检索结果-内蒙古大学图书馆

中华皮肤科杂志 2003年第11期36卷 650-652页

作者：左亚刚王家璧许雪梅朱明昭刘方司静懿宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院皮肤科北京100730 中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室

目的了解北京地区人乳头瘤病毒(HPV)16型E6E7结构特点,为研制HPV16疫苗奠定基础。方法从HPV感染组织中提取DNA,PCR鉴别其型别,从单独HPV16感染的标本中分离HPV16E6E7基因,克隆入载体pGEM-3ZF,进行双向测序,与德国标准株进行比较。结果... 详细信息

目的了解北京地区人乳头瘤病毒(HPV)16型E6E7结构特点,为研制HPV16疫苗奠定基础。方法从HPV感染组织中提取DNA,PCR鉴别其型别,从单独HPV16感染的标本中分离HPV16E6E7基因,克隆入载体pGEM-3ZF,进行双向测序,与德国标准株进行比较。结果构建了北京地区HPV16E6E7的重组质粒。测序结果表明该基因全长为776bp,与已发表的德国标准株长度相等,3处核苷酸发生变异,同源性99.7%。分别位于第60、96和565nt(相当于HPV16全长序列中第142、178和647nt),2处位于E6区,1处位于E7,其对应氨基酸分别为第20、32和188个氨基酸,分别由Pro(CCA)、Asp(GAT)和Asn(AAT)变异为Pro(CCG)、Glu(GAG)和Ser(AGT)。结论北京地区HPV16E6E7基因结构与德国标准株存在差异。

关键词：北京人乳头瘤病毒16型 E6E7基因聚合酶链反应基因变异

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X-连锁肾上腺脑白质营养不良患者成纤维细胞系MnSOD基因表达增强

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基础医学与临床 2003年第2期23卷 146-149页

作者：胡兰 Kirby DSmith 黄尚志中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所 JohnsHopkins大学医学院

探讨X 连锁肾上腺脑白质营养不良 (X linkedAdrenoleukodystrophy,X ALD)个体的MnSOD表达的变化与发病机理的相关性。应用免疫组化、免疫荧光、定量PCR法 ,观察锰过氧化物岐化酶 (Mnactivatedsuperoxidedismutase ,MnSOD)表达的差异。... 详细信息

探讨X 连锁肾上腺脑白质营养不良 (X linkedAdrenoleukodystrophy,X ALD)个体的MnSOD表达的变化与发病机理的相关性。应用免疫组化、免疫荧光、定量PCR法 ,观察锰过氧化物岐化酶 (Mnactivatedsuperoxidedismutase ,MnSOD)表达的差异。免疫组化的结果显示X ALD小鼠脑组织中MnSOD的含量高于野生型小鼠 ;免疫荧光显示CCER(X ALD中最严重的一种 )患者成纤维细胞中的MnSOD含量高于健康人 ;定量PCR显示CCER患者成纤维细胞中MnSODmRNA量高于健康人 ,并且MnSOD能被 4PBA诱导。推测氧化应激升高可能是造成X ALD患者神经系统退行性改变的原因之一。而MnSOD增加则有助于细胞清除氧自由基 ,缓解氧化应激 ,为应用 4PBA治疗X

关键词： X-连锁肾上腺脑白质营养不良成纤维细胞 MnSOD 基因表达发病机理隐性遗传代谢病

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对我国社区卫生服务进展和面临形势的思考

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中国公共卫生 2003年第6期19卷 745-746页

作者：梁万年中国协和医科大学基础医学院中国医学科学院基础医学研究所北京100005

自1997年1月提出改革城市卫生服务体系,积极发展社区卫生服务以来,社区卫生服务在全国各地有了长足的发展,社区卫生服务的重要性和意义逐渐为各级政府和群众所理解.本文就我国社区卫生服务的有关进展情况以及面临的有关形势等,提出一些... 详细信息

自1997年1月<中共中央、国务院关于卫生改革与发展的决定>提出改革城市卫生服务体系,积极发展社区卫生服务以来,社区卫生服务在全国各地有了长足的发展,社区卫生服务的重要性和意义逐渐为各级政府和群众所理解.本文就我国社区卫生服务的有关进展情况以及面临的有关形势等,提出一些看法和意见,供参考.

