检索结果-内蒙古大学图书馆

淡水渔业 2010年第2期40卷 19-23页

作者：李超陈明黄维义王瑞余晓丽黄婷雷爱莹梁万文广西大学动物科学技术学院南宁530051 广西水产研究所南宁530021 农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室/中国水产科学研究院淡水渔业研究中心江苏无锡214081

应用Trizol一步法对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）外周血白细胞总RNA提取方法进行优化,通过β-ac-tin基因反转录对所分离到的总RNA进行质量验证,并对mRNA的冻干浓缩进行了探讨,确定了一套快速、高效的尼罗罗非鱼外周血白细胞总RN... 详细信息

应用Trizol一步法对尼罗罗非鱼（Oreochromis niloticus）外周血白细胞总RNA提取方法进行优化,通过β-ac-tin基因反转录对所分离到的总RNA进行质量验证,并对mRNA的冻干浓缩进行了探讨,确定了一套快速、高效的尼罗罗非鱼外周血白细胞总RNA分离和mRNA浓缩体系。结果显示：获得的总RNA纯度较高,OD260/OD280均在1.9-2.0之间;甲醛变性电泳显示,总RNA完整性良好,28S与18S比值为2∶1;总RNA的分离量与起始白细胞量成正比,每毫升Trizol最大裂解量为1×10^8个白细胞,可得到总RNA量约为90μg;总RNA的分离量在前四个小时随着沉淀时间的增长而增加,并成功进行了β-actin基因的反转录。mRNA的分离率为1.08%,通过冻干浓缩成功使其浓度提高9倍。结果表明：分离到的总RNA质量可充分满足下游分子生物学实验要求,所建立的mRNA浓缩方法简单易行,可完全解决mRNA起始浓度低的难题。

关键词：尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus) 外周血白细胞总RNA mRNA 冻干浓缩

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芙蓉鲫(芙蓉鲤♀×红鲫♂)及其原始亲本间的遗传关系

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大连水产学院学报 2010年第3期25卷 197-202页

作者：王金龙刘臻李传武王冬武曾国清鲁双庆湖南省水产科学研究所湖南长沙410153 长沙大学生物工程与环境科学系湖南长沙410003 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

利用RAPD和微卫星标记技术,对芙蓉鲫及其原始亲本(红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、兴国红鲤)5个群体的遗传关系进行研究。利用20条随机引物进行RAPD分析,其中12条在5个群体中均能扩增出特异条带。统计分析显示:芙蓉鲫与红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜... 详细信息

利用RAPD和微卫星标记技术,对芙蓉鲫及其原始亲本(红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、兴国红鲤)5个群体的遗传关系进行研究。利用20条随机引物进行RAPD分析,其中12条在5个群体中均能扩增出特异条带。统计分析显示:芙蓉鲫与红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、兴国红鲤的遗传相似性分别为0.8757、0.7478、0.7419、0.7449,遗传距离分别为0.1327、0.2906、0.2985、0.2944。在进行微卫星标记分析时,所扩增的29对微卫星引物中共有13对在5个群体中均能扩增出特异条带。统计分析显示,芙蓉鲫与红鲫、芙蓉鲤、散鳞镜鲤、兴国红鲤的遗传相似性分别为0.8717、0.7434、0.6680、0.7552,遗传距离分别为0.1374、0.2965、0.4034、0.2808。两种分析结果均表明,芙蓉鲫的遗传结构更接近于父本红鲫,与外祖父兴国红鲤的遗传相似性比与外祖母散鳞镜鲤的遗传相似性要大,其遗传结构更偏向于具红色体征的原始亲本。

关键词：芙蓉鲫随机扩增多态性DNA 微卫星遗传关系原始亲本

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芙蓉鲫(芙蓉鲤♀×红鲫♂)及其原始亲本的形态学分析

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淡水渔业 2009年第5期39卷 3-6页

作者：王冬武李传武王金龙曾国清肖调义湖南省水产科学研究所长沙410153 湖南农业大学动物科技学院长沙410128 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

本研究随机采集芙蓉鲫及其原始亲本(芙蓉鲤、红鲫、散鳞镜鲤、兴国红鲤),测定了7项可数性状和12项可量性状,研究芙蓉鲫与其原始亲本之间的表型差异。结果表明:芙蓉鲫(Cyprinus capiofurong.♀×Carassiusauratusred var.♂)可数性... 详细信息

