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生物多样性 2016年第2期24卷 205-215页

作者：于少帅徐启聪林彩丽王圣洁田国忠中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京100091 自然农法国际研究开发中心日本国松本市3901401

植原体是引起众多植物病害的一类重要的无细胞壁的原核致病菌,其寄主种类多、危害面积广,对经济、环境等影响严重。大量研究表明植原体存在丰富的遗传多样性。本文就植原体遗传多样性研究现状作一概要评述,并对植原体遗传变异的研究技... 详细信息

植原体是引起众多植物病害的一类重要的无细胞壁的原核致病菌,其寄主种类多、危害面积广,对经济、环境等影响严重。大量研究表明植原体存在丰富的遗传多样性。本文就植原体遗传多样性研究现状作一概要评述,并对植原体遗传变异的研究技术、产生机制、与致病性关系等今后可能的研究方向作一展望。对已完成的5个植原体全基因组序列分析发现,它们在大小、结构和功能等方面皆存在显著差异,缺少很多标准代谢所需的基因。不同植原体中质粒的数量、大小和功能等也存在一定差异。植原体含有2个核糖体RNA编码基因,其序列在不同株系中的变异奠定了现今植原体分类鉴定的基础。对植原体蛋白编码基因如核糖体蛋白编码基因(rp)、蛋白延伸因子基因(tuf、fus A)、转运蛋白基因(sec Y、sec A)、效应子及非编码区序列如启动子、假基因等的深入研究可进一步揭示植原体更丰富的遗传变异特征。由于植原体分离培养困难,人们对其形态特征、生理代谢等了解甚少,因而全基因组测序、多位点序列分析等现代分子生物学技术将会成为植原体遗传变异研究的主要手段。植原体遗传多样性研究进展有助于从分子水平上系统地阐明植原体遗传变异规律、系统进化特征及其与寄主(植物和昆虫)、生态环境间的互作和适应关系,并产生新的认识。这对于提高植原体的分类鉴定、致病机制、流行预测及病害防治等研究水平具有重要的作用和意义。

关键词：植原体遗传变异系统进化分类鉴定植物(介体昆虫)–植原体互作多位点序列分析(MLSA)

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青海湖斑头雁粪便细菌分离鉴定与耐药性分析

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动物学杂志 2016年第4期51卷 590-598页

作者：陈卓罗静张国钢何宏轩中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所全国鸟类环志中心国家林业局森林保护学重点实验室北京100091 中国科学院动物研究所动物生态与保护学重点实验室野生动物疫病研究中心北京100101

为了解斑头雁(Anser indicus)粪便中携带细菌多样性及其耐药情况,对青海湖斑头雁粪便细菌进行分离培养、生化鉴定、16S r RNA基因PCR扩增和序列分析,并进行细菌耐药性试验。结果显示:从30份斑头雁粪便中共分离到123株细菌,可分为10类细... 详细信息

为了解斑头雁(Anser indicus)粪便中携带细菌多样性及其耐药情况,对青海湖斑头雁粪便细菌进行分离培养、生化鉴定、16S r RNA基因PCR扩增和序列分析,并进行细菌耐药性试验。结果显示:从30份斑头雁粪便中共分离到123株细菌,可分为10类细菌,分别从每类细菌中挑出一株代表性菌株进行鉴定,鉴定结果显示这10株细菌分别为大肠埃希菌(Escherichia coli)、水生拉恩氏菌(Rahnella aquatilis)、蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtii)、枯草芽孢杆菌(Bacillus sublitis)、柠檬节杆菌(Arthrobacter citreus)、腐败希瓦氏菌(Shewanella pulrefaciens)、河生肠杆菌(Enterobacter amnigenus)、成团泛菌(Pantoea agglomerans)、杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)和产酸克雷伯菌(Klebsiella oxytoca)。选取氨苄西林、哌拉西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢唑林、头孢他啶、氨曲南、庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、四环素、氯霉素、环丙沙星、诺氟沙星药敏纸片,对分离菌株进行耐药性分析,发现水生拉恩菌、杀鲑气单胞菌和成团泛菌表现为多重耐药性;其他细菌对氨苄西林和四环素有一定的耐药性,对其余受试药物都有不同程度的敏感性。野鸟携带耐药性的条件致病菌,可能会对野生动物健康造成威胁,本研究对斑头雁粪便中携带的条件致病菌及其耐药性进行探究,以期为野鸟携带细菌的耐药机制提供研究理论依据,同时也对野生动物疫病的监测与防控有重要意义。

