检索结果-内蒙古大学图书馆

水产学报 2007年第3期31卷 369-373页

作者：俞菊华戈贤平唐永凯刘波中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

使用实时定量RT-PCR测定了摄食无糖（脂肪9.13%,蛋白63.38%）、高糖（糖23.93%,脂肪9.94%,蛋白40.53%）、低脂（中糖）（脂肪9.92%,糖14.45%,蛋白50.14%）、高脂（脂肪19.93%,糖14.98%,蛋白40.88%）饲料的翘嘴红鲌在摄食后0、3、6、12、... 详细信息

使用实时定量RT-PCR测定了摄食无糖（脂肪9.13%,蛋白63.38%）、高糖（糖23.93%,脂肪9.94%,蛋白40.53%）、低脂（中糖）（脂肪9.92%,糖14.45%,蛋白50.14%）、高脂（脂肪19.93%,糖14.98%,蛋白40.88%）饲料的翘嘴红鲌在摄食后0、3、6、12、24hPEPCK的表达水平。结果显示,饲料中糖含量一致的情况下,高脂组和低脂组翘嘴红鲌PEPCK的表达差异不显著;脂肪水平一致时,高糖（23.93%）和中糖（14.45%）饲料组翘嘴红鲌PEPCK的表达,除了在0、3h时高糖组显著高外,6、12、24h没显著差异,但12、24h高糖组PEPCK相对较低,分别是中糖组的75%和65%;无糖组PEPCK的表达量除了在12h和其他各组一致（均较低）外,在其他时间均明显高,特别是摄食后24h其表达量为其他组同期的2.5～4.7倍。由此可见,当饲料中至少含14.45%糖但又低于23.93%时,饲料中的营养成分对PEPCK的表达没显著影响,而无糖饲料PEPCK的表达明显较高,和无糖饲料会引起较强的糖异生作用一致。

关键词：翘嘴红鲌磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶碳水化合物脂肪实时定量RT-PCR

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美国紫踵劈蚌与三角帆蚌和褶纹冠蚌的形态比较与判别分析

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动物学杂志 2007年第3期42卷 84-89页

作者：闻海波顾若波徐钢春华丹中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室无锡214081

描述了紫踵劈蚌(Potamilus alatus)贝壳外部和内部特征,并对紫踵劈蚌、三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)和褶纹冠蚌(Cristaria plicata)进行了形态学比较。运用多变量形态度量学方法分析了3种淡水育珠蚌的形态差异。主成分分析构建了2个主... 详细信息

描述了紫踵劈蚌(Potamilus alatus)贝壳外部和内部特征,并对紫踵劈蚌、三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)和褶纹冠蚌(Cristaria plicata)进行了形态学比较。运用多变量形态度量学方法分析了3种淡水育珠蚌的形态差异。主成分分析构建了2个主成分,其中第一主成分的方差贡献率为66·90%,第二主成分的贡献率为33·10%,2个主成分的累计贡献率达到100%;采用逐步判别法,从11个比例性状中筛选出6个主要性状建立了3种育珠蚌的形态判别函数,其综合判别准确率达到100%。

关键词：紫踵劈蚌淡水育珠蚌形态学特征主成分分析判别方程

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饲料脂肪对翘嘴红鲌生长、葡萄糖激酶和葡萄糖-6-磷酸酶活性与基因表达的影响

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中国水产科学 2008年第6期15卷 1024-1033页

作者：刘波唐永凯俞菊华谢骏戈贤平中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

选用360尾翘嘴红鲌(Erythrocutler ilishaeformis Bleeker),体质量约40g。随机分成为2组,分别为高脂组(脂肪质量分数19.93%,碳水化合物质量分数14.45%)、低脂组(脂肪质量分数9.92%,碳水化合物质量分数12.38%),每组设3个重复,饲养8周。... 详细信息

