检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物工程杂志 2005年第6期25卷 40-44页

作者：刘立颖许士奇赵雪梅杜洪震张伟梁平中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学研究院病理室北京100005 承德医学院微生物与免疫学教研室承德067000

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受... 详细信息

抗β-淀粉样多肽(Aβ)的抗体对老年性痴呆(AD)病变有清除作用,人源融合抗体由可识别结合Aβ的多肽序列A与人抗体Fc段连接重组构成。构建的单拷贝表达载体PA0815-αAFc,可以在毕赤酵母中高效表达。此表达载体含有一个AFc表达单元,并在受严格调控的醇氧化酶启动子的控制下由甲醇诱导表达,并利用α因子前导肽引导融合抗体分泌。载体线性化后整合入甲醇营养型酵母Pichia pastoris(Pp)GS115基因组中,经鉴定表达单位具有良好的遗传稳定性。对筛选得到的高分泌表达融合抗体的细胞株进行表达和培养条件的优化,使诱导上清液中融合抗体的产量选到100mg/L。利用Protein A层析柱分离、纯化,获得纯度较高的融合抗体。经鉴定分析其具有正确的分子量和N末端,且融合抗体可与Aβ抗原结合并能吸引巨噬细胞吞噬和清除抗原抗体复合物,具有抗体生物学活性。这是首次利用甲醇营养型酵母表达系统成功实现了抗Aβ融合抗体的高效分泌表达及产物纯化鉴定,为进一步研究AD及其治疗提供了新的途径。

关键词：抗β-淀粉样多肽人源融合抗体甲醇营养型酵母表达系统阿尔茨海默病免疫治疗纯化性质

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含人PDGF-B链基因不同上游序列报告基因的构建和表达

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基础医学与临床 1998年第3期18卷 68-72页

作者：沈传陆王华王小明郭恒怡吴其夏中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学教研室

本研究构建了含人ＰＤＧＦＢ链基因不同上游序列的荧光素酶报告基因ｐＳＩＳ－１７５８／＋４３Ｌｕｃ和ｐＳＩＳ－４０２／＋４３Ｌｕｃ，经与ｐＳＶβＧａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅＣｏｎｔｒｏｌＶｅｃｔｏｒ共转染血管内皮细胞... 详细信息

本研究构建了含人ＰＤＧＦＢ链基因不同上游序列的荧光素酶报告基因ｐＳＩＳ－１７５８／＋４３Ｌｕｃ和ｐＳＩＳ－４０２／＋４３Ｌｕｃ，经与ｐＳＶβＧａｌａｃｔｏｓｉｄａｓｅＣｏｎｔｒｏｌＶｅｃｔｏｒ共转染血管内皮细胞后，测定了基础水平和ＴＮＦα作用下细胞裂解液中的荧光素酶和β半乳糖苷酶活性。结果表明：在ＴＮＦα作用下，ＰＤＧＦＢ链基因上游序列上调内皮细胞荧光素酶的表达，其主要调控区可能位于－１７５８／－４０３ｂｐ之间。

关键词： PDGF-B链基因肿瘤坏死因子血小板源生长因子

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非小细胞肺癌靶向药物治疗相关基因检测的规范建议

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中华病理学杂志 2016年第2期45卷 73-77页

作者：王恩华朱明华步宏陈杰丁彦青周晓军梁智勇张祥宏孙保存无中国医科大学基础医学院病理学教研室/附属第一医院病理科沈阳110001 第二军医大学附属长海医院病理科四川大学华西医院病理科中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院病理科南方医科大学南方医院病理科南京军区南京总医院病理科河北医科大学附属第二医院病理科天津医科大学病理学教研室中华医学会病理学分会胸部疾病学组国家卫生和计划生育委员会临床病理质控与评价中心分子病理学组中国医师协会病理医师分会分子病理学组中国抗癌协会肿瘤病理学分会分子病理学组

一、检测非小细胞肺癌（NSCLC）常见靶向治疗相关基因的意义肺癌是世界范围内发病率及病死率均居于首位的恶性肿瘤，其中NSCLC约占85％左右。随着对其分子途径探索的逐步深入和相对应的靶向药物的不断出现，给其中的部分晚期患者带来了... 详细信息

一、检测非小细胞肺癌（NSCLC）常见靶向治疗相关基因的意义肺癌是世界范围内发病率及病死率均居于首位的恶性肿瘤，其中NSCLC约占85％左右。随着对其分子途径探索的逐步深入和相对应的靶向药物的不断出现，给其中的部分晚期患者带来了新的希望。

