检索结果-内蒙古大学图书馆

林业科学研究 2025年第2期38卷 116-126页

作者：钟姗辰张伟溪张冰玉苏晓华唐芳中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种全国重点实验室国家林业和草原局林木培育重点实验室北京100091 南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037

[目的]建立欧美杨‘渤丰3号’叶片高效的原生质体提取体系,为基因功能研究和基因编辑分子育种提供技术支撑。[方法]利用两种组分的酶解液和不同的预处理方法检测‘渤丰3号’杨叶片原生质体提取的效率和质量,优化原生质体纯化条件,以建... 详细信息

[目的]建立欧美杨‘渤丰3号’叶片高效的原生质体提取体系,为基因功能研究和基因编辑分子育种提供技术支撑。[方法]利用两种组分的酶解液和不同的预处理方法检测‘渤丰3号’杨叶片原生质体提取的效率和质量,优化原生质体纯化条件,以建立最适合‘渤丰3号’杨叶片高效的原生质体提取方法。[结果]结果表明,酶解液1(1.5%纤维素酶+0.75%离析酶+20 mmol·L^(-1)MES+10 mmol·L^(-1)KCl+0.6 mol·L^(-1)甘露醇+10 mmol·L^(-1)CaCl_(2)+1%BSA)酶解原生质体的效果优于酶解液2(0.8%纤维素酶+0.2%离析酶+5 mmol·L^(-1)MES+0.6 mol·L^(-1)甘露醇),酶解液1酶解得到的原生质体数量较多,且细胞较为完整,杂质少。酶解前的抽真空处理能略微提高原生质体的数量,但得到的原生质体与未抽真空处理的相比,细胞易碎、杂质更多;而换用更小空隙细胞筛对原生质体过滤的效果提升不明显。采用W5溶液直接洗涤可以获得最多的原生质体但有少许的杂质,在样品量有限的情况下可以使用该纯化方式。0.5 mol·L^(-1)蔗糖溶液纯化后的原生质体中杂质最少,但会损失较多的原生质体细胞;而0.75 mol·L^(-1)蔗糖溶液的纯化效果最好,既能减少杂质,又能获得较多的原生质体,适用于对原生质体纯度要求较高的情况。[结论]通过优化酶解条件、预处理步骤和纯化方法,本研究建立了欧美杨‘渤丰3号’叶片高效的原生质体提取体系。这一体系能够显著提高原生质体的提取效率和纯度,为后续的基因功能研究和分子育种实验提供了可靠的基础。

关键词：欧美杨 ‘渤丰3号’杨原生质体酶解原生质体纯化

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落叶松LkTCTP启动子的克隆及表达分析

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林业科学研究 2025年第2期38卷 48-57页

作者：黄雨芹张如鑫张馨元王俊臣齐力旺张立峰中国林业科学研究院林业研究所林木遗传育种全国重点实验室国家林业和草原局林木育种与培育重点实验室北京100091 河北农业大学生命科学学院河北保定071001 北京林业大学林学院北京100083

[目的]通过研究落叶松LkTCTP及其启动子的表达特性,揭示该基因在体细胞胚发育中的功能,评估它作为组成型启动子的可行性。[方法]利用染色体步移技术,获得LkTCTP启动子序列;采用qRT-PCR检测其在不同温度、激素处理下的表达模式;构建2.0 k... 详细信息

[目的]通过研究落叶松LkTCTP及其启动子的表达特性,揭示该基因在体细胞胚发育中的功能,评估它作为组成型启动子的可行性。[方法]利用染色体步移技术,获得LkTCTP启动子序列;采用qRT-PCR检测其在不同温度、激素处理下的表达模式;构建2.0 kb的LkTCTP启动子融合GUS载体,在模式植物及落叶松中研究其启动子活性及组织定位。[结果]获得了长度约为3.0 kb的LkTCTP启动子序列,生物信息学预测该区域含有多个与激素和抗逆相关的顺式作用元件,如AuxRR-core/TGA-element、TATC-box、TCA-element、LTR、MBS/TC-rich repeats等;高温(42、37℃)和激素(75μmol·L^(-1)ABA、50μmol·L^(-1)GA、50μmol·L^(-1)IAA、50μmol·L^(-1)SA)处理均可诱导LkTCTP上调;LkTCTP 2.0 kb启动子在拟南芥中驱动GUS呈组成型表达,也可用于目的蛋白的亚细胞定位研究;落叶松胚性细胞瞬时侵染6 d时表现出明显的GUS染色,引入P19蛋白可增加外源基因的表达强度;转基因体细胞胚苗的子叶、下胚轴以及根部均可观察到GUS染色,且子叶基部表达量明显高于叶尖,但在落叶松中的表达具有组织特异性。[结论]本文克隆了LkTCTP的启动子序列,发现其表达水平受温度、激素影响;在拟南芥幼苗及落叶松体细胞胚发育阶段均呈组成型表达,但在落叶松幼苗的表达具有组织特异性。上述结果表明LkTCTP参与落叶松体细胞胚发育,揭示了其启动子作为组成型启动子的应用潜力。本研究为开发适用于落叶松的基因工程元件提供理论依据。