选用360尾翘嘴红鲌(Erythrocutler ilishaeformis Bleeker),体质量约40g。随机分成为2组,分别为高脂组(脂肪质量分数19.93%,碳水化合物质量分数14.45%)、低脂组(脂肪质量分数9.92%,碳水化合物质量分数12.38%),每组设3个重复,饲养8周。分别于摄食后0h、3h、6h、12h、24h测定血液指标、糖代谢酶葡萄糖激酶(Glucokinase,GK,E.C.2.7.1.1)以及葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G6Pase,E.C.3.1.3.9)活性及基因表达,并分析高脂肪与低脂肪水平日粮对翘嘴红鲌生长的影响。与低脂水平日粮相比,高脂水平日粮组血液甘油三酯水平和游离脂肪酸水平分别在摄食后3h、12h有增加现象,肝胰脏粗蛋白与脂肪含量有显著增加(P<0.05)。与低脂水平日粮相比,在摄食后3～12h高脂肪水平日粮组糖代谢酶GK的mRNA水平显著增加(P<0.05),但是日粮脂肪水平并不能显著影响GK活性(P>0.05)。在摄食后3～24h高脂肪水平日粮组糖代谢酶G6Pase的mRNA水平得到显著促进,并在摄食后24hG6Pase活性显著增加(P<0.05)。因此,摄食高脂肪水平日粮能增加肝胰脏粗蛋白与脂肪含量,造成翘嘴红鲌高血糖效应,诱导G6Pase酶活性及基因的表达,这可能是影响翘嘴红鲌碳水化合物利用的原因之一。

关键词：翘嘴红鲌脂肪葡萄糖激酶葡萄糖-6-磷酸酶酶活性生长基因表达

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罗非鱼性别决定和分化机制的研究进展

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中国水产科学 2009年第1期16卷 139-145页

作者：邹芝英杨弘李大宇中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

罗非鱼染色体遗传型性别决定机制(Chromosomal genetic sex determination,GSD)的研究开展较早,目前利用种间杂交的方法得到全雄罗非鱼在生产上已广泛应用,而对影响罗非鱼性别决定的环境因素研究开展较晚。研究证实罗非鱼确实存在温度... 详细信息

罗非鱼染色体遗传型性别决定机制(Chromosomal genetic sex determination,GSD)的研究开展较早,目前利用种间杂交的方法得到全雄罗非鱼在生产上已广泛应用,而对影响罗非鱼性别决定的环境因素研究开展较晚。研究证实罗非鱼确实存在温度依赖型性别决定机制(Temperature-dependent sex determination,TSD),而且这种温度依赖型性别决定机制只出现在性别发育的某一特定时期。近年来,研究者们开始尝试用分子生物学手段来研究罗非鱼性别决定及分化机制,寻找影响性别决定的基因位点、研究位点之间的相互关系及其相互作用,以及外界因素是如何通过调控性别决定位点来影响鱼类性别分化的等。目前研究的主要功能基因有DMRT基因家族、DAX1、SHP、AMH、oP450arom等。最新研究结果表明,tDMRT1可作为尼罗罗非鱼精巢分化的分子标记。

关键词：罗非鱼染色体遗传型性别决定温度依赖型性别决定

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不饱和脂肪酸对黄鳝部分非特异性免疫和代谢指标的影响

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中国水产科学 2008年第4期15卷 600-605页

作者：杨鸢劼邴旭文徐增洪中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

在不含脂肪酸的黄鳝基础饲料中,按正交法[L9（3^4）]分别添加亚油酸（C18：2n-6）、亚麻酸（C18：3n-3）和EPA＋DHA（C20：5n-3＋C22：6n-3）,人工投喂饲养野生黄鳝（Monopterus albus）,31d后测定实验黄鳝血清溶菌酶（Lysozyme,LSZ）... 详细信息

