检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 1999年第2期21卷 99-104页

作者：杨立刘山鸣张小晓周巍贾开亮戴理吴东颖高春生刘国仰杨焕明中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学遗传室

目的构建河豚鱼基因组文库，为人类基因组的研究提供资料。方法以红鳍东方豚的精子ＤＮＡ为材料，采用含有“外显子捕获”元件的粘粒（ｓＣＯＧＨ２）作为载体，构建河豚鱼的基因组粘粒文库。结果该文库共有５７６００个克隆，分别被保... 详细信息

目的构建河豚鱼基因组文库，为人类基因组的研究提供资料。方法以红鳍东方豚的精子ＤＮＡ为材料，采用含有“外显子捕获”元件的粘粒（ｓＣＯＧＨ２）作为载体，构建河豚鱼的基因组粘粒文库。结果该文库共有５７６００个克隆，分别被保存在６００块９６孔细胞培养板中，插入片段的大小平均为３５ｋｂ，相当于５．０个库容量，即从本文库中筛选到河豚鱼基因组任一单拷贝序列的机率为９９．２％。该文库能承受１０次以上的反复冻融，重组粘粒克隆在传代中仍保持高稳定性。以河豚鱼基因组ＤＮＡ为探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析，结果显示出强阳性的杂交信号。结论该文库符合粘粒文库的质量要求。

关键词：河豚鱼比较基因组学粘粒文库

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雌激素诱发大鼠原位与移植垂体催乳素瘤中催乳素基因与TGFα和TGFβ1基因的表达

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生理学报 1999年第6期51卷 675-680页

作者：吴雪梅许建萍张荣许荣焜中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理研究室北京100005 中国医学科学院中国协和医科大学肿瘤医院内科北京100021

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体... 详细信息

利用本实验室建立的17β雌二醇(17βestradiol,E2)诱致SpragueDawley(SD)大鼠原位垂体和异体移植于肾囊的垂体同时形成催乳素(prolactin,PRL)瘤的动物模型,采用Northern印迹杂交方法,我们观察了E2长期作用(120d)后诱发的原位与移植垂体PRL瘤中PRL基因和两种转化生长因子(transforminggrowthfactor,TGF)TGFα和TGFβ1基因表达水平的改变。结果表明:在E2长期作用后,原位垂体与异体移植于肾囊,从而远离下丘脑的垂体均可形成垂体PRL瘤;原位与移植垂体PRL瘤中均表现PRL基因的高表达,但移植瘤中的PRL基因表达水平低于原位垂体瘤;此外,仅在原位垂体PRL瘤中发现上述两种转化生长因子呈较高水平的表达,移植垂体PRL瘤与正常垂体中均检测不到这两种转化生长因子的表达。上述结果提示,TGFα和TGFβ1可能涉及E2诱发的原位垂体PRL瘤形成;

关键词： PRL瘤生长因子 TGFα TGFβ1 E2基因表达

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胞内钙释放在胃泌素引起胃平滑肌细胞收缩中的作用

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生理学报 1997年第2期49卷 197-203页

作者：周吕罗洁新中国医学科学院基础医学研究所北京100005 中国协和医科大学基础医学院生理研究室北京100005

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩，并对胃窦作用最强。在G54×10－8... 详细信息

本研究用大鼠游离的胃平滑肌细胞，观察五肽胃泌素（G5）对胃平滑肌细胞的收编作用及胃泌索引起胃平滑肌细胞收缩时胞内游离钙释放作用。结果表明：（1）G5能够引起胃体、胃窦、幽门平滑肌细胞收缩，并对胃窦作用最强。在G54×10－8～16×10－8mol／L剂量范围内，呈剂量依赖性。（2）丙谷胺或抗胃泌素血清可以阻断G5对胃肌细胞的收缩反应，而阿托品则不影响G5的作用。（3）G5与乙酸胆碱对平滑肌细胞收缩有相加作用。（4）胞内钙释放阻断剂TMB-8可抑制G5对胃肌细胞的收缩作用。（5）G5作用于胃窦平滑肌细胞后胞内游离Ca2+显著上升。上述结果提示：胃泌素通过特异性受体引起胃平滑肌细胞收缩，其收缩作用通过胞内Ca2+释放介导。

