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中国植物病理学会第九届全国会员代表大会暨2010年学术年会

作者：田国忠赵文军朱水芳林彩丽宋传生牟海青胡佳续中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所

本文就当前植原体病害的诊断、病原检测和鉴定的技术与方法进行了系统的评估和分析,主要包括病害症状鉴别诊断、电子显微镜观察病原形态、抗生素处理、嫁接传病和介体昆虫传病、组织学和生物化学技术、植原体抗体制备与血清学测定技术...

本文就当前植原体病害的诊断、病原检测和鉴定的技术与方法进行了系统的评估和分析,主要包括病害症状鉴别诊断、电子显微镜观察病原形态、抗生素处理、嫁接传病和介体昆虫传病、组织学和生物化学技术、植原体抗体制备与血清学测定技术、核酸杂交技术、植原体基因扩增和序列分析技术等内容。并结合我国关于植原体病害的相关研究存在的问题及自身研究体会提出了我们的一些看法和建议。

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用泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-10RF4蛋白抗血清测定几种植原体的血清学关系

用泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-10RF4蛋白抗血清测定几种植原体的...

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中国植物病理学会第九届全国会员代表大会暨2010年学术年会

作者：宋传生林彩丽田国忠赵文军朱水芳胡佳续牟海青中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所

植原体(phytoplasma)是一类无细胞壁的原核微生物,属柔膜菌纲(Mollicutes),寄生于植物韧皮部筛管内,主要由叶蝉等刺吸式昆虫传播。目前国际上对植原体鉴定分类的重要依据是保守基因16SrDNA。Lee等(2000)和Wei等(2007)根据16SrDNA的PCR产物

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植原体病害诊断与病原检测和鉴定技术与方法评价

植原体病害诊断与病原检测和鉴定技术与方法评价

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中国植物病理学会2010年学术年会

作者：田国忠赵文军朱水芳林彩丽宋传生牟海青胡佳续中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京100193 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所北京100029

本文就当前植原体病害的诊断、病原检测和鉴定的技术与方法进行了系统的评估和分析,主要包括病害症状鉴别诊断、电子显微镜观察病原形态、抗生素处理、嫁接传病和介体昆虫传病、组织学和生物化学技术、植原体抗体制备与血清学测定技术... 详细信息

本文就当前植原体病害的诊断、病原检测和鉴定的技术与方法进行了系统的评估和分析,主要包括病害症状鉴别诊断、电子显微镜观察病原形态、抗生素处理、嫁接传病和介体昆虫传病、组织学和生物化学技术、植原体抗体制备与血清学测定技术、核酸杂交技术、植原体基因扩增和序列分析技术等内容.指出植原体的鉴定方法虽然与分类有相似之处，但要求有所不同。对一组植原体的鉴定必需以这些植原体已有的分类系统为前提。目前来看，植原体鉴定的有效方法是对其保守基因进行扩增、克隆和序列分析，确定其分组和系统发育关系。但血清学、寄主范围、传病介体专化性也是分类鉴定的重要依据和必要补充。虽然根据16Sr DNA为主要依据进行的植原体分类和候选种的命名尝试，己有重大突破，但与其他可培养的和有细胞壁类细菌的分类鉴定相比还很不完善;我国在这方面还要走更长的路。

关键词：植原体病害病原检测鉴定技术评价体系

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用泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-1 0RF4蛋白抗血清测定几种植原体的血清学关系

用泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-1 0RF4蛋白抗血清测定几种植原体的...

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中国植物病理学会2010年学术年会

作者：宋传生林彩丽田国忠赵文军朱水芳胡佳续牟海青中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京 100091 中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所北京 100029

植原体(phytoplasma)是一类无细胞壁的原核微生物,属柔膜菌纲(Mollicutes),寄生于植物韧皮部筛管内,主要由叶蝉等刺吸式昆虫传播.目前国际上对植原体鉴定分类的重要依据是保守基因***等(2000)和Wei等(2007)根据16SrDNA的PCR产物限制性... 详细信息

