检索结果-内蒙古大学图书馆

中华微生物学和免疫学杂志 1998年第3期18卷 202-206页

作者：马凤蓉朱立平张立新李波张淑珍王汛李国燕赵方萄崔莲仙中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学系

目的鉴于５Ｃ５ｃＤＮＡ（６１３ｂｐ）的２～４５０ｂｐ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ（１００８ｂｐ）的５６０～１００８ｂｐ的同源性高达９５％，且后者编码的蛋白质（ＭＲＰＬ１２）也在细胞活化后表达，本研究旨在探究两者是否属同一... 详细信息

目的鉴于５Ｃ５ｃＤＮＡ（６１３ｂｐ）的２～４５０ｂｐ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ（１００８ｂｐ）的５６０～１００８ｂｐ的同源性高达９５％，且后者编码的蛋白质（ＭＲＰＬ１２）也在细胞活化后表达，本研究旨在探究两者是否属同一物。方法多个人Ｂ细胞株用单抗５Ｃ５－Ｇ１作间接免疫荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜观察。结果５Ｃ５－Ｇ１单抗识别分子表达于膜下近膜胞浆处、也可能在膜表面，但非单纯在膜上，而ＭＥＰＬ１２只表达于线粒体。另外，前Ｂ细胞Ｎａｌｍ－６与单抗５Ｃ５－Ｇ１反应阴性，活化前期Ｂ细胞Ｄａｕｄｉ和３Ｄ５的反应强阳性，分化晚期Ｂ细胞ＳＫＷ６为弱阳性。结论５Ｃ５ｃＤＮＡ与ＨＳＭＲＰ１７ｍＲＮＡ不属同一基因；

关键词：单克隆抗体 B细胞胞膜显微镜检

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重组腺相关病毒转导外源基因入EB病毒转化的B淋巴细胞获长期表达

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第6期21卷 594-599页

作者：史耕先刘音李琳朱立平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫学教研室北京100005

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包... 详细信息

目的　采用重组腺相关病毒 (AAV)载体pAGX(+) ,把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞 ,以获得正义或反义 6A8DNA长期表达的B淋巴细胞株。方法　构建含正义或反义 6A8DNA片段的重组pAGX(+)质粒。经包装后转导淋巴细胞 ,经G418筛选 ,用有限稀释法克隆转导成功的淋巴细胞。Northern杂交和RT PCR检测转导基因的mRNA表达水平。ConA结合试验检测细胞在转导基因后 6A8α 甘露糖苷酶活性的改变。结果　pAGX 反义6A8DNA及pAGX 正义 6A8DNA经包装获得了高复制滴度的重组AAV(rAAV)颗粒 ,藉助rAAV成功地把 6A8基因转导入EB病毒转化的B细胞株SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB。Northern杂交结果显示 ,转导的正义或反义 6A8DNA获得表达。经 1年余传代培养 ,RT PCR检测见BJAB和SKW6细胞中转导的正义或反义 6A8DNA的mRNA表达增加 ,新霉素抗性基因 (neoR)也获得表达 ,表明转导基因获得了长期表达。ConA结合强度在转导反义 6A8DNA的细胞升高 ,提示转导反义 6A8DNA可影响 6A8α 甘露糖苷酶的表达。结论　用AAV载体成功地把 6A8α 甘露糖苷酶基因的正义或反义DNA片段转导入EB病毒转化的B淋巴细胞SKW6和B淋巴样白血病细胞株BJAB ,转导的基因获得长期表达 ,并干扰 6A8α 甘露糖苷酶的表达。

关键词：重组腺相关病病毒 EB病毒转化 B淋巴细胞外源基因转导

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神经生长因子的药代动力学研究

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中国药学杂志 2000年第3期35卷 181-184页

作者：姜国辉唐刚华张云陈力真王世真王树惠中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物免疫研究室北京100730

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓... 详细信息

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓度。结果 :静注12 5I NGF 2 5 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β为 2 .2 2 3h ,酸沉法为 2 .2 6 4h。肌注12 5I NGF75 ,2 5 ,1 0 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .1 4 0 ,2 .331 ,3.1 73h ,酸沉法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .480 ,2 .5 5 2 ,2 .6 42h ,达峰时间tmax为 0 .5 83h。电泳法和酸沉法测得12 5I NGF平均血浆清除率 (Cl)分别为 0 .32 1和 0 .332L·h-1·kg-1,表观分布容积 (Vd)为 1 .2 5 9和 1 .31 5L·kg-1,体内平均滞留时间 (MRT)为 3.5 92和 3.5 39h。结论 :NGF在体内消除半衰期较短。本研究为今后的临床应用提供了必要的参考资料。

