检索结果-内蒙古大学图书馆

西北植物学报 2015年第10期35卷 2012-2017页

作者：田韦韦王彩霞田敏欧阳彤张莹中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室杭州311400

以文心兰浅绿条纹突变体为材料,分析叶片光合色素含量和组成、叶绿素合成前体物质含量以及叶绿素荧光参数的变化,观察突变体叶绿体超微结构的改变,以探寻其叶色变异的生理基础。结果表明:(1)突变体叶绿素a(Chl a)、叶绿素b(Chl b)、类... 详细信息

以文心兰浅绿条纹突变体为材料,分析叶片光合色素含量和组成、叶绿素合成前体物质含量以及叶绿素荧光参数的变化,观察突变体叶绿体超微结构的改变,以探寻其叶色变异的生理基础。结果表明:(1)突变体叶绿素a(Chl a)、叶绿素b(Chl b)、类胡萝卜素(Car)和总叶绿素(Chl)含量分别比叶色正常植株显著降低了37.1%、34.0%、30.8%和36.3%。(2)突变体叶绿素生物合成受阻于胆色素原(PBG)到尿卟啉原Ⅲ(UrogenⅢ)的反应步骤。(3)突变体叶绿体发育存在明显的缺陷,基粒数目及基粒片层的垛叠层数明显减少,嗜锇颗粒及囊泡较多。(4)突变体初始荧光(Fo)比正常植株高39%,最大荧光(Fm)、最大光化学效率(Fv/Fm)、PSⅡ有效光化学效率(Fv′/Fm′)和PSⅡ实际光化学效率(ΦPSⅡ)均显著低于正常植株,但光化学淬灭系数(qP)和非光化学淬灭系数(NPQ)与正常植株无显著差异。研究结果说明,文心兰叶绿素生物合成受阻和叶绿体结构发育不良,导致叶绿素的含量下降,致使突变体叶片呈现浅绿条纹,光能利用率降低。

关键词：文心兰浅绿条纹突变体光合色素叶绿素合成前体物质超微结构叶绿素荧光

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矮生山茶‘恨天高’GA20ox1的克隆及其对转基因烟草株形的影响

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园艺学报 2015年第8期42卷 1523-1532页

作者：王江英吴斌刘伟鑫范正琪李纪元中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室浙江富阳311400

根据山茶(Camellia japonica)同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3′,5′-RACE技术,从云南山茶(***)矮生品种‘恨天高’茎尖组织中克隆出GA20–氧化酶(GA20-oxidase,GA20ox)基因,命名为Cr GA20ox1(Gen Bank登录号:KP635268),基因全长1 178 bp,开放阅读框1 146 bp,编码381个氨基酸。实时荧光定量PCR分析发现,GA20ox1在4种不同的山茶中均得到表达,其中乔木类的浙江红山茶(***)GA20ox1表达量最高,其次是岳麓连蕊茶(***)及金花茶(***),表达量最低的为矮生品种‘恨天高’。结果表明该基因的表达量高低与测试物种的株高有关。GA20ox1在4个物种不同组织中的表达模式基本一致,且在茎尖组织中的表达量均高于叶片。Cr GA20ox1转基因烟草分析结果表明,过表达Cr GA20ox1烟草株高约为野生型的3.6倍,而沉默表达Cr GA20ox1烟草株高约为野生型的一半。

关键词：山茶云南山茶矮生基因克隆表达分析转基因烟草

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杜鹃红山茶CaCPI基因的克隆及过量表达提高烟草植株的抗虫性

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华北农学报 2015年第5期30卷 57-64页

作者：王江英范正琪殷恒福吴斌刘伟鑫李纪元中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室浙江富阳311400

绝大多数观赏山茶花属于设施栽培植物,因环境湿热易造成病虫害出现,导致观赏价值降低,影响种植效益。为了提高抗虫性,根据山茶同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3＇,5＇-RACE技术,从杜鹃红山茶嫩叶组织中克隆出半胱氨酸蛋白酶抑制... 详细信息

绝大多数观赏山茶花属于设施栽培植物,因环境湿热易造成病虫害出现,导致观赏价值降低,影响种植效益。为了提高抗虫性,根据山茶同源序列设计特异性引物,利用同源克隆和3＇,5＇-RACE技术,从杜鹃红山茶嫩叶组织中克隆出半胱氨酸蛋白酶抑制剂（Cysteine proteinase inhibitor,CPI）基因,命名为CaCPI,基因全长579 bp,开放阅读框306 bp,编码101个氨基酸,分子量为11.078 kDa,等电点p I=6.72。利用实时荧光定量PCR方法对杜鹃红山茶根、茎、叶中该基因的表达特性进行分析,结果表明,CaCPI基因在叶中的表达量较高,其次为茎,在根中表达量较低,比较显示叶的表达量分别约为茎的1.53倍,根的1.61倍。转基因烟草分析表明,过量表达CaCPI基因后,转基因烟草中目的基因表达量提高了55.84-174.83倍,并且转基因植株抗蚜虫能力获得提高,接虫5 d后植株上的蚜虫绝大多数死亡,累积死亡率约为90.75%,高达野生型的5.14倍。

