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17β-雌二醇对人的类成骨细胞HOS TE85胞内游离钙、IP_3及钙调蛋白影响

中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 105-110页

作者：刘景生孙兰汪青翁玲玲郑虎中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１，４，５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂，采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光... 详细信息

目的观察１７β－雌二醇（Ｅ２）对成骨细胞胞内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）、１，４，５－三磷酸肌醇（ＩＰ３）含量及钙调蛋白（ＣａＭ）含量的影响。方法以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ为钙荧光指示剂，采用激光共聚焦显微系统测定细胞内钙荧光值的改变，以反映［Ｃａ２＋］ｉ含量的变化。用阳离子交换法测定ＩＰ３含量。以测定钙依赖的磷酸二酯酶活性方法测定ＣａＭ含量。结果给予０．１、１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２后５０ｓ胞内钙荧光值分别增加４．７和６．１倍，持续８０～１６０ｓ；以１００ｎｍｏｌ／Ｌｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ预处理细胞，Ｅ２仅使胞内钙荧光值升高１．５倍。加入１．０ｎｍｏｌ／ＬＥ２，ＩＰ３含量在给药后２０～３０ｓ和６０～７０ｓ呈双峰升高。同样剂量的Ｅ２可使ＣａＭ含量增加８５．２％。他莫西芬不能阻断Ｅ２引起的胞内钙荧光值、ＩＰ３及ＣａＭ含量升高的作用，而磷脂酶Ｃ抑制剂使Ｅ２的作用部分或完全抑制。结论Ｅ２作用于胞膜引起胞外钙内流，并通过ＩＰ３导致［Ｃａ２＋］ｉ进一步增加，激活ＣａＭ从而调节细胞功能。

关键词：骨质疏松雌激素钙调蛋白三磷酸肌醇

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凉山彝族血脂状况及其载脂蛋白AI基因启动子嘌呤置换突变限制片段长度多态性研究

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中华心血管病杂志 1999年第1期27卷 9-12页

作者：赵庆伟申萍张华周梦玲佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理室北京100005

为探讨凉山彝族农民血脂水平与心血管病发生率低的原因，通过流行病学调查采集６９１份（人）血样，确定彝族农民、彝族移民、当地城市汉族居民三组人群的各项血脂水平，并探讨载脂蛋白基因多态性在人群血脂水平变异中的作用。方法血脂... 详细信息

为探讨凉山彝族农民血脂水平与心血管病发生率低的原因，通过流行病学调查采集６９１份（人）血样，确定彝族农民、彝族移民、当地城市汉族居民三组人群的各项血脂水平，并探讨载脂蛋白基因多态性在人群血脂水平变异中的作用。方法血脂测定、从凝血块中分离ＤＮＡ、ＤＮＡ聚合酶链式反应一限制片段长度多态性分析。结果（１）彝族农民各项血脂（ＴＣ、ＴＧ、ＨＤＬ－Ｃ、ａｐｏＡＩ、ａｐｏＢ）水平显著低于彝族移民和汉族居民（Ｐ＜０．０１）。（２）彝族移民与当地汉族居民间，除ＨＤＬ－Ｃ外的各项血脂水平相当，彝族移民的ＨＤＬ－Ｃ水平明显低于汉族居民（Ｐ＜０．０５）。（３）ａｐｏＡＩ基因启动子Ｇ／Ａ置换多态性分析显示，彝族农民、彝族移民和汉族居民三组人群的Ａ等位基因相对频率分别为０．２３、０．２４、０．２３，差异无显著性，与新加坡华人的相对频率０．２７５相近，均显著高于高加索人。（４）各组人群内，ＧＧ基因型者与ＧＡ和ＡＡ基因型者的各项血脂水平差异均无显著性。结论结果提示，（１）在现阶段，彝族农民各项血脂处于低水平，可能主要归因于饮食等环境因素，生活水平提高脂肪摄入增加会导致群体血脂水平升高；（２）中国人的Ａ等位基因频率显著高于高加索人，各民族间?

