本文对卵形鲳鲹长链多不饱和脂肪酸(Long chain polyunsaturated fatty acid,LC-PUFA)关键酶脂肪酸碳链延长酶 4a/4b (Elongation of very long chain fatty acids protein 4a/4b,Elovl4a/4b)和脂肪酸去饱和酶2-like(Fatty acid desatur...
详细信息
本文对卵形鲳鲹长链多不饱和脂肪酸(Long chain polyunsaturated fatty acid,LC-PUFA)关键酶脂肪酸碳链延长酶 4a/4b (Elongation of very long chain fatty acids protein 4a/4b,Elovl4a/4b)和脂肪酸去饱和酶2-like(Fatty acid desaturases 2-like,Fads2-like)的基因进行了克隆分析,卵形鲳鲹elovl4a和elovl4b cDNA全长分别为1606bp和2430bp,开放阅读框(ORF)分别为963 bp和918 bp,编码320和305个氨基酸;Fads2-like cDNA全长为2041bp,其中开放阅读框(ORF)长1329 bp,编码442个氨基酸。利用qRT-PCR技术检测了其在卵形鲳鲹12种不同组织中的表达模式,发现其在不饱和脂肪酸主要合成和代谢组织中高表达。采用酵母异源表达技术分析Elovl4a/4b和Fads2-1ike的功能,将含有目的基因的重组表达载体转化酿酒酵母,并在诱导培养基中添加目的基因可能的PUFA底物。利用气相色谱法对酿酒酵母重组子细胞中PUFA的组成进行分析,利用气质联用法对产物脂肪酸进行结构分析。酵母异源表达分析证实了Elovl4a具有对C18：2n-6碳链延长功能,Elovl4b具有对C18：2n-6、C18：3n-6、C20：5n-3碳链延长功能,Fads2-like具有△4去饱和酶的功能。该研究为进一步了解海洋鱼类LC-PUFA合成机制及调控机理奠定了基础。
暂无评论