检索结果-内蒙古大学图书馆

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2003年第2期35卷 117-121页

作者：高俊刘德培黄粤董文吉吴敏冯东晓梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所、医学分子生物学国家重点实验室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所、医学分子生物学国家重点实验室

清道夫受体能结合带负电荷的大分子 ,特别是经过修饰的脂蛋白颗粒 ,与血浆脂质代谢有密切关系。为研究A类清道夫受体的过量表达对血脂代谢的影响 ,首先从小鼠巨噬细胞中经RT PCR获得鼠清道夫受体A类I型 (MSR AI)的表达序列 ,插入到含人... 详细信息

清道夫受体能结合带负电荷的大分子 ,特别是经过修饰的脂蛋白颗粒 ,与血浆脂质代谢有密切关系。为研究A类清道夫受体的过量表达对血脂代谢的影响 ,首先从小鼠巨噬细胞中经RT PCR获得鼠清道夫受体A类I型 (MSR AI)的表达序列 ,插入到含人清道夫受体基因增强子和金属硫蛋白启动子的真核表达载体中。选择Km×ICR杂交一代为实验小鼠 ,显微注射、移卵后 ,获得转基因小鼠 ,经PCR、Southern杂交鉴定 ,获得完整整合外源DNA序列的首建鼠 4只 ,拷贝数分别为 15、6、2和 4。Northern杂交实验显示A类清道夫受体基因主要在脾脏中表达 ;在金属锌诱导下 ,MSR AI表达有所增高 ,同时血清中甘油三酯水平显著升高 ,胆固醇浓度下降。结果表明A类清道夫受体的过量表达能显著影响血脂水平 ,具体机制需进一步研究。

关键词：清道夫受体金属硫蛋白启动子转基因小鼠过量表达血脂

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鼠小肠上皮内淋巴细胞与脾脏T淋巴细胞的差异比较和功能初探

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中国免疫学杂志 2003年第3期19卷 162-165页

作者：左芩马驰陈娟何维中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的 :比较小鼠小肠上皮内淋巴细胞 (intestineintraepitheliallymphocytes ,iIEL)与脾脏T淋巴细胞的差异并寻找刺激iIEL活化的特异性抗原。方法 :分别提取新鲜分离的iIEL和脾脏T细胞的细胞膜蛋白 ,通过SDS PAGE和银染法比较二者的区别 ... 详细信息

目的 :比较小鼠小肠上皮内淋巴细胞 (intestineintraepitheliallymphocytes ,iIEL)与脾脏T淋巴细胞的差异并寻找刺激iIEL活化的特异性抗原。方法 :分别提取新鲜分离的iIEL和脾脏T细胞的细胞膜蛋白 ,通过SDS PAGE和银染法比较二者的区别 ;用蛋白定量和磷定量方法 ,比较两种细胞的膜蛋白与膜磷脂比。提取Daudi细胞和小鼠小肠上皮细胞的细胞膜脂 ,将其制成脂质体 ,采用H3 TdR掺入法检测其刺激iIEL和脾脏T细胞增殖的能力。结果 :两种细胞的膜蛋白存在着质和量的差异。iIEL膜蛋白与膜磷脂之比高于脾脏T细胞。脾脏T细胞对Daudi细胞膜脂和小肠上皮细胞膜脂的刺激无反应 ,甚至有负反应 ;而iIEL对小肠上皮细胞膜脂刺激的增殖反应强于对Daudi细胞膜脂的。结论 :iIEL与脾脏T淋巴细胞在形态、表型、起源、发育以及功能上的差异存在相应的分子基础。小肠上皮细胞膜脂可能作为一种特异性抗原参与iIEL的活化。

关键词：小肠上皮内淋巴细胞 T淋巴细胞

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病毒载体与造血干细胞基因治疗

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Acta Genetica Sinica 2003年第4期30卷 383-388页

