检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学与临床 2005年第6期25卷 507-511页

作者：张洁邱劲娄晋宁王小明斯琴吴其夏郭恒怡中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院病理生理学系中日友好医院临床医学研究所北京100029

目的探讨TNFαⅠ型受体(TNFR1)对小鼠脑血管内皮细胞iNOS、HO1基因表达水平的影响。方法体外培养TNFR1基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞(BVECTNFR1)和野生型小鼠脑血管内皮细胞(BVEC),分别给予5ngmLTNFα刺激24h后,用实时荧光定量PCR技术及... 详细信息

目的探讨TNFαⅠ型受体(TNFR1)对小鼠脑血管内皮细胞iNOS、HO1基因表达水平的影响。方法体外培养TNFR1基因敲除的小鼠脑血管内皮细胞(BVECTNFR1)和野生型小鼠脑血管内皮细胞(BVEC),分别给予5ngmLTNFα刺激24h后,用实时荧光定量PCR技术及Westernblot方法检测两种细胞iNOS基因和HO1mRNA和蛋白表达量。结果给予TNFα刺激后,iNOSmRNA和蛋白表达仅在野生型脑血管内皮细胞内明显增高,而在受体敲除脑血管内皮细胞无明显变化。HO1mRNA和蛋白表达量在野生型小鼠脑血管内皮细胞和受体敲除小鼠脑血管内皮细胞均明显增高。结论TNFα可能作用于脑血管内皮细胞TNFR1,增加iNOS表达,HO1表达增高并非由TNFR1介导,而由TNFα的其他受体介导。

关键词：脑血管内皮细胞 TNF-α HO-1 Ⅰ型受体小鼠实时荧光定量PCR技术 TNFR1 基因表达水平 Westem iNOS基因 mRNA iNOS表达野生型基因敲除体外培养 blot 蛋白表达受体介导表达量 24h 种细胞增高细胞内

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多聚丙氨酸延展突变与人类遗传病

引用

基础医学与临床 2005年第11期25卷 986-991页

作者：赵秀丽张学中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

三核苷酸重复的延展突变是导致遗传病的重要机制之一。根据产生机制和遗传特点的不同,可将其分为2类:一类是引起多种神经系统遗传病的动态突变;另一类就是本文重点介绍的多聚丙氨酸延展(polyalanine expan-sion,PAE)突变。PAE是指编码... 详细信息

三核苷酸重复的延展突变是导致遗传病的重要机制之一。根据产生机制和遗传特点的不同,可将其分为2类:一类是引起多种神经系统遗传病的动态突变;另一类就是本文重点介绍的多聚丙氨酸延展(polyalanine expan-sion,PAE)突变。PAE是指编码多聚丙氨酸的不完全GCN(N为A、C、G或T中任意一种)三核苷酸重复的延展,其结果是蛋白中多聚丙氨酸链的氨基酸数增多。PAE突变能在世代间稳定传递,其产生机制可能为等位基因间的不等交换。迄今为止,已在9种遗传病中发现PAE突变。本文将对PAE突变及所致遗传病作一介绍。

关键词：遗传病突变多聚丙氨酸延展三核苷酸重复

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肿瘤血管内皮细胞的免疫学特性

引用

癌症 2005年第5期24卷 634-638页

作者：张文健吴练秋叶丽亚娄晋宁中国医学科学院基础医学院中国协和医科大学病理生理学系卫生部中日友好医院临床医学研究所卫生部中日友好医院临床医学研究所北京100029

在肿瘤的发展过程中,肿瘤血管起到极为重要的作用,不仅为肿瘤提供营养、而且为肿瘤的转移提供了途径。由于肿瘤血管内皮细胞长期处于肿瘤微环境中,其表型及功能特性都发生了明显的变化,其中包括某些免疫学特性的改变,例如内皮细胞粘附... 详细信息

在肿瘤的发展过程中,肿瘤血管起到极为重要的作用,不仅为肿瘤提供营养、而且为肿瘤的转移提供了途径。由于肿瘤血管内皮细胞长期处于肿瘤微环境中,其表型及功能特性都发生了明显的变化,其中包括某些免疫学特性的改变,例如内皮细胞粘附分子表达水平降低、白细胞粘附作用减弱、抗原递呈功能不良、抗自由基损伤能力增强、合成大量的细胞外基质等。由于肿瘤血管内皮细胞是免疫细胞和免疫治疗药物进入肿瘤组织的第一道屏障,因此肿瘤血管内皮细胞的免疫学特性可能与肿瘤细胞逃避免疫监视、抵抗免疫杀伤有关。本文简要综述有关肿瘤血管内皮细胞免疫学特性,并分析这些特性与肿瘤免疫逃逸的关系。

关键词：肿瘤血管内皮细胞粘附分子 MHC分子氧化损伤细胞外基质免疫逃逸

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗原基因克隆表达及其抗体诊断原发性胆汁性肝硬化的价值初探

