检索结果-内蒙古大学图书馆

中华预防医学杂志 2002年第3期36卷 180-183页

作者：李明月李荣成黄尚志龚健曾宪嘉李燕萍陆明李辉中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传室北京100005 广西壮族自治区卫生防疫站

目的　分析接种乙型肝炎疫苗的人群中 ,不能产生良好的免疫应答反应的群体主要组织相容性复合体 (HLA)基因单体型 ,为乙型肝炎疫苗免疫不应答遗传机制的破译提供有意义的结果。方法　以来自广西壮族自治区的样本 10 7例为研究对象 ,通过... 详细信息

目的　分析接种乙型肝炎疫苗的人群中 ,不能产生良好的免疫应答反应的群体主要组织相容性复合体 (HLA)基因单体型 ,为乙型肝炎疫苗免疫不应答遗传机制的破译提供有意义的结果。方法　以来自广西壮族自治区的样本 10 7例为研究对象 ,通过PCR扩增和电泳对样本个体进行HLA DR、DQ区域的DNA分型 ,并对不应答家系的个体进行初步HLA DR、DQ单体型别的确定。通过相对危险性估计、关联分析、连锁不平衡检测等统计学分析模式对不 /弱应答群体与强应答群体HLA分型结果进行统计分析。结果　中国人中与乙型肝炎疫苗免疫接种不应答密切相关的HLA单体型为 :HLA DRB1 0 4 0 1 2 2 ,112 2 DRB4 0 10 110 1,0 10 2 / 3 DQB1 0 4 ,即HLA DR4 ,112 2 DR5 3 DQB4。结论乙型肝炎疫苗免疫不应答与特异的HLA等位基因单体型密切相关。

关键词：乙型肝炎疫苗 HLA基因单体型 HLA-DR抗原 HLA-DQ抗原免疫

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应用酵母双杂交技术研究人睾丸特异表达基因HSD-3.8的功能

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中国医学科学院学报 2002年第6期24卷 582-587页

作者：林雯缪时英张琳王琳芳中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探寻本实验室筛选出的与不孕症相关的人睾丸特异表达基因HSD-3.8(GenBank接收号为AF311312,国际上命名为精子相关抗原1)编码蛋白质的作用配体,揭示其参与受精过程的机制。方法采用酵母双杂交体系,构建含有HSD-3.8基因部分序列(HSD-0... 详细信息

目的探寻本实验室筛选出的与不孕症相关的人睾丸特异表达基因HSD-3.8(GenBank接收号为AF311312,国际上命名为精子相关抗原1)编码蛋白质的作用配体,揭示其参与受精过程的机制。方法采用酵母双杂交体系,构建含有HSD-3.8基因部分序列(HSD-0.7)的诱饵质粒,筛选人卵巢cDNA文库。在获得阳性克隆后,根据蛋白质结构分析并结合PCR方法重新构建一系列缺失体,在酵母体内验证它们与被捕获的蛋白因子之间的结合。结果酵母双杂交实验获得一阳性克隆,其编码氨基酸与人G蛋白β1亚基羧基端的144个氨基酸同源性为100%。所构建的几种诱饵蛋白缺失体在酵母体内均不能与该捕获的蛋白因子相互作用。结论HSD-3.8编码蛋白质片段HSD-0.7可能通过G蛋白信号转导途径在受精过程中发挥功能,与G蛋白β1亚基的结合有赖于其结构的完整。

关键词：酵母双杂交技术睾丸 P-loop结构 G蛋白 HSD-3.8基因不孕症

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中国人CAPN10基因单核苷酸多态性的分布及其在北方汉族2型糖尿病人群中的关联分析

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中国医学科学院学报 2002年第3期24卷 228-233页

作者：孙红霞张奎星杜玮南施锦绣姜正文左瑾黄薇陈竺沈岩姚志建强伯勤杭建梅王姮方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的检测始发现于墨西哥裔美国人群中的2型糖尿病易感基因CAPN10的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)在中国人群中的分布,并探讨其与中国北方汉族人群2型糖尿病的关联关系。方法对27份取自中国不同民族人群DNA标本进行... 详细信息

