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2018年中国水产学会学术年会

作者：宋飞彪王兰梅朱文彬董在杰俞贞贞付建军罗明坤南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室上海海洋大学水产与生命学院

作为IGF家族的新成员,igf3基因在硬骨鱼类性腺发育中起着重要的作用。尽管有研究表明igf3在鱼类性腺中高表达,但igf3是否影响性腺中长链非编码RNAs(LNCRNs)的表达尚不清楚。本研究利用RNA干扰技术建立了igf3基因被敲降的福瑞鲤(Cyprinus... 详细信息

作为IGF家族的新成员,igf3基因在硬骨鱼类性腺发育中起着重要的作用。尽管有研究表明igf3在鱼类性腺中高表达,但igf3是否影响性腺中长链非编码RNAs(LNCRNs)的表达尚不清楚。本研究利用RNA干扰技术建立了igf3基因被敲降的福瑞鲤(Cyprinus carpio)活体模型。然后对igf3基因敲降后的福瑞鲤性腺组织进行高通量测序。结果显示,对照组和干扰组中鉴定出327169410和306305018条有效读取序列。经过筛选,工产生14199个LncRNA和106932个m RNA,应用EdgeR共筛选出124差异表达lncRNA和353个差异表达m RNA。GO分析显示,这些差异表达基因与细胞内雌激素/雄激素受体信号通路、雌/雄性腺发育有关。KEGG分析表明,这些差异表达基因富集到Wnt、PI3K-Akt和TGF-β信号通路,并且这三个信号通路包括相同的差异表达基因,表明igf3可能通过IGF/Wnt/PI3K-Akt/TGF-β信号通路发挥作用。LncRNA-mRNA共表达网络显示,igf3基因敲降导致lncRNAMSTRG.42108的表达下调,继而诱导细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase)、成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因家族(serine/threonine protein kinase gene family)等基因的表达,进而影响性腺细胞信号转导通路、细胞周期、分化、支持细胞和生殖细胞分化,最终影响性腺发育。这些结果暗示lncRNA MSTRG.42108可能是igf3基因的负调控因子,在igf3基因敲除后性腺发育中起重要作用。

关键词：福瑞鲤 igf3 RNA干扰 lncRNA mRNA

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基于转录组分析刀鲚开口期仔鱼摄食前后基因表达变化

基于转录组分析刀鲚开口期仔鱼摄食前后基因表达变化

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2018年中国水产学会学术年会

作者：高俊聂志娟杜富宽黎燕杨西伟邵乃麟徐跑顾若波南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室上海海洋大学水产与生命学院

运用转录组分析刀鲚开口期仔鱼摄食前后基因变化谱的变化。比较摄食前后有154个基因上调和144个基因下调。相比于摄食前,视黄醇代谢和脂质存储是摄食后的两大主要过程。运用荧光定量PCR方法检验刀鲚开口期仔鱼摄食前后生物学过程涉及差... 详细信息

运用转录组分析刀鲚开口期仔鱼摄食前后基因变化谱的变化。比较摄食前后有154个基因上调和144个基因下调。相比于摄食前,视黄醇代谢和脂质存储是摄食后的两大主要过程。运用荧光定量PCR方法检验刀鲚开口期仔鱼摄食前后生物学过程涉及差异表达基因的表达情况。结果显示,摄食后RDH10、RDH12、RPE65、CRY、PER、CYP7A1和CYP27A的表达量均显著上调(P <0.05),ACSL的表达量显著下调(P<0.05)。为了探究不同胚胎发育阶段视黄醇代谢、PPAR信号通路和胆汁合成通路中DEGs的表达模式,通过RT-qPCR分析,结果显示RDH12和RPE65在出膜后和摄食后表达显著高于其他时期;RDH10在摄食后高表达,其他时期表达量较低;CYP7A1和CYP27A表达模式类似,摄食后表达量最高,原肠期、出膜后和摄食前表达量次之,在多细胞期表达量最低。ACSL的表达量在多细胞期和原肠期最低,出膜后表达量突然升高,并在之后显著下降。

关键词：开口期刀鲚仔鱼转录组基因表达

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四个罗非鱼选育品种抗链球菌病能力差异研究

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水生生物学报 2017年第6期41卷 1232-1241页

作者：祝璟琳邹芝英李大宇肖炜徐跑杨弘薛良义宁波大学海洋学院宁波315211 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081

为筛选出抗病力优良的罗非鱼品种,以奥利亚罗非鱼"夏奥1号"、尼罗罗非鱼"99"埃及品系、吉富罗非鱼"中威1号"和奥尼罗非鱼为研究对象,33℃水温暂养7d后分别进行无乳链球菌人工感染实验,连续7d统计累计死亡... 详细信息