引用

中华检验医学杂志 2005年第11期28卷 1120-1125页

作者：李永哲刘镭孙庆国曾常茜赵振国佟大伟张蜀澜高扬于孟学朱立平 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科北华大学医学院免疫学教研室北华大学医学院免疫学教研室吉林北方肝胆医院吉林北方肝胆医院中国医学科学院中国协和医大学基础医学研究所免疫学系 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿免疫科

目的克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,建立酶联免疫吸附法(ELISA),初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义。方法构建重组表达... 详细信息

目的克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,构建重组表达质粒,获得具免疫学活性的纯化重组蛋白,建立酶联免疫吸附法(ELISA),初探抗核包膜蛋白gp210、p62和LBR自身抗体在原发性胆汁性肝硬化(PBC)诊断中的意义。方法构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21、M15中表达;融合蛋白经NiNAT树脂柱进行亲和层析纯化,并通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)及免疫印迹法(WB)进行免疫活性鉴定;应用表达蛋白建立间接ELISA,检测60名健康体检者、68例原发性胆汁性肝硬化(PBC)、60例病毒性肝炎、60例结缔组织病患者血清中抗gp210、p62和LBR抗体。结果经重组质粒测序和酶切结果证实,gp210、p62和LBR目的基因已正确插入原核表达载体中,基因序列正确,符合表达框架;SDSPAGE检测表达产物分别在69000、62000和27000处有一明显的蛋白表达条带,WB分析表明重组蛋白具有人gp210、p62和LBR抗原反应性。ELISA检测标本血清结果显示,PBC中,抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体阳性率分别为36.8%、30.9%和5.9%;而病毒性肝炎组、结缔组织病组和健康体检组中,除抗gp210抗体在结缔组织病患者中阳性率为1.7%外,3种自身抗体检测结果均为阴性。PBC组3种自身抗体阳性率与疾病对照组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。结论本研究成功克隆人核包膜蛋白自身抗原gp210、p62和LBR基因,并将其在大肠杆菌中成功表达。应用纯化融合蛋白建立的ELISA检测抗gp210抗体、抗p62抗体和抗LBR抗体,对PBC具有较好特异性,为PBC的特异性临床诊断提供了有效的工具。

关键词：肝硬化,胆汁性自身抗原核包膜蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HRV143C蛋白酶在大肠杆菌的融合表达及活性检测

引用

基础医学与临床 2005年第7期25卷 653-656页

作者：文中伟狄文娜董秀华阴彬强伯勤袁建刚彭小忠中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的人鼻病毒3C蛋白酶具有酶切物异性强且在低温下仍保持较强酶活性的特点而被用作工具酶。为大量获得3C蛋白酶,以融合形式在大肠杆菌中高效表达3C蛋白酶。方法将编码HRV 14 3C蛋白酶的cDNA克隆到pGEX4T-1载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表... 详细信息

目的人鼻病毒3C蛋白酶具有酶切物异性强且在低温下仍保持较强酶活性的特点而被用作工具酶。为大量获得3C蛋白酶,以融合形式在大肠杆菌中高效表达3C蛋白酶。方法将编码HRV 14 3C蛋白酶的cDNA克隆到pGEX4T-1载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,经一步GST亲和层析纯化获得GST-3C,再通过体外酶切实验对GST-3C和Thrombin的酶切活性进行比较。结果每升培养产物可获得纯度≥90%的重组融合蛋白约50 mg,重组GST-3C在4℃低温下具有比Thrombin更高的酶活性。结论GST-3C蛋白酶不仅可以应用于融合蛋白的酶切,而且为引入3C蛋白酶识别位点的串联亲和纯化(TAP)系统提供又一种酶切工具。

关键词：人鼻病毒 3C蛋白酶表达纯化

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

三核苷酸重复序列扩增与精神系统疾病

引用

基础医学与临床 2005年第11期25卷 982-985页

作者：陶玉斌许琪中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

三核苷酸重复序列扩增是三核苷酸重复序列的拷贝数在世代传递中逐渐增加的一种基因动态突变,现已发现近20种疾病的发生与这一突变相关。本文就近年来国际上关于三核苷酸重复序列扩增与精神系统疾病研究的一些成果进行综述,主要内容包括... 详细信息

三核苷酸重复序列扩增是三核苷酸重复序列的拷贝数在世代传递中逐渐增加的一种基因动态突变,现已发现近20种疾病的发生与这一突变相关。本文就近年来国际上关于三核苷酸重复序列扩增与精神系统疾病研究的一些成果进行综述,主要内容包括:①三核苷酸重复序列扩增相关疾病的分类;②三核苷酸重复序列扩增与疾病的早现遗传现象;③三核苷酸重复序列扩增与精神系统疾病的发病机制研究;④精神系统疾病相关基因内三核苷酸重复序列的研究。

关键词：三核苷酸重复序列扩增精神系统疾病

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

FasL N-端编码序列对其表达的影响

引用

基础医学与临床 2005年第7期25卷 624-627页

作者：李健郑德先刘彦信中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨Fas配体(Fas ligand, FasL)胞内区氨基酸组成对膜型FasL蛋白表达的影响.方法 PCR技术扩增FasL胞内区产生不同缺失的cDNA,构建重组表达质粒;使用脂质体转染法将表达质粒导入靶细胞;RT-PCR分析FasL mRNA水平;荧光抗体染色、流式... 详细信息