关键词：社区卫生服务中国卫生政策试点工作社会氛围

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鼻咽癌患者外周血γδT细胞的体外扩增及对鼻咽癌细胞的体外杀伤活性

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临床耳鼻咽喉科杂志 2003年第3期17卷 155-158页

作者：王小路何维张连山张素梅何洪彬姜鸿中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院耳鼻咽喉科中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所免疫研究室

目的 :通过体外扩增鼻咽癌 (NPC)患者外周血γδT细胞 ,研究对NPC细胞体外细胞毒作用 ,以探讨γδT细胞在NPC免疫机制中的作用。方法 :用抗体固相法体外扩增 7例NPC患者 (NPC组 )及 6例健康者(对照组 )的外周血γδT细胞 ,以流式细胞仪... 详细信息

目的 :通过体外扩增鼻咽癌 (NPC)患者外周血γδT细胞 ,研究对NPC细胞体外细胞毒作用 ,以探讨γδT细胞在NPC免疫机制中的作用。方法 :用抗体固相法体外扩增 7例NPC患者 (NPC组 )及 6例健康者(对照组 )的外周血γδT细胞 ,以流式细胞仪检测γδT细胞亚型 ,用MTT法观察不同来源的γδT细胞在不同效靶比条件下 ,对Daudi、CNE1和CNE2细胞的细胞毒作用。结果 :对照组与NPC组外周血γδT细胞经体外扩增 ,纯度可达到 82 %以上 ,其中 90 %为Vγ9/Vδ2亚型 ;γδT细胞对Daudi、CNE 1和CNE 2细胞显示出作用强度相同的细胞毒作用 (P >0 .0 5 )。随效靶比升高 ,γδT细胞对CNE 1和CNE 2的细胞毒作用明显增强 ,在相同效靶比时对Daudi细胞的细胞毒作用最强。结论

关键词：鼻咽肿瘤 γδT淋巴细胞细胞毒作用 T细胞扩增

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血管紧张素Ⅱ受体介导细胞凋亡及其功能的研究进展

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解剖学报 2003年第3期34卷 333-335页

作者：刘艳张世馥金叔敏程凯中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院细胞生物学系北京100005

肾素．血管紧张素系统(renin-angiotensin system， RAS)是机体调控内环境稳定的重要体液调节系统之一，它主要通过血管紧张素的作用而产生多种生物学效应。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，ANGⅡ)是肾素一血管紧张素系统的主要活性肽，愈... 详细信息

肾素．血管紧张素系统(renin-angiotensin system， RAS)是机体调控内环境稳定的重要体液调节系统之一，它主要通过血管紧张素的作用而产生多种生物学效应。血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ，ANGⅡ)是肾素一血管紧张素系统的主要活性肽，愈来愈多的证据表明，在一些以组织器官发生进行性纤维化为特征的慢性疾病，尤其是心血管，肾脏疾病的进展中起着重要作用~[1]。已知RAS的生物学效应均通过ANGⅡ与相应的受体作用而介导的。根据不同的药理和生化特性，ANGⅡ受体分为两个亚型ATl和AT2~([1,2])。血管内皮上的受体由循环ANGII激活，而心脏、血管壁、肾脏等血管中的受体则以自分泌或旁分泌形式生成的ANGⅡ激活。 ANGⅡ除了具有调节血管张力、血流及促进细胞生长、的作用之外。近几年研究表明，它还具有介导细胞凋亡用。

关键词：血管紧张素Ⅱ受体细胞凋亡细胞功能生物学特性肾脏细胞心血管细胞

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抗异质性胞核核糖核蛋白A2/RA33抗体酶联免疫吸附法的建立及临床应用

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中华检验医学杂志 2003年第7期26卷 428-430页

作者：杨玲于孟学林嘉友高杨尹宏恩中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院风湿科 100730 中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院基础医学研究所免疫室 100730

目的　探讨酶联免疫吸附法 (ELISA)检测抗异质性胞核核糖核蛋白A2 (hnRNPA2 ) /类风湿关节炎 (RA) 33抗体在不同风湿性疾病患者中的阳性率及对RA早期诊断的意义。方法　以纯化的重组蛋白hnRNPA2为抗原 ,用ELISA检测RA 179例、系统性红... 详细信息