关键词：神经生长因子药代动力学小鼠 NGF

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ULBP4原核表达、生物学功能鉴定及其单克隆抗体的制备和初步鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2007年第3期23卷 242-245页

作者：曹伟郝志勇郗雪艳孔燕马驰崔莲仙何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院免疫系北京100005

目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR方法从HO-8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表... 详细信息

目的:在大肠杆菌中表达ULBP4重组蛋白,并制备其特异性的单克隆抗体(mAb),为γδT细胞对ULBP4的识别机制研究奠定基础。方法:根据GenBank中ULBP4的基因序列设计相应的引物,用RT-PCR方法从HO-8910细胞中扩增得到ULBP4片段,构建重组原核表达质粒pET22b(+)/ULBP4(前225aa胞外段),在Rosetta-gamiTMB(DE3)大肠杆菌中获得表达且主要位于包含体中,经纯化透析复性后,分析其对NK细胞IFN-γ细胞因子分泌的影响。以ULBP4为抗原,免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞常规融合,依次经HAT选择培养、间接ELISA法、克隆化培养、荧光免疫检测和流式细胞术以及Western blot筛选和鉴定抗ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结果:构建了pET22b(+)/ULBP4(225aa)原核表达体系,并检测到重组蛋白的有效表达;纯化的重组蛋白在体外培养体系中可以刺激NK细胞IFN-γ细胞因子的分泌。此外,还获得了4株可稳定分泌抗人ULBP4 mAb的杂交瘤细胞株。结论:成功地构建并表达了具有生物活性的ULBP4,为γδT细胞的识别机制研究建立抗原制备平台,同时所制备的抗人ULBP4 mAb,为后续研究奠定了基础。

关键词： ULBP4 NKG2D IFN-γ Rosetta-gami^TMB(DE3)大肠杆菌表达生物学功能单克隆抗体

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Role of the area postrema of medulla oblongata in the regulation of canine interdigestive migrating motor complex

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Chinese Medical Journal 2002年第3期115卷 384-388页

作者：王礼建周吕田瑞中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理研究室北京100005

OBJECTIVE: To determine the effect of the area postrema (AP) of the medulla oblongata on gastrointestinal interdigestive migrating motor complex (MMC) and the plasma motilin level. METHODS: Interdigestive MMC activities of the antrum and duodenum were recorded by strain gauge implanted on the serosa of 8 conscious dogs. A cannula was intubated in femoral vein for motilin injection. The plasma motilin concentration was measured by RIA. We observed: (1) normal interdigestive MMC activity and fluctuations in plasma motilin concentration; (2) the effects of electrically damaging the AP on MMC activity and plasma motilin level; (3) whether intravenous injection of motilin could induce phase III contractions after the AP was destroyed. RESULTS: (1) Typical interdigestive MMC with phase I, II, III, and IV was recorded in normal dogs. Phase III was concurrent with the peak of plasma motilin level. (2) In damaged AP dogs, antroduodenal interdigestive MMC contractions were suppressed; cyclic, phasic and migratory pattern of MMC was disrupted. Plasma motilin concentration was decreased. Intravenous injection of motilin could not induce phase III contractions. CONCLUSIONS: The area postrema might play an important role, which is mediated by motilin, on the regulation of interdigestive MMC.

关键词： Animals Dogs Fourth Ventricle Medulla Oblongata Motilin Myoelectric Complex, Migrating Research Support, Non-U.S. Gov't Stomach

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胃动素对大鼠胃平滑肌细胞收缩活动的作用

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生理学报 1996年第2期48卷 165-172页

作者：周吕王新中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理研究室

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察胃动素对胃平滑肌细胞的收缩作用。结果表明：（１）胃动素明显增强单个胃平滑肌细胞收缩活动，在生理剂量１０（－１１）─１０（－１０）ｍｏｌ范围内，呈剂量依赖性。（２）不同胃分区平滑肌细... 详细信息