关键词：血脂载脂蛋白彝族 AI基因心血管疾病

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雌激素诱发大鼠原位与移植垂体催乳素瘤中催乳素基因与TGFα和TGFβ1基因的表达

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生理学报 1999年第6期51卷 75-80页

作者：吴雪梅许建萍张荣许荣焜中国医学科学院、中国协和医科大学肿瘤医院内科!北京100021 中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院生理研究室!北京100005

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体... 详细信息

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体PRL瘤中PRL基因和两种转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF)TGFα和TGFβ1基因表达水平的改变。结果表明:在E2长期作用后,原位垂体与异体移植于肾囊,从而远离下丘脑的垂体均可形成垂体PRL瘤;原位与移植垂体PRL瘤中均表现PRL基因的高表达,但移植瘤中的PRL基因表达水平低于原位垂体瘤;此外,仅在原位垂体PRL瘤中发现上述两种转化生长因子呈较高水平的表达,移植垂体PRL瘤与正常垂体中均检测不到这两种转化生长因子的表达。上述结果提示,TGFα和TGFβ1可能涉及E2诱发的原位垂体PRL瘤形成;E2诱发原位与移植垂体形成PRL瘤的机制可能不尽相同

关键词： PRL瘤移植转化生长因子 Northern印迹杂交

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大鼠脑缺血再灌后NMDA受体、NO及cGMP含量的变化

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 175-179页

作者：强文安左萍萍刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室

目的观察大鼠脑缺血再灌后Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体－一氧化氮（ＮＯ）－ｃＧＭＰ通路变化。方法采用大鼠双侧颈总动脉阻断和尾部放血并重复缺血再灌的脑缺血模型，观察术后不同时间动物大脑皮层、海马、纹状体、中脑和... 详细信息

目的观察大鼠脑缺血再灌后Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体－一氧化氮（ＮＯ）－ｃＧＭＰ通路变化。方法采用大鼠双侧颈总动脉阻断和尾部放血并重复缺血再灌的脑缺血模型，观察术后不同时间动物大脑皮层、海马、纹状体、中脑和下丘脑５个部位的ＮＭＤＡ受体活性（３Ｈ－ＭＫ８０１结合）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量变化。结果３Ｈ－ＭＫ８０１结合在海马、纹状体两部位呈持续性明显增加；原生型ＮＯＳ（ｃＮＯＳ）于缺血后３天在海马、大脑皮层、纹状体达高峰；而诱导型（ｉＮ－ＯＳ）活性及ｃＧＭＰ含量仅在海马呈持续上升，两者在增加幅度与趋势上也很相似。结论在海马缺血性神经损伤过程中，ＮＭＤＡ受体－ＮＯ－ｃＧＭＰ通路激活可能起重要作用。

关键词：脑缺血再灌注损伤 NMDA 一氧化氮 cGMP

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吗啡长时程作用对SH-SY5Y细胞cAMP系统及c-Fos磷酸化的影响

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中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 262-267页

作者：方芳曹清宋福津刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ及ｃＦｏｓ的变化... 详细信息

目的　探讨吗啡长时作用下分化的人成神经瘤ＳＨＳＹ５Ｙ细胞中ｃＡＭＰ系统变化以及ＰＫＡ对转录因子ｃＦｏｓ的磷酸化调节。方法　采用蛋白竞争结合法、酶活性测定法及同位素掺入法分别观察ｃＡＭＰ、ＰＫＡ及ｃＦｏｓ的变化。结果　（１）１００μｍｏｌ／Ｌ吗啡作用２ｍｉｎ～３６ｈ可使ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰ水平呈双相变化：短时作用下ｃＡＭＰ水平降低，随着吗啡作用时间的延长，ｃＡＭＰ水平逐渐回升，至３６ｈ时明显高于对照，这时加入１００ μｍｏｌ／Ｌ纳洛酮可诱发ｃＡＭＰ水平的反弹性超高现象。表明吗啡作用３６ｈ可使分化的ＳＨＳＹ５Ｙ细胞产生类吗啡依赖样变化；（２）吗啡长时作用下，胞质可溶相ＰＫＡ活性也呈双相变化，而膜相ＰＫＡ活性未见明显变化；（３）吗啡作用３６ｈ时，细胞ｃＦｏｓ磷酸化水平显著降低，ＰＫＡ抑制剂可抑制此作用；（４）纳洛酮可抑制上述ＰＫＡ活性及ｃＦｏｓ磷酸化水平的改变。结论　ＳＨＳＹ５Ｙ细胞ｃＡＭＰＰＫＡ系统的上调可能与吗啡依赖的形成有关，而且在吗啡依赖样细胞中ＰＫＡ可能通过磷酸酶而使细胞ｃＦｏｓ发生去磷酸化，从而激活某些基因的转录。

