检索结果-内蒙古大学图书馆

农业环境科学学报 2017年第8期36卷 1618-1626页

作者：史磊磊范立民陈家长邴旭文赵志祥胡庚东吴伟南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部长江下游渔业生态环境监测中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

采用组合填料(全塑性夹片和维纶醛化丝)作为生物膜载体,以土著微生物为生物膜菌源,研究其对水质、罗非鱼生长及水体微生物群落功能多样性的影响。结果表明:组合填料可促进水体中NO_2^-、DO、IC含量显著升高,使水体中pH、NO_3^-含量显著... 详细信息

采用组合填料(全塑性夹片和维纶醛化丝)作为生物膜载体,以土著微生物为生物膜菌源,研究其对水质、罗非鱼生长及水体微生物群落功能多样性的影响。结果表明:组合填料可促进水体中NO_2^-、DO、IC含量显著升高,使水体中pH、NO_3^-含量显著下降,同时有使水体中NH_4^+、TOC含量下降的趋势;和对照组相比,组合填料组罗非鱼增重量显著升高,饵料系数显著降低,填料悬挂密度越高,增重效果越明显;组合填料能显著降低水体细菌数量,而对水体微生物多样性无显著影响;组合填料明显提高了水体微生物对糖类、醇类、酯类的利用率,降低了水体微生物对胺类和酸类的利用率。RDA分析表明,组合填料组和对照组之间的水体微生物代谢多样性存在一定的差异,而DO、pH和硝酸盐是影响处理组和对照组水体微生物代谢多样性差异的主要环境因子,显示组合填料在一定程度上可有效改善水质,促进罗非鱼生长,降低水体细菌数量,影响水体微生物群落功能多样性。

关键词：组合填料罗非鱼净化效果微生物群落碳代谢特征

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建鲤两种Δ6脂肪酸去饱和酶基因克隆与表达

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中国生物化学与分子生物学报 2012年第7期28卷 677-684页

作者：任洪涛俞菊华徐跑唐永凯李红霞李建林南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 河南科技大学动物科技学院河南洛阳471003 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心、农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

利用逆转录PCR和RACE技术获得建鲤2种Δ6脂肪酸去饱和酶(FADs6-a,FADs6-b)的全长cDNA序列.FADs6-a基因的cDNA总长为1 966 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸;FADs6-b基因的cDNA总长为1 931 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨... 详细信息

利用逆转录PCR和RACE技术获得建鲤2种Δ6脂肪酸去饱和酶(FADs6-a,FADs6-b)的全长cDNA序列.FADs6-a基因的cDNA总长为1 966 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸;FADs6-b基因的cDNA总长为1 931 bp,开放阅读框为1 335 bp,编码444个氨基酸.FADs6-a和FADs6-b基因都包括N端细胞色素b5结构域、3个富含组氨酸的结构域和2个推测的跨膜区,具有典型的Δ6脂肪酸去饱和酶结构特点.氨基酸同源性分析显示,建鲤FADs6-a和FADs6-b与斑马鱼的相似性较高,而与海水鱼类的相似性较低,与人类FADs6的相似性高于与FADs5的相似性.通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测该基因在建鲤幼鱼不同组织中的表达量,发现2种Δ6脂肪酸去饱和酶基因在建鲤肝脏的表达量最高,其次是肠、脑、肌肉、心和肾,而前肠高于后肠,FADs6-a的表达量高于FADs6-b.得到的结论是,建鲤具有2种类型的合成高度不饱和脂肪酸(HUFA)的关键酶—Δ6脂肪酸去饱和酶,在肝脏和肠道中的含量较多,且FADs6-a和FADs6-b在结构和组织的表达方面都存在差异,这为进一步研究建鲤HUFA的合成途径及调控机理奠定了基础.