关键词：杜鹃红山茶基因克隆虫害表达分析转基因烟草

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缓释肥加载对3种珍贵树种大规格容器苗生长和N、P库构建的影响

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林业科学研究 2015年第6期28卷 781-787页

作者：肖遥楚秀丽王秀花张东北叶定文周志春中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室浙江杭州311400 浙江省庆元县实验林场浙江庆元323800

针对南方红豆杉、浙江楠和浙江樟3种珍贵树种2年生大规格优质容器苗的培育需求,系统研究了缓释肥加载量对其生长、根系发育、生物量积累和分配以及N、P养分积累的影响。结果表明:(1)缓释肥加载量为1.5 kg·m-3时南方红豆杉地径达到... 详细信息

针对南方红豆杉、浙江楠和浙江樟3种珍贵树种2年生大规格优质容器苗的培育需求,系统研究了缓释肥加载量对其生长、根系发育、生物量积累和分配以及N、P养分积累的影响。结果表明:(1)缓释肥加载量为1.5 kg·m-3时南方红豆杉地径达到最大值,2.5 kg·m-3缓释肥加载量能有效促进浙江樟苗高增长。缓释肥加载对南方红豆杉根、叶和总生物量积累具有显著影响;(2)南方红豆杉和浙江樟总根长、根体积和根系表面积均在3.5 kg·m-3缓释肥加载量下达到最大,而2.5 kg·m-3缓释肥加载量则可满足浙江楠根体积和根表面积的增长;(3)3.5 kg·m-3缓释肥加载量有助于3个树种2年生容器苗养分库中N素的积累,但较低缓释肥加载量(1.5 kg·m-3)利于浙江楠P素养分库的构建。养分含量的提高在一定范围内可促进容器苗生长和养分库中养分的积累,而养分含量过高不仅抑制容器苗生长,还会引起养分在苗木体内的再分配。综合考虑,建议对南方红豆杉和浙江樟2年生容器苗采用1.67 g·株-1N素和0.74 g·株-1P素的施肥水平进行培育,而培育浙江楠2年生容器苗宜采用1.67 g·株-1N素和0.32 g·株-1P素施肥水平。

关键词：南方红豆杉浙江楠浙江樟容器苗缓释肥加载

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红松转录组SSR分析及EST-SSR标记开发

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林业科学 2015年第8期51卷 114-120页

作者：张振张含国莫迟张磊东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室哈尔滨150040 中国林业科学研究院亚热带林业研究所杭州311400

【目的】红松已开发的分子标记缺乏共显性的遗传标记，尚不能满足分子标记辅助育种的需要。利用转录组数据开发 SSR标记目前仍然是较为经济高效的 DNA分子标记开发策略，本研究利用高通量测序技术开发红松 EST-SSR标记，掌握其在转录组... 详细信息

【目的】红松已开发的分子标记缺乏共显性的遗传标记，尚不能满足分子标记辅助育种的需要。利用转录组数据开发 SSR标记目前仍然是较为经济高效的 DNA分子标记开发策略，本研究利用高通量测序技术开发红松 EST-SSR标记，掌握其在转录组序列中的分布类型及特征，为红松的 SSR多样性分析及变异分析提供基础。【方法】利用 SSR检索程序从红松转录组41476条 Unigenes中筛选得到1757个 SSR 位点，并对 SSR 位点的数量、分布特征进行统计分析。设计合成101对 SSR引物，采用琼脂糖电泳初步检查和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离检测方法确定引物的多态性，并收集扩增产物，送测序验证，最终开发出16对 SSR引物。合成6对荧光引物，采用荧光标记技术对来自黑龙江省鹤岗、林口、铁力、苇河4个种子园的53份自由授粉子代进行遗传多样性分析。【结果】基于转录组序列开发出的 EST-SSR的分布频率（ SSR 的个数与总 Unigene 的数量比）为4.24%。单、二、三核苷酸重复单元分别占总SSR的46.90%，17.12%和34.66%； SSR重复单元的重复次数分布在5～24次之间。参试的101对引物中有21对引物扩增可检测出多态性位点，占引物总数的20.8%；重测序验证，有16对引物能够扩增出目标序列。6对荧光引物共检测出18个等位基因，多态性信息量（PIC）为0.0363～0.6674，平均为0.325。【结论】红松属于基因组序列比较庞大的裸子植物，本研究可扩增出多态性位点的引物重复单元以二、三核苷酸重复为主。所研究红松种子园子代属于中等多态性水平。本研究印证了利用红松转录组数据开发 SSR标记的可行性，同时采用荧光标记技术检测红松自由授粉子代材料，为红松种质资源的多样性水平分析及变异水平的研究提供基础。

