检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 351-355页

作者：刘深基陈松森狄旭熊安琪张友鸿中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室北京100005

目的降低鲑鱼降钙素（sCT）对人体的免疫原性。方法设计并合成人源化鲑鱼降钙素（11 ～ 17）hsCT基因，用基因重组方法构建表达载体，转入大肠杆菌G1724中，经色氨酸诱导表达；用渗透压法处理菌体纯化融合蛋白；以大鼠血清钙浓度降低... 详细信息

目的降低鲑鱼降钙素（sCT）对人体的免疫原性。方法设计并合成人源化鲑鱼降钙素（11 ～ 17）hsCT基因，用基因重组方法构建表达载体，转入大肠杆菌G1724中，经色氨酸诱导表达；用渗透压法处理菌体纯化融合蛋白；以大鼠血清钙浓度降低方法测定hsCT生物活性；用定量Western blot法测定hsCT免疫原性。结果重组pTrxFus-hsCT质粒在大肠杆菌中获得高效可溶性融合蛋白表达, 表达水平达46%以上, 并得到纯度约90%的融合蛋白,rhsCT保存了鲑鱼降钙素前体活性的一半以上, 免疫原性降低了55%。结论获得一种新型人源化降钙素（11 ～ 17）hsCT，其保存较高sCT前体的活性，免疫原性明显降低。

关键词：人源化降钙素重组免疫原性生物活性

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中国海南岛人恶性疟原虫基因文库的构建及环子孢子蛋白基因的筛选

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生物化学杂志 1992年第1期8卷 99-104页

作者：钟伟民强伯勤陈菊凤樊汝恭刘尔翔中国协和医科大学基础医学部中国协和医科大学基础医学部分子生物学与生物化学研究室北京100005 中国协和医科大学基础医学部寄生虫学教研室北京100005

本文介绍了以噬菌体λEMBL3为载体的中国海南岛人恶性疟原虫FCC1/HN分离株基因文库的构建。所得重组体的数目为3.3×10~4pfu,其相当于构建完整基因库理论计算值的6倍。作者以人工合成的巴西株恶性疟环子孢子蛋白基因重复序列区的24-... 详细信息

本文介绍了以噬菌体λEMBL3为载体的中国海南岛人恶性疟原虫FCC1/HN分离株基因文库的构建。所得重组体的数目为3.3×10~4pfu,其相当于构建完整基因库理论计算值的6倍。作者以人工合成的巴西株恶性疟环子孢子蛋白基因重复序列区的24-mer寡核苷酸(AATGCAAACCCAAATGCAAACCCA)作探针,进行噬斑原位杂交,筛得三株阳性克隆。对其一重组体进行酶谱分析和Southern印迹实验,环子孢子蛋白基因被定位于HindⅢ和BamHI联合降解后所得的的4kb大小的片段上。

关键词：恶性疟原虫基因文库 CSP

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兔高密度脂蛋白中载脂蛋白抑制实验性动脉粥样硬化的研究

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中华病理学杂志 1989年第4期18卷 257-261+323页

作者：冉碧芳王宗立刘佩毛吴时丽刘连生李浩赵三妹蔡春波谷素敏黄亚东陈保生夏人仪佘铭鹏中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学部病理室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学部基础医学研究所分子生物学及生物化学研究室

高密度脂蛋白(HDL)中主要的载脂蛋白(apolipoproteins,简称 apo)有 AⅠ,AⅡ,AⅣ。我们从大量的兔血清中分离提纯 HDL 中的载脂蛋白(主要为 apoAⅠ),并进行了两次抑制动脉粥样硬化的实验。结果为:apoA 实验组动物主动脉内膜中脂质含量,... 详细信息

高密度脂蛋白(HDL)中主要的载脂蛋白(apolipoproteins,简称 apo)有 AⅠ,AⅡ,AⅣ。我们从大量的兔血清中分离提纯 HDL 中的载脂蛋白(主要为 apoAⅠ),并进行了两次抑制动脉粥样硬化的实验。结果为:apoA 实验组动物主动脉内膜中脂质含量,内膜脂质沉积,主动脉内膜粥样斑块病变面积以及粥样斑块病变的严重程度均明显低于胆固醇对照组。临床及实验室资料表明,HDL 可降低粥样硬化的发病率。本实验明确显示降低内膜脂质沉积及抑制粥样硬化病变发展的主要因素和载脂蛋白 A 关系最为密切。其结果为今后用高生物技术制备有关的载脂蛋(如 apoAⅠ,AⅡ),以防治粥样硬化的发生发展,提出了重要的理论依据。

关键词：脂蛋白类,高密度载体蛋白类动脉粥样硬化

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噬菌体展示技术构建重组人TNF-α单链抗体库

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上海交通大学学报（医学版） 2006年第2期26卷 155-158页

作者：柴蔚然杨涛胡晓年牛勃上海交通大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室上海200025 山西医科大学生物化学与分子生物学教研室中国协和医科大学基础研究所

目的应用噬菌体展示技术构建抗重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)的单链抗体库。方法利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经免疫BALB/c小鼠淋巴细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库。由L in... 详细信息