关键词：建鲤 Δ6-脂肪酸去饱和酶基因克隆基因表达

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团头鲂(Megalobrama amblycephala)两种热休克蛋白70(HSP70s)的原核表达、纯化及鉴定

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海洋与湖沼 2012年第1期43卷 185-191页

作者：明建华谢骏徐跑戈贤平刘文斌叶金云湖州师范学院生命科学学院湖州313000 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081

采用PCR方法扩增团头鲂组成型HSC70和诱导型HSP70基因完整的编码区片段,并分别克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),用1mmol/L IPTG在不同温度及时间下进行诱导表达。采用Ni-NTA His Bind Resins亲和层析和DEAE-S... 详细信息

采用PCR方法扩增团头鲂组成型HSC70和诱导型HSP70基因完整的编码区片段,并分别克隆到原核表达载体pET-22b(+)中,然后转化大肠杆菌BL21(DE3),用1mmol/L IPTG在不同温度及时间下进行诱导表达。采用Ni-NTA His Bind Resins亲和层析和DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析对目的蛋白进行纯化,并进行SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果表明,成功构建了团头鲂两种重组表达质粒pET-22b(+)/Ma-HSC70和pET-22b(+)/Ma-HSP70,表达融合蛋白的相对分子量均约为72kDa,并能与兔抗人HSP70多抗进行特异性结合,这两种HSP70s融合蛋白经纯化后的纯度均达到95%以上。本实验选择融合蛋白Ma-HSC70在25℃和Ma-HSP70在30℃下分别诱导7h作为可溶性表达的最佳条件。

关键词：团头鲂热休克蛋白70 原核表达融合蛋白纯化鉴定

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饲料中添加三种芽孢杆菌对建鲤生长及肠道菌群比较研究

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饲料工业 2012年第18期33卷 16-19页

作者：尹恒高启平谢骏刘波李云兰通威股份有限公司四川成都610041 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

以平均体重为(14.62±0.11)g的当年建鲤(Jian Carp)作为试验对象,设计4种实用饲料,对照组为基础日粮,试验组为基础日粮中分别添加0.1%的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、0.1%蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、0.1%枯草芽孢杆菌(Ba... 详细信息

以平均体重为(14.62±0.11)g的当年建鲤(Jian Carp)作为试验对象,设计4种实用饲料,对照组为基础日粮,试验组为基础日粮中分别添加0.1%的凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、0.1%蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)、0.1%枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)(芽孢杆菌添加浓度均为1.5×1010个/kg),在室外水泥池中(7 m×7 m×1.5 m)养殖94 d,测定了鱼体的生长及肠道菌群。生长结果表明:与对照组相比,添加0.1%的凝结芽孢杆菌饲料系数下降5.0%(P>0.05),特定生长率增加3.00%(P<0.05);添加0.1%的蜡样芽孢杆菌饲料系数下降2.50%(P>0.05),特定生长率增加0.5%(P>0.05);添加0.1%的枯草芽孢杆菌饲料系数提高5.63%(P<0.05),特定生长率下降3.0%(P<0.05)。与对照组相比,在饲料中添加0.1%的凝结芽孢杆菌使鲤鱼肠道内的细菌总数增加0.15%(P>0.05),大肠杆菌下降8.16%(P<0.05),弧菌下降17.32%(P<0.05),乳酸菌上升6.74%(P<0.05);添加0.1%的蜡样芽孢杆菌使鲤鱼肠道内的细菌总数增加11.13%(P<0.05),大肠杆菌上升10.6%(P<0.05),弧菌下降0.56%(P>0.05),乳酸菌增加0.63%(P>0.05)。添加0.1%的枯草芽孢杆菌使鲤鱼肠道内的细菌总数增加12.17%(P<0.05),大肠杆菌增加8.32%(P<0.05),弧菌总数下降2.23%(P>0.05),乳酸菌下降6.90%(P>0.05)。因此,在鲤鱼饲料中添加凝结芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌对鲤鱼的生长和肠道健康有一定的促进作用,单独添加枯草芽孢杆菌的效果则有待进一步研究。

关键词：枯草芽孢杆菌蜡样芽孢杆菌凝结芽孢杆菌生长肠道菌群建鲤

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建鲤和黑龙江野鲤杂交与自交F1代肌肉营养成分的比较

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营养学报 2010年第2期32卷 183-186页

作者：张成锋李冰钟立强王建新朱健中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室无锡214082 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081 上海海洋大学水产与生命科学学院上海201306

目的检测建鲤和黑龙江野鲤杂交与各自交F1代的肌肉营养成分。方法2008年8月25日～10月8日对三个群体进行了为期45d的网箱养殖之后,按GB/T5009-2003方法分别测定水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分,用液相和气相色谱仪分别测定氨基酸和脂肪酸... 详细信息