作者：董文吉祖振响刘德培梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干... 详细信息

多种获得性和遗传性疾病累及造血细胞。造血干细胞是人类基因治疗的重要靶细胞。成功的造血干细胞基因治疗不仅需要高效基因转移 ,还需要治疗基因的长期、高水平表达。反转录病毒载体是造血干细胞基因治疗的常用载体 ,结合优化的造血干细胞转导条件 ,其介导的腺苷脱氨酶缺陷引起的严重联合免疫缺陷和X染色体连锁的严重联合免疫缺陷的基因治疗已经获得初步成功 ;其他整合型病毒载体如慢病毒和腺相关病毒载体 ,也在临床前造血干细胞基因治疗研究中得到广泛应用。从病毒载体。

关键词：造血干细胞反转录病毒载体慢病毒载体腺相关病毒载体基因治疗

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一种简便的染色质免疫沉淀法的建立

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生物化学与生物物理进展 2003年第4期30卷 634-638页

作者：傅湘辉刘德培辛立郝德龙董文吉黄粤梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的... 详细信息

染色质结构和基因表达调节是当前国际前沿研究的热点 .染色质免疫沉淀法是研究染色质结构的首选方法 ,它不仅可用来研究体内反式因子与DNA的相互作用 ,也可以用来研究组蛋白修饰与基因表达的关系 .综合国外相关文献 ,建立了一种简便的染色质免疫沉淀法 ,并通过对诱导前后的MEL细胞中 β 珠蛋白基因簇组蛋白H3乙酰化的研究 ,证实了其可操作性 .结果表明 :高敏位点HS2和活跃基因 βmaj的启动子区域存在较高的组蛋白乙酰化水平 ,且诱导前后变化显著 ,而不活跃基因Ey的启动子区域则几乎检测不到组蛋白的乙酰化 ,且诱导前后无明显变化 .

关键词：染色质免疫沉淀法染色质 MEL细胞组蛋白乙酰化基因表达调节

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一种新的红细胞源降压因子对大鼠心脏的保护作用

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科学通报 2003年第23期48卷 2461-2465页

作者：王玉堂文允镒石磊马宁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理系北京100005

研究一种新的红细胞源降压因子(EDDF)对自发性高血压大鼠(SHR)、钙超载大鼠(CaO)及Wistar大鼠心功能的影响及其作用机制.用八导生理记录仪观察EDDF对SHR平均动脉压(MAP)、心率(HR)及左心室收缩和舒张最大变化速率(LVdp/dtmax)的影响;用... 详细信息

研究一种新的红细胞源降压因子(EDDF)对自发性高血压大鼠(SHR)、钙超载大鼠(CaO)及Wistar大鼠心功能的影响及其作用机制.用八导生理记录仪观察EDDF对SHR平均动脉压(MAP)、心率(HR)及左心室收缩和舒张最大变化速率(LVdp/dtmax)的影响;用无机磷法及^(45) Ca^(2+)放射性同位素法分别测定 EDDF对CaO大鼠心肌肌浆网(SR)Ca^(2+)-ATPase活性及对 CaO大鼠心肌 SR Ca^(2+)转运的影响;用Western blot方法检测 EDDF对 SHR及 CaO大鼠心肌组织细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinase,ERK)磷酸化水平的影响;用透射电子显微镜观察 EDDF对 SHR心肌细胞超微结构的影响.结果表明,EDDF呈剂量依赖性地明显降低MAP,HR和 LVdp/dtmax(P<0.05).其作用机制可能与激活心肌SR Ca^(2+)-ATPase活性,提高SR对Ca^(2+)的摄取与释放(P<0.05),降低心肌组织ERK-1/2磷酸化水平(P<0.01)和改善心肌细胞超微结构的异常密切相关.EDDF可明显保护心脏的结构和功能,其作用机制可能与改善心肌Ca^(2+)转运,抑制 MAPK信号转导通路密切相关.

