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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1999年第7期9卷 602-605页

作者：白龙川胡松年赵全壁邵一鸣强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国预防医学科学院病毒学研究所北京100052

Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述... 详细信息

Tat(Transactivator)蛋白是人免疫缺陷病毒HIV基因组编码的反式激活因子。为了进一步研究M5 Tat和M6 Tat蛋白对HIV病毒复制的抑制作用,将可被Tat调控的启动子YL158替换基因治疗中常用的逆转录病毒载体LNCX中的CMV启动子,构建了表达上述反显性Tat蛋白的逆转录病毒载体,随后导入双向性包装细胞PA317细胞中,用产生出的复制缺陷病毒感染MT4 T淋巴细胞.用HIV-1病毒攻击稳定表达有M5和M6 Tat蛋白的MT4细胞;结果显示,M5和M6 Tat蛋白均能抑制低剂量的HIV-1病毒的复制。

关键词：人免疫缺陷病毒 1型反显性 Tat蛋白

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凉山彝族男性血管紧张素转换酶基因多态性与高血压的关系

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中华预防医学杂志 1999年第6期33卷 346-347页

作者：单广良王学超邱长春任崇文李辉王平乌正赉廖苏苏李雄伟童仕明张孔来中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院流行病学教研室北京市100005 四川省凉山彝族自治州卫生防疫站医学分子生物学国家重点实验室四川省凉山彝族自治州昭觉县卫生防疫站四川省凉山彝族自治州布拖县卫生防疫站

目的　探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与高血压的关系。方法　应用横断面调查方法和ＰＣＲ技术。结果　正常血压人群ＡＣＥ基因ＤＤ、ＩＤ和ＩＩ基因型分别占１３．０％、５０．９％和３６．１％。Ｉ和Ｄ等位... 详细信息

目的　探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与高血压的关系。方法　应用横断面调查方法和ＰＣＲ技术。结果　正常血压人群ＡＣＥ基因ＤＤ、ＩＤ和ＩＩ基因型分别占１３．０％、５０．９％和３６．１％。Ｉ和Ｄ等位基因频率分别是为６１．６％和３８．４％。高血压人群ＡＣＥ基因ＤＤ、ＩＤ和ＩＩ基因型分别占９．７％、４８．４％和４１．９％。Ｉ和Ｄ等位基因频率分别是６６．１％和３３．９％。彝族男性高血压和正常血压人群的ＡＣＥ基因型分布及Ｉ／Ｄ等位基因频率差异无显著性。结论　彝族男性ＡＣＥ基因多态性与高血压的关联尚不能确定。

关键词：高血压 ACE 基因多态性彝族

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体外转运红细胞囊泡的GPI锚定蛋白CD59保护阵发性睡眠性血红蛋白尿症红细胞<英文>

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中国实验血液学杂志 1999年第2期7卷 123-127页

作者：许彩民杨洋吕照江潘华珍张之南中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005 北京协和医院北京100730

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种后天获得性克隆溶血疾病,由于血细胞膜上缺乏具有调节蛋白补体的GPI-锚定蛋白如CD59和CD55等,所以对补体敏感,易产生溶血。红细胞存储或ATP耗空时有囊泡释放,经免疫印迹试验证明囊泡中富含CD59。应... 详细信息

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种后天获得性克隆溶血疾病,由于血细胞膜上缺乏具有调节蛋白补体的GPI-锚定蛋白如CD59和CD55等,所以对补体敏感,易产生溶血。红细胞存储或ATP耗空时有囊泡释放,经免疫印迹试验证明囊泡中富含CD59。应用免疫亲和层析柱分离PNH CD59^-红细胞,然后与红细胞囊泡保温,保温后分别测定PNH CD59^-细胞表面CD59含量和溶血度。用流式细胞仪测定CD59,结果发现保温后CD59含量增加;用蛇毒因子溶血试验测得溶血度有显著下降。体外实验证明囊泡上的CD59可以转运到PNH CD59^-红细胞上,并具有抑制补体溶血的功能,使PNH CD59^-红细胞在受补体攻击时不易溶血。

关键词：阵发性睡眠性血红蛋白尿症 GPI-描定蛋白红细胞囊泡 CD59

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成人及胚胎组织中FMR1基因的选择剪接表达

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自然科学进展（国家重点实验室通讯） 1999年第8期9卷 696-702页

作者：丁侃李兰英范钰许琪韩富天朱宁宁刘恩莉林炳承吴冠芸沈岩中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005 天津医科大学天津市内分泌研究所天津300070 中国科学院大连化学物理研究所大连116023

选择剪接使单一基因表达产物的功能多样化,是真核基因表达调控的重要途径之一。FMR1基因在胚胎和成人不同组织中广泛表达,并在中枢神经系统等组织特异性高表达,转录本呈复杂的选择剪接方式。采用RT-PCR结合毛细管电泳分析了成人及2个6... 详细信息

