检索结果-内蒙古大学图书馆

中华病理学杂志 2005年第3期34卷 150-153页

作者：马琳张军航刘芙蓉张学中国医科大学附属第二医院(盛京医院)妇产科沈阳110004 卫生部细胞生物学重点实验室中国协和医科大学基础医学院医学遗传研究室

目的探讨RASSF1基因转录本A和C在多个卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中所起的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和激光捕获显微切割技术检测3个卵巢癌细胞系和80例人原发卵巢上皮性恶性肿瘤组织中RASSF1A和RASSF1CmRNA的表达。结果RA... 详细信息

目的探讨RASSF1基因转录本A和C在多个卵巢癌细胞系和卵巢癌组织中所起的作用。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)和激光捕获显微切割技术检测3个卵巢癌细胞系和80例人原发卵巢上皮性恶性肿瘤组织中RASSF1A和RASSF1CmRNA的表达。结果RASSF1A mRNA在卵巢癌SK OV3细胞中表达缺失;RASSF1A和RASSF1C在人卵巢癌组织中的表达率分别为40.0%(32/80)和91.3%(73/80)。RASSF1AmRNA的表达在浆液性癌、黏液性癌和内膜样癌组织中分别是41.2%(20/48),38.1%(8/21)和36.4%(4/11),P>0.05;临床Ⅰ期和Ⅱ期分别为71.4%和75.0%(10/14,9/12),明显高于临床Ⅲ期和Ⅳ期(26.7%、12/45和14.1%,1/9),P<0.05;高和中分化组分别为58.6%和50.0%(17/29,10/20),明显高于低分化组(16.1%,5/31),P<0.05。结论卵巢癌细胞和人原发卵巢癌组织中存在RASSF1AmRNA表达的缺失,RASSF1A的表达与卵巢癌的临床分期和组织学分级有关,可能作为一种新的抑癌基因在卵巢癌的发生和发展过程中起重要作用,RASSF1AmRNA的缺失提示预后不良。

关键词：卵巢癌细胞系癌组织中表达率基因转录 RNA 原发临床分化 RT-PCR 逆转录-聚合酶链反应

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重组核酸疫苗诱导小鼠抗血吸虫感染的免疫学研究

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中华医学杂志 2005年第3期85卷 193-197页

作者：甘燕石佑恩卜玲毅宁长修朱红刚华中科技大学同济医学院寄生虫学教研室武汉430030 中国协和医科大学基础医学院病原生物学系

目的为日本血吸虫病的防治寻求新的高效联合基因免疫策略。方法构建共表达日本血吸虫相对分子质量23000表膜蛋白(Sj23)基因与鼠IL12基因的核酸疫苗质粒pVIVO2IL12Sj23,转染HEK293细胞,通过RTPCR,Westernblot及ELISA法检测Sj23和IL12蛋... 详细信息

目的为日本血吸虫病的防治寻求新的高效联合基因免疫策略。方法构建共表达日本血吸虫相对分子质量23000表膜蛋白(Sj23)基因与鼠IL12基因的核酸疫苗质粒pVIVO2IL12Sj23,转染HEK293细胞,通过RTPCR,Westernblot及ELISA法检测Sj23和IL12蛋白的表达。接种并攻击感染BALB/c小鼠,以减虫率和减卵率评价其免疫保护力,同时设攻击感染对照组、空白质粒pVIVO2组、pVIVO2IL12组和pVIVO2Sj23组。用ELISA法和WesternBlot分析免疫小鼠血清中抗体。以脾细胞培养法检测经SEA刺激后,小鼠脾细胞分泌IFNγ和IL4的水平。并以FCM分析脾细胞亚群。结果经瞬时转染HEK293细胞证明质粒pVIVO2IL12Sj23能在体外进行表达。免疫小鼠后获得了4553%的减虫率和5835%的减卵率,较单价DNA疫苗pVIVO2Sj23免疫效果好(P<005)。ELISA法和WesternBlot检测抗体结果表明免疫小鼠产生了抗Sj23特异性IgG抗体。pVIVO2IL12Sj23免疫组IFNγ的水平较对照组显著升高而IL4水平较对照组低。攻击感染后各实验组小鼠脾细胞的CD4+,CD8+亚群比率无显著差别(P>005)。结论pVIVO2IL12Sj23DNA疫苗具有诱导BALB/c小鼠产生较好的抗血吸虫感染免疫保护效果。细胞因子IL12作为基因佐剂,具有诱导Th1型免疫反应从而增强DNA疫苗免疫保护性的作用。

关键词：感染脾细胞抗血吸虫免疫小鼠 ELISA法诱导 DNA疫苗免疫保护力核酸疫苗免疫保护效果

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基于多Agent的生物信息数据整合系统-BioAgent1