关键词：胃平滑肌细胞胃泌素收缩游离钙

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电损毁延髓最后区对犬消化间期移行性复合运动的作用

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中华医学杂志 2000年第10期80卷 764-768页

作者：王礼建周吕田瑞中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理研究室北京100005

目的　探讨延髓最后区对胃肠消化间期移行性复合运动 (MMC)的影响。方法　应用 8只犬进行慢性实验 ,在胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动。在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素。用放射... 详细信息

目的　探讨延髓最后区对胃肠消化间期移行性复合运动 (MMC)的影响。方法　应用 8只犬进行慢性实验 ,在胃窦和十二指肠浆膜埋植应力传感器记录胃窦和十二指肠消化间期复合运动。在一侧股静脉内置慢性静脉插管供注射外源性胃动素。用放射免疫法 (RIA)测定血浆胃动素含量。观察 :(1)消化间期正常MMC活动和血浆胃动素浓度变化 ;(2 )电损毁延髓最后区对MMC活动和血浆胃动素水平的影响 ;(3)电损毁延髓最后区对外源性胃动素启动MMCⅢ相收缩作用的影响。结果　(1)正常犬消化间期出现典型的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ相MMC。MMCⅢ相与血浆胃动素释放高峰同步发生。(2 )电损毁延髓最后区后 ,胃窦和十二指肠MMC的收缩运动明显抑制 ,MMCⅠ相延长 ,Ⅱ、Ⅲ相明显缩短 ,失去了损毁前MMC周期性、时相性和移行性的特点 ,血浆胃动素浓度明显降低 ,外源性静脉注射胃动素不能启动MMCⅢ相收缩。结论　延髓最后区对消化间期MMC的周期发生和移行有重要的调控作用 ,其作用途径与胃动素介导有关。

关键词：延髓消化生理学胃动素

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转基因小鼠人载脂蛋白AI基因表达对血浆高密度脂蛋白的影响

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中华医学杂志 1998年第7期78卷 531-533页

作者：李汇华谷素敏佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院病理学研究室

目的研究载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）基因表达调控对血浆高密度脂蛋白（ＨＤＬ）代谢的影响。方法采用已建立的含小鼠金属硫蛋白Ｉ（ＭＴ－Ｉ）启动子的人ａｐｏＡＩ转基因Ｃ５７ＢＬ／６小鼠系，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒ... 详细信息

目的研究载脂蛋白ＡＩ（ａｐｏＡＩ）基因表达调控对血浆高密度脂蛋白（ＨＤＬ）代谢的影响。方法采用已建立的含小鼠金属硫蛋白Ｉ（ＭＴ－Ｉ）启动子的人ａｐｏＡＩ转基因Ｃ５７ＢＬ／６小鼠系，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术检测锌诱导前后人ａｐｏＡＩ基因整合和表达的情况。结果转基因小鼠整合４～１５拷贝的人ａｐｏＡＩ基因。人ａｐｏＡＩ基因主要在肝和肾中表达，经重金属锌诱导后，人ａｐｏＡＩ基因可在肝、小肠及肾中高效表达。转基因鼠血浆总ａｐｏＡＩ水平比对照组明显增高，其中人ａｐｏＡＩ水平经锌诱导后增高约４６％。与对照组相比，血浆ＨＤＬ水平在锌诱导前后分别增高约４７％和１０３％。转基因鼠ＨＤＬ和人ａｐｏＡＩ水平间呈显著正相关（ｒ＝０．８５，Ｐ＜０．０１）。结论ＡｐｏＡＩ对血浆ＨＤＬ水平升高有重要的调节作用。

