为了研究不同温度预热应激对大黄素处理草鱼肝细胞,细胞活力、释放LDH、SOD活性、T-AOC、ROS、△Ψm和HSPs(HSP60、70和90)相对mRNA表达的影响.培养的细胞在高温30、32或34℃ 暴露0.5 h,然后立即放回27℃恢复12h,接着用不同浓度大黄素(0.04-25 ug mL-1)处理细胞24 h.试验结果显示,30℃预处理组显著增加高浓度大黄素组(1、5、25 ug mL-1)细胞活力(P<0.05),降低LDH释放(P<0.05),提高细胞膜电位(P<0.05),说明30℃高温预处理可以减轻大黄素对细胞产生的损伤;30℃高温预处理组的ROS最低,和大黄素对照组之间差异显著(P<0.05),这表明草鱼肝细胞在大黄处理后,机体正在经历氧化应激诱导的损伤,细胞有可能引起生理功能紊乱甚至丧失;30℃高温预处理组SOD活性和T-AOC显著增加(P<0.05),说明30℃温和热应激能够产生细胞内的抗氧化酶保护细胞不受ROS的损伤;3种高温预处理(30、32和34℃)都能显著增加HSPs的表达(P<0.05),由此推断出高温预处理可诱导草鱼肝细胞产生HSPs保护氧自由基损伤,抑制细胞凋亡,对高浓度大黄素产生的细胞损伤产生保护作用.
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