关键词：红松转录组遗传多样性

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基质配比和缓释肥添加量对浙江楠大规格容器苗质量的影响

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南京林业大学学报(自然科学版) 2015年第6期39卷 67-73页

作者：楚秀丽王秀花张东北吴小林王艺周志春中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室浙江省庆元县实验林场

以浙江楠1年生容器苗为材料,采用析因试验设计,设置基质配比(代号S)和缓释肥添加量(代号F)两因素,培育2年生容器苗,对其生长及N、P养分状况等质量因子进行分析。结果表明:基质中黄泥、泥炭比例变化对容器苗生长的影响较小,缓释肥添加量... 详细信息

以浙江楠1年生容器苗为材料,采用析因试验设计,设置基质配比(代号S)和缓释肥添加量(代号F)两因素,培育2年生容器苗,对其生长及N、P养分状况等质量因子进行分析。结果表明:基质中黄泥、泥炭比例变化对容器苗生长的影响较小,缓释肥添加量对容器苗生长的影响较明显,两因素对苗高、地径及根冠比影响皆不显著;而两因素对养分吸收的影响均显著。缓释肥加载对该容器苗生长的影响主要体现在干物质积累和根系发育方面,两者的较佳添加量分别为2.5和3.5 kg/m3。组合S1(泥炭45%+谷壳40%+黄泥15%)+F2(2.5 kg/m3)处理的单株干物质量最大,为56.48 g,其次为组合S1+F3(3.5 kg/m3)、S2(泥炭35%+谷壳40%+黄泥25%)+F2处理的,干物质量分别为54.05、52.07 g,而根系发育指标表现出组合S1+F2、S1+F3、S2+F2和S2+F3处理的较好。S2基质容器苗叶片N含量显著高于S1基质,叶片、根系P含量则在S1基质时较高。随缓释肥添加量增加,浙江楠N含量上升,P含量降低。基于以上生长及养分吸收状况,浙江楠2年生容器苗对基质配比不甚敏感,可结合生产成本和需求进行配比调整,而其对缓释肥加载要求较高,因此培育高质量容器苗应采用高N低P型缓释肥,经换算,培育浙江楠2年生容器苗,N的施用量不应低于1 850 mg/株,P的施用量不应高于350mg/株。

关键词：浙江楠大规格容器苗基质配比缓释肥加载

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木糖筛选系统对杜鹃红山茶愈伤组织诱导及生长的影响

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热带作物学报 2015年第2期36卷 321-328页

作者：王江英吴斌范正琪李纪元中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术重点实验室浙江富阳311400

在农杆菌介导的遗传转化过程中，抗生素不同程度地抑制山茶转化体的生长与分化。以木糖异构酶基因xylA为筛选标记，试图建立杜鹃红山茶（Camellia azalea）遗传体系过程中的非抗生索筛选系统。从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因，并用其... 详细信息

在农杆菌介导的遗传转化过程中，抗生素不同程度地抑制山茶转化体的生长与分化。以木糖异构酶基因xylA为筛选标记，试图建立杜鹃红山茶（Camellia azalea）遗传体系过程中的非抗生索筛选系统。从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因，并用其替换经改造的植物表达载体pCAMBIA1300中的hptⅡ基因，获得植物表达载体pCAMBIA1300-xrlA并导入根癌农杆菌EHA105中，经农杆菌介导转化烟草结果表明，xylA标记基因可以替代卡那霉素应用于烟草转化体中，且效果更优。以杜鹃红山茶带柄叶片、茎段、子叶为外植体诱导的愈伤组织，生长状态均表现良好．愈伤组织启动诱导的所需天数比对照组提前约10d，生长量为对照组的1．5～2．5倍。可以认为25g/L的木糖浓度是适合杜鹃红山茶愈伤组织诱导及生长的筛选浓度。

关键词：杜鹃红山茶愈伤组织诱导生长木糖筛选

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北美红杉在浙江建德的生长适应性研究

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江苏林业科技 2016年第5期43卷 37-40页

作者：盛卫星何贵平胡飞蔡建荣周燕张少伟徐奎源浙江省建德市林业局浙江建德311600 中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室浙江富阳311400 浙江省建德市新安江林场浙江建德311600