关键词：落叶松 TCTP 启动子克隆体细胞胚表达分析

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基于分子标记技术的马尾松和火炬松杂交子代鉴定与抗性评价

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林业科学研究 2025年第1期38卷 181-189页

作者：李俊刘青华高凯张振丰忠平周志春金国庆中国林业科学研究院亚热带林业研究所林木遗传育种全国重点实验室全省林木育种重点实验室国家林业草原马尾松工程技术研究中心浙江杭州311400 四川农业大学四川成都611130 淳安县林业总场有限公司姥山分场浙江杭州311700

[目的]早期快速精准鉴定马尾松和火炬松杂交子代,选育高抗马尾松×火炬松家系,以期更好地防控松材线虫病。[方法]本研究以马尾松为母本,火炬松为父本进行杂交,比对火炬松和油松基因组序列设计特异性引物,筛选马尾松与火炬松种间特... 详细信息

[目的]早期快速精准鉴定马尾松和火炬松杂交子代,选育高抗马尾松×火炬松家系,以期更好地防控松材线虫病。[方法]本研究以马尾松为母本,火炬松为父本进行杂交,比对火炬松和油松基因组序列设计特异性引物,筛选马尾松与火炬松种间特异性引物,对杂交后代进行扩增条带分析,建立马尾松×火炬松快速鉴定体系,通过接种松材线虫评价筛选高抗家系。[结果]从150对引物中筛选出12对引物组合用于鉴定,特异性强,稳定性好,且扩增率高。F1代29个家系共88个样本,其中81株鉴定为杂交植株,杂种率为92.05%;F2代21个家系共688个样本,其中279株为杂交植株,杂种率为40.55%;对马尾松×火炬松F2代13个家系进行抗性评价,获得5个高抗家系。[结论]12对引物组合可作为马尾松和火炬松杂交子代真实性鉴定,筛选获得5个高抗家系,为松材线虫病防控和抗性机理研究奠定基础。

关键词：马尾松×火炬松分子标记杂种鉴定抗性育种

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桉树草甘膦耐性浓度的筛选及其生理代谢的影响

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西南林业大学学报(自然科学) 2025年第2期45卷 35-41页

作者：王学君庞贞武张双吴兵刘关君范春节东北林业大学林木遗传育种国家重点实验室黑龙江哈尔滨150040 中国林业科学研究院哈尔滨/北京150040/100091 中国林业科学研究院热带林业研究所国家林业和草原局热带林业重点实验室广东广州510520 广西八桂种苗高科技集团股份有限公司广西南宁530001

以尾巨桉DH3229为材料,使用不同浓度草甘膦进行喷施处理,观察其生长,并对过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性以及丙二醛(MDA)、脯氨酸、叶绿素含量等生理指标进行分析。结果表明:喷施稀释200倍的草甘膦(2.4 g/L... 详细信息

以尾巨桉DH3229为材料,使用不同浓度草甘膦进行喷施处理,观察其生长,并对过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性以及丙二醛(MDA)、脯氨酸、叶绿素含量等生理指标进行分析。结果表明:喷施稀释200倍的草甘膦(2.4 g/L)导致桉树叶片枯死,整株死亡,为尾巨桉DH32-29的致死浓度。在此过程中CAT、POD、SOD活性随着浓度的增加先升高后急剧降低,其中稀释600倍草甘膦(0.8 g/L)处理时CAT、POD活性最高,而在稀释400倍草甘膦(1.2 g/L)处理时SOD活性最高。MDA和脯氨酸含量则随着草甘膦浓度升高而增加,说明高浓度草甘膦对桉树幼苗伤害较大。为进一步明确草甘膦对桉树生长的影响,使用稀释200倍的草甘膦进行喷施处理,观察和分析处理不同时间对桉树生长和生理的影响,发现桉树幼苗经过16 d处理整株完全枯死。与不同浓度处理相似,随着处理时间增加,CAT、SOD、POD活性缓慢升高后急剧下降,其中CAT、SOD活性在处理8 d时最高,POD活性在处理6 d时活性最高。而叶绿素含量也随着处理时间延长不断降低。