目的检测始发现于墨西哥裔美国人群中的2型糖尿病易感基因CAPN10的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,SNP)在中国人群中的分布,并探讨其与中国北方汉族人群2型糖尿病的关联关系。方法对27份取自中国不同民族人群DNA标本进行测序,以确定CAPN10基因中的SNP位点分布;选择其中5个位点,用单碱基延伸(single-baseextension,SBE)法对156例北方汉族正常人和173例2型糖尿病患者DNA标本进行SNP分型及病例-对照关联分析;对文献报道的易感基因CAPN10中的3个阳性位点进行单体型分析,并对其中1个位点在68个2型糖尿病家系(377例)中进行传递不平衡检验(transmission-disequilibriumtest,TDT)和同胞传递不平衡检验(sibtransmission-disequilibriumtest,STDT)。结果在所检测的8936bp长度范围内共检出40个SNP,平均约223bp出现1个SNP,各多态性在基因中呈不均匀分布;中国人CAPN10的SNP与文献报道的墨西哥裔美国人群中该基因多态性存在较大的差异;所选择的5个SNP位点等位基因频率分布在正常人群和2型糖尿病患者间的差异无统计学意义(P>0.05);上述3个阳性位点单体型频率在两组人群间差异无统计学意义(P>0.05);TDT和STDT均无统计学意义(P>0.05)。结论CAPN10基因SNP具有民族差异;

关键词：中国人 CAPN10基因单核苷酸多态性北方汉族人 2型糖尿病

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树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶cDNA和蛋白质序列结构分析

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中国医学科学院学报 2002年第2期24卷 149-155页

作者：张坚曾武威陈保生吴钢张文成张可满中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的克隆获得树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶cDNA序列并进行结构分析。方法以树鼩肝脏mRNA逆转录出的Ⅰ链cDNA为模板,运用SMARTRACEPCR扩增技术,扩增得到树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)cDNA序列,并推导出LCAT氨基酸序列。利用分子生物... 详细信息

目的克隆获得树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶cDNA序列并进行结构分析。方法以树鼩肝脏mRNA逆转录出的Ⅰ链cDNA为模板,运用SMARTRACEPCR扩增技术,扩增得到树鼩卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)cDNA序列,并推导出LCAT氨基酸序列。利用分子生物学软件DNAMAN对氨基酸序列的一、二级结构及主要结构域进行分析和比较。结果树鼩LCATcDNA序列由1340个核苷酸构成,开放阅读框架1320bp,编码440个氨基酸的LCAT前体(含24个氨基酸构成的信号肽和416个氨基酸组成的成熟蛋白)熏3'非翻译区18bp,终止密码TAA,加尾信号AATAAA和一个25bp的poly(A)尾。树鼩LCATcDNA序列已作为新基因被GenBank接受,登记号AF272861。树鼩与人和狒狒LCATcDNA的同源性分别为90%和89%。结论树鼩LCATcDNA序列与人及其他实验动物高度同源。

关键词：树Qu 卵磷脂酰基转移酶 cDNA

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TMR结合转基因技术促血管生成的形态学实验

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解剖学杂志 2002年第3期25卷 210-213页

作者：张晓东黄秉仁王冬李若凡程效东刘克曲彦明徐达传中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院解剖组胚学系北京100005 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生化学系第一军医大学解剖学教研室

目的:观察机械性透室壁心肌血管重建术（Transmyocardial　revascularization,TMR）管道内转入VEGF基因后血管再生与重建的形态学效果,并探索TMR结合转基因技术的新方法。方法:利用高速空心钻头在家兔左室前壁进行TMR,形成透室壁性心肌... 详细信息