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电子学报 2005年第1期33卷 78-82页

作者：庄永龙马飞周敏沈岩李衍达清华大学生物信息学研究所教育部生物信息学重点实验室北京100084 中国协和医科大学基础医学院

随着人类基因组计划的实施 ,生命科学研究已进入后基因组时代 .人们基于指数形式增长的核酸、蛋白质序列和结构等数据 ,开发了数百种不同类型的数据库 .由于不同数据库存贮和检索方式的极大差异 ,给研究者对它们的整合应用造成了一定的... 详细信息

随着人类基因组计划的实施 ,生命科学研究已进入后基因组时代 .人们基于指数形式增长的核酸、蛋白质序列和结构等数据 ,开发了数百种不同类型的数据库 .由于不同数据库存贮和检索方式的极大差异 ,给研究者对它们的整合应用造成了一定的难度 .本文建立了一个基于多Agent的生物信息数据整合系统 BioAgent,通过信息采集A gent、信息整合Agent、用户Agent的协调 ,完成数据抽取、数据标准化、数据存储、数据融合、Web显示等工作流程 ,以实现数据整合的自动化 .同时利用BioAgent系统 ,开发了人类精神分裂症相关基因的突变信息多层次定位数据库 .

关键词：生物信息学数据整合 XML 多Agent

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胃癌患者生活质量问卷(QLQ-STO22)中文版的制定

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中国心理卫生杂志 2005年第5期19卷 310-312页

作者：姜宝法徐涛刘春晓徐敏崔永春王家林杜君 J.Blazyby 山东大学公共卫生学院 250012 中国协和医科大学基础医学院医学统计室山东省肿瘤医院欧洲癌症治疗与研究组织生存质量研究组

目的:将QLQ-STO22引入国内,并评价其可行性、信度和效度。方法:以2003年6月1日至12 月31日在某市三家医院入院治疗的胃癌患者为研究对象。调查内容主要包括一般状况、简明病情调查表及QLQ-STO22。结果:重复测量前后比较,STO22量表各个... 详细信息

目的:将QLQ-STO22引入国内,并评价其可行性、信度和效度。方法:以2003年6月1日至12 月31日在某市三家医院入院治疗的胃癌患者为研究对象。调查内容主要包括一般状况、简明病情调查表及QLQ-STO22。结果:重复测量前后比较,STO22量表各个维度的ICC 值均大于0.75;Cronbaeh'a 系数为0.80; 量表的分半信度系数分别为0.78。表明量表的重测信度、分半信度和内部一致性良好。对STO22量表的各个维度做因子分析,得到3个因子,它们分别能解释总体方差的72.8%,各公共因子在相应项目上的因子载荷均>0. 5,表明该量表具有较满意的结构效度。结论:QLQ-STO22中文版具有较好的信度和效度。

关键词：胃癌生活质量问卷 QLQ-STO22 中文版制定

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人甲状旁腺素(1-34)衍生物在大肠杆菌中表达、纯化及其生物学活性

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第2期21卷 227-233页

作者：狄旭刘长征陈松森张艳丽邓艳春孙兰杨京医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

为研究Gly hPTH(1 34)衍生物的生物学活性 ,用重叠PCR方法合成编码hPTH(1 34)的DNA片段 ,克隆到融合表达载体pGEX 2T的缩短型谷胱甘肽转移酶基因GST6 9△的 3′末端 ,构建正确读码框架的融合基因 .在两个基因间引入蛋白质羟胺切割位点序... 详细信息

为研究Gly hPTH(1 34)衍生物的生物学活性 ,用重叠PCR方法合成编码hPTH(1 34)的DNA片段 ,克隆到融合表达载体pGEX 2T的缩短型谷胱甘肽转移酶基因GST6 9△的 3′末端 ,构建正确读码框架的融合基因 .在两个基因间引入蛋白质羟胺切割位点序列 ,转入E .coliJM10 9中 ,IPTG诱导表达 .该融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的 2 0 %以上 ,主要以包涵体形式存在 ,盐酸羟胺切割表达产物 .分析表明 ,80 %左右的融合蛋白被裂解为GST6 9△和Gly hPTH(1 34) .经分子筛柱层析和反相层析分离纯化获得重组Gly hPTH(1 34)衍生物 ,纯度达 98%以上 ,回收率约为 10mg/升发酵液 ,分子量为 4 177,等电点 (pI)为 8 4 0 ,N端 16个氨基酸 ,除第一个为甘氨酸外 ,其余与天然hPTH(1 34)序列一致 .Western印迹结果表明 ,Gly hPTH(1 34)衍生物具有hPTH(1 34)的免疫学活性 .体外活性测定结果表明 ,Gly hPTH(1 34)衍生物能刺激人成骨细胞HOSTE85增殖、增加细胞内胶原合成、ALP活性增高和cAMP生成量增加 ,并呈量效关系 ,提示它具有与化学合成的hPTH(1 34)相同的生物学活性 ,N端多一个Gly对其活性无明显影响 .

