检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2001年第1期23卷 32-35,F003页

作者：赵青葛晔华周建平马静陈克铨薛社普韩代书中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室北京100005

研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细... 详细信息

研究小鼠红细胞分化去核分化因子 (MEDDF)在红细胞终末分化中的功能。方法构建在真核细胞中表达的重组质粒 pcDNA- MEDDF，用其转染小鼠红白血病细胞系 (MEL)。通过分析细胞的生长曲线、分裂指数及在半固体培养基中的集落形成率比较细胞的生长特性，采用 RT- PCR检测 c- myc及β-珠蛋白 (β- globin)基因的表达。结果转染 pcDNA- MEDDF与转染空载体 (pcDNA3.1)的细胞相比较，细胞的增殖率减慢、分裂指数降低、在半固体培养基中形成集落的数量减少。转染细胞的联苯胺阳性率达 32.8％。用 RT- PCR检测发现，转染细胞β-珠蛋白的表达量上升了 3.43倍， c- myc表达量下降了 66.3％。结论 MEDDF能使小鼠红白血病细胞分化并抑制其恶性变。

关键词：小鼠红细胞分化去核因子红细胞分化红白血病

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6A8α-甘露糖苷酶酶解p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside

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中国医学科学院学报 2001年第5期23卷 423-427页

作者：王壮志李琳史耕先刘音赵方萄朱立平中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫学教研室

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后... 详细信息

目的明确6A8cDNA编码蛋白质的α-甘露糖苷酶性质。方法利用基因重组技术将克隆到的3个DNA片段拼接成完整6A8cDNA将其插入到真核表达载体pCDI转染COS-7细胞,用酶活性检测与Westernblot对瞬时表达的蛋白质的性质进行鉴定。结果拼接后的cDNA片段经测序完全符合6A8cDNA碱基顺序。转染重组表达载体pCDI-6A8的COS-7细胞的匀浆对p-nitrophenyl-α-D-mannopyranoside的酶解作用为转染空载体pCDI的细胞及野生型细胞的3～4倍,且这种酶解作用不能被swainsonine所抑制。Westernblot检测显示在相对分子质量(Mr)120000处有一明显蛋白带,此带的显影于转染pCDI-6A8cDNA的细胞明显深于转染空载pCDI及野生型细胞。结论6A8cDNA编码的蛋白质确为一种α-甘露糖苷酶,属于Ⅱ类α-甘露糖苷酶。

关键词： 6A8 α-甘露糖苷酶 COS-7细胞瞬时表达

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The role of sexual related Y gene detection in the diagnosis of patients with gonadal dysgenesis

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Chinese Medical Journal 2001年第2期114卷 16-19,103-104页

作者：郁琦何方方谷春霞葛秦生黄尚志叶丽珍叶珏冯玲中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所遗传室北京100730 北京友谊医院妇产科北京100050

Objective　To clarify the role of sexual related Y (SRY) gene detection in the diagnosis of gonadal ***　Sixteen cases of gonadal dysgenesis were included in this study: 5 with androgen insensitivity syndrome, 1 with 17-α-hydroxylase deficiency, 4 with true hermaphrodite, 2 with 45,X/46,XY gonadal dysgenesis, 1 with 45,X gonadal dysgenesis, 1 with XY pure gonadal dysgenesis, 1 with testicular regression, and 1 XY female who gave birth to a normal baby. SRY gene was detected by using polymerase chain reaction (PCR) in blood and gonad samples and by direct sequencing of the SRY ***　Among the 16 cases, 15 were blood SRY positive, among which 13 (86.7%) showed the presence of testicular tissue, and 2 showed ovaries without testicular tissue. One SRY negative case showed the presence of testicular tissue. In 3 cases, SRY detection in gonadal tissue correlated with pathological findings but not with blood karyotype. The correlation between peripheral blood SRY and the pathology of the gonads was 81.25% and the correlation between the presence of peripheral blood Y chromosome and pathology of the gonads was 68.75%. Sequencing of the SRY motif in an XY female who gave birth to a normal baby showed no ***　SRY detection is more sensitive and specific than blood karyotype in the prediction of the presence of testicular tissue. Peripheral blood karyotype does not necessarily reflect gonadal type. There may be testicular related factors other than the SRY gene.