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察胃动素对胃平滑肌细胞的收缩作用。结果表明：（１）胃动素明显增强单个胃平滑肌细胞收缩活动，在生理剂量１０（－１１）─１０（－１０）ｍｏｌ范围内，呈剂量依赖性。（２）不同胃分区平滑肌细胞对冒动素兴奋反应不同，胃动素对胃窦平滑肌细胞收缩强度大于胃体和幽门。（３）给予抗胃动素血清可以完全取消胃动素对胃肌细胞的收缩反应，而阿托品、ＴＴＸ、甲氰米胍、ｌｏｘｉｇｌｕｍｉｄｅ均不影响胃动素的作用。（４）给予胞内钙释放阻断剂ＴＭＢ－８可抑制胃动素对目肌细胞的收缩作用。上述结果提示，胃动素对胃平滑肌细胞的直接作用是由胃动素受体所介导，且与胞内Ｃａ（２＋）释放起重要作用。

关键词：胃动素收缩胃平滑肌细胞

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大鼠肝癌前病灶与卵圆细胞的关系

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中华病理学杂志 1998年第2期27卷 87-90页

作者：廖钢陵陈晋彦丁濂张彦东中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理室

目的探讨肝脏癌前病灶的细胞学起源。方法用雄性Ｆｉｓｈｅｒ３４４大鼠，在两个不同的化学致癌模型中，用放射自显影方法追踪癌前病灶的发生与卵圆细胞（ｏｖａｌｃｅｌ）或肝细胞的关系。模型Ⅰ动物连续饲喂含００２％二乙酰胺基芴... 详细信息

目的探讨肝脏癌前病灶的细胞学起源。方法用雄性Ｆｉｓｈｅｒ３４４大鼠，在两个不同的化学致癌模型中，用放射自显影方法追踪癌前病灶的发生与卵圆细胞（ｏｖａｌｃｅｌ）或肝细胞的关系。模型Ⅰ动物连续饲喂含００２％二乙酰胺基芴（２ＡＡＦ）共２８天，第７天作２／３肝大部切除（２／３ＰＨ）以刺激卵圆细胞增生，第１２天用３ＨＴｄｒ腹腔注射以选择性标记卵圆细胞；模型Ⅱ在２８天连续饲喂００２％２ＡＡＦ之前第９天，先进行２／３ＰＨ，术后２２小时用３ＨＴｄｒ腹腔注射以标记代偿性增生的肝细胞。结果模型Ⅰ与模型Ⅱ在癌前病灶出现之前分别获得了对卵圆细胞和肝细胞的选择性标记，而癌前病灶细胞核内的示踪银颗粒只出现在卵圆细胞被选择性标记的模型Ⅰ中。结论提供了大鼠以２ＡＡＦ为致癌物诱发的癌前病灶来自卵圆细胞的直接证据。

关键词：肝肿瘤癌前病灶卵圆细胞

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强啡肽A（1－17）所致大鼠运动障碍及对脊髓组织AC－cAMP水平的影响

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中国药理学通报 1995年第6期11卷 459-463页

作者：张志媛李富春强文安刘捷王艳红刘景生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院药理室

大鼠蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ（１－１７），观察其所引起的行为变化及对脊髓组织ＡＣ－ｃＡＭＰ系统的影响。强啡肽Ａ（１－１７）５、１０、２０ｎｍｏｌ可引起大鼠双后肢弛缓性瘫痪，并在给药１０ｍｉｎ强啡肽Ａ（１－１７）１０、２... 详细信息

大鼠蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ（１－１７），观察其所引起的行为变化及对脊髓组织ＡＣ－ｃＡＭＰ系统的影响。强啡肽Ａ（１－１７）５、１０、２０ｎｍｏｌ可引起大鼠双后肢弛缓性瘫痪，并在给药１０ｍｉｎ强啡肽Ａ（１－１７）１０、２０ｎｍｏｌ显著抑制脊髓组织ｃＡＭＰ含量和ＡＣ活性，呈量效关系，２ｈ后均有不同程度的恢复。选择性ｋ型阿片受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ３０ｎｍｏｌ可明显对抗强啡肽Ａ（１－１７）２０ｎｍｏｌ所致的后肢瘫痪并完全阻断其对ＡＣ、ｃＡＭＰ的抑制作用；Ｌ型Ｃａ２＋通道阻断剂异搏定１００ｎｍｏｌ亦可部分阻断强啡肽Ａ（１－１７）对脊髓的影响；而兴奋性氨基酸ＮＭＤＡ受体特异性拮抗剂ＡＰＶ１０ｎｍｏｌ则无效。提示ｋ型阿片受体和Ｌ型Ｃａ２＋通道参与了强啡肽Ａ（１－１７）所引起的大鼠运动障碍及对脊髓组织ＡＣ、ｃＡＭＰ水平的调控。