关键词：转基因小鼠载脂蛋白AI 基因表达 HDL 冠心病

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神经生长因子的药代动力学研究

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中国药学杂志 2000年第3期35卷 181-184页

作者：姜国辉唐刚华张云陈力真王世真王树惠中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院核医学科北京100730 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所微生物免疫研究室北京100730

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓... 详细信息

目的 :研究神经生长因子 (nervegrowthfactor,简称NGF)在小鼠体内的药代动力学。方法 :12 5I NGF用氯胺T法制备经静注和肌注两种途径 ,血浆中NGF的浓度采用同位素示踪结合三氯醋酸 (TCA)沉淀法或SDS PAGE电泳法 ,测定小鼠血浆NGF的浓度。结果 :静注12 5I NGF 2 5 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β为 2 .2 2 3h ,酸沉法为 2 .2 6 4h。肌注12 5I NGF75 ,2 5 ,1 0 μg·kg-1,电泳法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .1 4 0 ,2 .331 ,3.1 73h ,酸沉法测得消除半衰期t1/ 2 β分别为 2 .480 ,2 .5 5 2 ,2 .6 42h ,达峰时间tmax为 0 .5 83h。电泳法和酸沉法测得12 5I NGF平均血浆清除率 (Cl)分别为 0 .32 1和 0 .332L·h-1·kg-1,表观分布容积 (Vd)为 1 .2 5 9和 1 .31 5L·kg-1,体内平均滞留时间 (MRT)为 3.5 92和 3.5 39h。结论 :NGF在体内消除半衰期较短。本研究为今后的临床应用提供了必要的参考资料。

关键词：神经生长因子药代动力学小鼠 NGF

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胃动素和胃泌素引起大鼠胃窦平滑肌细胞收缩的信号转导通路

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生理学报 2000年第4期52卷 272-276页

作者：王玲周吕中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生理研究室北京100005

应用大鼠游离胃窦平滑肌细胞 ,观察胃动素和胃泌素对胃窦平滑肌细胞收缩作用的胞内信号转导通路。结果显示 :(1)胃动素和胃泌素对胃窦平滑肌细胞均有收缩作用 ;(2 )Gαi 3 抗体可抑制胃动素和胃泌素加强胃窦平滑肌细胞的收缩 ,胃动素、... 详细信息

应用大鼠游离胃窦平滑肌细胞 ,观察胃动素和胃泌素对胃窦平滑肌细胞收缩作用的胞内信号转导通路。结果显示 :(1)胃动素和胃泌素对胃窦平滑肌细胞均有收缩作用 ;(2 )Gαi 3 抗体可抑制胃动素和胃泌素加强胃窦平滑肌细胞的收缩 ,胃动素、胃泌素明显增加Gαi 3 抗体与 [35S]GTPγS的结合 ;(3)磷脂酶C抑制剂U 7312 2、三磷酸肌醇受体拮抗剂肝素可抑制胃动素和胃泌素引起的胃窦平滑肌细胞的收缩。结果表明 :胃动素和胃泌素通过兴奋与磷脂酶C耦联的Gi 蛋白 ,产生三磷酸肌醇 ,激发胃窦平滑肌细胞的收缩反应。

关键词：胃动素胃泌素收缩 G蛋白磷脂酶C

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反转录病毒载体介导的人β-珠蛋白基因低水平表达的机制初探

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生物化学与生物物理学报 2002年第6期34卷 763-768页

作者：董文吉祖振响刘德培郝德龙郭志晨梁植权中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室北京100005

以人 β 珠蛋白基因簇基因座控制区DNaseI高敏位点 2和高敏位点 3组合的微小基因座控制区作为调控元件 ,以 374bp第二内含子部分缺失的 2 .0kbβ 珠蛋白基因作为结构基因的反转录病毒重组体 ,通过建立 ψ 2产病毒细胞系和瞬时转染双向... 详细信息