关键词：吗啡蛋白激酶A c-Fos磷酸化 cAMP 吗啡依赖

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小鼠红细胞分化相关因子cDNA片段的克隆与分析

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 94-98页

作者：刘世广章正琰张世馥马静唐文章静波薛社普中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所细胞生物室

目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因，并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Ｆｒｉｅｎｄ病毒（ＦＶＡ）诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾脏产生大量ＦＶＡ原红细胞，后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂... 详细信息

目的克隆与小鼠红细胞终末分化相关因子的基因，并对其表达特性进行分析。方法用致贫血Ｆｒｉｅｎｄ病毒（ＦＶＡ）诱导ＢＡＬＢ／ｃ小鼠脾脏产生大量ＦＶＡ原红细胞，后者经分离纯化并在促红细胞生成素作用下进行体外培养。采用减除杂交与ＰＣＲ相结合的方法，用未经培养的ＦＶＡ诱导的原红细胞（０ｈＦＶＡ原红细胞）的ｃＤＮＡ对培养３６ｈ的ＦＶＡ诱导的成红细胞（３６ｈＦＶＡ成红细胞）的ｃＤＮＡ进行多次减除杂交和ＰＣＲ扩增，构建上述３６ｈｃＤＮＡ的质粒减除文库并进行差异筛选。对阳性克隆进行核苷酸序列测定及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析。结果获得１个４７２ｂｐ的ｃＤＮＡ片段，其中含有１个３０９ｂｐ的开放阅读框架，编码１０２个氨基酸。经ＧｅｎＢａｎｋ进行同源比较，未发现同源序列，已被ＧｅｎＢａｎｋ接受，（编号ＡＡ１１４３６９）。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹分析表明，该ｃＤＮＡ在培养３６ｈ的ＦＶＡ中、晚幼红细胞中呈差异表达，其ｍＲＮＡ全长约为５００～６００ｂｐ左右。将其暂命名为小鼠红细胞分化相关因子（ＭＥＤＲＦ）基因。结论ＭＥＤＲＦ基因在红细胞分化的中、晚幼阶段特异表达，表明ＭＥＤＲＦ是一个新的与红细胞终末分化相关的因子。

关键词：红细胞分化细胞分化 cDNA 克隆相关因子

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补体活化与中性粒细胞产生活性氧之间的反馈调节作用

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中国医学科学院学报 1999年第3期21卷 170-174页

作者：范欣荣凌允礼吴元德侯健存中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理研究室

目的在试管实验中证明补体系统的活化与中性粒细胞产生的活性氧间存在相互作用的反馈关系。方法用菊糖活化的补体作用于中性粒细胞产生活性氧，并进一步通过测定吸光度以观察补体进一步活化情况。用佛波醇肉豆蔻醋酸酯激发中性粒细胞产... 详细信息

目的在试管实验中证明补体系统的活化与中性粒细胞产生的活性氧间存在相互作用的反馈关系。方法用菊糖活化的补体作用于中性粒细胞产生活性氧，并进一步通过测定吸光度以观察补体进一步活化情况。用佛波醇肉豆蔻醋酸酯激发中性粒细胞产生的活性氧作用于补体，并进一步采用发光测定仪测定活性氧来观察活化的补体对中性粒细胞释放活性氧的促进作用。结果试管实验证明活化的补体能刺激中性粒细胞产生活性氧，而活性氧又能进一步活化补体。结论补体和中性粒细胞产生的活性氧两者间存在着相互活化的反馈调节作用。从而推测炎症过程中补体活化在炎症反应的产生中起主要作用，而在炎症反应的持续过程中，此两者起互相促进的反馈调节作用。

