检索结果-内蒙古大学图书馆

MAPK和Ca^(2+)通路对介导弱氧修饰LDL增强HUVECPAI-1活性

基础医学与临床 2002年第6期22卷 530-533页

作者：祖淑玉李晓冬陆晓茜朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京10005

探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂 (PAI 1)活性的影响及促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)级联反应及第二信使Ca2 + 在其中作用。用mmLDL作用于传代培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,发色底物法检测PA... 详细信息

探讨弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对血管内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂 (PAI 1)活性的影响及促分裂原活化蛋白激酶 (MAPK)级联反应及第二信使Ca2 + 在其中作用。用mmLDL作用于传代培养的人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,发色底物法检测PAI 1活性的变化 ,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化。结果显示 ,几种不同浓度的mmLDL(12 5～ 2 0 0mg/L)作用HUVEC 12h ,PAI 1活性显著增加。PD980 5 9(6 0 μmol/L)能阻断mmLDL对PAI 1活性的诱导反应。mmLDL(5 0mg/L)能显著诱导HUVEC胞内游离钙离子浓度增高。表明mmLDL作用HUVEC能诱导PAI 1活性明显增加 ;MAPK级联反应和胞内Ca2 + 可能起到重要作用。

关键词：内皮细胞纤溶酶原激活物抑制剂促分裂原活化蛋白激酶钙

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弱氧化修饰低密度脂蛋白诱导ECV304组织因子基因表达及银杏内酯B的抑制作用

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基础医学与临床 2002年第3期22卷 241-244页

作者：陆晓茜李晓冬祖淑玉朱广瑾中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系北京100005

为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激... 详细信息

为研究弱氧化修饰低密度脂蛋白 (mmLDL)对ECV30 4组织因子 (TF)蛋白含量和mRNA水平的影响、对胞浆游离钙离子 ([Ca2 + ]i)的影响 ,以及银杏内酯B等的干预作用。采用ELISA法检测细胞内TF蛋白含量 ,用RT PCR法检测细胞内TFmRNA水平 ,用激光共聚焦显微镜观察 [Ca2 + ]i 的变化。结果显示 ,4 0mg LmmLDL作用ECV30 4 4h ,能使TF蛋白含量及mRNA水平显著增加 ,并迅速升高 [Ca2 + ]i。抗氧化剂银杏内酯B及PKC抑制剂Staurosporine可拮抗mmLDL的上述诱导反应。以上结果提示 ,mmLDL可诱导ECV30 4TF表达 ,Ca2 + 与PKC参与mmLDL诱导ECV30 4TF基因表达过程。

关键词：弱氧化修饰低密度脂蛋白组织因子钙 ECV304 银杏内酯B 抑制作用基因表达

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纳米粒子介导特异基因转染的实验研究

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中华医学杂志 2002年第5期82卷 341-344页

作者：李拥军管珩刘昌伟郑曰宏赵三妹王宗立杨菁宋存先中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基本外科 100730 中国医学科学院基础医学研究所病理室中国医学科学院生物医学工程研究所第七研究室

目的　观察纳米粒子携带特异性基因转染的可行性及其效率。方法　应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物和聚乙烯醇包载特异性反义单核细胞趋化蛋白 1基因 ,制备纳米级粒子混合物。检测其包埋率、体外释放情况及粒度。以阳离子脂质体为对照 ,利用... 详细信息

目的　观察纳米粒子携带特异性基因转染的可行性及其效率。方法　应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物和聚乙烯醇包载特异性反义单核细胞趋化蛋白 1基因 ,制备纳米级粒子混合物。检测其包埋率、体外释放情况及粒度。以阳离子脂质体为对照 ,利用培养的平滑肌细胞 ,应用聚合酶链反应(PCR)观察其为真核细胞传递基因的可能性 ;采用移植静脉内膜增生动物模型 ,应用RNA斑点杂交和病理形态学分析 ,观察其在体内的基因转染、表达及生物学效应。结果　制备的纳米粒子 DNA粒度为 1 50～ 30 0nm ,包埋率为 :0 .9% ,体外释放时间为 2周左右。PCR结果提示 :纳米粒子可将目的基因转移至平滑肌细胞中。体内实验显示 :纳米粒子可实现体内局部基因转染、表达 ,发挥相应的效应。