关键词： Gly—hPTH(1—34)衍生物融合表达羟胺切割纯化生物学活性

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人载脂蛋白A-Ⅰ半胱氨酸突变体的二级结构和脂质结合能力的比较

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中国生物化学与分子生物学报 2005年第5期21卷 603-609页

作者：祝学卫吴刚曾武威薛红陈保生中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体... 详细信息

为探讨人载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ,apolipoproteinA-Ⅰ)α螺旋不同位点的半胱氨酸突变后,对蛋白二级结构和脂质结合能力的影响,利用定点诱变技术构建apoA-Ⅰ的天然半胱氨酸突变体apoA-ⅠMilano(R173C),及其它α螺旋片段上的半胱氨酸突变体,分别为apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),和apoA-Ⅰ(L195C).观察比较各种野生型及突变apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量和二级结构稳定性及其脂质结合能力.结果显示,野生型apoA-Ⅰ,apoA-Ⅰ(S52C),apoA-Ⅰ(N74C),apoA-Ⅰ(L107C),apoA-Ⅰ(K129C),apoA-ⅠMilano和apoA-Ⅰ(L195C)的α螺旋含量分别为54±4%,49±4%,50±2%,51±6%,56±4%,52±3%,和54±1%,各种蛋白的α螺旋含量无显著性差异(P>0.05).野生型apoA-Ⅰ的变性标准自由能(ΔG0D)为10.5kJ/mol;apoA-Ⅰ(S52C)和apoA-ⅠMilano的ΔG0D比野生型低2.1kJ/mol;而apoA-Ⅰ(K129C)的ΔG0D比野生型apoA-Ⅰ高1.6kJ/mol.与野生型apoA-Ⅰ相比,apoA-Ⅰ(K129C)和apoA-Ⅰ(L195C)两个突变体与脂质结合能力明显下降(P<0.05),而其它半胱氨酸突变体(包括apoA-ⅠMilano)在脂质结合动力学方面与野生型apoA-Ⅰ无明显差异.以上结果提示,不同位点发生的半胱氨酸突变对apoA-Ⅰ单体蛋白的α螺旋含量无明显影响,但对蛋白的二级结构稳定性和脂质结合能力影响不尽相同.

关键词：人载脂蛋白A—Ⅰ 半胱氨酸突变体 α螺旋含量二级结构稳定性脂质结合能力

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一个在小鼠精子发生后期特异表达基因(SRG-L)的克隆及分析

一个在小鼠精子发生后期特异表达基因(SRG-L)的克隆及分析

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中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会

作者：马全红郭睿王海坤王会珍葛晔华马静陈咏梅韩代书中国协和医科大学基础医学院中国协和医科大学基础医学院中国协和医科大学基础医学院中国协和医科大学基础医学院中国协和医科大学基础医学院中国协和医科大学基础医学院中国协和医科大学基础医学院中国协和医科大学基础医学院

哺乳动物精子发生是一个特殊的细胞分化过程,在这一过程中发生了许多特殊的事件,受多种因素的严格调控,包括染色体结构的变化及一系列特定基因的程序性表达。我们在对小鼠精子发生过程中的基因转录和调控机制研究中,发现了一个在精子发... 详细信息

哺乳动物精子发生是一个特殊的细胞分化过程,在这一过程中发生了许多特殊的事件,受多种因素的严格调控,包括染色体结构的变化及一系列特定基因的程序性表达。我们在对小鼠精子发生过程中的基因转录和调控机制研究中,发现了一个在精子发生后期明显高表达的新基因SRG-L,并克隆出该基因的全长cDNA序列。cDNA全长为2843 bp,包含一个2625 bp的开放读码框,Westem Blot显示该基因编码一个874 aa,预计分子量104 kD的蛋白。组织特异性表达特征分析显示SRG-L在睾丸和脾脏中表达水平较高,精子发生阶段特异性的表达分析表明,其mRNA及蛋白质均在粗线期的精母细胞开始表达,在圆形精子细胞及变态期的精子细胞中表达水平升高,而在完整的精子中消失。 SRG-L基因位于小鼠第八号染色体长臂33．1位点,由18个外显子和17个内含子组成。同源性分析表明该基因在哺乳动物中高度保守,且有两个序列保守区Transglutaminase-like homologues domain和 D-serine dehydratase domain,以及多个磷酸化位点。生物信息学分析在该蛋白中未发现跨膜区,免疫组化及细胞定位研究表明SRG-L产物分布在胞浆。这些结果表明,SRG-L能通过行使酶活性来调节精子发生,尤其是在减数分裂及精子细胞的形态变化中可能发挥特殊的作用,其确切功能值得深入研究。