目的检测建鲤和黑龙江野鲤杂交与各自交F1代的肌肉营养成分。方法2008年8月25日～10月8日对三个群体进行了为期45d的网箱养殖之后,按GB/T5009-2003方法分别测定水分、粗蛋白、粗脂肪和粗灰分,用液相和气相色谱仪分别测定氨基酸和脂肪酸含量,用原子吸收光谱仪测定无机元素,分析比较三个群体的肌肉营养成分。结果杂交F1代的水分含量低于两自交群体,粗蛋白含量高于两自交群体,粗脂肪含量显著低于建鲤自交F1代而高于黑龙江野鲤自交F1代;氨基酸总量,杂交F1代较建鲤自交F1代有不同程度提升;杂交F1代的WEAA/WTAA和WEAA/WNEAA符合FAO/WHO标准,后者比两自交群体更为理想,其必需氨基酸指数EAAI(98.46),明显高于建鲤自交F1代(81.71);脂肪酸的含量,杂交F1代除在饱和脂肪酸的总量低于两自交群体外,单、多不饱和脂肪酸和必需脂肪酸总量均高于两自交群体;宏量和微量元素总量,杂交F1代均高于两自交群体。结论杂交F1代不仅在蛋白质营养价值上优于两自交群体,而且在脂肪酸和营养元素的含量上更为丰富。

关键词：建鲤黑龙江野鲤杂交子代自交子代肌肉营养品质

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二溴海因对吉富罗非鱼血浆抗氧化酶基因表达的影响

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环境科学与技术 2017年第2期40卷 39-43页

作者：郑尧邴旭文裘丽萍范立民宋超孟顺龙刘涛孙博李丹丹张聪陈家长中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种与养殖生物学重点开放实验室农业部长江下游渔业资源环境科学观测实验站中国水产科学研究院内陆渔业生态环境和资源重点开放实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081

研究不同时间点(1、2、4、8、16 d)及修复期(26 d)、不同浓度(0、0.06、0.3、1.5 mg/L)二溴海因(DBDMH)对雄性吉富罗非鱼血浆中抗氧化酶基因的基因毒性,筛选稳定的生物标志物。实时荧光定量PCR方法检测DBDMH对超氧化物歧化酶(sod)、谷... 详细信息

研究不同时间点(1、2、4、8、16 d)及修复期(26 d)、不同浓度(0、0.06、0.3、1.5 mg/L)二溴海因(DBDMH)对雄性吉富罗非鱼血浆中抗氧化酶基因的基因毒性,筛选稳定的生物标志物。实时荧光定量PCR方法检测DBDMH对超氧化物歧化酶(sod)、谷胱甘肽-S-转移酶(gst)、谷胱甘肽还原酶(gr)、谷胱甘肽过氧化物酶1(gpx1)、过氧化氢酶(cat)基因表达的影响。中浓度组雄性吉富罗非鱼血浆抗氧化酶基因(除gr)表达受DBDMH胁迫诱导显著上调;各DBDMH浓度组1 d(sod,gst,gpx1),2 d(gst,gr)抗氧化基因表达呈现浓度依赖性下降,4 d sod,gpx1基因表达呈现浓度依赖性上升;8 d中浓度DBDMH处理组基因表达(gst,gr,gpx1)显著低于低浓度组;恢复试验阶段,中、高浓度DBDMH组各抗氧化酶基因表达均不能恢复到正常水平。0.3 mg/L DBDMH显著增强雄性吉富罗非鱼血浆所测抗氧化酶基因的表达(除1 d gpx1、cat,8和16 d gr),此浓度下抗氧化酶基因作为标志物较合适。

关键词：吉富罗非鱼二溴海因血浆抗氧化酶基因

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丹江口水库鲤肠道寄生蠕虫群落结构与季节动态

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水生生物学报 2012年第3期36卷 482-488页

作者：高典王桂堂吴山功邹红习丙文李文祥南昌大学医学院寄生虫教研室南昌330006 中国科学院水生生物研究所武汉430072 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室无锡214081

2004年2月到2005年11月在丹江口水库库区206尾鲤(Cyprinus carpio)肠道中检获蠕虫11种,其中复殖吸虫3种,线虫5种,棘头虫2种,绦虫1种。总体感染率为45.63%,平均感染丰度为4.23±12.65,平均感染强度为9.29±17.48,其中饭岛盾腹吸... 详细信息