目的应用噬菌体展示技术构建抗重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α)的单链抗体库。方法利用噬菌体表面展示技术、绕过杂交瘤技术,提取经免疫BALB/c小鼠淋巴细胞总RNA,用相应引物扩增小鼠免疫球蛋白VH基因和VL基因,构建VH、VL抗体库。由L inker-prim erm ix经重叠延伸反应将重链可变区基因与轻链可变区基因拼接成单链抗体。再用RS prim erm ix以单链抗体为模板进行第二次聚合酶链反应,从而获得全套抗rhTNF-α的单链抗体基因。以SfiⅠ/NotⅠ,位点定向插入pCANTAB-5E噬菌粒载体,转化大肠杆菌TG1后,经M13KO7辅助噬菌体拯救,构建成全套抗rhTNF-α单链抗体表面展示文库。结果成功构建了rhTNF-α全套单链抗体噬菌体表面展示文库。经M13KO7超感染后,噬斑计数滴度为2.1×1011pfu。结论rhTNF-α全套单链抗体噬菌体表面展示文库的构建,为研究rhTNF-α抗体结合位点,了解其结构与功能的关系以及研究用于临床免疫治疗的新型抗体打下了基础。

关键词：肿瘤坏死因子-α 单链抗体噬菌体展示技术重组人TNF-α单链抗体库

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多聚TAR-CoreRNA诱饵对人免疫缺陷病毒1型Tat蛋白活性的抑制作用

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中国生物化学与分子生物学报 1998年第5期14卷 628-631页

作者：白龙川袁建刚杜光伟强伯勤中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室

为了抑制Ｔａｔ蛋白的反式激活作用，在细胞内大量表达外源ＴＡＲＲＮＡ使其与Ｔａｔ蛋白结合，从而竞争性抑制其与ＨＩＶ－１ＬＴＲ的ＴＡＲＲＮＡ元件结合．构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲＹＬ１５８（－１５８～＋１８０）为启动子，分别... 详细信息

为了抑制Ｔａｔ蛋白的反式激活作用，在细胞内大量表达外源ＴＡＲＲＮＡ使其与Ｔａｔ蛋白结合，从而竞争性抑制其与ＨＩＶ－１ＬＴＲ的ＴＡＲＲＮＡ元件结合．构建了以ＨＩＶ－１ＬＴＲＹＬ１５８（－１５８～＋１８０）为启动子，分别含有４，８和１５个拷贝的ＴＡＲ－ＣｏｒｅＲＮＡ诱饵（ｄｅｃｏｙ）表达质粒；以荧光酶基因为报告基因，检测了瞬时共转染体系中含不同拷贝数的ＴＡＲ－ＣｏｒｅＤＮＡ转录产物对Ｔａｔ蛋白反式激活作用的影响．结果证明，ＴＡＲ－ＣｏｒｅＲＮＡ诱饵对Ｔａｔ蛋白活性具有很强的抑制作用，其抑制程度与ＴＡＲ－ＣｏｒｅＤＮＡ串联体的拷贝数有关．

关键词：人免疫缺陷病毒 Tat TAR-Core RNA 诱饵

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人表皮生长因子的基础和应用研究

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中国医学科学院学报 2001年第2期23卷 176-180页

作者：黄秉仁蔡良婉向绪传 Xiang-Xu-zhuan 中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室北京100005 Middle-Scale Experimental Base of the Institute of Basic Medical Sciences CAMS PUMC and Jin Ke Company Guilin

本文报道了有关人表皮生长因子（ hEGF）及其受体（ EGFR）的基础研究结果，以及在此基础上进行新药开发的有关工作： hEGF的基因合成、表达载体的构建和转化宿主细胞、表达产物的纯化和中试规模三批样品的生产和检验等的有关研究结果、... 详细信息

本文报道了有关人表皮生长因子（ hEGF）及其受体（ EGFR）的基础研究结果，以及在此基础上进行新药开发的有关工作： hEGF的基因合成、表达载体的构建和转化宿主细胞、表达产物的纯化和中试规模三批样品的生产和检验等的有关研究结果、 hEGF滴眼液的动物实验和临床实验等新药研制过程。有关基础研究表明，编码 51个氨基酸的 hEGF可以在α因子前导肽的引导下在酵母体系中分泌性表达，表达产物可促进角膜缘上皮细胞的增殖，可促进角膜碱烧伤的愈合，可用于口腔溃疡和皮肤烧伤的治疗，可对大鼠十二指肠溃疡有预防作用等 ,并用之制备了抗血清以测定血尿中 EGF的浓度。研究表明 EGF在大于 10 ng/ml浓度下对神经胶质瘤细胞株 BT325和人阴道上皮癌细胞株 A431的生长具有抑制作用，并用差异显示方法对此现象进行了分子机制的探讨。研究肾癌 EGFR表达和 DNA含量检测具有临床意义。对 EGF的晶体进行了初步的结构分析。中试产品检测表明 hEGF相对分子质量为 6000、等电点为 4.6、氨基端 15个氨基酸顺序正确、具有 EGF的免疫原性和生物活性。产品中无酵母细胞的残余 DNA。动物实验表明 EFG在体内无蓄积，有明确的促进角膜上皮细胞增殖的作用，无急毒和长毒副作用，对眼无刺激和局部毒性作用。在四家医院进行的多中?