植原体(phytoplasma)是一类无细胞壁的原核微生物,属柔膜菌纲(Mollicutes),寄生于植物韧皮部筛管内,主要由叶蝉等刺吸式昆虫传播.目前国际上对植原体鉴定分类的重要依据是保守基因***等(2000)和Wei等(2007)根据16SrDNA的PCR产物限制性酶切片段长度多态性(RFLP)将植原体分为14个组,泡桐丛枝植原体被划分于16SrⅠ组,即翠菊黄化植原体组.Lin等(2009)从泡桐丛枝植原体南阳株系中克隆到两个质粒pPaWBNy-1和pPaWBNy-2,其中对pPaWBNy-1 ORF4编码的蛋白进行了原核表达并制备抗血清.本实验以感染植原体的丛枝泡桐和健康植物材料为对照，应用pPaWBNy-1 ORF4蛋白抗血清分别对16SrⅠ组长春花绿变植原体及其他组的植原体如板栗黄化皱缩植原体(16SrXIX),枣疯病植原体(16SrV)、樱桃致死黄化植原体(16SrV)进行Western blot检测和间接免疫荧光显微镜观察。Western blot结果表明，在从枝泡桐中检测到大小为34kDa的特异性目的条带，并在丛枝泡桐和健康泡桐中都检测到一条90kDa较弱的非特异性条带;而在海南绿变长春花植株中检测到两条分别为49kDa和45kDa，且明显比泡桐丛枝弱的条带，在枣疯病材料中检测到45kDa很弱的非特异性条带;板栗黄化皱缩、樱桃致死黄化和其他健康材料中没有检测到任何条带。在间接免疫荧光显微镜检测中，除丛枝泡桐切片外，其余材料在韧皮部均无荧光亮斑出现。

关键词：泡桐丛枝植原体原核表达载体蛋白结构蛋白血清学

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定量分析红脂大小蠹后肠挥发物释放量的变化

定量分析红脂大小蠹后肠挥发物释放量的变化

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第三届中国森林保护学术大会

作者：陈海波张真王鸿斌孔祥波中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室黑龙江省农垦总局八五五农场

外来入侵林业害虫红脂大小蠹,是危害我国林业的重要害虫之一,已经危害油松600万株以上。分析林间该害虫在不同寄主和危害阶段上后肠挥发性成分的释放量,结合各危害阶段红脂大小蠹的种群特点讨论各挥发性成分的作用。将为进一步加强对该... 详细信息

外来入侵林业害虫红脂大小蠹,是危害我国林业的重要害虫之一,已经危害油松600万株以上。分析林间该害虫在不同寄主和危害阶段上后肠挥发性成分的释放量,结合各危害阶段红脂大小蠹的种群特点讨论各挥发性成分的作用。将为进一步加强对该害虫的高效监测和管理,提供可靠依据。本文通过在野外收集不同寄主材料不同危害阶段的红脂大小蠹成虫352头。分类存入液氮后带回实验室。提取成虫后肠后,利用GC-FID、GC-MS定性其中的信息素成分,根据各物质的GC-FID图谱峰面积利用GC-FID外标法进行定量分析。结果表明,主要有5种挥发性成分,分别是桃金娘烯醇、反式马鞭草烯醇、马鞭草烯酮、顺式马鞭草烯醇和桃金娘烯醛。各阶段中桃金娘烯醇的释放量最高,结合红脂大小蠹危害特点分析,该物质可能是红脂大小蠹一种聚集信息素成分。反式马鞭草烯醇的释放量仅次于桃金娘烯醇,该物质可能是红脂大小蠹调控种内聚集危害寄主的一种关键信息素成分。而雌虫释放的马鞭草烯酮与顺式马鞭草烯醇可能是调控种内竞争的多功能信息素物质。

关键词：红脂大小蠹挥发性成分定量分析不同阶段

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基于COⅠ基因部分序列对松毛虫属(鳞翅目,枯叶蛾科)八种松毛虫分子系统关系及相关问题的探讨

基于COⅠ基因部分序列对松毛虫属(鳞翅目,枯叶蛾科)八种松毛虫分...

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第三届中国森林保护学术大会

作者：贾玉迪孔祥波张真王鸿斌张爱兵中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室首都师范大学生命科学学院

松毛虫属昆虫种及亚种间的亲缘关系目前还不明确。虽然种间杂交是确定物种间是否存在生殖隔离的最有效的方法,但是受各种客观条件的制约而限制了种间杂交实验。由于受地理环境及气候的影响,个别种的不同地理种群的个体在形态上存在较大... 详细信息