在不含脂肪酸的黄鳝基础饲料中,按正交法[L9（3^4）]分别添加亚油酸（C18：2n-6）、亚麻酸（C18：3n-3）和EPA＋DHA（C20：5n-3＋C22：6n-3）,人工投喂饲养野生黄鳝（Monopterus albus）,31d后测定实验黄鳝血清溶菌酶（Lysozyme,LSZ）、总超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）及丙二醛（Malondiadehyde,MDA）含量和血细胞吞噬活性。评价实验组及对照组的非特异性免疫水平、自由基（Free radical,FR）代谢以及脂质过氧化状态。采用SPSS11.5软件,Duncan多重比较实验组间差异。实验结果显示,实验组血清LSZ活性均有不同程度的提高,最高为94.90U/mL（P〈0.05）;血细胞吞噬率为2.6%-11.47%,吞噬指数介于0.02-0.227之间,实验组比对照组血细胞吞噬率和吞噬指数显著提高（P〈0.01）;血清SOD及CAT活性分别在116.95-333.44U/mL及9.48-17.81U/mL之间,无显著差异（P〉0.05）,但MDA含量比对照组有不同程度的下降,其中第4组MDA为6.48nmol/mL,有极显著差异（P〈0.01）。结果表明：添加不饱和脂肪酸后,黄鳝血清LSZ活性和血细胞吞噬能力增加最明显的组合为C18：3n-3、C18：2n-6和EPA＋DHA,添加量分别为1.30%、1.55%和0.25%,可显著增加黄鳝非特异性免疫功能,而此时血清中FR代谢水平处于相对平衡状态。

关键词：黄鳝不饱和脂肪酸溶菌酶自由基血细胞吞噬能力

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Generation of Antibodies Against DMRT1 and DMRT4 of Oreochromis aurea and Analysis of Their Expression Profile in Oreochromis aurea Tissues

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Journal of Genetics and Genomics 2007年第6期34卷 497-509页

作者：曹谨玲曹哲民吴婷婷南京农业大学渔业学院无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室无锡214081

Sex determination is composed of somatic and germ-line sex differentiation hierarchies whose interaction is poorly understood. A single gene known to control somatic sex determination, the DM-domain containing （Doublesex/Mab-3 DNA-binding motif） gene, is highly conserved across species. Vertebrate DMRT1 （DM-related transcription factor 1） expression occurs predominantly in the testis. Here, however, isolated two distinct DM-domain cDNA from Oreochromis aurea ovary and testis have been named DMRT4 （DM-related transcription factor 4） and DMRT1 by BLAST, respectively. Despite high homology in the DM-domain there is little similarity outside the *** better understand the structure, function, and possible roles of DMRT4 and DMRT1 as potential candidates for sex differentiation and sex determination, the intact regions encoding DMRT4 and DMRT1 obtained by PCR were sub-cloned into the vector pMAL-c2x and introduced into the Escherichia coli TB1 cell for efficient fusion expression. After purification and cleavage, DMRT4 and DMRT1 proteins were used to immunize adult rabbits following standard protocols. Consequently, it was found by using Western blot analysis that polyclonal antibodies against DMRT4 and DMRT1 had high specificity. The relative expression levels of DMRT4 and DMRT1 mRNA were determined by fluorescent Real-time RT-PCR in female and male Oreochromis aurea with 13-actin as the internal standard. DMRT1 was expressed only in testis, whereas DMRT4 was over expressed in the ovary, but in both female and male, a slight expression in the brain was also detected. Statistical analysis showed that in the brain, mean DMRT4 mRNA levels in female were significantly higher than in male. Meanwhile, the expression of DMRT4 and DMRT1 protein was also analyzed using the purified antibodies through Western blot and immunohistochemistry. It was found that DMRT4 was exclusively expressed in the ovary and DMRT1 in the testis. Study on DMRT4 and DMRT1 expression facilitate

关键词： DMRT 1 DMRT4 prokaryotic expression polyclonal antibody expression profile

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黄鳝AQP1 cDNA的克隆与表达分析

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华北农学报 2012年第B12期27卷 6-11页

作者：丁炜东曹丽萍曹哲明邴旭文中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)分离、克隆出黄鳝水通道蛋白(Aquaporin 1,AQP1)基因全长cDNA序列,共1 134 bp,包括163 bp 5'非翻译区、789 bp阅读框以及182 bp 3'非翻译区,阅读框共编码263个氨基酸,分子量计算值为27.8 k... 详细信息