目的:观察机械性透室壁心肌血管重建术（Transmyocardial　revascularization,TMR）管道内转入VEGF基因后血管再生与重建的形态学效果,并探索TMR结合转基因技术的新方法。方法:利用高速空心钻头在家兔左室前壁进行TMR,形成透室壁性心肌管道。实验组的心肌管道内注入编码VEGFcDNA质粒;对照组仅做单纯机械性TMR。动物于术后不同时间处死,利用组织切片染色法,对照观察两组TMR管道内血管再生与重建状况。结果:实验组管道内新生小血管的密度月数量较高,与对照组相比具有非常显著性差异（P<0.001）。结论:机械TMR管道内注入VEGcDNA质粒后能有效地促进其血管生成,机械TMR结合转基因技术促血管生成作用明显优于单纯机械性TMR。

关键词：机械性透室壁心肌血管重建术血管内皮生长因子质粒血管生成形态学实验研究

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蛋白激酶Cξ亚型基因内SNP功能分析

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中国医学科学院学报 2002年第5期24卷 471-473页

作者：孙红霞杜玮南李云峰左瑾吴国栋沈岩强伯勤姚志建杭建梅罗会元王姮黄薇陈竺方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所国家分子生物学重点试验室北京100005

目的对中国北方汉族人群2型糖尿病易感基因蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)基因内的5个单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphismSNP)标记在疾病发生中的作用进行分析。方法通过生物信息学比对及报告基因活性测定等方法分析PRKCZ基因内5个SN... 详细信息

目的对中国北方汉族人群2型糖尿病易感基因蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)基因内的5个单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphismSNP)标记在疾病发生中的作用进行分析。方法通过生物信息学比对及报告基因活性测定等方法分析PRKCZ基因内5个SNP位点对基因表达的影响。结果PRKCZ基因中rs427811和rs809912位点两种等位基因重组质粒报告基因活性存在明显差异,提示这两个位点可能影响PRKCZ基因表达。结论PRKCZ基因中两个SNP位点可能通过影响基因的表达水平而在中国人2型糖尿病发生中发挥作用。

关键词：蛋白激酶C 单核苷酸多态性标记 2型糖尿病 PRKCZ基因

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热休克蛋白的产生提高大鼠离体皮瓣的成活

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基础医学与临床 2002年第6期22卷 566-569页

作者：叶菜英 Bethodtle H.Wang Rabelt Udelsman 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005 美国霍普金斯大学医学院

观察热休克蛋白对离体皮瓣成活的影响。雄性大鼠分对照组 ,全身加热组 ,局部加热组。加热组分别全身或局部 4 2℃作用 30min ,离体皮瓣取自大腿内收缩肌条一块 (2cm× 6cm) ,植入同侧腹股沟。手术 3d后处死动物 ,用硝基蓝四氮唑染... 详细信息

观察热休克蛋白对离体皮瓣成活的影响。雄性大鼠分对照组 ,全身加热组 ,局部加热组。加热组分别全身或局部 4 2℃作用 30min ,离体皮瓣取自大腿内收缩肌条一块 (2cm× 6cm) ,植入同侧腹股沟。手术 3d后处死动物 ,用硝基蓝四氮唑染色判定皮肤损失面积 (cm2 )及肌肉运动性 ,皮瓣上皮肤和肌肉用定量Norther和Wester分析HSP72 的变化及离体皮瓣存活率。局部和全身预热的大鼠皮肤成活率明显提高 2 3% ,HSP72 的表达升高 ,与对照组相比P <0 0 5。实验结果表明热诱导热休克蛋白的产生有利于皮肤移植后皮瓣的成活。

关键词：成活热休克蛋白离体皮瓣

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蛋白激酶Cξ亚型基因内SNP的连锁不平衡分析

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中国医学科学院学报 2002年第5期24卷 474-478页

目的对中国北方汉族人群2型糖尿病候选易感基因蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)内的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphismSNP)标记进行群体相关分析及连锁不平衡linkagedisequilibriumLD分析,寻找疾病相关单体型。方法通过生物信息学方... 详细信息