本研究随机采集芙蓉鲫及其原始亲本(芙蓉鲤、红鲫、散鳞镜鲤、兴国红鲤),测定了7项可数性状和12项可量性状,研究芙蓉鲫与其原始亲本之间的表型差异。结果表明:芙蓉鲫(Cyprinus capiofurong.♀×Carassiusauratusred var.♂)可数性状稳定,介于父母本之间,可量性状中芙蓉鲫有5项偏向父本,3项偏向母本、4项超父母本。聚类分析显示芙蓉鲫可量性状更接近于父本红鲫,而与另3种亲本差异较远。判别分析结果也显示芙蓉鲫与红鲫形态更为接近,各组判别准确率依次为芙蓉鲫100%,红鲫96%,兴国红鲤87%,散鳞镜鲤81.3%,芙蓉鲤73.1%。

关键词：芙蓉鲫(Cyprinuscapio furong.♀×Carassiusauratus red var.♂) 形态学原始亲本

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奥利亚罗非鱼DMO蛋白结构和功能预测的研究

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生物技术 2009年第1期19卷 13-16页

作者：曹谨玲陈剑杰吴婷婷山西农业大学动物科技学院山西省生态畜牧与环境兽医重点实验室山西太谷030801 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

目的：对奥利亚罗非鱼DMO蛋白的结构和功能进行预测研究。方法：利用生物信息学的方法对DMO基因推导的氨基酸序列进行结构特征和功能域预测分析,探讨了DMO的信号肽、亲/疏水性、跨膜拓扑结构、卷曲螺旋结构、基序、功能域及高级结构。... 详细信息

目的：对奥利亚罗非鱼DMO蛋白的结构和功能进行预测研究。方法：利用生物信息学的方法对DMO基因推导的氨基酸序列进行结构特征和功能域预测分析,探讨了DMO的信号肽、亲/疏水性、跨膜拓扑结构、卷曲螺旋结构、基序、功能域及高级结构。结果：DMO在第1-17,39-113,153-301,372-410区段为高亲水性区域,属亲水性基团,具有两个螺旋卷曲区域,97-112,155-168氨基酸区域,没有信号肽,含有两个跨膜结构域,发生跨膜运动;DMO包含两个保守的DM-domain和DNA锌指结构等功能结构域;DMO含有1个亮氨酸拉链结构（21-42）,7个蛋白激酶C磷酸化位点（49-51,184-186,191-193,235-237,270-272,294-296,333-335）,5个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点（189-192,225-228,227-230,231-234,233-236）,1个cAMP-andcGMP-依赖蛋白激酶磷酸化位点（296-299）10个肉豆蔻酰化位点（59-64,121-126,125-130,129-134,135-140,301-306,304-309,307-312,310-315,350-355）;DMO蛋白含有27.38%的α-螺旋,8.8%的β-转角和53.79%的无规卷曲;DMO的高级结构中含有两个α-螺旋区域。结论：DMO蛋白与性别调控有关,并在细胞信号传导中发挥作用,且其生物活性可能接受信号途径中多种信号的调控,这为进一步研究奥利亚罗非鱼DMO基因编码蛋白的功能,明确DMO基因与性别调控的关系奠定了基础。

关键词： DMO 生物信息学蛋白质结构蛋白质功能性别调控

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太湖日本沼虾的遗传多样性分析

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上海水产大学学报 2008年第5期17卷 620-624页

作者：吴滟傅洪拓李家乐龚永生李明爽中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 上海海洋大学农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海200090

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对太湖湖区不同水域(无锡、宜兴、苏州及湖州水域)野生日本沼虾群体进行基因组DNA的遗传多样性分析。在事先优化的条件下,试验从选用的50个随机引物中筛选出16个有效引物,共检测到117个清晰稳定的位点,大... 详细信息

利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术对太湖湖区不同水域(无锡、宜兴、苏州及湖州水域)野生日本沼虾群体进行基因组DNA的遗传多样性分析。在事先优化的条件下,试验从选用的50个随机引物中筛选出16个有效引物,共检测到117个清晰稳定的位点,大小为200bp～2000bp,其中92个位点具有多态性。四个群体的多态位点比例分别为49.57%、60.68%、53.85%、57.26%,杂合度为0.2077～0.2163,Shannon信息指数为0.2967～0.3053,群体间遗传分化指数Gst值为0.1644～0..2002。AMOVA分析结果显示,群体的遗传变异有16.67%是由群体间遗传变异引起的,显著性检验表明群体间遗传变异对总遗传变异影响显著。遗传距离显示四个群体有一定遗传分化,其中苏州和宜兴群体间遗传距离最大(0.1481),无锡与宜兴群体间遗传距离最小(0.1141)。利用UPGMA进行聚类分析表明,无锡与宜兴群体首先聚在一起,湖州与苏州群体随后聚在一起,再与无锡、宜兴群体聚在一起。