松毛虫属昆虫种及亚种间的亲缘关系目前还不明确。虽然种间杂交是确定物种间是否存在生殖隔离的最有效的方法,但是受各种客观条件的制约而限制了种间杂交实验。由于受地理环境及气候的影响,个别种的不同地理种群的个体在形态上存在较大的差异,这给传统的形态分类学造成了困难。分子标记技术由于其具有稳定性高、信息含量高、不同层次和类群之间广泛可比等优点为研究种群遗传提供了良好的实验手段。目前还未见从基因测序方面对松毛虫属昆虫系统发育进行研究报道。作者采用COI基因作为分子标记,通过序列比对分析研究松毛虫属昆虫的基因差异,从分子生物学角度探讨松毛虫的亲缘关系和演化顺序以及各种松毛虫不同地理种群的基因差异,也为定种或亚种提供分类学依据。为了保证种类的准确性,作者采用的虫体全部为成虫,在进行形态鉴定的基础上,进一步做了雄性生殖器的解剖。为了避免外缘基因的污染采用胸部肌肉组织为材料。在获得的638bp的序列中,有98个变异位点,50个简约信息位点,T、C、A、G碱基的平均含量分别为37.9%、15.6%、30.5%及15.9%;表现出明显的A+T(68.4%)含量偏异。采用NJ、MP、ML法构建了系统发育树,结果表明油松毛虫和马尾松毛虫的确为同一物种,马尾松毛虫、落叶松毛虫和赤松毛虫为一个分支,云南松毛虫和思茅松毛虫归到一起。文山松毛虫和思茅松毛虫归到一起,德昌松毛虫单分出来。对文山松毛虫和德昌松毛虫的分类地位还有待进一步研究。

关键词：鳞翅目枯叶蛾科松毛虫属 COⅠ基因系统发育

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松毛虫性信息素的固相微萃取及质谱和触角电位分析

松毛虫性信息素的固相微萃取及质谱和触角电位分析

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第八届全国化学生态学学术研讨会

作者：孔祥波赵莉蔺张真王鸿斌于国民中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护重点实验室北京100091 中国科学院动物研究所北京100101 内蒙古克什克腾旗林业局克什克腾旗025350

松毛虫性信息素成分在腺体中含量很低,利用固相微萃取(SPME)技术近距离长时间采集单只云南松毛虫处女雌蛾释放的性信息素成分,进一步利用气相色谱-质谱(GC-MS)和气相色谱-触角电位联用(GC-EAD)技术分析SPME采集的性信息素成分,结果发现... 详细信息

松毛虫性信息素成分在腺体中含量很低,利用固相微萃取(SPME)技术近距离长时间采集单只云南松毛虫处女雌蛾释放的性信息素成分,进一步利用气相色谱-质谱(GC-MS)和气相色谱-触角电位联用(GC-EAD)技术分析SPME采集的性信息素成分,结果发现在云南松毛虫处女雌蛾求偶召唤期间SPME聚乙二醇/二乙烯基苯(CAR/DVB)萃取头吸附了大量的反5,顺7-十二碳二烯醇(E5,z7-12：OH)和反5,顺7-十二碳二烯乙酸酯(E5,7-12：OAc)成分及微量的反5,顺7-十二碳二烯醛(E5,Z7-12：Ald)成分,这3种腺体成分均能激起云南松毛虫雄虫触角的电位反应。与溶剂浸提昆虫性信息素成分的方法比较,SPME活体采样技术和GC-MS及GC-EAD分析方法联用研究昆虫的信息素成分具有采集的样品代表性强、样品量能满足色谱分析需要和无溶剂干扰等方面的优点。本文还强调了固相微萃取的样品提取方法、效果及实际应用中应该注意的一些问题。

关键词：云南松毛虫性信息素固相微萃取气相色谱-质谱联用仪气相色谱-触角电位联用仪

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印楝素制剂对锈色粒肩天牛成虫和卵的生物活性测定

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环境昆虫学报 2010年第4期32卷 493-497页

作者：王晓红杨忠岐魏建荣王小艺辛贺奎张鸣放杨晶晶中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京100091 河北大学生命学院河北保定071002 河南省濮阳市森林病虫害防治检疫站濮阳市457000 河南省濮阳县森林病虫害防治检疫站濮阳县457100

为了探索锈色粒肩天牛Apriona swainsoni(Hope)成虫期利用高效低毒的生物药剂防治技术,使用梯度浓度的印楝素制剂处理国槐当年生嫩枝,供锈色粒肩天牛成虫补充营养时取食,以研究其对锈色粒肩天牛成虫胃毒、拒食、产卵量及卵孵化率的影响... 详细信息

为了探索锈色粒肩天牛Apriona swainsoni(Hope)成虫期利用高效低毒的生物药剂防治技术,使用梯度浓度的印楝素制剂处理国槐当年生嫩枝,供锈色粒肩天牛成虫补充营养时取食,以研究其对锈色粒肩天牛成虫胃毒、拒食、产卵量及卵孵化率的影响。结果表明,不同浓度印楝素药液对锈色粒肩天牛均具有一定的生物活性。0.3%印楝素乳油300倍、400倍、500倍、600倍及700倍液处理后第6d时,成虫的死亡率分别达97.6%,86.0%,73.8%,50.0%和36.1%;拒食作用也比较明显,300倍、400倍液处理的拒食率达到了94.87%和90.22%,取食量显著低于对照,500倍、600倍及700倍液处理的拒食率分别为61.28%、41.54%和37.00%;不同浓度药液均使成虫产卵量、卵的孵化率显著低于对照。表明在锈色粒肩天牛成虫期,在其寄主国槐枝条上喷洒300倍或400倍印楝素乳油能有效防治该天牛成虫。