目的　探讨酶联免疫吸附法 (ELISA)检测抗异质性胞核核糖核蛋白A2 (hnRNPA2 ) /类风湿关节炎 (RA) 33抗体在不同风湿性疾病患者中的阳性率及对RA早期诊断的意义。方法　以纯化的重组蛋白hnRNPA2为抗原 ,用ELISA检测RA 179例、系统性红斑狼疮 (SLE) 14 1例、其他弥漫性结缔组织病 (CTD) 97例、血清阴性脊柱关节病 (SPA) 30例、骨关节炎 (OA) 10例、关节痛 /关节炎5 9例、正常对照 4 0名 ,比较抗hnRNPA2 /RA33抗体在各组人群中的阳性率 ,并评价其与RA患者临床和实验室检查指标间的关系及早期诊断的价值。结果　抗hnRNPA2 /RA33抗体在RA患者中的敏感性为 36 9%、特异性为 87 1% ,在SLE、其他CTD、SPA和OA患者中阳性率分别为 19 2 %、7 2 %、6 8%和 0。抗hnRNPA2 /RA33抗体在早期RA患者中的阳性率为 4 3 3%。结论　以纯化的重组蛋白hnRNPA2为抗原的ELISA是检测抗hnRNPA2 /RA33抗体 ,早期诊断RA的可靠方法。

关键词：类风湿关节炎酶联免疫吸附法抗异质性胞核核糖核蛋白A2 33抗体临床应用

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多基因疾病相关基因定位的研究策略

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中国科学（C辑） 2003年第3期33卷 193-201页

作者：刘天承邱长春周文郁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

多基因疾病既是影响世界上多数人生命健康和生活质量的重要因素,也是长期困惑广大科研人员的难题之一。对多篇相关文献进行综合比较的结果说明:研究样本、遗传标记的选择和遗传统计方法是多基因疾病研究中必须优先考虑的三个方面,它直... 详细信息

多基因疾病既是影响世界上多数人生命健康和生活质量的重要因素,也是长期困惑广大科研人员的难题之一。对多篇相关文献进行综合比较的结果说明:研究样本、遗传标记的选择和遗传统计方法是多基因疾病研究中必须优先考虑的三个方面,它直接决定了实验设计的可能性和结果的合理性。其中,样本的选择尤为重要,不同群体的样本在多基因疾病相关基因定位的不同阶段所起的作用不同,有的适合于疾病相关基因初步定位,有的适合于精细定位和疾病的群体关联分析。遗传标记的选择和遗传统计方法是由实验目的、样本特点和资料的完整情况等决定的。对不同的统计结果应采用适当的标准,以排除假阳性。

关键词：多基因疾病基因定位研究策略样本选择遗传标记遗传统计方法群体关联分析

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实验性氟中毒骨组织中Ⅱ型胶原基因表达及结构的改变

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中华预防医学杂志 2003年第4期37卷 243-245,T002页

作者：刘秉慈许增禄缪庆徐园园徐茗钱晓菁尤宝荣袁伯华康宁中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所北京100050 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院

目的　观察过量氟对大鼠骨组织中Ⅱ型胶原基因表达的影响和对大鼠骨骼中胶原类型及胶原结构的作用。方法　制备Ⅱ型胶原cDNA探针 ,采用cDNA mRNA原位杂交技术 ,检测饮用过量氟水 (氟化钠 2 2 1mg/L)的大鼠骨组织中Ⅱ型胶原的改变。采用... 详细信息

目的　观察过量氟对大鼠骨组织中Ⅱ型胶原基因表达的影响和对大鼠骨骼中胶原类型及胶原结构的作用。方法　制备Ⅱ型胶原cDNA探针 ,采用cDNA mRNA原位杂交技术 ,检测饮用过量氟水 (氟化钠 2 2 1mg/L)的大鼠骨组织中Ⅱ型胶原的改变。采用苦味酸天狼星红染色偏振光法对骨组织中胶原类型及胶原纤维结构进行观察。结果　染氟后 ,股骨等骨组织出现成软骨细胞。cDNA mRNA原位杂交显示 ,软骨化的骨组织软骨陷窝的软骨胞质中可见Ⅱ型胶原基因表达。染氟0 5个月组肋软骨软骨细胞胶原mRNA水平最高 ,其灰度值和标准误分别为 0 0 86和 0 0 13,染氟 1个月及 2个月后逐渐减弱 ,其灰度值和标准误分别为 0 0 4 7、0 0 0 8和 0 0 39、0 0 0 7。苦味酸天狼星红染色偏振光法观察骨组织中出现多色性Ⅱ型胶原纤维 ,胶原纤维断裂、排列紊乱、含量下降。结论　过量氟可致骨组织中胶原类型和胶原结构的改变 ,导致Ⅱ型胶原在软骨化骨组织中的表达及在肋软骨组织中的表达增强。