关键词： gonadal dysgenesis · SRY gene · polymerase chain reaction

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在免疫老化中T细胞结构与功能的变化

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中国免疫学杂志 2001年第2期17卷 57-60页

作者：何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫室北京100005

21世纪人口的老龄化对人类社会是一个重大的挑战。我国目前已经步入老年型社会。随着社会性人口的衰老，与人口衰老相关疾病的发生急剧增加，特别是阿尔采默痴呆(AD)、帕金森病(PD)、骨质疏松和II型糖尿病为代表的老年性疾病引起的智... 详细信息

21世纪人口的老龄化对人类社会是一个重大的挑战。我国目前已经步入老年型社会。随着社会性人口的衰老，与人口衰老相关疾病的发生急剧增加，特别是阿尔采默痴呆(AD)、帕金森病(PD)、骨质疏松和II型糖尿病为代表的老年性疾病引起的智能衰退、行动障碍、骨折和肾功能衰竭等严重地影响老人的生活质量，为社会和家庭带来沉重负担。老年性疾病并非简单地由机体老化所致，也非疾病在老年期的明显表现，但是以老化为其发病基础的。同时，遗传因素和体内外环境因素在老年性疾病的发生与发展方面起一定作用。然而，目前大多数老年性疾病研究尚处于资料的积累阶段，迫切需要有科学创意假说的提出，从多个角度全方位地对老化和老年性疾病的发生机制进行研究，进而为临床提供有效的手段用于老年性疾病的防治。 衰老或老化（senescence）是机体代谢过程中的一个必然阶段，主要表现为机体对环境刺激的适应能力减弱以至丧失。老化的机制颇为复杂，有关老化的理论假说也颇多，如氧化损伤学说、遗传控制学说、体细胞突变学说、衰老符合途径假说等。美国病理学家Wolford在60年代首先提出老化的免疫学假说，认为免疫系统从根本上参加了正常脊椎动物的老化过程，是老化过程的主要调节系统之一。老化免疫学旨在研究免疫老化（Immunesenescence）的发生与发展机制，研究正常脊椎动物免疫系统功能与结构的增龄性变化规律，为高等生物生命活动研究提供全程性（尤其生命处于衰退阶段时）免疫系统方面的信息，并且探讨免疫老化对机体抗感染和抗肿瘤机能及其自身免疫病易感性等方面的影响，为解决衰老所致的免疫相关性疾病的诊断、预防和治疗提供策略与方法。 T淋巴细胞功能降低与数量减少是增龄性免疫系统的主要改变，其中胸腺增龄性萎缩（退化）表现尤为明显。T细胞与免疫老化的关系是老化免疫学机制研究的核心内容，其中至少有以下6项研究为研究者们所关注：其一，T细胞来源于骨髓的前体T细胞，因此老化对T细胞的影响的第一个证据应在老龄动物或老年人造血发生的研究之中来寻求，老化时干细胞缺陷受到重视；其二，胸腺是T淋巴细胞发育与成熟的场所，对于成年个体来说，胸腺似乎为 T细胞发育成熟的特殊目的而存在。然而，胸腺随增龄而发生退化，即便是年轻成熟的个体，其胸腺功能和T细胞产生也随着胸腺退化而表现低下，因此胸腺退化机制的澄清对老化免疫的深刻理解至关重要；其三，静止成熟的T淋巴细胞在外周是长寿命的,其人类T细胞一般认为可存活几十年。在此期间，它们也将受到老化过程的影响；其四，T淋巴细胞介导的免疫应答表现为特异性T细胞克隆的迅速扩增性增殖。此外，记忆性反应也是少数T细胞克隆增殖的结果。这些增殖性淋巴细胞与老化的关系受到研究者的重视；其五，老化时T细胞与抗原呈递细胞的关系有待于澄清；其六，老化时T细胞活化时信号传导异常目前引起关注。

关键词：衰老老化 T细胞结构功能

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支气管哮喘患者T细胞受体δ链多态性研究

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中华结核和呼吸杂志 2001年第4期24卷 215-218页

作者：白彦林耀广何维陈勇马毅中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所免疫室 100730

目的　探讨γδ链T细胞在哮喘气道慢性炎症产生及延续机制中的作用。方法　留取 7例哮喘患者与 7例对照者的外周血和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,用免疫荧光染色和流式细胞分析技术检测γδ链T细胞的百分率 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT P... 详细信息

目的　探讨γδ链T细胞在哮喘气道慢性炎症产生及延续机制中的作用。方法　留取 7例哮喘患者与 7例对照者的外周血和支气管肺泡灌洗液 (BALF) ,用免疫荧光染色和流式细胞分析技术检测γδ链T细胞的百分率 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法和基因扫描法分析T细胞受体Vδ1～Vδ3 亚族的相对取用频率及克隆增殖状态。结果　哮喘患者BALF中γδT细胞比例 [(7 8±4 7) % ]与对照组 [(3 3± 3 0 ) % ]比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;且Vδ1的相对取用频率 [(4 4±13) % ]与对照组 [(19± 5 ) % ]比较 ,差异有显著性 (P =0 0 0 2 )。哮喘患者BALF中部分Vδ基因亚家族呈单或寡克隆扩增 ,以Vδ1亚族尤其显著。结论　对抗原发生特异性应答的γδT细胞可能在启动和维持哮喘慢性气道炎症中发挥了较重要的作用。