关键词：除草剂尾巨桉过氧化氢酶过氧化物酶丙二醛

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早实核桃坚果表型和内在品质的关联分析及模型构建

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南京林业大学学报(自然科学版) 2025年第1期49卷 119-127页

作者：李洋张赟齐温玥张绥林陈永浩齐建勋张俊佩侯智霞林木资源高效生产国家重点实验室省部共建森林培育与保护教育部重点实验室北京林业大学林木遗传育种国家重点实验室国家林业和草原局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京市农林科学院林业果树研究所农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室北京市落叶果树工程技术研究中心新疆农业大学园艺学院

【目的】果实表型性状和内在品质间存在关联性。明确早实胡桃(核桃，Juglans regia)内、外在品质关系并构建关联模型，为通过表型性状初步判别果实内在品质提供依据。【方法】以北京市农林科学院核桃选种圃的早实核桃优株为研究对象，... 详细信息

【目的】果实表型性状和内在品质间存在关联性。明确早实胡桃(核桃，Juglans regia)内、外在品质关系并构建关联模型，为通过表型性状初步判别果实内在品质提供依据。【方法】以北京市农林科学院核桃选种圃的早实核桃优株为研究对象，在成熟期对坚果的9个表型性状和4个内在品质指标分别进行了测定，分析各性状的变异系数，并进行方差和相关性分析，最终通过拟合验证得到适宜的关联模型。【结果】(1)坚果13个指标的变异均达到极显著水平(P<0.01),变异系数为5.43%～28.63%,除球形度、几何平均直径、出仁率、含油率和蛋白质外，其余指标的变异系数均达到10%;(2)坚果品质指标间存在相关性。含油率与出仁率的关系最密切，与可溶性糖含量也呈极显著正相关，与淀粉、蛋白质含量关系均不显著；蛋白质、可溶性糖含量与坚果表型性状的关系类似，表现为与坚果大小、干质量及体积出仁率密切相关，与前两者呈极显著负相关，与后者呈极显著正相关，蛋白质、可溶性糖含量均与淀粉含量呈极显著负相关；淀粉含量和坚果大小、干质量呈极显著正相关，而与体积出仁率呈极显著负相关；(3)基于坚果表型性状和内在品质的相关性构建了回归模型，含油率与出仁率呈线性模型关系，可溶性糖含量与体积出仁率呈抛物线关系，淀粉含量与坚果体积呈线性模型关系，蛋白质含量与几何平均直径呈线性模型关系。通过拟合验证，模型预测值与实际值差值位于95%一致性界限(95%LOA)内的点均占总体的95%以上，模型表现出较好的拟合性。【结论】基于坚果表型与内在品质的密切关系构建了较为可靠的回归模型，通过坚果表型可初步判别内在品质优劣，用于适宜品种(系)的初步筛选。

关键词：胡桃(核桃) 表型性状内在品质品种(系)筛选模型拟合

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睡莲种质花粉形态特征

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植物研究 2025年第2期45卷 287-298页

作者：尹丹丹魏豪辉吴倩中国林业科学研究院林木遗传育种全国重点实验室北京100091 中国科学院植物研究所植物多样性与特色经济作物全国重点实验室北京100093 国家植物园北京100093 湖南农业大学园艺学院长沙410128

为探讨睡莲属(Nymphaea)花粉形态特征及其在分类学的意义,以睡莲属5个亚属和2个跨亚属共113个种或品种花粉为材料,使用扫描电镜对其花粉形态进行观察研究。结果表明:(1)睡莲属植物花粉粒均为单粒,辐射对称,中等大小(10.05~37.04)μm... 详细信息

为探讨睡莲属(Nymphaea)花粉形态特征及其在分类学的意义,以睡莲属5个亚属和2个跨亚属共113个种或品种花粉为材料,使用扫描电镜对其花粉形态进行观察研究。结果表明:(1)睡莲属植物花粉粒均为单粒,辐射对称,中等大小(10.05~37.04)μm×(21.96~64.83)μm。(2)86份睡莲花粉萌发沟为赤道环槽,23份为远极环槽,4份为远极单槽。(3)花粉外壁纹饰包括平滑型、微疣、粗糙型、瘤状和棒状纹饰型、具小窝型。(4)113份睡莲种质共聚为5个类群,其中广温带亚属萌发沟以远极环槽为主,外壁纹饰以瘤状和棒状为主,可以区别于其他亚属。研究认为,睡莲属不同亚属和跨亚属植物花粉大小、萌发沟类型、外壁纹饰存在一定差异,可以作为分类的辅助参考指标,为睡莲种质亲缘关系及系统发育研究提供孢粉学依据。