选择剪接使单一基因表达产物的功能多样化,是真核基因表达调控的重要途径之一。FMR1基因在胚胎和成人不同组织中广泛表达,并在中枢神经系统等组织特异性高表达,转录本呈复杂的选择剪接方式。采用RT-PCR结合毛细管电泳分析了成人及2个6月龄胎儿10个组织中FMR1基因的选择剪接表达谱。FMR1基因在成人肺和肝组织中选择剪接表达谱相同,由7种选择剪接异构体组成;在胎儿不同组织中表达3种共同的主要剪接异构体,但这3种异构体在不同组织中所占比例及次要异构体剪接方式不尽相同。胎儿与成人组织中FMR1转录本剪接方式的主要差别表现在外显子12和17的使用上,提示FMR1基因的选择剪接表达存在发育转换。但在同一发育阶段的不同组织中未见FMR1选择剪接表达谱的显著改变。

关键词： FMR1 基因表达选择剪接胚胎组织成人

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入淋巴细胞CD2胞内区结合蛋白的分子克隆

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中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 158-158页

作者：邵源肖声李董刘彦信刘士廉郑德先中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所实验血液学国家重点实验室天津300020 中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

CD2分子,又称E受体,分布于胸腺细胞及所有成熟T淋巴细胞和大部分NK细胞的表面,是T淋巴细胞的粘附和信号分子,在T淋巴细胞分化、成熟、识别、粘附、激活和凋亡等方面都具有重要作用.CD2分子的胞内区含有能调节细胞识别作用、粘附作用和... 详细信息

CD2分子,又称E受体,分布于胸腺细胞及所有成熟T淋巴细胞和大部分NK细胞的表面,是T淋巴细胞的粘附和信号分子,在T淋巴细胞分化、成熟、识别、粘附、激活和凋亡等方面都具有重要作用.CD2分子的胞内区含有能调节细胞识别作用、粘附作用和细胞信号传递作用的不同功能区.近年的研究发现,CD2与其配体CD58、CD48的结合介导T细胞识别、粘附和激活作用.而以抗CD2不同抗原决定簇的单克隆抗体处理T细胞,则引起T细胞的不同应答反应.T112和T113处理T淋巴细胞引起细胞激活,而T11l和D66处理T淋巴细胞引起细胞激活后凋亡(activation induced cell death),其原因尚不明了.本实验室在多年研究的基础上推测,CD2胞内区可能传递不同的刺激信号,从而引起不同的细胞应答反应.为了验证这一假说,本研究采用酵母双杂交系统(two hybrid system),首次克隆得到了一与CD2胞内区结合的下游蛋白,并对该蛋白的功能进行探讨,结果如下:采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人外周血淋巴细胞mRNA中扩增了CD2胞区cDNA片段,并将其命名为CD2c.

关键词： CD2 胞内区酵母双杂交系统 v-fos转化效应蛋白

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人神经系统特异表达基因HMP19cDNA的克隆与表达谱分析

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云南大学学报（自然科学版） 1999年第S3期21卷 249-249页

作者：李光涛金鉴周严黄晓玮周海军胡松年袁建刚强伯勤医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所国协和医科大学基础医学院北京100005

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外显子捕获法分离FRAXA位点的新表达序列

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生物化学与生物物理进展 1998年第4期25卷 367-373页

作者：孔建朱宁宁尹斌沈岩吴冠芸中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

外显子捕获是近年发展起来的一种自基因组ＤＮＡ分离表达序列的有效方法．我们采用以ｐＳＰＬ３为剪接载体的外显子捕获系统，从覆盖ＦＲＡＸＡ位点的酵母人工染色体ＹＡＣ２０９Ｇ４中分离到２个新外显子序列Ａ９１和Ｄ１２．Ａ９１在... 详细信息

外显子捕获是近年发展起来的一种自基因组ＤＮＡ分离表达序列的有效方法．我们采用以ｐＳＰＬ３为剪接载体的外显子捕获系统，从覆盖ＦＲＡＸＡ位点的酵母人工染色体ＹＡＣ２０９Ｇ４中分离到２个新外显子序列Ａ９１和Ｄ１２．Ａ９１在人胎肝和骨骼肌文库中丰度较高，在肝、肾和骨髓文库中也有ＰＣＲ扩增．而Ｄ１２在所分析的８个ｃＤＮＡ文库中均未见ＰＣＲ扩增产物．从骨骼肌文库中克隆到一段包含Ａ９１的３１５ｂｐ的ｃＤＮＡ（ＡＭ４４７０）．多种组织ＲＮＡ印迹显示，ＡＭ４４７０与骨骼肌和心脏ｍＲＮＡ杂交，转录本长度均为２８ｋｂ．

关键词：外显子捕获表达序列 FRAXA位点

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非编码的mRNA

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生物化学与生物物理进展 1998年第5期25卷 387-389页