关键词：非小细胞肺癌基因检测靶向治疗药物治疗 NSCLC 相关基因恶性肿瘤世界范围

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人胚胎肺成纤维细胞复制性衰老模型的建立

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中国老年学杂志 2014年第8期34卷 2171-2173页

作者：师迎旭杜华郑国光内蒙古医科大学附属医院检验科内蒙古医科大学基础医学院病理学教研室中国医学科学院北京协和医学院血液学研究所天津300020

目的建立人胚肺成纤维(HEL)细胞,复制性衰老模型,模拟正常细胞的衰老过程。方法利用HEL细胞的复制性衰老特性,通过细胞传代培养的办法,将获得的原代HEL细胞培养直至其衰老,冻存不同代的HEL细胞备用。然后利用β-半乳糖苷酶染色、端粒长... 详细信息

目的建立人胚肺成纤维(HEL)细胞,复制性衰老模型,模拟正常细胞的衰老过程。方法利用HEL细胞的复制性衰老特性,通过细胞传代培养的办法,将获得的原代HEL细胞培养直至其衰老,冻存不同代的HEL细胞备用。然后利用β-半乳糖苷酶染色、端粒长度的检测以及p21蛋白的表达变化检测细胞的衰老状态。结果培养HEL细胞,按1∶2分瓶传代直至其衰老,最终细胞代龄为64。通过染色与分子检测证实细胞随着传代逐渐衰老。结论成功建立了HEL衰老模型,为进一步研究正常细胞复制性衰老奠定了基础。

关键词：复制性衰老人胚肺成纤维细胞衰老模型

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改造的人乳头瘤病毒16型E6/E7融合蛋白疫苗抗肺癌作用的实验研究

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中国肺癌杂志 2004年第5期7卷 379-382页

作者：周小山赵清正千新来许春雷陆元志中国协和医科大学中国医学科学院肿瘤医院肿瘤研究所生化与分子生物学实验室北京100021 河南省新乡医学院病理学教研室

目的　研究经改造的HPV16E6/E7蛋白质疫苗 (HPV 16mE6Δ/mE7)对表达HPV16E6和E7的小鼠肺癌细胞的体内生长抑制作用 ,为肺癌免疫治疗提供新线索。方法　预防性实验 :对C5 7BL/6小鼠先进行免疫 ,然后接种表达HPV 16E6和E7癌蛋白的TC 1肿... 详细信息

目的　研究经改造的HPV16E6/E7蛋白质疫苗 (HPV 16mE6Δ/mE7)对表达HPV16E6和E7的小鼠肺癌细胞的体内生长抑制作用 ,为肺癌免疫治疗提供新线索。方法　预防性实验 :对C5 7BL/6小鼠先进行免疫 ,然后接种表达HPV 16E6和E7癌蛋白的TC 1肿瘤细胞 ;第 3 3天 ,对未出瘤小鼠进行第二次大剂量肿瘤细胞攻击。治疗性实验 :C5 7BL/6小鼠先接种TC 1细胞 ,然后进行两次免疫治疗 ,再对未出瘤小鼠进行第二次大剂量TC 1细胞攻击实验。计算各组肿瘤发生率、肿瘤体积。采用MTT方法检测淋巴细胞增殖反应。结果　预防性实验 :在 10 0天的观察时间内 ,免疫组小鼠可以有效抵抗第一、二次肿瘤细胞攻击 ,所有小鼠均未见肿瘤发生 ;而PBS组及单纯佐剂组小鼠在第一次肿瘤细胞接种后 6～ 12天内均有肿瘤形成 ,3 0天内因肿瘤负荷出现衰竭。在治疗性实验中 ,免疫组、PBS组、单纯佐剂组小鼠成瘤率分别为 2 0 %、90 %、60 % ;第二次攻击实验中 ,免疫组仍有 87.5 %的小鼠无肿瘤生长 ,而其他两组动物在 4～ 6天内均有肿瘤形成。MTT实验表明经mE6Δ/mE7免疫的小鼠脾淋巴细胞增殖反应明显强于对照组。结论　经改造的HPV16型mE6Δ/mE7蛋白质疫苗对于实验动物肺癌有较好的抑制作用。

关键词：肺肿瘤 HPV16 E6/E7病毒蛋白免疫治疗

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Survivin、P34^(cdc2)在非小细胞肺癌中的表达及意义

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中国组织化学与细胞化学杂志 2003年第2期12卷 147-153页

作者：李国生乐道双张道荣邵俊刘冬王恩华邱雪杉华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科武汉430022 中国医科大学基础医学院病理学教研室沈阳110001 辽宁省肿瘤医院病理科沈阳110042

