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人类基因组研究的主题:基因组医学与公共卫生——2004年亚太人类基因组与遗传学大会简介

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中国医学科学院学报 2004年第6期26卷 709-714页

作者：方福德中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

概述两年一次的亚太地区人类基因组与遗传学大会于2004年11月17～20日在新加坡召开.来自亚太地区数十个国家千余名科学家与会,我国有数十人赴会,笔者也在其中.

关键词：人类基因组研究基因组医学公共卫生 2004年亚太人类基因组与遗传学大会

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用DDRT-PCR方法克隆小鼠精子发生早期相关基因的EST

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第1期35卷 92-96页

作者：俞作仁郭睿葛晔华关纪奎马静薛社普韩代书中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系中国医学科学院基础医学研究所、中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系北京100005

为了避免差异显示技术中的放射性污染 ,并用之于筛选、克隆精子发生早期的相关基因 ,分离纯化了小鼠的原始精原细胞及B型精原细胞 ,提取其总RNA ,逆转录获得cDNA ,以荧光差异显示方法筛选差异表达基因。利用斑点杂交技术对差异片段进行... 详细信息

为了避免差异显示技术中的放射性污染 ,并用之于筛选、克隆精子发生早期的相关基因 ,分离纯化了小鼠的原始精原细胞及B型精原细胞 ,提取其总RNA ,逆转录获得cDNA ,以荧光差异显示方法筛选差异表达基因。利用斑点杂交技术对差异片段进行快速鉴定以排除假阳性。选取 16条差异显著的片段做克隆测序 ,通过Gen Bank/Blast比较 ,有 7个片段属于新的EST ,且均表现为在B型精原细胞中表达强度高于原始精原细胞。提交Gen Bank获得注册号。从中选取较有意义的 3条基因片段通过半定量RT PCR方法进一步验证其表达特征。和传统的差异显示方法比较 ,文中所采用的mRNA差异显示技术可快速排除假阳性结果 ,避免同位素标记带来的放射性污染。结果表明所获得的 7个新EST均表现为B型精原细胞中高表达 ,这些表达升高的基因可能与其后精子发生过程中的一系列特殊现象 (如减数分裂、变态成形 )有关 ,为生精细胞的分化做物质上的准备。

关键词：荧光mRNA差异显示技术精子发生基因克隆斑点杂交

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脂筏的结构与功能

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生物化学与生物物理进展 2003年第1期30卷 54-59页

作者：陈岚许彩民袁建刚潘华珍中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

脂筏是膜脂双层内含有特殊脂质及蛋白质的微区 .小窝是脂筏的一种类型 ,由胆固醇、鞘脂及蛋白质组成 ,以小窝蛋白为标记蛋白 .脂筏的组分和结构特点有利于蛋白质之间相互作用和构象转化 ,可以参与信号转导和细胞蛋白质运转 .一些感染性... 详细信息

脂筏是膜脂双层内含有特殊脂质及蛋白质的微区 .小窝是脂筏的一种类型 ,由胆固醇、鞘脂及蛋白质组成 ,以小窝蛋白为标记蛋白 .脂筏的组分和结构特点有利于蛋白质之间相互作用和构象转化 ,可以参与信号转导和细胞蛋白质运转 .一些感染性疾病、心血管疾病、肿瘤、肌营养不良症及朊病毒病等可能与脂筏功能紊乱有着密切的关系 .

关键词：膜结构脂筏结构功能小窝蛋白信号转导糖肌醇磷脂-锚固蛋白膜脂双层

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茶儿茶素抗大鼠脑缺血再灌注损伤与对脑细胞内Ca^(2+)的作用

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中国药学杂志 2003年第12期38卷 917-919页

作者：方芳崔志清韩永晶中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所北京100050 天津医科大学基础医学院药理教研室天津300070

目的　本研究观察茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑细胞内钙离子浓度和海马组织细胞的作用 ,进一步阐明其对缺血再灌注损伤的保护机制。方法　采用钳夹双侧颈总动脉和迷走神经缺血 6 0min再灌注 30min的动物模型 ,荧光分光光度法测定脑细... 详细信息

目的　本研究观察茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑细胞内钙离子浓度和海马组织细胞的作用 ,进一步阐明其对缺血再灌注损伤的保护机制。方法　采用钳夹双侧颈总动脉和迷走神经缺血 6 0min再灌注 30min的动物模型 ,荧光分光光度法测定脑细胞内钙离子浓度并观察神经细胞损伤程度。结果　模型组脑细胞内钙离子浓度显著高于正常组 (P <0 .0 1) ,海马组织呈明显的损伤 ,茶儿茶素 (5 0mg·kg-1,ip ,qd× 7)组显著降低脑缺血再灌注后脑细胞内钙离子浓度 ,损伤程度也较模型组轻。结论　茶儿茶素可能通过降低脑细胞内钙离子浓度 ,保护脑组织对抗缺血再灌注损伤。