关键词：基因治疗载体纳米粒子反义单核细胞趋化因子血管再狭窄基因转染实验研究

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弱氧化型低密度脂蛋白的致动脉粥样硬化作用

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中国动脉硬化杂志 2002年第3期10卷 271-274页

作者：李素敏郭恒怡吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理教研室北京市100005

弱氧化型低密度脂蛋白近年来被认为是动脉粥样硬化发病过程中关键的致病因素之一。它几乎参与了该病变发生发展的所有环节 ,如介导单核细胞与内皮细胞粘附增强 ;导致内皮细胞损伤 ;促进氧化型低密度脂蛋白的大量产生 ;促进泡沫细胞的形... 详细信息

弱氧化型低密度脂蛋白近年来被认为是动脉粥样硬化发病过程中关键的致病因素之一。它几乎参与了该病变发生发展的所有环节 ,如介导单核细胞与内皮细胞粘附增强 ;导致内皮细胞损伤 ;促进氧化型低密度脂蛋白的大量产生 ;促进泡沫细胞的形成 ;削弱高密度脂蛋白的抗动脉粥样硬化作用 ;诱导血管平滑肌细胞的迁移和增殖 ;

关键词：胆蛋白低密度弱氧化型动脉粥样硬化

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温筋通对链脲佐菌素糖尿病大鼠坐骨神经糖化终产物受体mRNA表达的调节

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中国糖尿病杂志 2002年第4期10卷 219-221页

作者：梁晓春唐代屹郭赛珊张建伟孙仁宇张宏凌允礼中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院中医科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础研究所病理生理研究室

目的　探讨中药复方温筋通对糖尿病大鼠坐骨神经糖化终产物 (AGEs)受体 (RAGE)m RNA表达的影响。　方法　 4 0只大鼠采用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。制模后将大鼠随机分为模型组、氨基胍组、预防组和治疗组。预防组与治疗组分别在... 详细信息

目的　探讨中药复方温筋通对糖尿病大鼠坐骨神经糖化终产物 (AGEs)受体 (RAGE)m RNA表达的影响。　方法　 4 0只大鼠采用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型。制模后将大鼠随机分为模型组、氨基胍组、预防组和治疗组。预防组与治疗组分别在制模后不同时间给予温筋通灌胃。另选 10只体重、鼠龄相匹配的大鼠作为正常对照组。采用逆转录聚合酶链式反应 (RT- PCR)检测病程12周各组大鼠坐骨神经 RAGE m RNA表达水平。　结果　糖尿病大鼠坐骨神经 RAGE m RNA表达较正常对照组增强 (P<0 .0 1) ,温筋通预防组、治疗组及氨基胍预防组大鼠坐骨神经 RAGE m RNA表达较糖尿病未治疗组降低 (P<0 .0 5～ 0 .0 1)。　结论　温筋通可能通过调节糖尿病大鼠坐骨神经RAGE m RNA的异常表达 ,减轻

关键词：温筋通链脲佐菌素糖尿病坐骨神经糖化终产物受体信使RNA 中药复方

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糖尿病大鼠心肌及主动脉糖基化终产物受体mRNA表达及仙贞片对其影响的实验研究

糖尿病大鼠心肌及主动脉糖基化终产物受体mRNA表达及仙贞片对其影...

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第三届糖尿病（消渴病）国际学术会议

作者：潘明政郭赛珊梁晓春唐代屹张建伟孙仁宇中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院北京协和医院中医科中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室中国协和医科大学中国医学科学院基础医学研究所病理生理研究室

糖尿病最重要的慢性并发症之一是心血管系统病变,而长期的高血糖环境致蛋白非酶糖基化终产物 (AGEs)的形成和累积、并通过受体的相互作用是形成的根本原因。控制高血糖,抑制AGEs的形成及其与受体的结合,将可能预防或减缓糖尿病慢性并发... 详细信息