目的　研究非小细胞肺癌组织中survivin和P34cdc2 的表达 ,探讨survivin和P34cdc2 的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。方法　随机收集非小细胞肺癌 (含癌旁细支气管和 /或小支气管增生组织和正常肺组织 )标本 10 0例。采用免疫... 详细信息

目的　研究非小细胞肺癌组织中survivin和P34cdc2 的表达 ,探讨survivin和P34cdc2 的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。方法　随机收集非小细胞肺癌 (含癌旁细支气管和 /或小支气管增生组织和正常肺组织 )标本 10 0例。采用免疫组织化学SP法染色。结果　在癌组织与癌旁细支气管和 /或小支气管上皮增生组织及正常肺组织中survivin和P34cdc2 表达差异有显著性 (P <0 .0 1)。在癌组织中有过表达 ,在癌旁细支气管和 /或小支气管上皮增生组织中的表达较正常肺组织中的表达增强 ;癌组织中survivin和P34cdc2 表达呈正相关 (P <0 .0 1) ,癌旁细支气管和 /或小支气管上皮增生组织中 ,survivin和P34cdc2 的表达也呈正相关 (P <0 .0 1)。癌组织类型、分化程度和淋巴结转移与survivin和P34cdc2 的表达均无相关性 (P >0 .0 5 )。不同临床分期的非小细胞肺癌 ,其survivin和P34cdc2 的表达差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　survivin和P34cdc2 在非小细胞肺癌中有过表达现象 ,在非小细胞肺癌的G2 /M期 ,P34cdc2 可能通过将survivinThr (34)磷酸化而激活或增强细胞的抗凋亡能力 ,从而将细胞周期进程与凋亡调控有机地联系起来。过表达的survivin和P34cdc2 可作为反映非小细胞肺癌细胞分裂增殖、凋亡抑制 (细胞生存?

关键词：非小细胞肺癌细胞周期调控凋亡 survivin P34^(cdc2)

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纳米粒子的表面修饰在疫苗佐剂开发中的应用

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中国生物制品学杂志 2022年第10期35卷 1257-1260页

作者：周珈(综述) 申丽娟刘野(审校) 昆明医科大学基础医学院病理学教研室云南昆明650500 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所云南昆明650118

接种疫苗是预防传染病的有效方法。疫苗可增强免疫力,并使个体对病原体感染具有抵抗力。蛋白亚单位疫苗虽具有良好的安全性,但其免疫原性较弱,需要佐剂辅助增强其免疫反应。佐剂作为增加疫苗免疫应答的关键部分,其设计理念和构建原理对... 详细信息

接种疫苗是预防传染病的有效方法。疫苗可增强免疫力,并使个体对病原体感染具有抵抗力。蛋白亚单位疫苗虽具有良好的安全性,但其免疫原性较弱,需要佐剂辅助增强其免疫反应。佐剂作为增加疫苗免疫应答的关键部分,其设计理念和构建原理对开发有效的疫苗十分重要。表面修饰可赋予纳米材料预设的免疫调节功能,以优化疫苗诱导的免疫反应。本文对纳米粒子表面修饰在疫苗佐剂中的应用作一综述。

关键词：纳米粒子表面修饰疫苗佐剂

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Cyclin B_1、P34^(cdc2)在非小细胞肺癌中的表达及意义

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中国组织化学与细胞化学杂志 2002年第2期11卷 195-198,240页

作者：李国生张道荣刘冬杨秀萍王恩华邱雪杉华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科 430022 中国医科大学基础医学院病理学教研室 110001 辽宁省肿瘤医院病理科 110042

目的　为了研究非小细胞肺癌组织中CyclinB1及P34 cdc2 的表达 ,探讨CyclinB1及P34 cdc2 的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。方法　随机收集非小细胞肺癌 (含癌旁细支气管和 /或小支气管增生组织和正常肺组织 )标本10 0例。采用... 详细信息

目的　为了研究非小细胞肺癌组织中CyclinB1及P34 cdc2 的表达 ,探讨CyclinB1及P34 cdc2 的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的关系。方法　随机收集非小细胞肺癌 (含癌旁细支气管和 /或小支气管增生组织和正常肺组织 )标本10 0例。采用免疫组织化学SP法。结果　显示在癌组织与癌旁细支气管和 /或小支气管上皮增生组织及正常肺组织中CyclinB1及P34 cdc2 表达差异有显著性 (P <0 0 1)。在癌组织中有过表达 ;在癌旁细支气管和 /或小支气管上皮增生组织中的表达较正常肺组织中的表达增强。 10 0例非小细胞肺癌组织中CyclinB1及P34 cdc2 表达呈正相关 (P <0 0 1) ,相关系数为 0 96 6。癌旁细支气管和 /或小支气管上皮增生组织中 ,CyclinB1及P34 cdc2 的表达也呈正相关 (P <0 0 1) ,相关系数为 0 6 38。组织类型、分化程度和淋巴结转移与CyclinB1及P34 cdc2 的表达均无统计学意义 (P >0 0 5 )。不同临床分期的非小细胞肺癌 ,其CyclinB1及P34 cdc2 的表达差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论　CyclinB1及P34 cdc2 在非小细胞肺癌中有过表达现象 ,二者在M期前形成过多的促成熟因子 (maturationpromotingfactor,MPF)从而加速非小细胞肺癌细胞跨越G2 /M期关卡进入分裂期。过表达的CyclinB1及P34 cdc2 可作为反?