关键词：支气管哮喘 T细胞受体 δ链多态性

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血管紧张素II对血管内皮细胞三种转录因子作用的影响

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中国病理生理杂志 2001年第3期17卷 196-199页

作者：王华斯琴王小明郭恒怡李素敏吴其夏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室北京100005

目的和方法 :分别采用凝胶迁移率改变法 (EMSA)和Western -blot的方法从基因转录水平探讨AngII对血管内皮细胞株ECV30 4的影响。结果 :(1)EMSA结果表明 ,AngII组核抽提物与 3种探针的结合活性均高于正常对照组 ,与NF -κB ,SP - 1和AP ... 详细信息

目的和方法 :分别采用凝胶迁移率改变法 (EMSA)和Western -blot的方法从基因转录水平探讨AngII对血管内皮细胞株ECV30 4的影响。结果 :(1)EMSA结果表明 ,AngII组核抽提物与 3种探针的结合活性均高于正常对照组 ,与NF -κB ,SP - 1和AP - 1探针结合活性分别为正常对照组的 10 98倍 ,3 97倍和 1 33倍 ,说明AngII对血管内皮细胞的作用机制可能与NF -κB ,SP - 1和AP - 1等转录因子的转录活性增加有关。进一步证实NF -κB ,AP -1在内皮细胞功能失调发病机制中的重要作用 ,同时发现转录因子SP - 1也可能参与此过程。 (2 )Western -blot结果表明 ,AngII处理后细胞核内NF -κB含量明显增加 ,提示AngII能够增加血管内皮细胞转录因子NF -κB的核转位 ,进一步验证了EMSA的结论。而细胞核内SP - 1和AP - 1的含量较对照组略有增加 ,提示AngII对SP - 1和AP - 1的核转位无明显影响而可能主要是促进转录因子与相应顺式调控元件的结合活性。结论 :AngII对内皮细胞 3种重要的转录因子的活性有不同程度的影响。

关键词：血管紧张素Ⅱ 转录因子血管内皮细胞 EMSA Western-blot 基因转录

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整合素与心血管疾病

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中国病理生理杂志 2001年第4期17卷 366-369页

作者：王华斯琴中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理生理室北京100005

The adhesion of cells to each other and to the proteins of the extracellular matrix provides a stable environment for cell growth, differentiation and migration. This is a prerequisite for the normal function of the cardiovascular system. Thus the abnormal adhesion function may play a key role in the pathogenesis and development of cardiovascular diseases. To date, there are six main groups of adhesion molecule, and integrins family are the largest and most broadly distributed of the families of cellular adhesion receptors. They have an important role in several aspects of cardiovascular diseases and that its regulated inhibition leads to a reduction in incidence and mortality due to these disorders. This review focuses upon the structure、mechanism and their roles in cardiovascular diseases which maybe facilitate the development of novel therapies.

关键词：结合素类心血管疾病血管内皮细胞白细胞粘附

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疟疾DNA疫苗免疫接种方法对小鼠体液免疫应答的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第1期21卷 50-54页

作者：石宁董敏阴彬徐蓓何湘云李晋芳刘宝丰王恒中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病原学室北京100005 山西医科大学

目的　探讨DNA疫苗免疫接种方法对抗体水平及辅助性T细胞极化的影响。方法　利用DNA重组技术构建恶性疟原虫红内期多表位DNA疫苗 ,通过基因枪、肌肉注射、皮内注射等接种方法免疫小鼠 ,经ELISA测定该疫苗诱导产生特异性抗体的总量、亚... 详细信息

目的　探讨DNA疫苗免疫接种方法对抗体水平及辅助性T细胞极化的影响。方法　利用DNA重组技术构建恶性疟原虫红内期多表位DNA疫苗 ,通过基因枪、肌肉注射、皮内注射等接种方法免疫小鼠 ,经ELISA测定该疫苗诱导产生特异性抗体的总量、亚型及表位特异性 ,比较不同免疫接种方法对DNA疫苗诱导产生抗体及辅助性T细胞极化的影响。结果　接种DNA疫苗的小鼠经 3次免疫后都产生了较高滴度的抗重组蛋白抗体。基因枪组单位DNA诱导抗体滴度是肌注组的 12 0倍。基因枪组小鼠血清抗体以IgG1升高为主 ,而肌注和皮内注射组小鼠血清抗体均以IgG2a升高为主。各免疫接种组诱导产生的抗表位多肽抗体特异性相同。结论　不同免疫接种方法不但会影响血清总免疫球蛋白水平 ,还能使辅助性T细胞向不同方向极化。肌注和皮内注射诱导产生以IgG2a为主的TH1型免疫应答 ,基因枪接种诱导产生以IgG1为主的TH2型免疫应答。DNA疫苗的摄取方式可明显影响辅助性T细胞的极化。