关键词：斑头雁粪便细菌分离鉴定耐药性

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中国落叶松八齿小蠹伴生粘束孢属真菌的鉴定及其系统发育分析

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林业科学 2016年第8期52卷 76-87页

作者：刘学伟吕全孟贤静白雪松黄国军李秀玲张星耀国家林业局森林保护学重点实验室中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所北京100091 内蒙古赤峰市克什克腾旗广兴林场克什克腾025364 内蒙古赤峰市万方物业管理有限责任公司赤峰024000 辽宁省抚顺市抚顺县温道林场抚顺113113

【目的】对我国东北异域分布的3种落叶松林内齿小蠹粘束孢属(微囊菌目:粘束孢科)伴生真菌进行系统调查和分析,为研究其致病机制奠定基础,为控制森林病虫害提供理论依据。【方法】对异域分布的长白落叶松和华北落叶松八齿小蠹(鞘翅目:小... 详细信息

【目的】对我国东北异域分布的3种落叶松林内齿小蠹粘束孢属(微囊菌目:粘束孢科)伴生真菌进行系统调查和分析,为研究其致病机制奠定基础,为控制森林病虫害提供理论依据。【方法】对异域分布的长白落叶松和华北落叶松八齿小蠹(鞘翅目:小蠹科)的虫体和坑道组织进行伴生真菌的分离纯化,进行生理学特性、菌落特征、微观形态学的观察,以及基于rRNA-ITS和TEF-1α多位点DNA序列的系统发育进行分析。【结果】落叶松粘束孢和黑梗粘束孢2种粘束孢属真菌与我国的落叶松八齿小蠹伴生,其中落叶松粘束孢为中国新纪录种。落叶松粘束孢和黑梗粘束孢都是首次从亚洲落叶松八齿小蠹上分离到,与落叶松八齿小蠹形成新的小蠹虫-真菌伴生关系。在亚洲落叶松八齿小蠹和中国落叶松坑道中发现了落叶松粘束孢,不仅丰富了菌株数量,也扩大了落叶松粘束孢的分布范围,同时也增加了中国地区粘束孢属真菌的种类。目前黑梗粘束孢仅在中国云南松梢木蠹象(鞘翅目:象甲科)上分离得到,本研究不仅增加了黑梗粘束孢的寄主种类,也扩大了寄主的分布范围。该种在我国的分布跨度区域巨大,可能是一个广泛分布的种。【结论】多基因序列特征表明来自云南松梢木蠹象和亚洲落叶松八齿小蠹2种不同生态位的黑梗粘束孢存在种下分化现象,进一步支持了在不同地理(或寄主)种群中发现伴生菌存在适应寄主植物和小蠹虫的分化潜力这一结论。落叶松粘束孢和黑梗粘束孢都是首次从亚洲落叶松八齿小蠹上分离到,为进一步研究其与落叶松八齿小蠹间的伴生关系,以及在危害寄主方面的协同作用提供良好的模式材料。

关键词：落叶松八齿小蠹落叶松粘束孢黑梗粘束孢新纪录种伴生关系

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杨树SAMT基因超表达载体的构建及遗传转化

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农业生物技术学报 2016年第11期24卷 1709-1717页

作者：董慧霞理永霞吕全贾秀贞张星耀中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所/国家林业局森林保护学重点实验室河南师范大学生命科学学院中国林业科学研究院林业新技术研究所南京林业大学南方现代林业协同创新中心