关键词：精子发生 SRG-L 小鼠精子特异表达基因

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应用单核苷酸多态性技术筛查2型糖尿病易感基因

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中国医学科学院学报 2005年第3期27卷 274-279页

作者：李义吴国栋左瑾孟雁方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的利用单核苷酸多态性(SNP)标记熏在中国北方汉族2型糖尿病相关基因定位区域(1p36.33-p36.23、1q24.3-25.1及1q42.12-42.13)内寻找疾病易感基因位点以及与疾病相关的单倍型。方法通过公共SNP数据库和对样本库全基因测序寻找SNP位点的... 详细信息

目的利用单核苷酸多态性(SNP)标记熏在中国北方汉族2型糖尿病相关基因定位区域(1p36.33-p36.23、1q24.3-25.1及1q42.12-42.13)内寻找疾病易感基因位点以及与疾病相关的单倍型。方法通过公共SNP数据库和对样本库全基因测序寻找SNP位点的途径,在定位区域内选择了33个候选基因中的124个SNP位点,用测序法对236例北方汉族散发2型糖尿病患者及152例正常对照个体进行SNP基因分型及病例-对照关联分析,并对具显著性差异的SNP位点进行单倍型分析。结果124个SNP位点中有4个SNP位点的分布频率在病例组和正常对照组存在显著差异穴P<0.05雪,分别为sAC基因中的rs203849(P=0.005,OR=1.60)和rs203826(P=0.016,OR=1.60),PANK4基因中的rs7535528(P=0.028,OR=1.45)和CASP9基因中的rs884363(P=0.043,OR=1.37)。在这4个SNP位点构成的组合型中发现,有2种组合型的频率分布在病例组与对照组之间差异有显著性穴P<0.001雪。此外,对sAC基因的单倍型分析发现,有4种单倍型与疾病发生相关。结论sAC、PANK4和CASP9基因为中国北方汉族人群2型糖尿病候选易感基因,这3个基因可能在2型糖尿病易感性上有协同作用。

关键词： 2型糖尿病单核苷酸多态性单倍型易感基因

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靶向性抗肿瘤融合蛋白EGF-E4orf4的表达及其细胞毒性的初步分析

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癌症 2005年第1期24卷 33-39页

作者：卜鹏莉王东梅陈虹黄秉仁中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

背景与目的:人表皮生长因子(human epidermal growth factor,EGF)是受体起作用刺激细胞增殖和分化的重要生长因子。正常细胞的表面有,但很多肿瘤尤其是实体瘤细胞表面则有异常高水平的EGF受体的表毒早期区4第4编码蛋白,即腺病毒E4orf4蛋... 详细信息

背景与目的:人表皮生长因子(human epidermal growth factor,EGF)是受体起作用刺激细胞增殖和分化的重要生长因子。正常细胞的表面有,但很多肿瘤尤其是实体瘤细胞表面则有异常高水平的EGF受体的表毒早期区4第4编码蛋白,即腺病毒E4orf4蛋白(adenovirus early region ding frame 4 protein)可以特异地诱导肿瘤细胞发生不依赖p53表达的种新型的细胞毒因子。本研究旨在利用EGF的靶向性和E4orf4蛋白的,在分子水平设计合成一个融合蛋白。

关键词： EGF 融合蛋白酵母表达载体靶向性 MDA-MB-231 细胞毒性受体重叠PCR 毕赤酵母人表皮生长因子

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肌营养不良致病基因及发病机制

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中国医学科学院学报 2005年第3期27卷 394-400页

作者：张勇朱大海中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

肌营养不良(MD)是以进行性骨骼肌萎缩和无力为特征的遗传病,根据临床特征和遗传方式分为很多类型.随着家系连锁分析和定位候选策略在鉴定遗传病致病基因中的应用,现已陆续克隆了各种类型MD的致病基因.MD相关蛋白的功能研究增进了人们对M... 详细信息

肌营养不良(MD)是以进行性骨骼肌萎缩和无力为特征的遗传病,根据临床特征和遗传方式分为很多类型.随着家系连锁分析和定位候选策略在鉴定遗传病致病基因中的应用,现已陆续克隆了各种类型MD的致病基因.MD相关蛋白的功能研究增进了人们对MD病理发生机制的认识.本文总结了MD致病基因的克隆、功能研究及其在MD发病中的作用机理.

关键词：肌营养不良基因发病机理

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