目的探讨Fas配体(Fas ligand, FasL)胞内区氨基酸组成对膜型FasL蛋白表达的影响.方法 PCR技术扩增FasL胞内区产生不同缺失的cDNA,构建重组表达质粒;使用脂质体转染法将表达质粒导入靶细胞;RT-PCR分析FasL mRNA水平;荧光抗体染色、流式细胞仪和Western免疫印迹技术检测细胞中FasL蛋白的表达.结果 FasL N-端缺失第2～16氨基酸残基后,FasL蛋白在细胞中的表达水平显著增加,但mRNA水平不变.结论 FasL N-端第2～16氨基酸残基对FasL蛋白表达水平具有自我调节作用.

关键词： FasL 胞内区表达调控

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

核心组蛋白及染色质组装相关因子的分离、表达及纯化

引用

基础医学与临床 2005年第10期25卷 948-952页

作者：莫志成张勇李宏帆吴宁华沈(王羽)琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的为制备体外组装染色质所需的核心组蛋白及蛋白因子。方法应用密度梯度离心和羟基磷灰石柱分离小牛胸腺细胞核心组蛋白H2A、H2B、H3及H4;应用昆虫表达体系表达了染色质组装相关子NAP-1、ACF(包括Acf-1和ISWI两个同时表达的组分),并... 详细信息

目的为制备体外组装染色质所需的核心组蛋白及蛋白因子。方法应用密度梯度离心和羟基磷灰石柱分离小牛胸腺细胞核心组蛋白H2A、H2B、H3及H4;应用昆虫表达体系表达了染色质组装相关子NAP-1、ACF(包括Acf-1和ISWI两个同时表达的组分),并用离子交换或亲和层析方法进行了纯化。结果本实验报道了制备几种核内蛋白因子的表达与纯化方法和条件,为体外组装染色质模板提供了必要基础。

关键词：染色质组装组蛋白 NAP-1 Acf-1 ISWI

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

用酵母单杂交系统筛选人IL-2Rα基因NIRS元件结合蛋白的cDNA

引用

基础医学与临床 2005年第3期25卷 214-218页

作者：盛德乔陆瑜李宏帆吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的筛选与白细胞介素2受体(IL2R)α基因NIRS元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系从HTLV1转化的人外周血淋巴细胞MATCHMAKERcDNA文库中筛选与NIRS相互作用的蛋白。结果经过筛选并排除假阳性后有9个阳性克隆仍保持His+表型和... 详细信息

目的筛选与白细胞介素2受体(IL2R)α基因NIRS元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系从HTLV1转化的人外周血淋巴细胞MATCHMAKERcDNA文库中筛选与NIRS相互作用的蛋白。结果经过筛选并排除假阳性后有9个阳性克隆仍保持His+表型和βgal活性;测序后分析发现它们分别属于4个不同蛋白的cDNA克隆。其中一个是已知的反式作用因子Ku抗原,另一个是RNA聚合酶Ⅰ的转录终止因子。它们的C末端分别含有SAP和SANTDNA结合结构域。结论在Jurkat细胞中存在与NIRS元件相互作用的结合蛋白,相关的研究正在进行中。

关键词： NIRS 结合蛋白人IL-2 筛选 Ra基因杂交系统酵母白细胞介素2受体人外周血淋巴细胞 DNA结合结构域 Jurkat细胞相互作用 HTLV-1 cDNA文库 cDNA克隆反式作用因子 RNA聚合酶阳性克隆 Ku抗原杂交体 gal 假阳性 SAP C末端

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

HLA-DRB基因启动子区多态性与肺结核合并2型糖尿病的相关性

引用

基础医学与临床 2005年第6期25卷 521-524页

作者：时广利岳思东邱长春胡秀玲宋长兴北京市结核病胸部肿瘤研究所免疫室北京101149 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的研究HLADRB基因启动子区序列与肺结核合并2型糖尿病的相关性。方法用PCRSSP法进行HLADRB基因分型,启动子区扩增产物直接测序。结果病例组DRB109等位基因的频率显著高于对照组(P<0.05)。病例组中DRB基因启动子区-65位碱基T和-8位A... 详细信息

目的研究HLADRB基因启动子区序列与肺结核合并2型糖尿病的相关性。方法用PCRSSP法进行HLADRB基因分型,启动子区扩增产物直接测序。结果病例组DRB109等位基因的频率显著高于对照组(P<0.05)。病例组中DRB基因启动子区-65位碱基T和-8位AG杂合子的频率明显增加(P<0.05)。病例组中DRB109阳性标本-65位碱基T的频率明显增加,G明显减少(P<0.01);+39位碱基C明显增加,T明显减少(P<0.01)。结论DRB109等位基因及HLADRB启动子区多态性与肺结核合并2型糖尿病密切相关。

关键词：启动子区多态性 2型糖尿病肺结核相关性 HLA-DRB基因分型 PCR-SSP法基因启动子区等位基因病例组直接测序扩增产物阳性标本对照组频率杂合子碱基

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：