关键词：实验性氟中毒骨组织 Ⅱ型胶原基因表达胶原纤维结构 cDNA-mRNA 原位杂交技术

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人乳头瘤病毒16型修饰后E6E7基因免疫原性增强

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基础医学与临床 2003年第3期23卷 269-273页

作者：许雪梅朱明昭张明策刘晓娟宋国兴中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物物理室北京100005

利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒 16型 (humanpapillomavirustype16 ,HPV16 )E6E7融合基因 (fmE6E7) ,研制治疗HPV16相关疾病的DNA疫苗。用PCR扩增fmE6E7基因后 ,插入真核表达质粒获得pVR10 12 fm... 详细信息

利用突变修饰后消除转化活性并保留抗原性的中国山东地方株人乳头瘤病毒 16型 (humanpapillomavirustype16 ,HPV16 )E6E7融合基因 (fmE6E7) ,研制治疗HPV16相关疾病的DNA疫苗。用PCR扩增fmE6E7基因后 ,插入真核表达质粒获得pVR10 12 fmE6E7,瞬时转染Cos 7细胞 ,免疫荧光法检测证实其表达后 ,在C5 7BL 6小鼠后腿肌肉进行裸DNA免疫 ,5 1Cr释放法体外分析免疫鼠的细胞毒性T淋巴细胞活性 (cytotoxicTlymphocyte,CTL) ,间接ELISA法检测免疫鼠血清中E7特异性抗体。研究表明修饰后的中国地方株E6E7融合基因可诱导机体产生特异的抗体反应和CTL反应 ,与单独野生型E7基因免疫相比 ,E6E7融和基因可更好的活化CTL反应。表明修饰后消除转化活性的中国地方株E6E7融合基因可作为HPV16治疗性DNA疫苗的靶基因。

关键词：人乳头瘤病毒16型基因修饰 E6E7基因免疫原性增强 DNA疫苗宫颈癌癌前病变

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一氧化氮合酶基因转染抑制缺氧大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的机制研究

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中华结核和呼吸杂志 2003年第6期26卷 358-361页

作者：曾琼冉丕鑫陈顺存刘景生广州医学院-广州呼吸疾病研究所 510120 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学院药理室北京100050

目的　研究诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因转染对缺氧条件下大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖的影响 ,探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子 p2 1、p2 7在细胞增殖过程中的调控作用。方法　经脂质体介导将iNOS重组逆转录病毒载体 (pLNC... 详细信息

目的　研究诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)基因转染对缺氧条件下大鼠肺动脉平滑肌细胞 (PASMCs)增殖的影响 ,探讨细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子 p2 1、p2 7在细胞增殖过程中的调控作用。方法　经脂质体介导将iNOS重组逆转录病毒载体 (pLNCX/iNOS)转染大鼠PASMCs,检测外源性iNOS表达及其生物学活性 ;氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷 (3 H TdR)掺入、流式细胞技术观察iNOS转染对缺氧条件下大鼠PASMCs增殖的影响 ;逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)和流式细胞技术检测p2 1、p2 7的变化。结果　转染后检测证实 ,外源性iNOS基因可有效转录、表达 ,具有生物学活性 ;iNOS转染显著抑制缺氧条件下大鼠PASMCs3 H TdR的掺入 ,缺氧组 (D组 )大鼠每分钟衰变数值为 (180 11± 2 5 2 1)次 /min ,缺氧 +DETANONOate组 (E组 ,0 5、1mmol/L)每分钟衰变数值分别为(15 36 4± 1382 )次 /min、(13712± 1782 )次 /min、低氧 +iNOS转染组 (G组 )大鼠每分钟衰变数值为(15 14 5± 15 14 )次 /min ,3组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ;iNOS转染导致停滞于G0 /G1期的细胞比例增加 ,G组G0 /G1期细胞百分比为 6 7 8% ,与D组 (46 8% )比较差异也有显著性 (P <0 0 1) ;iNOS转染可使低氧条件下PASMCs的P2 7蛋白表达下调受到抑制 ,P2

关键词：一氧化氮合酶基因转染缺氧肺动脉平滑肌细胞增殖

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