糖尿病最重要的慢性并发症之一是心血管系统病变,而长期的高血糖环境致蛋白非酶糖基化终产物 (AGEs)的形成和累积、并通过受体的相互作用是形成的根本原因。控制高血糖,抑制AGEs的形成及其与受体的结合,将可能预防或减缓糖尿病慢性并发症包括糖尿病性心血管并发症的发生。本课题应用原位杂交的方法观察STZ糖尿病Wistar大鼠心肌和主动脉组织中RAGE-mRNA表达,与氨基胍对照观察中药仙贞片的影响。

关键词：仙贞片灰度值糖尿病大鼠大鼠心肌氨基肌糖基化终产物受体

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oxLDL对转人apoAI基因小鼠动脉平滑肌细胞胆固醇摄取和清除的影响

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中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 328-332页

作者：曾莹赵高峰钱军王宗立佘铭鹏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理研究室北京100005

目的明确氧化低密度脂蛋白（oxLDL）对转人apoAI基因 C57BL/6小鼠主动脉平滑肌细胞（tr-SMC）胆固醇清除与摄取的影响；转入的apoAI基因是否有助于减轻oxLDL引起的SMC胆固醇积聚和对细胞的损害；以及oxLDL的刺激，对细胞已转入的apoAI... 详细信息

目的明确氧化低密度脂蛋白（oxLDL）对转人apoAI基因 C57BL/6小鼠主动脉平滑肌细胞（tr-SMC）胆固醇清除与摄取的影响；转入的apoAI基因是否有助于减轻oxLDL引起的SMC胆固醇积聚和对细胞的损害；以及oxLDL的刺激，对细胞已转入的apoAI基因表达的影响。方法用已建立的含小鼠金属硫蛋白I（MT-I）启动子的人apoAI转基因C57BL/6 小鼠主动脉SMC，通过3H-胆固醇标记率和清除率测定，观察oxLDL对tr-SMC胆固醇摄取与清除的影响。通过RT-PCR及 Northern blot技术检测oxLDL对tr-SMC基因表达的影响。结果 30 μg／ml oxLDL明显促进小鼠SMC增生；未见tr-SMC与非转基因小鼠平滑肌细胞（n-SMC）在标记率间的差别，oxLDL刺激后标记率增加约100%；tr-SMC较n-SMC细胞内胆固醇清除率增加40% ～ 50%。oxLDL刺激后，n-SMC清除率下降28%，而 tr-SMC仅下降10%。RT-PCR 及Northern blot表明oxLDL刺激后tr-SMC 的h-apoAI基因表达明显增加。结论转人apoAI 基因小鼠SMC的基因表达有助于减轻oxLDL引起的SMC胆固醇积聚；oxLDL的刺激促进tr-SMC 的人apo AI基因表达，表达的 h-apo AI可抑制oxLDL对平滑肌细胞的损害。

关键词：氧化低密度脂蛋白载脂蛋白AI 转基因平滑肌细胞胆固醇动脉血管

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血管紧张素Ⅱ对人内皮细胞转录因子NF-κB的激活机制及其对血小板源生长因子B链基因转录的影响

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中华病理学杂志 2001年第4期30卷 276-280页

作者：李皓尹鸿操张华王宗立佘铭鹏中国协和医科大学基础医学研究所病理研究室北京中国医学科学院100005

目的　研究血管紧张素Ⅱ对ECV3 0 4细胞中转录因子NF κB的作用和对血小板源生长因子B链 (PDGF B)基因表达的影响。方法　采用电泳迁移率移动分析法 (EMSA) ,免疫组织化学方法 ,共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术 ;荧光素酶报告基... 详细信息