2004年2月到2005年11月在丹江口水库库区206尾鲤(Cyprinus carpio)肠道中检获蠕虫11种,其中复殖吸虫3种,线虫5种,棘头虫2种,绦虫1种。总体感染率为45.63%,平均感染丰度为4.23±12.65,平均感染强度为9.29±17.48,其中饭岛盾腹吸虫(Aspidogaster ijimai)的总感染率(25.24%)和平均感染丰度(1.76±6.46)最大,瓣睾鲫吸虫(Carassatrema lamellorchis)的感染强度(25.00±46.68)最大。除部分平均感染丰度较低的线虫如鲤带巾线虫(Cucullanus cyprini)外,其他蠕虫的分布类型均为聚集分布,蠕虫群落多样性指数为4.63,均匀度指数为0.60,对群落多样性的季节动态分析表明,各季节群落多样性和均匀度波动较大,并无明显变化规律。每尾鲤感染蠕虫种数多在1—4种之间,所有感染的11种蠕虫中优势种为饭岛盾腹吸虫;次优势种为日本侧殖吸虫(Asymphylodora japonica)、中华许氏绦虫(Khawia sinensis)、瓣睾棘吸虫和鲤长棘吻虫(Rhadinarhynchus cyprini);非优势种为对盲囊线虫(Contracaecum sp.)、鲤带巾线虫、鲤杆咽吸虫(Rhabdochona cyprini)、黄颡刺盖线虫(Spinitectus gigi)、毛细线虫(Capillaria sp.)和木村小棘吻虫(Micracanthorhynchina motomurai)。在种间协调关系方面,鲤杆咽线虫和瓣睾鲫吸虫、鲤长棘吻虫和饭岛盾腹吸虫、对盲囊线虫和木村小棘吻虫、鲤长棘吻虫和木村小棘吻虫之间分别存在显著正关联。对优势种和次优势种蠕虫中种群的季节动态分析表明,鲤寄生蠕虫各组分的感染率和平均感染丰度存在显著的季节差异,在秋、冬季节的感染水平普遍比较高,而到春夏则急剧下降,但中华许氏绦虫无显著季节变化。

关键词：鲤蠕虫群落季节动态

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鲤鱼2种脂酰辅酶A脱氢酶基因cDNA克隆、表达及活性研究

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华北农学报 2017年第3期32卷 48-57页

作者：喻文娟俞菊华李红霞李建林唐永凯于凡何枫傅纯洁南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081 东海县水产技术推广站江苏东海222300

为探究脂酰辅酶A脱氢酶对脂肪酸β氧化的调控机制,使用RT-PCR在鲤鱼肝脏克隆了脂酰辅酶A脱氢酶家族中的MCAD和LCAD全长c DNA序列,阅读框分别为1 275,1 326 bp,编码424,441个氨基酸,分析表明他们均具备ACADs家族的特征序列:FAD结合位点... 详细信息

为探究脂酰辅酶A脱氢酶对脂肪酸β氧化的调控机制,使用RT-PCR在鲤鱼肝脏克隆了脂酰辅酶A脱氢酶家族中的MCAD和LCAD全长c DNA序列,阅读框分别为1 275,1 326 bp,编码424,441个氨基酸,分析表明他们均具备ACADs家族的特征序列:FAD结合位点、底物结合位点、催化位点等,与斑马鱼MCAD和LCAD的一致性分别为93.16%和94.56%。实时定量RT-PCR结果表明,MCAD和LCAD主要在肝脏和心脏表达;不同脂肪源对MCAD的表达没有明显影响,但鱼油对LCAD的表达有明显的刺激作用。此外,构建了原核表达载体MCADs-p EASY(E2)和LCADs-pEASY(E2),经IPTG诱导获得了原核表达蛋白,分子量分别为43.0,43.6 kDa。经检测这2个蛋白在370,450 nm处有明显的吸收峰,表明他们能自然结合FAD辅基。吩嗪硫酸甲酯反应法结果表明:MCAD和LCAD酶活性最适温度均为28℃,酶活分别为9.12,10.29 U/g。结果表明,与哺乳动物类似,鲤鱼MCAD和LCAD在肝脏和心脏表达量高;高不饱和脂肪酸对LCAD的表达有促进作用。

关键词：鲤鱼 MCAD LCAD 克隆原核表达酶活性

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尼罗罗非鱼出肉率与可量性状的相关性

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中国水产科学 2010年第2期17卷 212-217页

作者：董在杰梁政远徐跑明俊超张平张守领何杰谢庄南京农业大学动物科技学院江苏南京210095 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081