关键词：睡莲属花粉微形态扫描电镜聚类分析

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桉树假单胞菌DF15对核桃黄曲霉的抑菌作用研究

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林业科学研究 2025年第2期38卷 165-172页

作者：昝译博代雅苹陆斌熊新武李旭吴迪牛犇裴东林木遗传育种全国重点实验室东北林业大学黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学生命科学学院黑龙江哈尔滨150040 林木遗传育种全国重点实验室国家林业和草原局林木培育重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091 云南省林业和草原科学院云南昆明650204 中国农业科学院农产品加工研究所北京100193

[目的]筛选高效防控核桃黄曲霉毒素污染的生防细菌,实现核桃黄曲霉毒素污染绿色、低成本防控。[方法]利用核桃果仁筛选对黄曲霉有拮抗能力的生防细菌,对生防细菌进行形态学观察、分类学鉴定和生理生化特征检验,利用高效液相色谱分析该... 详细信息

[目的]筛选高效防控核桃黄曲霉毒素污染的生防细菌,实现核桃黄曲霉毒素污染绿色、低成本防控。[方法]利用核桃果仁筛选对黄曲霉有拮抗能力的生防细菌,对生防细菌进行形态学观察、分类学鉴定和生理生化特征检验,利用高效液相色谱分析该细菌对黄曲霉毒素的减毒效果。[结果]本研究从核桃果仁表面分离获得197株共生细菌,经过筛选获得38株具有拮抗黄曲霉能力的生防细菌,其中菌株DF15对核桃黄曲霉拮抗效果最佳。经分类学鉴定,确定菌株DF15为一株桉树假单胞菌(Pseudomonas eucalypticola)。该菌株能够破坏黄曲霉菌丝形态,使其呈现形态扭曲、断裂内陷以及表面毛躁粗糙的状态。菌株DF15对黄曲霉生长抑制率达到90.0%,经其处理后的核桃样品无黄曲霉素检出。此外,DF15发酵菌液能够显著抑制黄曲霉生长,但其发酵上清液对黄曲霉无明显抑制效果;该菌株具有定殖在核桃果仁表面的能力,且定殖量在第5 d时达到最大值,初步证实DF15在核桃上的有效定殖是抑制黄曲霉的关键。[结论]桉树假单胞菌DF15对核桃黄曲霉污染的防治效果显著,为核桃黄曲霉毒素污染的生物减毒提供了菌种资源,也为核桃黄曲霉毒素微生物减毒剂的研发提供理论支撑。

关键词：生物防治黄曲霉毒素桉树假单胞菌核桃定殖

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植物SPL转录因子的生物学功能研究进展

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世界林业研究 2025年第1期 23-30页

作者：张耀丹郑广顺王军辉赵鲲翟文继麻文俊张蔷王飞李少锋林木遗传育种全国重点实验室/中国林业科学研究院华北林业实验中心/北京九龙山暖温带森林国家长期科研基地中国林业科学研究院林业研究所/国家林业和草原局林木培育重点实验室/国家林木种质资源平台林木遗传育种全国重点实验室/中国林业科学研究院洛阳市农林科学院南阳市林业科学研究院

SPL (SQUAMOSA promoter-binding protein-like)是植物特有的一类转录因子，其编码蛋白均含有一个高度保守的SBP (squamosa promoter binding)结构域，能与下游基因结合，调控靶基因表达。多数SPL基因的转录受microRNAs剪切调控，这一... 详细信息

SPL (SQUAMOSA promoter-binding protein-like)是植物特有的一类转录因子，其编码蛋白均含有一个高度保守的SBP (squamosa promoter binding)结构域，能与下游基因结合，调控靶基因表达。多数SPL基因的转录受microRNAs剪切调控，这一机制为其表达的精细调控提供了重要手段。SPL基因在植物的多个生物学过程中发挥着至关重要的作用，包括植物根系生长、形态建成、花器官形成和分化、花期调控、果实发育和成熟以及木质部发育等。SPL调控植物激素信号转导，参与植物响应生物与非生物胁迫。SPL基因与多条信号转导途径相互作用，共同在植物生长发育过程中发挥关键作用。文中从SPL转录因子的研究概况、表达调控模式以及生物学功能等方面进行综述，并对SPL的研究前景进行展望，为进一步进行SPL转录因子的相关研究提供参考。

关键词： SPL 转录因子表达调控植物生长发育

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毛白杨GM107再生体系和遗传转化体系的建立

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分子植物育种 2025年第6期 1888-1896页

作者：黄赛高凯苗得雨安新民北京林业大学生物科学与技术学院林木育种国家工程实验室林木、花卉遗传育种教育部重点实验室林木花卉育种生物工程国家林业和草原局重点实验室中国林业科学研究院亚热带林业研究所