关键词：强啡肽A 运动障碍脊髓环磷酸腺苷

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甘丙肽（galanin）对大鼠垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的调节

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生理学报 1995年第1期47卷 65-72页

作者：许荣周远征黄曼影单惠敏王悦郭传海韩小四中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理研究室

本工作探讨甘丙肽是否参与垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的调节。实验分两部分：（１）在体实验，给清醒自由活动的大鼠第三脑室内微量注射甘丙肽（１μｇ或３μｇ／只），用放射免疫测定法检测血浆催乳素和β－内啡肽的浓度。结果如... 详细信息

本工作探讨甘丙肽是否参与垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的调节。实验分两部分：（１）在体实验，给清醒自由活动的大鼠第三脑室内微量注射甘丙肽（１μｇ或３μｇ／只），用放射免疫测定法检测血浆催乳素和β－内啡肽的浓度。结果如下：每只大鼠给１μｇ或３μｇ的甘丙肽后，都显著兴奋催乳素的静息分泌，３μｇ甘丙肽对催乳素分泌的兴奋效应显著大于１μｇ的作用。两种剂量的甘丙肽都不影响限制性应激引起的催乳素的释放；对β－内啡肽的静息分泌和应激引起的释放也无明显影响。（２）离体实验，在体外培养的垂体前叶细胞中，加入不同剂量的甘丙肽（０．０５，０．５和１．０μｇ），孵育１ｈ后，用上述方法测定培养液中催乳素和β－内啡肽的浓度。其结果是三种剂量的甘丙肽都显著兴奋β－内啡肽的分泌，兴奋效应随甘丙肽的剂量增加而增大，有显著的剂量效应；但三种剂量的甘丙肽对催乳素的分泌均无作用。以上结果表明，甘丙肽对垂体前叶催乳素和β－内啡肽释放的调节作用不同。中枢的甘丙肽可能通过一定的下丘脑机制兴奋垂体前叶催乳素的静息分泌，但不影响应激引起的催乳素的释放，也不影响β－内啡肽的静息分泌和应激引起的释放。外周的甘丙肽虽然对垂体前叶细胞的催乳素分泌无直接作用，但兴奋?

关键词：甘丙肽垂体前叶催乳素 β-内啡肽

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茶儿茶素抗大鼠脑缺血再灌注损伤与对脑细胞内Ca^(2+)的作用

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中国药学杂志 2003年第12期38卷 917-919页

作者：方芳崔志清韩永晶中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050 天津医科大学基础医学院药理教研室天津300070

目的　本研究观察茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑细胞内钙离子浓度和海马组织细胞的作用 ,进一步阐明其对缺血再灌注损伤的保护机制。方法　采用钳夹双侧颈总动脉和迷走神经缺血 6 0min再灌注 30min的动物模型 ,荧光分光光度法测定脑细... 详细信息

目的　本研究观察茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑细胞内钙离子浓度和海马组织细胞的作用 ,进一步阐明其对缺血再灌注损伤的保护机制。方法　采用钳夹双侧颈总动脉和迷走神经缺血 6 0min再灌注 30min的动物模型 ,荧光分光光度法测定脑细胞内钙离子浓度并观察神经细胞损伤程度。结果　模型组脑细胞内钙离子浓度显著高于正常组 (P <0 .0 1) ,海马组织呈明显的损伤 ,茶儿茶素 (5 0mg·kg-1,ip ,qd× 7)组显著降低脑缺血再灌注后脑细胞内钙离子浓度 ,损伤程度也较模型组轻。结论　茶儿茶素可能通过降低脑细胞内钙离子浓度 ,保护脑组织对抗缺血再灌注损伤。

关键词：茶儿茶素脑缺血再灌注损伤脑细胞 Ca^2+ 海马组织

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