一年生草本植物受到病原菌侵染时,体内的水杨酸甲基转移酶基因(salicylic acid methyltransferase,SAMT)能将植物侵染部位产生的水杨酸(salicylic acid,SA)转化为水杨酸甲酯(methyl salicylate,Me SA),在SA信号转导和植物系统获得抗性(s... 详细信息

一年生草本植物受到病原菌侵染时,体内的水杨酸甲基转移酶基因(salicylic acid methyltransferase,SAMT)能将植物侵染部位产生的水杨酸(salicylic acid,SA)转化为水杨酸甲酯(methyl salicylate,Me SA),在SA信号转导和植物系统获得抗性(systemic acquired resistance,SAR)中起着重要作用。而多年生木本植物中SAMT基因的功能还有待进一步验证。本研究根据毛果杨(Populus trichocarpa)SAMT基因序列,设计了84K杨SAMT引物,利用Gateway克隆技术,在BP反应酶作用下,使带att B接头的SAMT基因全长开放阅读框与入门载体p DONRTM222进行BP重组反应,将目的基因转入入门载体;转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞DH5α后提取的质粒用MLUⅠ进行酶切,然后在LR酶作用下与超表达载体p MDC32进行LR重组反应,将SAMT转入表达载体,成功构建了SAMT的超表达载体。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化,获得了SAMT超表达的84K杨转基因植株。为今后研究该基因在杨树抗溃疡病中的功能以及杨树在获得SAR和其他方面的作用提供了基础资料,同时也为研究该基因在其他多年生木本植物中的功能提供参考。

关键词： 84K杨水杨酸甲基转移酶基因(SAMT) 超表达载体构建遗传转化

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线虫蛔甙(Ascarosides)信息素研究进展

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生态学报 2016年第6期36卷 1501-1514页

作者：魏亚楠党政武陈立方宇凌孔祥波胡春祥赵莉蔺东北林业大学林学院哈尔滨150040 中国科学院动物研究所农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室北京100101 商洛市林木病虫防治检疫站商洛726000 中国林业科学研究院森林生态环境与环保研究所国家林业局森林保护重点实验室北京100091

大多数生物通过信息素系统来对环境进行感应和个体间交流,并指导其行为、发育和生理代谢。线虫是在地球上生存策略最多样的动物之一,但其信息素系统却鲜为人知。近年来发现一组称为蛔甙(ascarosides)的线虫种内化学信号物质,在秀丽隐杆... 详细信息

大多数生物通过信息素系统来对环境进行感应和个体间交流,并指导其行为、发育和生理代谢。线虫是在地球上生存策略最多样的动物之一,但其信息素系统却鲜为人知。近年来发现一组称为蛔甙(ascarosides)的线虫种内化学信号物质,在秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)的交配、聚集和滞育等行为及发育调控方面起着至关重要的作用。随后发现蛔甙在线虫界广泛存在。对蛔甙进行深入全面的了解有利于促进线虫化学生态学学科发展,并填补传统化学生态学中关于化学信息对生物发育调控的知识。因此,对近年来蛔甙的最新研究进展进行了系统总结,包括蛔甙结构与鉴定、组成和功能、生物合成与代谢调控、化学感受信号途径及信息调节模式,从而更好地理解化感信号对线虫乃至高等生物的行为、发育、新陈代谢及衰老的调控机制,为研究生命科学中信息素调控理论提供新的参考。

关键词：蛔甙秀丽隐杆线虫寄生线虫信息素

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诱捕栗山天牛成虫的食物源引诱剂研究

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环境昆虫学报 2016年第3期38卷 595-601页

作者：唐艳龙魏可杨忠岐姜静王小艺吕军高纯中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京100091 辽宁省宽甸满族自治县森林病虫害防治站辽宁宽甸118200