关键词：茶儿茶素脑缺血再灌注损伤脑细胞 Ca^2+ 海马组织

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17β-雌二醇长时程作用促进成骨细胞HOS TE85^(45)Ca摄取及间质矿化

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药学学报 2003年第3期38卷 181-184页

作者：孙兰岳赟杨京刘景生中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的　研究 17β 雌二醇 (17β estradiol,E2 )对HOSTE85细胞骨形成的长时程效应。方法　3H 胸腺嘧啶参入法 (3H TdR)测细胞增殖 ;4 5Ca沉积法测细胞钙摄取 ;茜素红染色法测间质矿化。结果　E2 (0 1～ 10nmol·L- 1 )作用14d剂量... 详细信息

目的　研究 17β 雌二醇 (17β estradiol,E2 )对HOSTE85细胞骨形成的长时程效应。方法　3H 胸腺嘧啶参入法 (3H TdR)测细胞增殖 ;4 5Ca沉积法测细胞钙摄取 ;茜素红染色法测间质矿化。结果　E2 (0 1～ 10nmol·L- 1 )作用14d剂量依赖地刺激细胞3H TdR参入、增加4 5Ca摄取并增加茜素红染色面积。ICI1 82 ,780 (1 0nmol·L- 1 )能部分抑制E2作用 ,使其3H TdR参入分别减少了 36 5 6 % ,19 6 %和 15 4 % ,4 5Ca的摄入则分别减少了 2 2 2 7% ,37 2 8%和 4 0 1% ,茜素红染色面积减少。结论　E2 通过增加细胞数量。

关键词： 17β-雌二醇成骨细胞 ^3H-胸腺嘧啶参入法钙摄取矿化骨样组织

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D构象丝氨酸在中枢神经系统中的功能研究进展

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生物化学与生物物理进展 2003年第6期30卷 852-854页

作者：阳洪波袁建刚彭小忠中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细... 详细信息

哺乳动物中枢神经系统中 D 构象丝氨酸的区域性高浓度分布与N 甲基 D 天冬氨酸 (NMDA)受体相一致 .它主要由丝氨酸消旋酶将 L 丝氨酸直接消旋而来 ,也可能通过肠道菌群产生后吸收至体内 ,最终被 D 构象氨基酸氧化酶氧化 .这种从胶质细胞而非神经元来源的“异常”构象氨基酸作为一种新型神经递质 ,不仅更新了传统“神经递质”的定义。

关键词： D构象丝氨酸丝氨酸消旋酶 NMDA受体中枢神经系统功能

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高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞NF-κB的激活和血小板源生长因子B链的表达

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中华病理学杂志 2003年第4期32卷 354-359页

作者：周礼董继红于淼尹洪超佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导... 详细信息

目的　验证体外培养的内皮细胞经轻微修饰低密度脂蛋白 (mm LDL)刺激后激活细胞核因子κB(NF κB)的现象可否同样在高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞内出现并促进血小板源生长因子B链 (PDGF B)的表达 ,以及年龄对NF κB PDGF B信号传导通路的影响。方法　胃饲高胆固醇乳剂建立高胆固醇血症大鼠模型 ,免疫组织化学染色法 [链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶 (SP)法 ]明确主动脉内皮细胞NF κB激活后发生核转位的情况 ;应用原位杂交技术观察内皮细胞PDGF BmRNA的表达 ,同时应用免疫组织化学染色法 (SP法 )观察内皮细胞合成PDGF B链的情况。结果　与对照组相比 ,胃饲高胆固醇乳剂 6周后 ,2个月龄大鼠出现高胆固醇血症 ,主动脉内皮细胞NF κB核转位的比例明显增加 ,PDGF BmRNA的表达也增多。 10个月龄对照组Wistar大鼠的主动脉内皮细胞几乎不表达PDGF BmRNA ,摄入高胆固醇乳剂 16周后 ,内皮细胞表达PDGF BmRNA明显增多。较之摄入胆固醇同时期的 2个月龄大鼠 ,NF κB的核转位及内皮细胞PDGF B链的合成均增多(0 4 6 1± 0 0 75比 0 35 0± 0 0 94 ;0 2 30± 0 0 4 0比 0 185± 0 0 37) ,其差异有显著性意义 (P <0 0 5 ;P <0 0 0 1)。结论　高胆固醇血症能激活大鼠主动脉内皮细胞的NF κB 。

关键词：高胆固醇血症大鼠主动脉内皮细胞血小板源生长因子B链基因表达细胞核因子KB

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胃动素对Cajal间质细胞引起的大鼠胃平滑肌收缩的作用

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中华医学杂志 2003年第16期83卷 1422-1427页