运用统计分析方法研究了吉富品系和埃及品系尼罗罗非鱼(Oreochro misniloticus)2龄成鱼雌、雄个体的出肉率和可量性状之间的相关性。结果显示,尼罗罗非鱼的平均出肉率为38.68%,雄性个体出肉率比雌性个体略高,吉富品系出肉率比埃及品系... 详细信息

运用统计分析方法研究了吉富品系和埃及品系尼罗罗非鱼(Oreochro misniloticus)2龄成鱼雌、雄个体的出肉率和可量性状之间的相关性。结果显示,尼罗罗非鱼的平均出肉率为38.68%,雄性个体出肉率比雌性个体略高,吉富品系出肉率比埃及品系略高。尼罗罗非鱼出肉率与可量性状间存在较强的线性关系,拟合方程相关系数为0.985。在有显著意义的可量性状相关系数中(P<0.01),与肉片质量和出肉率的相关性均最高的可量性状为体质量,相关系数分别为0.964和0.575;其次为体高、体长和体厚。而头长与肉片质量、出肉率均呈负相关关系。雄性个体的相关系数均高于雌性个体,在雄性个体中,出肉率与体质量的相关系数为0.630,与体高的相关系数为0.617,均为中等程度相关。对可量性状之间的比值与出肉率进行相关性分析,相关系数普遍比单个性状高,特别在雄性个体中表现明显。其中相关系数较高的比例组合有身长/头长比值(0.765)、体长/头长比值(0.732)、身长/体厚比值(0.703),均达到较强程度的相关,比单个性状的相关性有明显提高。结果表明,利用可量性状预测罗非鱼的出肉率是可行的。

关键词：尼罗罗非鱼出肉率可量性状相关性性状比例

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大黄素、维生素C及其配伍对团头鲂感染嗜水气单胞菌后生理生化指标的影响

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中国水产科学 2011年第3期18卷 588-601页

作者：明建华谢骏徐跑刘文斌周群兰刘波习丙文南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水鱼类遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

为综合评价大黄素、高剂量维生素C及其配伍对团头鲂(Megalobrama amblycephala Yih)抗嗜水气单胞菌感染能力的影响,选取1 200尾健康的团头鲂,体质量为(133.44±2.11)g,随机分成4组,其中1组为对照组,投喂基础日粮,另外3组在基础日粮... 详细信息

为综合评价大黄素、高剂量维生素C及其配伍对团头鲂(Megalobrama amblycephala Yih)抗嗜水气单胞菌感染能力的影响,选取1 200尾健康的团头鲂,体质量为(133.44±2.11)g,随机分成4组,其中1组为对照组,投喂基础日粮,另外3组在基础日粮中分别添加60 mg/kg大黄素、700 mg/kg维生素C、60 mg/kg大黄素+700 mg/kg维生素C(配伍组)。饲养60 d后,经腹腔注射感染嗜水气单胞菌,并在攻毒前后检测团头鲂血液和肝脏的生化指标以及肝脏2种热休克蛋白70s(HSP70s)mRNA的表达水平;另从各池中取10尾鱼进行同样的攻毒试验,统计攻毒后各时间点鱼的累积死亡率。结果表明,攻毒后,与对照组相比,大黄素、维生素C组不同程度地提高了血清总蛋白(TP)、溶菌酶(LSZ)和碱性磷酸酶(AKP)的水平,肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性以及HSC70和HSP70 mRNA的表达水平,降低了血清皮质醇(COR)、血糖(GLU)、谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、甘油三酯(TG)以及肝脏丙二醛(MDA)的水平;配伍组中,这些指标的变化趋势虽与上述类似,但大多与对照组的差异不显著(P>0.05),且未表现出协同增效作用。此外,各组鱼血清胆固醇(CHOL)的含量在攻毒前后的差异均不显著(P>0.05)。统计也表明,大黄素和维生素C组鱼的累积死亡率在攻毒后24 h、48 h均显著低于对照组(P<0.05),而配伍组试验鱼的累积死亡率与对照组差异均不显著(P>0.05)。由此可见,在基础日粮中添加大黄素60 mg/kg或维生素C 700 mg/kg,可提高鱼体的非特异性免疫力、抗氧化能力以及2种HSP70s mRNA的表达水平,增强鱼体抗病原菌感染的能力。二者配伍则效果不佳。

关键词：团头鲂大黄素维生素C 嗜水气单胞菌 HSP70s表达

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