关键词：日本沼虾太湖水域遗传多样性 RAPD分析

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寡糖-中草药复合物和黄霉素对异育银鲫生长、免疫及抗病力的影响

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淡水渔业 2009年第3期39卷 46-51页

作者：周传朋刘波王广宇谢俊戈贤平苏永腾南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081 南京奥迈科技有限公司南京210000

在基础日粮中分别添加6 mg/kg黄霉素、0.1%寡糖-中草药复合物、0.2%寡糖-中草药复合物,连续投喂600尾异育银鲫(Carassius auratus gibelio)56 d后,测定鱼的生长、血清溶菌酶活性,丙二醛含量,超氧化物歧化酶活性,谷丙转氨酶活性,谷草转... 详细信息

在基础日粮中分别添加6 mg/kg黄霉素、0.1%寡糖-中草药复合物、0.2%寡糖-中草药复合物,连续投喂600尾异育银鲫(Carassius auratus gibelio)56 d后,测定鱼的生长、血清溶菌酶活性,丙二醛含量,超氧化物歧化酶活性,谷丙转氨酶活性,谷草转氨酶活性及血液生化指标等。结果显示:与对照组相比,添加6 mg/kg黄霉素显著提高了异育银鲫血液甘油三酯含量、血清溶菌酶活性;添加0.1%寡糖-中草药复合物显著提高了异育银鲫增重率、特定生长率、血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性;添加0.2%寡糖-中草药复合物显著提高了异育银鲫增重率、特定生长率、血液葡萄糖含量、血清溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性,显著降低了谷丙转氨酶活性、谷丙转氨酶/谷草转氨酶(即GPT/GOT)活性比值。鱼攻毒试验也表明试验各组都有死鱼,但是对照组死亡率是最高的。因此添加0.2%寡糖-中草药复合物能提高机体免疫机能与抗氧化能力,抵抗病原菌感染,保护肝脏,能促进鱼体生长。

关键词：异育银鲫(Carassius auratus gibelio) 寡糖-中草药复合物免疫抗病力生长

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罗非鱼免疫前后白细胞cDNA差减文库的构建及鉴定

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西南农业学报 2010年第4期23卷 1286-1292页

作者：李超陈明李莉萍黄维义余晓丽黄婷张彬雷爱莹陈福艳梁万文广西水产研究所广西南宁530021 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室//中国水产科学研究院淡水渔业研究中心江苏无锡214081

为筛选罗非鱼链球菌疫苗免疫前后白细胞表达变化基因及探讨鱼类白细胞免疫机理,利用抑制性差减杂交(SSH)技术,以链球菌疫苗免疫前后罗非鱼白细胞cDNA为材料,构建了罗非鱼免疫前后正、负2个cDNA差减文库,并采用地高辛(DIG)标记差减文库c... 详细信息

为筛选罗非鱼链球菌疫苗免疫前后白细胞表达变化基因及探讨鱼类白细胞免疫机理,利用抑制性差减杂交(SSH)技术,以链球菌疫苗免疫前后罗非鱼白细胞cDNA为材料,构建了罗非鱼免疫前后正、负2个cDNA差减文库,并采用地高辛(DIG)标记差减文库cDNA作为探针,进行差异表达片段的筛选鉴定。结果显示:2个文库重组率均在90%以上,插入片段在300～900 bp,接头连接效率超过50%,差减效率非常高效,阳性率均超过70%。杂交筛选后正、负文库各挑选30个阳性克隆进行测序组装聚类,正、负文库各获得16和18条非冗余EST(unigene),所得序列经GenBank同源性分析,正、负文库各有10和11条unigene获得功能注释,且各有6和7条unigene没有同源性匹配,为未知新基因。

关键词：罗非鱼链球菌白细胞cDNA 差减文库抑制性差减杂交(SSH)技术

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用链球菌疫苗免疫罗非鱼前后其差异表达基因的鉴定与分析

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大连水产学院学报 2009年第5期24卷 379-386页

作者：李超陈明李莉萍黄维义余晓丽黄婷张彬雷爱莹陈福艳梁万文广西水产研究所广西南宁530021 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

采用抑制性差减杂交技术(SSH)成功构建了罗非鱼O reochrom is nilotica被链球菌Streptococcus iniae疫苗免疫前后正、反两个淋巴细胞cDNA差减文库,富集了免疫过程中表达谱发生变化的淋巴细胞基因,并对文库进行了斑点杂交筛选、测序和EST... 详细信息