关键词：表皮生长因子受体重组蛋白滴眼液基因工程药

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人突变载脂蛋白E(apoE4,apoE7)转基因小鼠模型

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中国科学（C辑） 2001年第1期31卷 1-6页

作者：孙明增琦祖和中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学室医学分子生物学国家重点实验室北京100005

为揭示人突变apoE基因表达在整体引起的异常反应并得到人类相关疾病的小鼠模型，用显微注射法制备了人apoE4与apoE7转基因小鼠, 用Southern印迹杂交及ELISA证明人apoE基因在首建鼠及其子代体内整合与表达良好, 具有遗传稳定性. 血清脂... 详细信息

为揭示人突变apoE基因表达在整体引起的异常反应并得到人类相关疾病的小鼠模型，用显微注射法制备了人apoE4与apoE7转基因小鼠, 用Southern印迹杂交及ELISA证明人apoE基因在首建鼠及其子代体内整合与表达良好, 具有遗传稳定性. 血清脂质与行为测定表明, 人apoE表达使小鼠患高脂血症并出现大脑学习与记忆功能衰退和寿命缩短, 高脂食物对正常鼠与转基鼠均可诱发高血脂, 但机制不同. 同时还证明, 氨基端与羧基端突变的apoE具有相同的致病作用.

关键词：转基因鼠人APOE7/E4 高脂血症学习记忆寿命载脂蛋白E

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体内筛选展示脑血管内皮选择性定位多肽的噬菌体

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解剖学杂志 2003年第4期26卷 307-311页

作者：王帅王欣陈红黄秉仁中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

目的:通过噬菌体展示技术寻找能够定位于脑部血管内皮的多肽。方法:通过鼠尾静脉注射展示文库,将脑组织中得到的噬菌体体外扩增,重新注人于Balb/c小鼠。如此3轮筛选,测定所获噬菌体的核苷酸顺序及导出展示多肽的氨基酸顺序,并进行免疫... 详细信息

目的:通过噬菌体展示技术寻找能够定位于脑部血管内皮的多肽。方法:通过鼠尾静脉注射展示文库,将脑组织中得到的噬菌体体外扩增,重新注人于Balb/c小鼠。如此3轮筛选,测定所获噬菌体的核苷酸顺序及导出展示多肽的氨基酸顺序,并进行免疫组化分析。结果:得到了展示6个多肽序列的噬菌体克隆。展示3个多肽顺序的噬菌体在脑组织中有明显分布,它们是CSKTAEHTC,QLADTTHHRPWP和SWASLPVGMNSW。免疫组化分析显示展示CSKTAEHTC和QLADTTHHRPWP序列的噬菌体在脑部有明显的阳性分布。结论:展示QLADT-THHRPWP的噬菌体可能对脑血管内皮有更好的结合能力。

关键词：体内筛选脑血管内皮选择性定位多肽噬菌体

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敬爱的梁植权院士,协和生化系永远怀念您!

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生命的化学 2006年第4期26卷 376-379页

作者：中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室中国医学科学院基础医学研究所

中科院院士梁植权教授与世长辞了.我们失去了一位可亲可敬的师长,我国失去了一位杰出的生物化学与分子生物学家、医学教育家.梁先生毕生的科学业绩和崇高品德将永远铭刻在我们心中.

关键词：中科院院士梁生化协和生物学家生物化学教育家

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人载脂蛋白(a)中Kringle域的结构与功能

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生命的化学 2007年第5期27卷 418-421页

作者：申乐陈保生中国医学科学院基础医学研究所/中国协和医科大学基础医学院生物化学与分子生物学系医学分子生物学国家重点实验室北京100005

Kringle domain,也称Kringle域是蛋白质分子中由3个二硫键形成的特殊的三环状结构。人体很多种蛋白质均含有这种结构,其中以载脂蛋白(a)中所含有的Kringle域数目为最多。载脂蛋白(a)是脂蛋白(a)的重要组成部分,而Kringle域在脂蛋白(a)... 详细信息

Kringle domain,也称Kringle域是蛋白质分子中由3个二硫键形成的特殊的三环状结构。人体很多种蛋白质均含有这种结构,其中以载脂蛋白(a)中所含有的Kringle域数目为最多。载脂蛋白(a)是脂蛋白(a)的重要组成部分,而Kringle域在脂蛋白(a)完整颗粒的结构组装及载脂蛋白(a)的功能方面均发挥这十分重要的作用。载脂蛋白(a)与纤维蛋白溶解酶原之间具有高度的同源性,而且载脂蛋白(a)中的部分Kringle域能够通过抑制血管生长实现抑制肿瘤生长的目的。这些研究进一步明确了脂蛋白(a)与载脂蛋白(a)的病理生理学意义,并对临床相关疾病的治疗提供了理论依据。

关键词：载脂蛋白(a) 三环结构域脂蛋白(a) 血管生长

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