为探索诱杀栗山天牛Massicus raddei(Blessig)成虫的新技术,本文研究了糖醋酒液对栗山天牛成虫的引诱效果。结果表明:糖醋酒液对栗山天牛成虫有较强的引诱作用,天牛羽化期内共诱捕到成虫6427头,平均每个引诱点引诱到107头,是林间寄主树... 详细信息

为探索诱杀栗山天牛Massicus raddei(Blessig)成虫的新技术,本文研究了糖醋酒液对栗山天牛成虫的引诱效果。结果表明:糖醋酒液对栗山天牛成虫有较强的引诱作用,天牛羽化期内共诱捕到成虫6427头,平均每个引诱点引诱到107头,是林间寄主树单株虫口密度的5.15倍。诱捕到的雌雄成虫数量基本一致,且诱捕到的雌虫怀卵量只比处女虫略低,表明诱捕到的雌虫尚未产卵或者产卵较少。糖醋酒液引诱剂最佳配比为糖∶醋∶乙醇∶蒸馏水=30∶20∶10∶100,最佳引诱时间是19∶00-21∶00。添加了菊酯类杀虫剂的引诱剂对栗山天牛成虫的引诱效果明显下降,且成虫对该引诱剂的取食时间明显缩短,取食该引诱剂的成虫80%在2 h内即死亡,24 h后死亡率达100%。

关键词：栗山天牛成虫引诱剂

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江西省鸟类种类的最新统计与分析

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野生动物学报 2016年第1期37卷 39-45页

作者：曾南京朱奇俞长好钱法文江西鄱阳湖国家级自然保护区管理局南昌330038 江西省林业厅南昌330038 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京100091

根据江西省多年的鸟类调查与监测工作以及多个自然保护区和鸟类环志站等资料,结合现有的各种文献,依据郑光美院士《中国鸟类分类与分布名录(第二版)》的分类系统,对江西省有记录的鸟类种类进行了梳理,特别是对同种异名和中文名不统一的... 详细信息

根据江西省多年的鸟类调查与监测工作以及多个自然保护区和鸟类环志站等资料,结合现有的各种文献,依据郑光美院士《中国鸟类分类与分布名录(第二版)》的分类系统,对江西省有记录的鸟类种类进行了梳理,特别是对同种异名和中文名不统一的情况进行了归纳和整理,共整理出同种异名种类17种,托丁名相同但中文名不同的种类63种。研究结果表明,到目前为止,江西省分布的鸟类有542种,占我国鸟类总种数的39.53%,其中国家Ⅰ级重点保护鸟类有13种,国家Ⅱ级重点保护鸟类有77种,江西省重点保护鸟类有93种。

关键词：鸟类江西物种名录

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泡桐丛枝和枣疯病植原体tuf基因上游序列结构、功能和遗传变异比较分析

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微生物学通报 2016年第5期43卷 1060-1069页

作者：于少帅林彩丽潘皎任争光朴春根汪来发郭民伟田国忠中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京100091 南开大学生命科学学院天津300071 北京农学院植物科学技术学院北京102206

【目的】探究泡桐丛枝和枣疯病植原体tuf基因上游序列结构、功能差异及其遗传多样性。【方法】利用热不对称交错式PCR(TAIL-PCR)扩增枣疯病植原体tuf基因上游未知序列,利用启动子探针载体pSUPV4构建了泡桐丛枝和枣疯病植原体tuf基因上... 详细信息