目的对中国北方汉族人群2型糖尿病候选易感基因蛋白激酶Cξ亚型(PRKCZ)内的单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphismSNP)标记进行群体相关分析及连锁不平衡linkagedisequilibriumLD分析,寻找疾病相关单体型。方法通过生物信息学方法在公共SNP数据库中查找PRKCZ基因中的SNP位点,用单碱基延伸反应(singlebaseextensionSBE)法对北方汉族散发2型糖尿病患者173例及对照组152例进行分型及病例-对照关联分析和LD分析,构建SNP单体型区段(haplotypeblock)。结果PRKCZ基因中有多个SNP位点与疾病相关,它们在病例组和对照组构成不同的haplotypeblock结构。由5个SNP位点组成的单体型频率在两组人群间存在显著差异。结论PRKCZ基因内由5个SNP位点组成的单体型可能和中国北方汉族人2型糖尿病相关,进一步从统计学角度证实了PRKCZ基因为该人群疾病易感基因。

关键词：单核苷酸多态性标记 2型糖病例-对照关联分析 PRCKCZ基因连锁不平衡分析

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小剂量亚硒酸钠和全反式维甲酸联合使用诱导NB4细胞的凋亡及分化

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中华血液学杂志 2002年第12期23卷 628-630页

作者：孙义民左路许彩民沈悌潘华珍张之南中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼... 详细信息

目的　研究小剂量亚硒酸钠 (2～ 5 μmol/L)与全反式维甲酸 (ATRA)联合使用对人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4凋亡及分化的影响。方法　采用膜联蛋白Ⅴ (Annexin Ⅴ )荧光标记试剂盒检测细胞的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻率和DNA片段化的琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 ,通过流式细胞术检测粒系分化细胞表面特异抗原CD11b表达 ,NBT还原实验检测细胞分化。结果　阴性对照组细胞PS外翻率为 1.2 % ,5 μmol/L亚硒酸钠处理NB4细胞 4 8h后PS外翻率为 0 .8% ,0 .1μmol/LATRA诱导 4 8h后PS外翻率为 2 .0 % ,与对照组相比 ,差异均无显著性 ,而两者联合作用NB4细胞 2 4 ,36 ,4 8h后的PS外翻率分别达到 18.3%、2 5 .9%、5 0 .0 % ,DNA电泳呈典型的梯形带。小剂量 (2 μmol/L)亚硒酸钠没有诱导NB4细胞分化的能力 ,但其与 0 .1μmol/L的ATRA联合使用同单独使用 0 .1μmol/L的ATRA相比 ,CD11b表达阳性细胞率进一步增加 ,NBT还原能力也进一步增强。结论　小剂量的亚硒酸钠与ATRA联合使用可诱导NB4细胞发生凋亡及分化。

关键词：亚硒酸钠全反式维甲酸细胞凋亡细胞分化 NB4细胞株急性白血病

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人Jurkat细胞GAGA样元件结合蛋白cDNA的克隆

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中国医学科学院学报 2002年第3期24卷 269-271页

作者：莫志成陆瑜高超吴宁华沈珝琲中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的探讨人Jurkat细胞中是否存在与GAGA样元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系,在HTLV-1转化的Jurkat细胞cDNA文库中筛选与GAGA样元件相互作用的蛋白;提取人Jurkat细胞总RNA,应用反转录反应标记cDNA探针,与候选的阳性克隆... 详细信息

目的探讨人Jurkat细胞中是否存在与GAGA样元件相互作用的结合蛋白。方法采用酵母单杂交体系,在HTLV-1转化的Jurkat细胞cDNA文库中筛选与GAGA样元件相互作用的蛋白;提取人Jurkat细胞总RNA,应用反转录反应标记cDNA探针,与候选的阳性克隆杂交。结果共获得9个阳性克隆,其中6个阳性克隆的插入片段可以与cDNA探针杂交。结论在人Jurkat细胞中有与GAGA样元件相关的结合蛋白。

关键词： Jurkat细胞酵母单杂交体系 GAGA元件基因调控

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