关键词：红细胞源降压因子心脏钙超载 ERK-1/2 磷酸化钙离子转运高血压内源性血压调节剂

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吸烟与帕金森病关系的病例对照研究

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中华流行病学杂志 2003年第7期24卷 604-607页

作者：董建群张清华蒋知新衣志勇喻陆李祯华张艳琴方明俊张振馨张孔来中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005 解放军第三〇五医院解放军总参谋部警卫局保健处中国协和医科大学北京协和医院神经科

目的　探讨吸烟与帕金森病 (PD)的关系。方法　采用以人群为基础的病例对照研究 ,调查在北京地区 55岁以上PD患病率调查中确诊及 2 0 0 2年 8月至 2 0 0 3年 1月在北京协和医院帕金森研究中心诊治的病例共 1 1 4例 ;以及性别、民族及居... 详细信息

目的　探讨吸烟与帕金森病 (PD)的关系。方法　采用以人群为基础的病例对照研究 ,调查在北京地区 55岁以上PD患病率调查中确诊及 2 0 0 2年 8月至 2 0 0 3年 1月在北京协和医院帕金森研究中心诊治的病例共 1 1 4例 ;以及性别、民族及居住地与其匹配的对照 2 0 5名。结果　吸烟与PD呈显著负相关联。以非吸烟者为对照 ,曾经吸烟者、现在吸烟者和过去吸烟者患PD的危险性低于对照 ,OR值分别为 0 .49(95 %CI:0 .30～ 0 .79)、0 .44(95 %CI :0 .2 3～ 0 .86)和 0 .54(95 %CI:0 .30～0 .96)。此外 ,对吸烟者分别按吸烟年限≥ 2 0年和 <2 0年、戒烟年限≥ 2 0年和 <2 0年以及吸烟量分层和logistic回归分析 ,其负相关联依然存在并具有剂量反应关系的趋势 (P <0 .0 5)。结论　吸烟与PD存在负相关联。

关键词：吸烟帕金森病病例对照研究危险因素剂量反应关系

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CD3ε和5-氟尿嘧啶在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P53的表达

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中华医学杂志 2003年第22期83卷 1962-1967页

作者：程宏刘彦信张锦春刘士廉郑德先中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM... 详细信息

目的　研究CD3ε分子与化疗药物 5 氟尿嘧啶 (5 FU)在T淋巴细胞凋亡中的协同作用及P5 3的表达 ,为探索T淋巴细胞凋亡的分子机制打下基础 ,为相关肿瘤的治疗提供新的实验依据。方法　培养人T淋巴白血病细胞株JK ,转染了突变的CD3εITAM的TJK及T3JK细胞株。用CD3ε特异的单克隆抗体 (2 0 0 μg/ml)和 /或 5 FU(2 5 μg/ml)刺激不同的T淋巴细胞诱导细胞凋亡 ,用噻唑蓝比色法检测细胞存活率 ,并计算细胞死亡率 ;用瞬时转染野生型或突变型P5 3表达质粒的方法和Western印迹检测P5 3蛋白质的表达 ,分析其在T淋巴细胞凋亡中的作用。结果　在CD3ε和 5 FU分别诱导T淋巴细胞凋亡过程中 ,均伴随着P5 3蛋白质表达增加 ;两者联合使用使T淋巴细胞凋亡和P5 3蛋白质表达显著增加 ;P5 3过表达可明显增加T淋巴细胞对 5 FU的敏感性。结论　抗CD3ε抗体和 5 FU联合作用可显著提高P5 3蛋白质表达 ,两者在T淋巴细胞凋亡中具有协同效应。

关键词： CD3ε 5-氟尿嘧啶 T淋巴细胞凋亡协同作用 P53 表达单克隆抗体

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红细胞肿瘤疫苗的制备及对肿瘤复发转移作用的观察

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中国肿瘤临床 2003年第1期30卷 49-52页

作者：刘玉琴顾蓓赵雪梅高进中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京市100005

目的:制备一种新型肿瘤疫苗,观察其对肿瘤复发转移的作用。方法:用PEG将血红细胞(RBC)与小鼠子宫颈癌(U14)细胞融合,制备瘤苗。MTT法检测新型瘤苗诱发的CTL活性。用复发瘤抑制率及肿瘤肺转移抑制率来评价瘤苗的疗效。结果:融合细胞携带... 详细信息

目的:制备一种新型肿瘤疫苗,观察其对肿瘤复发转移的作用。方法:用PEG将血红细胞(RBC)与小鼠子宫颈癌(U14)细胞融合,制备瘤苗。MTT法检测新型瘤苗诱发的CTL活性。用复发瘤抑制率及肿瘤肺转移抑制率来评价瘤苗的疗效。结果:融合细胞携带了RBC的血型抗原。在小鼠体内瘤苗可激发特异的CTL活性,对U14细胞的杀伤率为37.8%,而对照小鼠前胃癌(MFC)细胞的杀伤率为22.0%。瘤苗治疗组复发瘤抑制率为39.9%,肺转移的抑制率为69.9%。结论:RBC与肿瘤细胞融合制备的细胞可作为瘤苗。该瘤苗可有效抑制肿瘤复发和转移。