对浙江建德新安江林场营造的33年生北美红杉人工林进行了生长适应性研究,同时进行了树干解析、木材密度和心材比例测定。结果表明:北美红杉(组织培养苗)在浙江建德的适应性较强,33年生人工林平均树高逾22m,平均胸径逾36 cm,极显著大于... 详细信息

对浙江建德新安江林场营造的33年生北美红杉人工林进行了生长适应性研究,同时进行了树干解析、木材密度和心材比例测定。结果表明:北美红杉(组织培养苗)在浙江建德的适应性较强,33年生人工林平均树高逾22m,平均胸径逾36 cm,极显著大于同期种植的杉木砧木嫁接苗人工林和杉木人工林;33年生北美红杉组织培养苗人工林的材积连年生长量与平均生长量尚未交叉,其尚处在较快生长期,其木材密度平均为0.35 g/m3以上,而心材的比例平均为69.0%。说明北美红杉可在浙江建德及类似地区推广应用。

关键词：北美红杉生长适应性连年生长量心材比例木材密度

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基于SSR标记的板栗地方品种遗传多样性与关联分析

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园艺学报 2015年第12期42卷 2478-2488页

作者：江锡兵汤丹龚榜初赖俊声中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江省林木育种技术研究重点实验室杭州311400 庆元县林业局浙江庆元323800

采用SSR标记对山东等10个省份95个板栗地方品种的遗传多样性、群体结构进行分析,并进行板栗18个农艺性状与SSR标记关联分析。结果表明:(1)17对SSR引物在95个板栗品种中检测出44个等位位点,平均为2.6个,Shannon’s指数(I)和多态性信息含... 详细信息

采用SSR标记对山东等10个省份95个板栗地方品种的遗传多样性、群体结构进行分析,并进行板栗18个农艺性状与SSR标记关联分析。结果表明:(1)17对SSR引物在95个板栗品种中检测出44个等位位点,平均为2.6个,Shannon’s指数(I)和多态性信息含量(PIC)平均值分别为0.67和0.352,遗传多样性较为丰富;(2)山东群体和江苏群体的多态性位点比率(P)最高,均达到94.12%,观察等位基因数(Na)分别为2.53和2.18,亦高于其他群体;(3)根据Evanno等统计模型,92个板栗品种被划分为3个亚群,分别包含25、40和27个品种,且均有着复杂的地理起源,另有3个品种没有明确的类群归属;(4)利用GLM和MLM模型进行关联分析,并经过假阳性检验,发现叶柄长度和淀粉含量分别与标记Cs CAT 5和Cs CAT 22显著关联,关联系数分别为0.4027和0.1869。

关键词：板栗 SSR 遗传多样性群体结构关联分析

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濒危植物厚朴SSR引物筛选及反应体系优化

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生态与农村环境学报 2015年第4期31卷 600-607页

作者：麦静杨志玲杨旭陈慧刘起胜廖海军中国林业科学研究院亚热带林业研究所浙江富阳311400 浙江省林木育种技术研究重点实验室浙江富阳311400 湖南省安化县林业局湖南安化413500

探索适宜厚朴（Magnolia officinalis）简单重复序列（simple sequence repeat,SSR）-聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的最佳条件。在SSR引物筛选基础上,利用正交试验设计对影响PCR反应的5个因素（模板DNA、引物、Mg^... 详细信息

探索适宜厚朴（Magnolia officinalis）简单重复序列（simple sequence repeat,SSR）-聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的最佳条件。在SSR引物筛选基础上,利用正交试验设计对影响PCR反应的5个因素（模板DNA、引物、Mg^2＋、dNTPs和Taq酶催化活性浓度）进行4个水平的优化,并通过温度梯度试验优化引物退火温度。在厚朴及其近缘物种的70对引物中,筛选出13对扩增条带清晰、多态性丰富的SSR引物。PCR各因素在不同水平下对反应体系的影响由大到小依次为引物浓度、Taq酶催化活性浓度、Mg^2＋浓度、dNTPs浓度和模板DNA浓度。PCR最佳优化体系：25μL体系中,模板DNA质量浓度为2 ng·μL^-1,引物浓度为0.6μmol·L^-1,Mg^2＋浓度为2.0 mmol·L^-1,dNTPs浓度为0.5 mmol·L^-1,Taq酶催化活性浓度为0.03 U·μL^-1（1 U=16.67 nkat）。最佳扩增程序：94℃预变性4 min,94℃变性30 s,48.0-59.0℃（退火温度随引物不同而定）退火30 s,72℃延伸1 min,35个循环后72℃延伸10 min。上述结果可为利用SSR-PCR技术研究濒危厚朴群体遗传学和分子生态学提供技术参数。

关键词：厚朴(Magnolia officinalis) 简单重复序列(SSR) 引物筛选正交设计

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