【目的】探究泡桐丛枝和枣疯病植原体tuf基因上游序列结构、功能差异及其遗传多样性。【方法】利用热不对称交错式PCR(TAIL-PCR)扩增枣疯病植原体tuf基因上游未知序列,利用启动子探针载体pSUPV4构建了泡桐丛枝和枣疯病植原体tuf基因上游序列的大肠杆菌异源表达体系,分析泡桐丛枝、苦楝丛枝、莴苣黄化、桑萎缩、长春花绿变等16SrI组和枣疯病、樱桃致死黄化、重阳木丛枝等16SrV组株系tuf基因上游调控序列的遗传变异特征和启动子活性。【结果】泡桐丛枝等16SrI组植原体株系tuf基因和其上游fus A基因之间的间区序列长129-130 bp,预测有完整的启动子保守结构。泡桐丛枝植原体tuf基因上游130 bp片段具有启动子活性,此间区序列在5种35株16SrI组株系中存在4种变异类型;枣疯病植原体等16SrV组株系fusA和tuf基因间区长53-54 bp,未预测到完整启动子结构。枣疯病植原体tuf基因上游144 bp和346 bp片段均未检测到启动子活性,fus A和tuf基因间区序列在3种20株16SrV组株系中存在2种变异类型。fus A-tuf基因间区序列相对保守,基于此序列构建的进化树可清晰区分不同组别的植原体株系。【结论】研究方法和结果为深入研究植原体基因表达与调控、揭示植原体生长繁殖规律及其致病机理等奠定了良好的基础。

关键词：植原体启动子 TAIL-PCR 上游序列遗传变异

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利用管氏肿腿蜂防治松幽天牛幼虫试验

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中国森林病虫 2016年第1期35卷 34-37页

作者：李登泰何小丽熊建宏唐艳龙高尚坤贵州省仁怀市林业局贵州仁怀564500 江西省信丰县林业局江西信丰341600 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所/国家林业局森林保护学重点实验室北京100091

松幽天牛Asemum amurense Kraatz是典型的次期性蛀干蛀根害虫,也是松材线虫的传播媒介昆虫之一,严重威胁着林间长势衰弱的马尾松Pinus massoniana。本研究调查松幽天牛的危害情况,按照1∶1,1∶2,1∶3,1∶4的虫蜂比于室内外分别接种管氏... 详细信息

松幽天牛Asemum amurense Kraatz是典型的次期性蛀干蛀根害虫,也是松材线虫的传播媒介昆虫之一,严重威胁着林间长势衰弱的马尾松Pinus massoniana。本研究调查松幽天牛的危害情况,按照1∶1,1∶2,1∶3,1∶4的虫蜂比于室内外分别接种管氏肿腿蜂Sclerodermus guani Xiao et Wu防治松幽天牛低龄幼虫,并筛选接种最适虫蜂比例。结果表明:松幽天牛主要危害衰弱木、松褐天牛Monochamus alternatus危害木和枯死木,平均虫口数量分别为27,27,70头/株,最多为152头/株,有虫株率为11.99%。室内试验中按虫蜂比为1∶3接种时,寄生成功率最高为60.00%。林间试验中按虫蜂比1∶4接种时,防治效果最好,校正虫口减退率为56.47%。

关键词：松幽天牛管氏肿腿蜂生物防治

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美洲雁中鸭疫里默菌的分离鉴定及耐药性分析

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中国兽医杂志 2016年第4期52卷 99-101页

作者：陈卓罗静苏文张国钢何宏轩中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所全国鸟类环志中心国家林业局森林保护学重点实验室北京海淀100091 中国科学院动物研究所动物生态与保护学重点实验室野生动物疫病研究中心北京朝阳100101

从北京密云某美洲雁养殖场的发病美洲雁的肝脏中分离病原菌,并对病原菌进行染色镜检、生化检测及PCR检测,鉴定出1株鸭疫里默菌,对其进行耐药性分析,结果显示,该菌株对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻吩、头孢噻肟、头孢唑啉、庆大霉素、氨苄... 详细信息

从北京密云某美洲雁养殖场的发病美洲雁的肝脏中分离病原菌,并对病原菌进行染色镜检、生化检测及PCR检测,鉴定出1株鸭疫里默菌,对其进行耐药性分析,结果显示,该菌株对阿莫西林/克拉维酸、头孢噻吩、头孢噻肟、头孢唑啉、庆大霉素、氨苄西林高敏;对氯霉素、环丙沙星和阿米卡星中敏;对卡那霉素、四环素和复方新诺明耐药。

关键词：美洲雁鸭疫里默菌病分离鉴定耐药性

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