关键词：制备红细胞肿瘤疫苗肿瘤疫苗细胞融合复发转移

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重组肌肉抑制素功能分析及其对鸡肌肉发育的抑制作用

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生物化学与生物物理学报 2003年第11期35卷 1016-1022页

作者：杨威王琨陈岩张勇黄波朱大海哈尔滨工业大学分子与细胞发育生物学实验室中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室哈尔滨150001 北京100005

肌肉抑制素 (myostatin)为TGF β超家族成员 ,具有典型的TGF β家族成员特有的分子结构与功能。为了深入阐明肌肉抑制素的作用机制 ,研究了重组肌肉抑制素蛋白对鸡胚成肌细胞和小鼠C2 C1 2 成肌细胞增殖与分化的作用 ,同时制备了肌肉抑... 详细信息

肌肉抑制素 (myostatin)为TGF β超家族成员 ,具有典型的TGF β家族成员特有的分子结构与功能。为了深入阐明肌肉抑制素的作用机制 ,研究了重组肌肉抑制素蛋白对鸡胚成肌细胞和小鼠C2 C1 2 成肌细胞增殖与分化的作用 ,同时制备了肌肉抑制素特异性抗体。实验结果表明 ,重组肌肉抑制素对于成肌细胞的增殖过程具有极强的抑制作用 ,主要表现为抑制细胞周期由G1 期向S期的过渡 ,细胞生长速度显著变慢 ;同时重组肌肉抑制素也抑制成肌细胞分化为多核的融合肌管细胞 ,抑制肌肉分化标志myogenin和MHC的表达。由重组蛋白质制备的抗体能够特异性地识别人、小鼠、大鼠和鸡肌肉组织的内源肌肉抑制素。此外 ,通过免疫荧光技术还证实 ,肌肉抑制素主要定位于胞液中

关键词：肌肉抑制素细胞增殖分化抗体制备细胞定位

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奇静脉逆行灌注在主动脉手术中对脊髓保护的解剖学研究

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中国临床解剖学杂志 2003年第1期21卷 49-52页

作者：张平王乃利寇印华张晓东中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院解剖学教研室北京100005

目的 :为主动脉手术中脊髓保护提供形态基础和术式设计。方法 :解剖观察了 3 1例成人标本的奇静脉系、椎静脉丛 ,以及脊髓静脉回流途径。结果 :观测奇静脉系及相关静脉 ,其直径为 ( x±s) :奇静脉为 (9.2± 1.9)mm ,半奇静脉为 ... 详细信息

目的 :为主动脉手术中脊髓保护提供形态基础和术式设计。方法 :解剖观察了 3 1例成人标本的奇静脉系、椎静脉丛 ,以及脊髓静脉回流途径。结果 :观测奇静脉系及相关静脉 ,其直径为 ( x±s) :奇静脉为 (9.2± 1.9)mm ,半奇静脉为 (5 .5± 1.2 )mm ,副半奇静脉为 (3 .8± 0 .9)mm ,左最上肋间静脉为 (2 .0±0 .4)mm ,右最上肋间静脉为 (1.9± 0 .4)mm ,左腰升静脉为 (2 .3± 0 .5 )mm ,右腰升静脉为 (2 .2± 0 .6)mm。根据奇静脉属支的配布和肋间静脉汇入形式 ,将奇静脉系分为 4种类型。奇静脉及其属支中存在静脉瓣 ,有个体差异。脊髓静脉密集 ,与椎内静脉丛有丰富的网络连接 ,并通过神经根静脉与椎外静脉丛、奇静脉系相交通。结论 :在主动脉手术中应用奇静脉逆行灌注脊髓保护 ,是一种行之有效的新术式。

关键词：解剖学研究主动脉手术脊髓保护逆行灌注奇静脉

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