作者：周吕王礼建袁勃王玲中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理学系北京100005

目的　观察Cajal间质细胞 (ICC)在胃平滑肌收缩的关键作用 ,以及胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩的影响。方法　 (1)采用大鼠胃体上 1/3起搏区及胃窦环行肌条在恒温灌流Kreb液中 ,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动。 ... 详细信息

目的　观察Cajal间质细胞 (ICC)在胃平滑肌收缩的关键作用 ,以及胃动素对ICC引起胃平滑肌细胞收缩的影响。方法　 (1)采用大鼠胃体上 1/3起搏区及胃窦环行肌条在恒温灌流Kreb液中 ,通过张力换能器输入生理记录仪记录胃肌条的机械运动。 (2 )用美蓝 +光照选择性损伤ICC对胃平滑肌收缩的影响。 (3)损伤ICC后胃动素对胃肌收缩的影响。结果　 (1)带有ICC的胃体起搏区和胃窦肌条记录到稳定的收缩活动 ,胃窦收缩频率和振幅较胃体起搏区高。 (2 )损伤胃环肌层ICC后 ,导致胃体起搏区和胃窦平滑肌收缩频率与振幅下降 80 %～ 90 % ,运动几乎消失。 (3)胃动素 0 0 3～ 0 2 5 μg/ml明显增加胃体起搏区和胃窦的收缩频率和振幅 ,呈剂量依赖性增加。损伤ICC后几乎完全取消胃动素对胃肌的收缩作用。抗胃动素血清和阿托品可阻断胃动素的作用。结论　ICC是胃平滑肌运动的起搏细胞。胃动素通过ICC对胃肌收缩进行调节。

关键词：胃动素 Cajal间质细胞大鼠胃平滑肌收缩作用

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一种对阿尔茨海默病模型小鼠认知和记忆功能具有明显改善作用的中药方剂

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中国中药杂志 2003年第8期28卷 751-754页

作者：孙华胡愉张建民栗世铀何维中国医学科学院协和医科大学协和医院中医科北京100730 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的 :探索对阿尔茨海默病 (AD)病人认知和记忆能力具有明显改善作用的中药方剂。方法 :通过Balb/c小鼠侧脑室微量注射聚集态 β 淀粉样多肽 (β AP2 5 35) ,建立模拟AD的小鼠动物模型 ,并通过行为学实验和脑组织组织化学检测 ,研究了... 详细信息

目的 :探索对阿尔茨海默病 (AD)病人认知和记忆能力具有明显改善作用的中药方剂。方法 :通过Balb/c小鼠侧脑室微量注射聚集态 β 淀粉样多肽 (β AP2 5 35) ,建立模拟AD的小鼠动物模型 ,并通过行为学实验和脑组织组织化学检测 ,研究了中医经典药方柴胡加龙骨牡蛎汤、当归芍药散和作者自己研制的两种中药复方CHPI和CHPⅡ对该小鼠模型认知和记忆能力的疗效作用。同时 ,以西药脑复康做对照。结果 :CHPⅡ对AD模型小鼠的认知和记忆能力具有明显的改善。结论

关键词：阿尔茨海默病中医药疗法认知功能记忆功能柴胡加龙骨牡蛎汤当归芍药散

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体外肿瘤细胞对血管内皮细胞影响的观察

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中华病理学杂志 2003年第4期32卷 360-363页

作者：刘玉琴顾蓓王春景张宏高进任民峰中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学系北京100005

目的　观察肿瘤细胞与血管内皮细胞的关系及其在体外直接接触培养时内皮细胞的形态变化。方法　免疫磁珠阳性选择法分离培养大鼠肺血管内皮细胞 ,生长至汇合状态时加入不同的肿瘤细胞 (小鼠树突状细胞肉瘤细胞DCS、人胃癌细胞MGC 80 3... 详细信息

目的　观察肿瘤细胞与血管内皮细胞的关系及其在体外直接接触培养时内皮细胞的形态变化。方法　免疫磁珠阳性选择法分离培养大鼠肺血管内皮细胞 ,生长至汇合状态时加入不同的肿瘤细胞 (小鼠树突状细胞肉瘤细胞DCS、人胃癌细胞MGC 80 3、小鼠肺腺癌细胞LA795 )共培养 ,光镜、扫描电镜、免疫组织化学、transwell法及荧光分子传递等方法观察内皮细胞的形态、功能的变化。结果　培养的内皮细胞部分呈卵石样 ,部分呈长梭形。长至汇合状态的内皮细胞再加入肿瘤细胞后 ,内皮细胞形态发生明显变化 ,汇合细胞中间出现许多圆形管腔样结构 ;肿瘤细胞往往分布在新形成的腔隙内 ;肿瘤细胞条件培养基可支持内皮细胞的生长 ,促进内皮细胞的运动 ;lucifferyellow分子可直接从肿瘤细胞传递到内皮细胞。结论　肿瘤细胞与内皮细胞可进行通讯。

关键词：体外肿瘤细胞血管内皮细胞功能表型细胞结构细胞运动

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