关键词：锈色粒肩天牛印楝素生物活性拒食作用卵孵化率

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飞机草提取物对美国白蛾幼虫的生物活性及解毒酶的影响

飞机草提取物对美国白蛾幼虫的生物活性及解毒酶的影响

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第八届全国化学生态学学术研讨会

作者：范立鹏王志刚张真孔祥波河北农业大学林学院河北保定071000 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室北京100091

为了寻找防治美国白蛾的植物源农药材料，本试验以外来入侵恶性杂草—飞机草(Eupatorium odortuam L.)为原材料，采用减压蒸馏法对飞机草杀虫活性物质进行了初步的分离和纯化，测定了飞机草根、茎、叶的粗提物提取率;采用微量点滴法测... 详细信息

为了寻找防治美国白蛾的植物源农药材料，本试验以外来入侵恶性杂草—飞机草(Eupatorium odortuam L.)为原材料，采用减压蒸馏法对飞机草杀虫活性物质进行了初步的分离和纯化，测定了飞机草根、茎、叶的粗提物提取率;采用微量点滴法测定了不同浓度飞机草乙醇提取物对美国白蛾幼虫在不同时间的触杀校正死亡率，并利用SPASS软件对各处理间校正死亡率进行了比较分析;采用夹毒叶片法测定了不同浓度提取物对美国白蛾幼虫在不同时间的胃毒校正死亡率;并对取食提取物的美国白蛾幼虫进行了解毒酶活性测定，分析了飞机草提取物活性物质对美国白蛾幼虫体内乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响.

关键词：飞机草美国白蛾提取物校正死亡率解毒酶

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人工智能技术在森林保护中的应用

人工智能技术在森林保护中的应用

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第三届中国森林保护学术大会

作者：张真竺乐庆王鸿斌孔祥波张培毅中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所国家林业局森林保护学重点实验室浙江工商大学计算机与信息工程学院

随着计算机技术的不断高速地发展,作为计算机科学的分支学科人工智能(Artificial Intelligence)的发展也十分迅速。被认为是二十一世纪(基因工程、纳米科学、人工智能)三大尖端技术之一。它企图了解智能的实质,并生产出一种新的能以人... 详细信息

随着计算机技术的不断高速地发展,作为计算机科学的分支学科人工智能(Artificial Intelligence)的发展也十分迅速。被认为是二十一世纪(基因工程、纳米科学、人工智能)三大尖端技术之一。它企图了解智能的实质,并生产出一种新的能以人类智能相似的方式做出反应的智能机器,该领域的研究包括机器人、语言识别、图像识别、自然语言处理和专家系统等。除了计算机科学以外,人工智能还涉及信息论、控制论、自动化、仿生学、生物学、心理学、数学逻辑、语言学、医学和哲学等多门学科。人工智能广泛应用的领域有指纹识别、人脸识别、视网膜识别、虹膜识别、掌纹识别、专家系统、智能搜索、定理、博弈、自动程序设计、还有航天应用等。人工智能在森林保护领域也得到广泛的应用。专家系统被广泛地应用在病虫害的鉴定、病虫害预测、管理决策支持等方面,目前专家系统不断与3S技术、人工神经网络、模糊数学、数据库技术、多媒体技术、网络技术等结合,开发技术越来越多样化,应用范围越来越广。松毛虫综合管理决策专家系统和森林病虫害鉴定专家系统是这方面研究的典型实例。人工智能的另一个重要方面图像识别技术也广泛地应用在病虫害的鉴定和监测等方面。作者利用基于颜色直方图与双树复小波的昆虫图像自动分类、积分区域匹配和双树复小波的昆虫种类识别、颜色直方图和灰度共生矩阵的昆虫图像自动分类、昆虫区域颜色特征及支持向量机的昆虫分类等方法对森林害虫进行识别,取得了良好的效果。利用Mel倒谱系数和矢量量化、带倒谱和隐马尔可夫模型、Mel倒谱系数和隐马尔可夫模型等方法对昆虫声音自动鉴别,识别正确率达96%以上。利用图像识别技术能够通过昆虫的形态、声音图谱、化学图谱和反射光图谱进行自动识别。

关键词：人工智能专家系统图像识别昆虫自动识别

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