关键词：补体中性粒细胞活性氧反馈调节

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RRM RNA结合蛋白的结构与功能

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生物化学与生物物理进展 1999年第4期26卷 305-307页

作者：杜光伟周严袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白是一类含一个或数个ＲＲＭ结构域及附属结构域的ＲＮＡ结合蛋白，参与ＲＮＡ前体的剪接、ＲＮＡ的细胞定位、ＲＮＡ的稳定性等多种转录后调控过程．在ＲＲＭ基序中含有许多保守... 详细信息

ＲＲＭＲＮＡ结合蛋白是一类含一个或数个ＲＲＭ结构域及附属结构域的ＲＮＡ结合蛋白，参与ＲＮＡ前体的剪接、ＲＮＡ的细胞定位、ＲＮＡ的稳定性等多种转录后调控过程．在ＲＲＭ基序中含有许多保守的氨基酸以保证对ＲＮＡ的结合活性，但是这一家族的不同蛋白质却能特异地结合各种不同的ＲＮＡ分子．ＲＲＭＲＮＡ

关键词：转录后调控 RNA结合蛋白 RRM基序

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阿司匹林抑制急性心肌梗死患者血小板与白细胞的粘附

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中国医学科学院学报 1999年第4期21卷 268-271页

作者：高存记于晓霞林勇汪钟中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所药理室北京100005

目的　研究阿司匹林（乙酰水杨酸，ＡＳＡ）对急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者血小板与白细胞粘附的影响及其作用机制。方法　采用体外玫瑰花结形成实验检测血小板与白细胞粘附，观察ＡＳＡ对两者粘附的作用；用１２５Ｉ标记的单克隆抗体... 详细信息

目的　研究阿司匹林（乙酰水杨酸，ＡＳＡ）对急性心肌梗死（ＡＭＩ）患者血小板与白细胞粘附的影响及其作用机制。方法　采用体外玫瑰花结形成实验检测血小板与白细胞粘附，观察ＡＳＡ对两者粘附的作用；用１２５Ｉ标记的单克隆抗体测定血小板表面α颗粒膜蛋白１４０（ＧＭＰ１４０）的表达，观察ＡＳＡ对凝血酶诱导的血小板表面ＧＭＰ１４０表达的影响。结果　ＡＭＩ患者血小板与白细胞间粘附率增高，凝血酶通过诱导血小板表面ＧＭＰ１４０的表达促进血小板与白细胞粘附；阿司匹林（５００、５０００μｇ／ｍｌ）抑制ＡＭＩ患者血小板与白细胞间的粘附，抑制凝血酶诱导的正常人血小板与白细胞间的粘附以及凝血酶诱导的血小板表面ＧＭＰ１４０的表达。结论　ＡＳＡ一方面通过抑制ＧＭＰ１４０的表达，另一方面可能通过影响配体间的结合抑制血小板与白细胞之间的粘附，揭示了ＡＳＡ

关键词：阿司匹林血小板中性粒细胞心肌梗死 AMI

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一氧化氮合酶抑制剂阴断可片耐受和依赖的信号转导途径

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中华医学杂志 1999年第10期79卷 764-768页

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N＾G－硝基－L－精氨酸(L－NNA)对阿片耐受和依赖机制中腺苷酸环化酶－环磷酸腺苷(AC－CAMP)系统、CA＾2+系统和一氧化氮－环磷酸鸟苷(NO－MGMP)系统变化的影响.方法实验共分为对照组,阿片激动剂组,... 详细信息

目的探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N＾G－硝基－L－精氨酸(L－NNA)对阿片耐受和依赖机制中腺苷酸环化酶－环磷酸腺苷(AC－CAMP)系统、CA＾2+系统和一氧化氮－环磷酸鸟苷(NO－MGMP)系统变化的影响.方法实验共分为对照组,阿片激动剂组,阿片激动剂组,阿片激动剂+纳洛酮组;L－NNA+阿片激动剂组和L－NNA+阿片激动剂+纳洛酮组.采用竞争性蛋白结合试验,＾3H－精氨酸转化成＾3H

关键词：阿片样δ 麻醉品依赖一氧化氮信号传递

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