物对ECV304BKCa免受AⅡ的抑制具有保护作用。

关键词：钙激活钾通道血管紧张素Ⅱ受体血管内皮细胞一氧化氮银杏叶提取物高血压动脉粥样硬化

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犬陈旧性心肌梗死时连接蛋白43的分布

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中国医学科学院学报 2001年第3期23卷 255-258,I003页

作者：霍明章于德洁郝维陈孟勤曹济民中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理学研究室北京100005

目的探讨陈旧性心肌梗死时心肌缝隙连接蛋白43（connexin 43, Cx43）的分布特征。方法结扎犬冠状动脉造成心肌梗死，术后恢复40～50 d。用改良的免疫细胞化学法显示心肌梗死区、边缘带及非缺血区Cx43的分布，半定量分析不同部位Cx43的... 详细信息

目的探讨陈旧性心肌梗死时心肌缝隙连接蛋白43（connexin 43, Cx43）的分布特征。方法结扎犬冠状动脉造成心肌梗死，术后恢复40～50 d。用改良的免疫细胞化学法显示心肌梗死区、边缘带及非缺血区Cx43的分布，半定量分析不同部位Cx43的分布密度。结果与正常心肌相比，梗死病灶及其邻近区域Cx43的分布出现明显紊乱：梗死中心区Cx43完全消失；边缘带Cx43呈现不均匀消失，少量Cx43分布于岛状或半岛状尚存活的心肌；心肌细胞端－端相接处的Cx43严重消失，而细胞侧－侧相接处的Cx43仍有部分存在。非缺血区Cx43的密度和分布与正常心肌相比无明显改变。结论陈旧性心肌梗死时Cx43的数量和分布呈现高度不均一性，尤其在边缘带Cx43的分布特点是形成局部传导阻滞和折返性心律失常的结构基础。

关键词：缝隙连接连接蛋白43 折返性心律失常陈旧性心肌梗死

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褪黑素抑制雌二醇诱致的垂体PRL瘤生长与血浆PRL和过氧化脂质含量的关系

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生理学报 2001年第3期53卷 165-169页

作者：高列许建萍单惠敏张荣许荣焜中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京 100 中国医学科学院肿瘤医院内科

雄性Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠皮下埋置１７－β雌二醇（１７－β－ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，Ｅ２）药泵诱发垂体催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）瘤，并每日皮下注射褪黑素（ｍｅｌａｔｏｎｉｎ，ＭＬＴ），观察ＭＬＴ对Ｅ２... 详细信息

雄性Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ大鼠皮下埋置１７－β雌二醇（１７－β－ｅｓｔｒａｄｉｏｌ，Ｅ２）药泵诱发垂体催乳素（ｐｒｏｌａｃｔｉｎ，ＰＲＬ）瘤，并每日皮下注射褪黑素（ｍｅｌａｔｏｎｉｎ，ＭＬＴ），观察ＭＬＴ对Ｅ２诱发ＰＲＬ瘤生长的影响。另外，采用放免法和紫外分光光度法测定大鼠血浆ＰＲＬ和过氧化脂质（ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｌｉｐｉｄ，ＰＬ）浓度，观察ＰＲＬ瘤重量与大鼠血浆ＰＲＬ、ＰＬ浓度间的相关关系。实验结果显示，在对照组、０．０５、０．２５、０．５０、１．００和２．００ｍｇＭＬＴ组，ＰＲＬ瘤重量分别为１１５．０±７１．０、８５．２±４１．０、５８．９±２４．１、７２．７±２３．６、７９．３±５６．１、７４．５±４６．８ｍｇ；血浆ＰＲＬ浓度分别为４９３．４６±３３．３、３７３．７８±２６．５、１２５．１３±１３．３、２０１．７９±１１．２、４１８．８８±４１．３、２８１．９４±３６．４ｎｇ／ｍｌ；血浆ＰＬ水平分别为１．２１±０．２３、０．８９±０．３２、０．９２±０．２７、０．６４±０．２４、０．４１±０．１４、０．４３±０．２１△Ｄ２３３／ｍｌ。相关性分析表明，ＰＲＬ瘤重量与血浆ＰＲＬ浓度间的相

关键词：褪黑素垂体催乳素瘤 17-β-雌二醇催乳素过氧化脂质

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褪黑激素对17-β-雌二醇诱致的大鼠垂体催乳素瘤细胞增殖的抑制作用

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基础医学与临床 2001年第2期21卷 148-150页

作者：高列许建萍单惠敏许荣焜中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院内科北京100021

观察不同浓度的褪黑激素 (Melatonin ,MLT)对原代培养的大鼠垂体催乳素瘤细胞增殖的影响。用 80～10 0g体重的雄性Sprague Dawley(SD)大鼠 ,皮下埋置雌二醇诱致垂体催乳素瘤 (prolactinoma)形成后 ,取出瘤体 ,经消化、过滤、离心 ,用SFF... 详细信息