采用抑制性差减杂交技术(SSH)成功构建了罗非鱼O reochrom is nilotica被链球菌Streptococcus iniae疫苗免疫前后正、反两个淋巴细胞cDNA差减文库,富集了免疫过程中表达谱发生变化的淋巴细胞基因,并对文库进行了斑点杂交筛选、测序和ESTs初步分析。结果表明:文库富集了高丰度的差异表达基因,阳性率较高。正向文库中筛选得到21个免疫期间表达丰度上调的基因,其中1个基因与罗非鱼已知基因具有相似性,10个基因与其他鱼类已知基因相似,1个基因与其他物种已知基因具有相似性,9个为未知新基因;负向文库中筛选得到24个免疫期间表达丰度下调的基因,其中3个与罗非鱼已知基因具有相似性,15个与其他鱼类已知基因相似,6个为未知新基因。进一步功能注解发现,正向文库功能基因包括免疫信号传导相关蛋白、防御相关蛋白、肿瘤免疫相关蛋白和淋巴细胞相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度升高,提高了机体免疫抵抗力。负向文库功能基因包括细胞免疫相关蛋白、感染相关蛋白和肿瘤发生相关蛋白,这些基因免疫后表达丰度降低,可以降低机体感染和发病几率。

关键词：罗非鱼链球菌疫苗差减文库免疫相关基因斑点杂交筛选

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中国鲟鱼产业发展现状、机遇与对策建议

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湖南农业科学 2019年第7期 118-121页

作者：贺艳辉袁永明张红燕王红卫中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室

鲟鱼是具有较高经济价值的中大型特色鱼类,是冷水鱼主要养殖品种之一,我国鲟鱼养殖产量位居世界首位。为促进鲟鱼产业健康发展,从苗种与成鱼养殖现状、养殖模式、国内外贸易等方面分析我国鲟鱼产业的发展现状,发现产业存在鲟种业建设乏... 详细信息

鲟鱼是具有较高经济价值的中大型特色鱼类,是冷水鱼主要养殖品种之一,我国鲟鱼养殖产量位居世界首位。为促进鲟鱼产业健康发展,从苗种与成鱼养殖现状、养殖模式、国内外贸易等方面分析我国鲟鱼产业的发展现状,发现产业存在鲟种业建设乏力、成鱼养殖成本高、投入大、鲟鱼产品加工利用率低、国内市场销售不畅等主要问题,结合鲟鱼产品具有多元价值空间、鲟鱼子酱市场需求空间大和有利于开展野生鲟鱼资源保护等发展机遇,提出做好资源保护、加大科技攻关、开发可利用的冷水资源和深化产品加工等对策建议。

关键词：鲟鱼机遇产业对策建议

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体外药动模型中诺氟沙星对嗜水气单胞菌的药动及药效研究

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大连水产学院学报 2010年第3期25卷 219-223页

作者：陈俭清卢彤岩中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江哈尔滨150070

通过建立体外药动模型的方法,研究诺氟沙星对嗜水气单胞菌Aerom onas hydrophila的药动-药效(简称PK-PD)参数。结果表明:在消除半衰期为3.4 h的模型内,2M IC(最小抑菌浓度)、4M IC和8M IC的诺氟沙星对嗜水气单胞菌能够抑制4 h,4 h后细... 详细信息

通过建立体外药动模型的方法,研究诺氟沙星对嗜水气单胞菌Aerom onas hydrophila的药动-药效(简称PK-PD)参数。结果表明:在消除半衰期为3.4 h的模型内,2M IC(最小抑菌浓度)、4M IC和8M IC的诺氟沙星对嗜水气单胞菌能够抑制4 h,4 h后细菌出现再生长,而16M IC的诺氟沙星对嗜水气单胞菌能够起到持续的抑制作用;在消除半衰期为77 h的模型内,2M IC的诺氟沙星对嗜水气单胞菌能够抑制4 h,4 h后细菌出现再生长,而4M IC、8M IC和16M IC对嗜水气单胞菌能够起到持续的抑制作用。消除半衰期为3.4 h的模型内,当AUC0→24 h/M IC(药时曲线下面积与最小抑菌浓度的比值)>42.43±9.21,Cm ax/M IC(峰浓度与最小抑菌浓度的比值)>15.78±0.22时,诺氟沙星对嗜水气单胞菌能够起到持续的抑制作用;消除半衰期为77 h的模型内,当AUC0→24 h/M IC>41.87±10.16,Cm ax/M IC>4.79±0.11时,诺氟沙星对嗜水气单胞菌能够起到持续的抑制作用。

关键词：体外药动模型诺氟沙星嗜水气单胞菌

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