采用RT-PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)分离、克隆出黄鳝水通道蛋白(Aquaporin 1,AQP1)基因全长cDNA序列,共1 134 bp,包括163 bp 5'非翻译区、789 bp阅读框以及182 bp 3'非翻译区,阅读框共编码263个氨基酸,分子量计算值为27.8 kDa,理论等电点为7.945。氨基酸组成中,正电荷残基(K,R)总数21个,负电荷残基(E,D)总数19个,极性氨基酸为115个,疏水性氨基酸60个。同源性分析表明,黄鳝与欧洲鳗的相似性高达87%,其次与底(鱼将)、鲷、犬、克氏鲤、猪、珍珠鸟、斑马鱼、半滑舌鳎、非洲肺鱼、蟾蜍、非洲瓜蟾的相似性分别为42.9%,61.2%,46.1%,42.9%,53.9%,47.9%,41.5%,40.1%,33.2%,30.8%,33.2%。生物信息学分析显示,黄鳝AQP1基因所编码的蛋白质以亲水性区域为主,具有丰富的B细胞抗原位点。定量分析结果表明,AQP1 mRNA主要在卵巢中高表达,其他组织中表达量较少。

关键词：黄鳝卵巢水通道蛋白

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大黄蒽醌提取物对建鲤抗应激及生长的影响

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动物学报 2006年第5期52卷 899-906页

作者：刘波郑小平周群兰苏永腾邴旭文殷国俊谢骏徐跑中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

将750尾建鲤随机分成5组,第1组为对照组,投喂基础日粮,另外4组为试验组,投喂基础日粮中分别添加0.5%、1.0%、2.0%、4.0%大黄蒽醌提取物。从2005年7月到9月连续投喂70d后,对鱼体进行高密度应激,测定其生长、应激前后血液皮质醇、血糖、... 详细信息

将750尾建鲤随机分成5组,第1组为对照组,投喂基础日粮,另外4组为试验组,投喂基础日粮中分别添加0.5%、1.0%、2.0%、4.0%大黄蒽醌提取物。从2005年7月到9月连续投喂70d后,对鱼体进行高密度应激,测定其生长、应激前后血液皮质醇、血糖、溶菌酶等变化。结果表明:与对照组相比,应激前添加大黄蒽醌提取物提高了鱼体增重率、特定生长率、鱼体丰满度、血液溶菌酶活性,降低了饵料系数与鱼体死亡率,但是与大黄蒽醌提取物的添加水平不成线性关系,其中2.0%试验组还显著降低了血液皮质醇。高密度应激1d后,各组血液中的皮质醇、血糖、溶菌酶都有不同程度的增加,其中对照组最高,添加1.0%和2.0%大黄蒽醌提取物的试验组相对较低。应激前后各组鱼的攻毒试验表明:除应激前添加1.0%和2.0%大黄蒽醌提取物的组没有死鱼外,其它各组都有死鱼,其中对照组死亡率最高。因此添加1.0%-2.0%大黄蒽醌提取物提高了机体抗应激能力,并对病原菌感染起一定的保护作用,促进了鱼体生长。

关键词：建鲤大黄葸醌提取物中草药抗应激生长

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黄颡鱼LRH-1基因的分离和表达

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中国水产科学 2009年第5期16卷 649-659页

作者：唐永凯俞菊华徐跑李建林中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

肝受体类似物(Liver receptor homolog-1,LRH-1)是核受体家族Ftz-F1中一个亚家族成员,由于其在哺乳类卵巢中的高表达而被认为在卵巢类固醇合成的调控中起着一定的作用。本研究使用RT-PCR、RACE法分离到了黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco... 详细信息