作者：罗文琴袁建刚强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

非编码的ｍＲＮＡ是近年发现的一类不含典型ＯＲＦ的ｍＲＮＡ．目前已发现或克隆的这类基因主要有：Ｈ１９基因，ＸＩＳＴ基因，ＸＬＳＩＲＴ基因，Ｈｉｓ１基因，ｂｉｃ基因，ｒｏｘ１和ｒｏｘ２基因等．它们与胚胎发育，肿瘤发生及... 详细信息

非编码的ｍＲＮＡ是近年发现的一类不含典型ＯＲＦ的ｍＲＮＡ．目前已发现或克隆的这类基因主要有：Ｈ１９基因，ＸＩＳＴ基因，ＸＬＳＩＲＴ基因，Ｈｉｓ１基因，ｂｉｃ基因，ｒｏｘ１和ｒｏｘ２基因等．它们与胚胎发育，肿瘤发生及Ｘ染色体失活密切相关．

关键词：非编码 mRNA H19基因 XIST基因 His-1基因

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人apoE_7基因在NIH/3T3细胞中瞬时及稳定表达

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中国医学科学院学报 1998年第2期20卷 138-143页

作者：孙明增琦祖和潘燕中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的为了探索人apoE_7基因受控于异源启动子MT-I时,能否在鼠类细胞中表达。方法自10.3 kb人apoE_7基因组DNA获得不带自身启动子的人apoE_7基因组DNA片段(60 kb),与小鼠金属硫蛋白启动子(MT-I)重组,构建pME_7真核表达质粒,用Lipofectamin... 详细信息

目的为了探索人apoE_7基因受控于异源启动子MT-I时,能否在鼠类细胞中表达。方法自10.3 kb人apoE_7基因组DNA获得不带自身启动子的人apoE_7基因组DNA片段(60 kb),与小鼠金属硫蛋白启动子(MT-I)重组,构建pME_7真核表达质粒,用Lipofectamine转染NIH/3T3细胞。结果瞬时表达结果表明,重组pME_7质粒能够在NIH/3T3细胞中表达。稳定表达的结果则表明,人apoE_7基因的表达水平与其整合到宿主细胞基因组的拷贝数密切相关。ELISA测定结果显示,人apoE_7基因在NIH/3T3细胞中可以进行正确的转录剪切和翻译加工,合成有生物活性的人apoE_7蛋白;研究结果还表明:重金属可以诱导增强人apoE_7基因的高效表达,诱导后表达水平提高45%～60%。结论人apoE_7基因的表达不仅局限于人类的组织细胞,也可以在鼠类组织细胞中表达;而且MT-I启动子能够诱导表达人apoE_7基因,为人apoE_7转基因小鼠模型的建立奠定了基础。

关键词：真核表达质粒 apoE7基因 MT-I启动子 NIH/3T3

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血管紧张素转换酶基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

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中华结核和呼吸杂志 1998年第8期21卷 489-491页

作者：肖毅黄席珍邱长春朱席琳刘怡文中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院呼吸内科中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室

目的探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（ＯＳＡＳ）之间的关系。方法以ＡＣＥ基因内含子１６的一个２８７ｂｐ的Ａｌｕ顺序Ｉ／Ｄ（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ）型为多态标志，用聚合酶... 详细信息

目的探讨血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）基因多态性与阻塞性睡眠呼吸暂停综合征（ＯＳＡＳ）之间的关系。方法以ＡＣＥ基因内含子１６的一个２８７ｂｐ的Ａｌｕ顺序Ｉ／Ｄ（ｉｎｓｅｒｔｉｏｎ／ｄｅｌｅｔｉｏｎ）型为多态标志，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增基因片段，对５０例ＯＳＡＳ患者和５０名正常人ＡＣＥ基因多态性的分布进行了观察，并结合临床特点和多导睡眠监测结果进行了分析。结果发现在中国汉族正常人群中，ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态Ｉ、ＩＤ、ＤＤ基因型频率分别为１６％，５２％，３２％，其Ｄ和Ｉ等位基因频率分别为４２％和５８％。Ｉ／Ｄ多态分布符合Ｈａｒｄｙｗｅｉｎｂｅｒｇ定律，达到了遗传平衡，具有群体代表性。ＯＳＡＳ患者Ⅱ基因型显著高于正常人，ＤＤ基因型则明显低于正常人；Ｄ和Ｉ等位基因频率分别为２８％和７２％，其差异也具有统计学意义。Ⅱ基因型的ＯＳＡＳ患者较ＩＤ基因型，最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和睡眠呼吸暂停低通气指数（ＡＨＩ）均较严重。另外，合并高血压的ＯＳＡＳ患者其最长呼吸暂停时间，最低血氧饱和度和ＡＨＩ较无高血压的ＯＳＡＳ患者严重。结论中国汉族人ＯＳＡＳ发病与ＡＣＥ基因Ｉ／Ｄ多态性相关联，基因型ＩＩ和等位基因Ｉ可能是中国人?

关键词：睡眠呼吸暂停综合征 ACE 基因多态性

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