关键词： DNA疫苗辅助性T细胞抗体亚类基因枪疟疾

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尼古丁对脐静脉内皮细胞蛋白激酶C和Ras蛋白活性及胞浆钙浓度的影响

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基础医学与临床 2001年第5期21卷 428-431页

作者：周卫辉陈祥银中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理室北京100005

为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用 ,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化 ,用γ 32 P ATP掺入法检测PKC活性 ,用GST RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含... 详细信息

为研究尼古丁对血管内皮细胞胞内游离钙、蛋白激酶C(PKC)和Ras蛋白的作用 ,用激光共聚焦显微镜观察细胞内游离钙离子浓度的变化 ,用γ 32 P ATP掺入法检测PKC活性 ,用GST RBD沉淀并纯化活化的Ras蛋白和Western印迹杂交法检测Ras蛋白含量。观察到 (1～ 5 ) 10 - 4 mol L尼古丁使人脐静脉内皮细胞 [Ca2 + ]i 迅速增加 ,峰值约超过基础值 5 0 %～ 2 0 0 % ,钙通道阻滞剂尼莫地平可拮抗尼古丁的此种效应 ;10 - 4 mol L尼古丁作用 1～ 12h后胞浆PKC活性明显降低 ;而胞膜PKC活性则升高。 10 - 4 ～ 10 - 3 mol L尼古丁作用于人脐静脉内皮细胞 10～ 30min可使活化的Ras蛋白含量增加。以上结果提示尼古丁可使人脐静脉内皮细胞 [Ca2 + ]i

关键词：尼古丁钙蛋白激酶C Ras蛋白内皮细胞

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Reversing drug resistance in the ovarian carcinoma cell line SKOV3/mdr1 in vitro by antisense oligodeoxynucleotides

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Chinese Medical Journal 2001年第9期114卷 33-36,105页

作者：潘凌亚童英金滢周生张毅杨秀玉毛宁中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院妇产科北京100730 军事医学科学院基础医学研究所细胞生物学实验室北京100850

Objective　To investigate the effect of multidrug resistance gene 1 (mdr1) antisense oligodeoxynucleotides (ODNs) on reversing multidrug resistance in the drug resistant ovarian carcinoma cell line SKOV3/mdr1. Methods　The ovarian carcinoma cell line SKOV3 transducted with a human multidrug resistance gene (mdr1) served as the drug resistant model (SKOV3/mdr1). The mdr1 antisense ODNs was transfected into SKOV3/mdr1 cells while mediated by lipofectamine. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to measure the expression and the amount of the mdr1 mRNA in the cells. The positive rate and function of the mdr1 gene product P-glycoprotein (Pgp) in the mdr1 antisense ODNs treated SKOV3/mdr1 cells were determined by flow cytometry and rhodamine 123 efflux. Drug resistance in the SKOV3/mdr1 cell line was observed by MTT assay and cell colony culture. Results　The mdr1 mRNA level was decreased to about 60% of that of β-actin after mdr1 antisense ODNs treatment. The Pgp positive rate of mdr1 antisense ODNs treated SKOV3/mdr1 cells decreased from 100% to 52.6% (P<0.01). The intracellular rhodamine 123 retention was increased from 9.1% to 33.8% (P<0.01). The chemoresistance to taxol decreased to 58% of SKOV3/mdr1 with mdr1 antisense ODN treatment. Compared with SKOV3/mdr1 cells in the control group, under a certain range of drug concentrations, the number of drug resistance colonies in mdr1 antisense ODNs treated SKOV3/mdr1 cells for taxol and doxorubicin decreased by 8.6±0.8 fold and 3.1±0.6 fold, respectively. Some non-specific functions during oligodeoxyncleotide treatment was also detected. Conclusion　mdr1 expression in the SKOV1/mdr1 cell line was partially inhibited after mdr1 antisense ODNs treatment at the mRNA and protein level, increasing the chemotherapy sensitivity of this drug resistant ovarian carcinoma cell line.

关键词： oligodeoxynucleotides antisense · ovarian · neoplasma · multiple drug resistance · gene mdr1

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