本研究以毛白杨优良无性系GM107为试验材料，通过带芽茎段外植体消毒、接种生根获得无菌组培苗，利用无菌苗叶片建立了高频率的再生体系，筛选出最佳叶片分化生芽培养基为MS+TDZ 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+BA 0.5 mg/L，分化生芽率约为90%... 详细信息

本研究以毛白杨优良无性系GM107为试验材料，通过带芽茎段外植体消毒、接种生根获得无菌组培苗，利用无菌苗叶片建立了高频率的再生体系，筛选出最佳叶片分化生芽培养基为MS+TDZ 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L+BA 0.5 mg/L，分化生芽率约为90%，每小圆片生芽数可达20个。利用农杆菌介导的叶盘转化法，建立了高效的遗传转化体系，并确定了毛白杨叶片不定芽诱导卡那霉素筛选浓度为100 mg/L，不定芽生根筛选浓度为50 mg/L。Cef 250 mg/L+Tim 250 mg/L+Car 250 mg/L组合可作为筛选培养基的最佳抑菌抗生素组合。在农杆菌侵染前，对GM107小圆片外植体进行7 d预培养为宜。利用已经构建的pCAMBIA2300-VvMYBA1载体，以最佳组合进行遗传转化，获得102个转化株系，通过PCR检测，获得33个阳性株系，阳性植株达到32.35%。本研究为毛白杨基因功能研究提供了高效的遗传转化平台。

关键词：毛白杨再生体系遗传转化根瘤农杆菌

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干旱和高盐胁迫下钙离子依赖核酸酶基因CDD对银腺杨84K生长发育的影响

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林业科学 2019年第2期55卷 33-40页

作者：江成周厚君赵岩秋何辉楚立威宋学勤卢孟柱林木遗传育种国家重点实验室中国林业科学研究院林业研究所北京100091

【目的】钙离子依赖型脱氧核糖核酸酶(CDD)具有消化单链和双链DNA的活性,但CDD对水分等胁迫的响应尚未明确。本研究以CDD转基因银腺杨84K为材料,分析在干旱和高盐胁迫条件下CDD在84K杨生长中的作用,探讨CDD对干旱和高盐胁迫的响应,可为... 详细信息

【目的】钙离子依赖型脱氧核糖核酸酶(CDD)具有消化单链和双链DNA的活性,但CDD对水分等胁迫的响应尚未明确。本研究以CDD转基因银腺杨84K为材料,分析在干旱和高盐胁迫条件下CDD在84K杨生长中的作用,探讨CDD对干旱和高盐胁迫的响应,可为揭示杨树CDD基因在抗逆中的作用提供参考。【方法】以过表达PtoCDD和敲除PagCDD转基因银腺杨84K组培苗为材料,对其进行模拟干旱和高盐处理,分析其受干旱、高盐非生物胁迫条件下的表型变化,包括植株高、不定根数目。通过切片观察,分析不同处理条件下茎段木质部大小变化。利用qRT-PCR分析在不同处理条件下CDD转基因植株中水通道蛋白基因(PIP)的表达。【结果】与84K对照相比,在正常条件下CDD转基因植株株高没有显著差异,而干旱、高盐条件下CDD缺失突变体植株显著高于对照和CDD过表达植株,而过表达植株极显著低于对照及突变体。说明CDD过表达增强了杨树对干旱、高盐的敏感性,而敲除CDD后降低了杨树对干旱、高盐的敏感性。组织切片分析显示,在正常条件下木质部细胞层数呈现CDD过表达>对照84K>CDD缺失突变体,而在干旱、高盐条件下木质部细胞层数为CDD过表达<对照84K 对照84K>CDD过表达,且差异均达到显著水平或极显著水平,而干旱条件下差异不显著。表明CDD差异表达引起的不定根数目上的变化在一定程度上反映了杨树对干旱和高盐胁迫的敏感性。qRT-PCR分析显示,CDD过表达和CDD缺失突变体植株中均表现出多个PIP基因诱导高表达。表明CDD的表达变化可引起PIP基因不同成员的诱导表达,从而改变杨树的水分利用。【结论】杨树CDD的缺失或过量表达引起不定根数目的变化,同时改变了杨树的水分利用,影响对干旱和高盐胁迫的敏感性,导致胁迫下生长的变化。上述结果表明CDD参与杨树响应干旱和高盐胁迫过程。

关键词： CDD 银腺杨84K 干旱胁迫盐胁迫木质部不定根

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