目的　研究血管紧张素Ⅱ对ECV3 0 4细胞中转录因子NF κB的作用和对血小板源生长因子B链 (PDGF B)基因表达的影响。方法　采用电泳迁移率移动分析法 (EMSA) ,免疫组织化学方法 ,共聚焦显微镜及金颗粒标记免疫电镜技术 ;荧光素酶报告基因与变异型激酶质粒共转染的方法及Northern印迹法研究血管紧张素Ⅱ激活ECV3 0 4细胞NF κB的信号传递路径和检测了血管紧张素Ⅱ刺激前后ECV3 0 4细胞PDGF BmRNA的表达水平。结果　血管紧张素Ⅱ刺激后 ,在ECV3 0 4细胞内有NF κB的激活及核易位过程 ,应用免疫荧光共聚焦显微镜 ,免疫电镜及Northern印迹等方法均可观察到PDGF B或其基因表达增高。变异型激酶质粒IKKα KM ,IKKβ KM及NIK Km可抑制经血管紧张素Ⅱ刺激的转染细胞内与NF κB启动相连的荧光素酶的表达。结论　血管紧张素Ⅱ可激活胞质内NF κB并出现核易位 ,激酶NIK、IKKα 和IKKβ 参与了此信号传递路径。血管紧张素Ⅱ刺激后PDGF B链mRNA水平增高。

关键词：血管紧张素Ⅱ 内皮 NF-kB 血小板源生长因子

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血管紧张素II对血管内皮细胞三种转录因子作用的影响

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中国病理生理杂志 2001年第3期17卷 196-199页

作者：王华斯琴王小明郭恒怡李素敏吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室北京100005

目的和方法 :分别采用凝胶迁移率改变法 (EMSA)和Western -blot的方法从基因转录水平探讨AngII对血管内皮细胞株ECV30 4的影响。结果 :(1)EMSA结果表明 ,AngII组核抽提物与 3种探针的结合活性均高于正常对照组 ,与NF -κB ,SP - 1和AP ... 详细信息

目的和方法 :分别采用凝胶迁移率改变法 (EMSA)和Western -blot的方法从基因转录水平探讨AngII对血管内皮细胞株ECV30 4的影响。结果 :(1)EMSA结果表明 ,AngII组核抽提物与 3种探针的结合活性均高于正常对照组 ,与NF -κB ,SP - 1和AP - 1探针结合活性分别为正常对照组的 10 98倍 ,3 97倍和 1 33倍 ,说明AngII对血管内皮细胞的作用机制可能与NF -κB ,SP - 1和AP - 1等转录因子的转录活性增加有关。进一步证实NF -κB ,AP -1在内皮细胞功能失调发病机制中的重要作用 ,同时发现转录因子SP - 1也可能参与此过程。 (2 )Western -blot结果表明 ,AngII处理后细胞核内NF -κB含量明显增加 ,提示AngII能够增加血管内皮细胞转录因子NF -κB的核转位 ,进一步验证了EMSA的结论。而细胞核内SP - 1和AP - 1的含量较对照组略有增加 ,提示AngII对SP - 1和AP - 1的核转位无明显影响而可能主要是促进转录因子与相应顺式调控元件的结合活性。结论 :AngII对内皮细胞 3种重要的转录因子的活性有不同程度的影响。

关键词：血管紧张素Ⅱ 转录因子血管内皮细胞 EMSA Western-blot 基因转录

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尼古丁对脐静脉内皮细胞蛋白激酶C和Ras蛋白活性及胞浆钙浓度的影响

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基础医学与临床 2001年第5期21卷 428-431页

作者：周卫辉陈祥银中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室北京100005

为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用 ,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化 ,用γ 32 P ATP掺入法检测PKC活性 ,用GST RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含... 详细信息

为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用 ,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化 ,用γ 32 P ATP掺入法检测PKC活性 ,用GST RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含量。观察到 (1～ 5 ) 10 - 4 mol L尼古丁使人脐静脉内皮细胞 [Ca2 + ]i 迅速增加 ,峰值约超过基础值 5 0 %～ 2 0 0 % ,钙通道阻滞剂尼莫地平可拮抗尼古丁的此种效应 ;10 - 4 mol L尼古丁作用 1～ 12h后胞浆PKC活性明显降低 ;而胞膜PKC活性则升高。 10 - 4 ～ 10 - 3 mol L尼古丁作用于人脐静脉内皮细胞 10～ 30min可使活化的Ras蛋白含量增加。以上结果提示尼古丁可使人脐静脉内皮细胞 [Ca2 + ]i

关键词：尼古丁钙蛋白激酶C Ras蛋白内皮细胞

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