肝受体类似物(Liver receptor homolog-1,LRH-1)是核受体家族Ftz-F1中一个亚家族成员,由于其在哺乳类卵巢中的高表达而被认为在卵巢类固醇合成的调控中起着一定的作用。本研究使用RT-PCR、RACE法分离到了黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)肝受体类似物基因(LRH-1)以及一个无活性的LRH-1′cDNA。LRH-1cDNA全长1945bp,包括5′非翻译区207bp,3′非翻译区238bp,开放阅读框1500bp,编码500个氨基酸,推算的蛋白分子量为57.19kD。LRH-1′全长1663bp,5′非翻译区283bp,3′非翻译区330bp,开放阅读框1050bp,编码350个氨基酸,推算的蛋白分子量为39.7kD。与LRH-1相比,LRH-1′缺少存在于基因5′端的锌指结构和3′端起转录激活作用的AF-2基序。不同动物LRH-1氨基酸序列比对结果表明,黄颡鱼LRH-1和其他动物的LRH-1相似性为79%-85%,和其他动物的类固醇生成因子(SF-1)相似性为59%-66%。系统发育树显示,Ftz-F1分为两大支,一支包括鱼类SF-1;另一支又有2个分支,分别包含其他动物的SF-1和所有动物的LRH-1,在LRH-1分支中鱼类LRH-1单独为一小支。以β-actin为内标的荧光实时定量RT-PCR结果显示,LRH-1在雌、雄黄颡鱼脑、肝、肾、性腺均有表达,以肝脏的表达量为最高,雌鱼各组织的表达量均比雄鱼高,其中肝脏和性腺差异明显(P<0.05);在卵巢的不同发育阶段,该基因的表达量也不尽相同,Ⅲ期卵巢表达量最高,明显高于Ⅴ期(P<0.05),Ⅴ期又明显高于Ⅱ、Ⅳ和Ⅵ期(P<0.05);注射催产素促黄体释放激素类似物(LRH-A)12h后,LRH-1在脑的表达量没明显变化,在肝脏和肾脏的表达量明显增加,而在卵巢的表达量明显下降。

关键词：黄颡鱼肝受体类似物系统发育实时定量RT-PCR 表达模式

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草鱼种质相关SRAP及SCAR的分子标记

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动物学报 2008年第3期54卷 475-481页

作者：丁炜东曹丽萍曹哲明中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室江苏无锡214081

采用相关序列扩增多态性(Sequence-realted Amplified Polymorphism,SRAP)技术分析野生草鱼和家养草鱼,筛选与草鱼种质退化相关的分子遗传标记。共进行88对引物组合的检测,产生标记数目共计905个。依据标记在群体中出现的频率和变化规律... 详细信息

采用相关序列扩增多态性(Sequence-realted Amplified Polymorphism,SRAP)技术分析野生草鱼和家养草鱼,筛选与草鱼种质退化相关的分子遗传标记。共进行88对引物组合的检测,产生标记数目共计905个。依据标记在群体中出现的频率和变化规律,共筛选出21个可能与种质相关的特异性标记,对这些特异性标记进行测序并将测序结果进行BLAST分析。发现测得片段中有8个片段在GenBank中找到同源性较高的序列,而其他片段与数据库中序列的相似性较低。根据序列信息分别设计了3对引物。用这3对引物分别对草鱼三个群体进行PCR扩增,分别产生了SCAR1(308bp)、SCAR2(66bp)、SCAR3(114bp)3个扩增带。采用大样本对这3个标记进行验证,发现其中SCAR1在家养群体中呈现阳性,在野生群体中为阴性,可区分出这两种群体。以SCAR3为引物在174条家养群体中得到目的片段,在26个家养群体没有扩增出条带,分布频率为87%;在100个野生群体中有6个个体检测到该条带,分布频率为6%。以SCAR2为引物在野生群体中完全扩增出目的条带,淡水中心群体中有7条扩增到条带,前洲群体中没有扩增出条带,标记在家养种群中的分布频率为96.50%。因此SCAR1可作为草鱼家养群体的一个重要的分子遗传特征指标,为进一步进行分子标记辅助育种奠定了基础。

关键词：草鱼种质退化 SRAP分子标记 SCAR标记

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