以人 β 珠蛋白基因簇基因座控制区DNaseI高敏位点 2和高敏位点 3组合的微小基因座控制区作为调控元件 ,以 374bp第二内含子部分缺失的 2 .0kbβ 珠蛋白基因作为结构基因的反转录病毒重组体 ,通过建立 ψ 2产病毒细胞系和瞬时转染双向性包装细胞系 ψ A两种方法获得重组病毒。感染鼠红白血病细胞后 ,Southern杂交鉴定前病毒整合完整性 ,用RNase保护实验检测人 β 珠蛋白基因的表达 ,通过PCR产物测序确定前病毒结构。结果表明 ,在瞬时转染 ψ A来源的重组病毒转导和质粒转染的鼠红白血病细胞中 ,人 β 珠蛋白基因的表达水平分别达到内源性鼠α 基因表达的 (5 2 .4± 11.2 ) % (n =12 )和 (73.8± 14 .3) % (n =12 ,未确定整合拷贝数 ) ;而在 ψ 2产病毒细胞系来源的病毒转导的细胞中 ,表达水平低于 3% ,前病毒序列分析发现其高敏位点 2中出现一个点突变 ,这可能是人β 珠蛋白基因呈低水平表达的一个原因。

关键词： β-地中海贫血基因治疗反转录病毒载体位置效应 RNA干扰

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外显子捕获法分离FRAXA位点的新表达序列

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生物化学与生物物理进展 1998年第4期25卷 367-373页

作者：孔建朱宁宁尹斌沈岩吴冠芸中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室

外显子捕获是近年发展起来的一种自基因组ＤＮＡ分离表达序列的有效方法．我们采用以ｐＳＰＬ３为剪接载体的外显子捕获系统，从覆盖ＦＲＡＸＡ位点的酵母人工染色体ＹＡＣ２０９Ｇ４中分离到２个新外显子序列Ａ９１和Ｄ１２．Ａ９１在... 详细信息

外显子捕获是近年发展起来的一种自基因组ＤＮＡ分离表达序列的有效方法．我们采用以ｐＳＰＬ３为剪接载体的外显子捕获系统，从覆盖ＦＲＡＸＡ位点的酵母人工染色体ＹＡＣ２０９Ｇ４中分离到２个新外显子序列Ａ９１和Ｄ１２．Ａ９１在人胎肝和骨骼肌文库中丰度较高，在肝、肾和骨髓文库中也有ＰＣＲ扩增．而Ｄ１２在所分析的８个ｃＤＮＡ文库中均未见ＰＣＲ扩增产物．从骨骼肌文库中克隆到一段包含Ａ９１的３１５ｂｐ的ｃＤＮＡ（ＡＭ４４７０）．多种组织ＲＮＡ印迹显示，ＡＭ４４７０与骨骼肌和心脏ｍＲＮＡ杂交，转录本长度均为２８ｋｂ．

关键词：外显子捕获表达序列 FRAXA位点

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PAH基因内一个A／C多态性位点的分析

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Acta Genetica Sinica 1996年第3期23卷 169-173页

作者：黄尚志李辉苗世荣徐陆亭方炳良刘国仰罗会元中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京医学遗传研究室

在苯丙氨酸羟化酶基因ＩＶＳ３的３＇端－１１位有一个Ａ／Ｃ多态性位点，应用ＳＳＣＰ分析可进行简便检测。Ａ等位基因的频率为０．６５６，Ｃ等位基因的频率为０．３４４，此位点的多态性信息含量（ＰＩＣ）为０．３５１。Ａ／Ｃ位点... 详细信息

在苯丙氨酸羟化酶基因ＩＶＳ３的３＇端－１１位有一个Ａ／Ｃ多态性位点，应用ＳＳＣＰ分析可进行简便检测。Ａ等位基因的频率为０．６５６，Ｃ等位基因的频率为０．３４４，此位点的多态性信息含量（ＰＩＣ）为０．３５１。Ａ／Ｃ位点与同一内含子中的ＳＴＲ位点间没有连锁不平衡性，联合应用这两个多态性位点进行单体型连锁分析，对ＰＫＵ家系进行产前基因诊断的诊断率可达７５％。

关键词：苯丙酮尿症遗传病多态性位点苯丙氨酸羟化酶

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