关键词： CyclinB1 P34^cdc2 非小细胞肺癌表达细胞周期调控

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人喉癌细胞系的建立及生物学特性研究

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首都医科大学学报 2006年第5期27卷 612-615页

作者：任乐荣刘玉琴李正江苏小玲顾蓓董继红首都医科大学病理解剖学教研室中国协和医科大学基础医学院病理解剖学教研室

目的建立2种人喉癌细胞系，确定其生物学特性。方法取喉癌患者原发病灶和淋巴结转移灶组织，用组织块培养法进行原代培养。20代后观察细胞形态，绘制生长曲线图，用免疫组织化学染色方法鉴定细胞分子特征，测定细胞周期和软琼脂集落形... 详细信息

目的建立2种人喉癌细胞系，确定其生物学特性。方法取喉癌患者原发病灶和淋巴结转移灶组织，用组织块培养法进行原代培养。20代后观察细胞形态，绘制生长曲线图，用免疫组织化学染色方法鉴定细胞分子特征，测定细胞周期和软琼脂集落形成率。结果建立了2个人喉癌细胞系，分别命名为CCC-HLS和CCC-HLSLN，已传至第25代。CCC-HLS细胞形态以梭形为主；CCC-HLSLN细胞呈多形性，少数细胞有细长的突起，末端有分叉。2种细胞角蛋白（CK）免疫组织化学染色均为阳性。2种细胞传代后，2～4d为对数生长期，第7天开始死亡，CCC-HLS细胞倍增时间为33．9h，CCC-HLSLN细胞倍增时间为30h。细胞周期分析表明CCC-HLS细胞Go／G1期为54．7％，G2／M期为5．2％，S期为40．1％。CCC-HLSLN细胞G0／G1期为50．6％，G2／M期为27．4％，S期为22．0％。CCC-HLS细胞软琼脂集落形成率为1．23％，CCC-HLSLN软琼脂集落形成率为2．58％。结论建立的2种人喉癌细胞系可用于喉癌的基础研究。

关键词：喉鳞状细胞癌人喉癌细胞原发灶细胞系淋巴结转移灶细胞系

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北京鸭载脂蛋白AI cDNA的克隆及其组织表达

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武警后勤学院学报（医学版） 1998年第3期19卷 137-143页

作者：吕新跃陈保生王克勤武警医学院病理教研室天津300162 中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院北京100005

目的:克隆不易感动脉粥样硬化动物北京鸭载脂蛋白AI的基因。方法:分离提取北京鸭肝组织mRNA,以此为模板,反转录构建了鸭肝组织cDNA文库。利用制备的兔抗鸭载脂蛋白AI(apoAI)多抗血清为探针筛选该文库,获得10个阳性克隆,测序及序列分析... 详细信息

目的:克隆不易感动脉粥样硬化动物北京鸭载脂蛋白AI的基因。方法:分离提取北京鸭肝组织mRNA,以此为模板,反转录构建了鸭肝组织cDNA文库。利用制备的兔抗鸭载脂蛋白AI(apoAI)多抗血清为探针筛选该文库,获得10个阳性克隆,测序及序列分析。结果:包括18bp、240bp组成的5’和3’非翻译区,792bp组成的一个完整开放阅读框架,编码264个氨基酸的鸭apoAI前体,含18个氨基酸构成的信号肽、6个氨基酸的原肽片段和240肽的成熟蛋白。推译出的成熟肽与鸭apoAI氨基酸的直接测序结果完全一致。该新基因已被GenBank接受。Northern blot显示鸭apoAI mRNA不仅主要在肝和小肠组织表达;而且不同于人和哺乳类动物,亦可少量在脑、肾、肌肉组织分布。结论:结果为进一步研究不易感动脉粥样硬化动物北京鸭apoAI基因组结构、功能及其抗动脉硬化机制奠定了基础。

关键词：北京鸭载脂蛋白AI cDNA序列组织表达

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