观察不同浓度的褪黑激素 (Melatonin ,MLT)对原代培养的大鼠垂体催乳素瘤细胞增殖的影响。用 80～10 0g体重的雄性Sprague Dawley(SD)大鼠 ,皮下埋置雌二醇诱致垂体催乳素瘤 (prolactinoma)形成后 ,取出瘤体 ,经消化、过滤、离心 ,用SFFD培养基重悬细胞 ,得细胞悬液 ,浓度为 0 75× 10 6/mL ,转入 2 4孔培养板中并加入相应剂量的MLT使其终浓度 (mol/L)分别为 10 -5、10 -7、10 -9、10 -11和 10 -13 ,另设空白对照组 ,于 37℃、5 %CO2 条件下培养 1h ,再在每孔中加入 2 μCi [3H] TdR继续孵育 2 4h后测counts/min值。结果显示 ,在对照组和各剂量 (mol/L)MLT用药组 10 -5,10 -7,10 -9,10 -11和 10 -13 的 [3H]-TdR掺入率分别为 2 0 38 75± 186 84,142 1 75±6 4 49,12 38 2 5± 6 1 72 ,92 4 0 0± 6 4 44 ,10 33 2 5± 12 7 2 2和 110 3 2 5± 15 1 5 3counts/min。表明 10 -5～10 -13mol/L的MLT能有效抑制 [3H] TdR在原代培养的垂体催乳素瘤细胞中的掺入 ,P <0 0 0 1。其中 ,以 10 -9mol/L的MLT的抑制作用最强 ,达 5 4 6 8%。提示在培养条件下 ,10 -5～ 10 -13 mol/LMLT能有效地抑制E2 诱导的垂体催乳素瘤细胞的增殖。

关键词：褪黑激素催乳素瘤细胞增殖抑制作用垂体催乳素瘤

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胃粘膜慢性炎症与功能性消化不良之间相互关系的探讨

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基础医学与临床 2001年第Z1期21卷 82-83页

作者：郭建强柯美云张彦东中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化科100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院消化科100730 基础医学研究所病理教研室

目的功能性消化不良(FD)胃镜下所见多数大致正常,而30%～50%患者组织学上仍表现为慢性炎症.慢性胃炎与FD之间的关系,一直存在有争议.本研究旨在探讨胃粘膜慢性炎症与FD之间的相互关系.方法临床连续入选符合FD诊断的患者41例(男∶女=12∶... 详细信息

目的功能性消化不良(FD)胃镜下所见多数大致正常,而30%～50%患者组织学上仍表现为慢性炎症.慢性胃炎与FD之间的关系,一直存在有争议.本研究旨在探讨胃粘膜慢性炎症与FD之间的相互关系.方法临床连续入选符合FD诊断的患者41例(男∶女=12∶29),平均年龄38. 2岁(21～65岁),病程2～10年.对所有患者首先进行消化不良症状(餐后饱胀、不适、早饱、打嗝为主,无反酸、烧心、便秘等)积分(0～4);通过胃镜取胃底、胃体、胃窦和十二指肠粘膜活检各2块,分别进行HE病理学检查和甲苯胺蓝染色观察Hp感染、肥大细胞计数及活化状况.结果 1.一般资料:44例FD患者,消化不良症状积分为2.6±0.5分,变异系数为10.4%.2.组织学改变:胃窦(31.7%)慢性活动性炎症显著高于胃底(7.3%)、胃体 (9.8%)和十二指肠(9.8%)(P＜0.05);胃窦粘膜组织(24.4%)显著低于以上其他部位 (53.7%、51.2%和46.3%)(P＜0.05);慢性非活动性炎症4个部位之间无显著性差别( 胃底、体、窦和十二指肠分别为39%、39%、43.9%和43.9%)(P＞0.05).3.各部位粘膜在慢性活动性、非活动性炎症和正常粘膜组中肥大细胞计数无显著不同;除胃底中慢性活动性、非活动性炎症组的肥大细胞活化计数和活化率显著高于正常粘膜组外(P＜0.05) ;3组的十二指肠降部粘膜中肥大细胞计数、活化计数和活化率均显著低于各部位胃内粘膜 .4. ***检出率:慢性活动性炎症组中除胃窦为51.8%外,其他部位并未检出;慢性非活动性胃炎中,胃体和胃窦显著高于胃底和十二指肠(P＜0.05);正常粘膜组中,H. pylori检出率胃窦显著高于其他部位(P＜0.05);***阳性与阴性FD患者之间,胃底、胃体和胃窦的肥大细胞计数、肥大细胞活化计数以及活化率之间无显著差别.结论胃十二指肠粘膜的慢性炎症可能是FD发生的病理学基础之一;胃底和胃体肥大细胞活化可能与FD的发病有关;***感染可能与FD之间的相关性并不显著.

关键词：功能性消化不良胃粘膜慢性炎症

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卖淫妇女和嫖客的性病知识及性行为对比研究

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中国公共卫生 2001年第4期17卷 305-306页

作者：张志坤董建群左群张孔来中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室北京100005

卖淫妇女和嫖客都是性病的易感人群,他们对性病的认识直接影响他们在商业性性活动中的行为.目前多局限于其中的单一人群的调查研究,如卖淫妇女或嫖客对性病认知水平的研究,没有同时对这两个直接发生关系的特殊人群进行平行对比研究,限... 详细信息

卖淫妇女和嫖客都是性病的易感人群,他们对性病的认识直接影响他们在商业性性活动中的行为.目前多局限于其中的单一人群的调查研究,如卖淫妇女或嫖客对性病认知水平的研究,没有同时对这两个直接发生关系的特殊人群进行平行对比研究,限制了人们对其安全性行为的客观认识.本文对卖淫妇女及嫖客的性病知识和安全套的使用情况进行了对比研究.现报道如下.

关键词：卖淫妇女嫖客性病知识性行为对比研究

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