为筛选出抗病力优良的罗非鱼品种,以奥利亚罗非鱼"夏奥1号"、尼罗罗非鱼"99"埃及品系、吉富罗非鱼"中威1号"和奥尼罗非鱼为研究对象,33℃水温暂养7d后分别进行无乳链球菌人工感染实验,连续7d统计累计死亡率,并于人工感染后0、24h、48h和72h采集血液和组织样本,研究这4个罗非鱼选育品种抗链球菌病能力的差异。结果显示:感染7d后奥尼罗非鱼的累计死亡率最低;奥尼罗非鱼的谷草转氨酶(AST)感染前后始终都低于其余3个品种罗非鱼(P<0.05);埃及尼罗和奥尼在感染72h后球蛋白(GLO)分别显著升高1.13倍和1.41倍;奥尼罗非鱼白蛋白/球蛋白(A/G)在感染前后没有显著性变化(P>0.05),而其余3个品种罗非鱼A/G比值在感染后都显著性降低(P<0.05);埃及尼罗的碱性磷酸酶(AKP)在感染72h后显著降低(P<0.05),奥利亚和吉富的AKP表现为先上升后下降,奥尼的AKP感染前后没有显著性变化(P>0.05);各品种罗非鱼血清中的乳酸脱氢酶(LDH)感染后都显著升高(P<0.05);奥利亚、吉富和奥尼罗非鱼的超氧化歧化酶(SOD)感染48h时都显著升高(P<0.05);奥尼罗非鱼在感染前后溶菌酶(LZM)活性都显著高于其余3个品种罗非鱼(P<0.05)。组织病理学结果显示:吉富和奥尼肝细胞水肿变性,而奥利亚和埃及尼罗出现大面积肝细胞脂肪变性;每个品种罗非鱼均呈现严重的脾炎,奥利亚、埃及尼罗和吉富的脾脏中大量铁血黄素沉积;每种罗非鱼呈现不同程度的肾小球萎缩,肾小管上皮细胞变性、坏死。研究表明奥尼罗非鱼抗链球菌病能力最强,感染后血清中AST水平与肝受损程度呈一定的正相关,LZM水平和罗非鱼抗链球菌病能力呈一定的正相关。

关键词：品种罗非鱼无乳链球菌生化指标溶菌酶抗病力组织病理

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黄芩苷对H2O2诱导的罗非鱼肝损伤的保护作用

黄芩苷对H2O2诱导的罗非鱼肝损伤的保护作用

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2018年中国水产学会学术年会

作者：李尧贾睿杜金梁曹丽萍徐跑殷国俊南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业种质资源利用重点实验室中国水产科学研究院淡水渔业研究中心鱼类免疫药理国际联合实验室 National Agricultural Research Center Research Institute for Fisherie and Aquaculture Anna

本实验旨在研究黄芩苷对HO诱导的罗非鱼肝损伤的保护作用,并阐明黄芩苷在罗非鱼肝保护作用中的分子机制。将实验罗非鱼随机分为五组,空白对照组,HO组和三个黄芩苷药物组（0.4、0.8和1.6g/kg）。饲养60天后,空白对照组腹腔注射磷酸缓冲液... 详细信息

本实验旨在研究黄芩苷对HO诱导的罗非鱼肝损伤的保护作用,并阐明黄芩苷在罗非鱼肝保护作用中的分子机制。将实验罗非鱼随机分为五组,空白对照组,HO组和三个黄芩苷药物组（0.4、0.8和1.6g/kg）。饲养60天后,空白对照组腹腔注射磷酸缓冲液,其他四组注射HO。24小时后采集血清和肝脏检测生化指标和基因表达。实验结果表明黄芩苷预处理可通过降低谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、碱性磷酸酶（AKP）和丙二醛（MDA）的含量有效抑制HO诱导的罗非鱼肝损伤和氧化应激;并且呈剂量依赖性增加总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）和超氧化物歧化酶（SOD）含量;提高总抗氧化能力（T-AOC）和谷胱甘肽（GSH）的水平。同时,黄芩苷预处理能够阻止NF-кB的激活和随后产生的炎性介质TNF-α和IL-1β的增多。综合以上数据表明黄芩苷对HO诱导的罗非鱼肝毒性具有保护作用,这可能与其增强抗氧化能力和抑制NF-кB信号通路的能力有关。

关键词：黄芩苷过氧化氢肝损伤罗非鱼

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青虾甲壳动物心激肽(CCAP)基因克隆及在急性缺氧和复氧过程中的表达分析

青虾甲壳动物心激肽(CCAP)基因克隆及在急性缺氧和复氧过程中的表...

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2018年中国水产学会学术年会

作者：单冬艳王亚冰傅洪拓乔慧孙盛明张文宜水产科学国家级实验教示范中心(上海海洋大学) 南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室

从青虾(Macrobrachium nipponense)的眼柄中克隆到甲壳动物心激肽(CCAP)的全长,并命名为Mn-CCAP。qPCR显示CCAP在青虾眼柄中的表达量最高,表明CCAP在神经系统组织中起重要作用。低氧应激试验,在青虾脑组织中CCAP表达水平增加,复氧后CCA... 详细信息

从青虾(Macrobrachium nipponense)的眼柄中克隆到甲壳动物心激肽(CCAP)的全长,并命名为Mn-CCAP。qPCR显示CCAP在青虾眼柄中的表达量最高,表明CCAP在神经系统组织中起重要作用。低氧应激试验,在青虾脑组织中CCAP表达水平增加,复氧后CCAP的表达水平降低;但在眼柄中,CCAP的表达量复氧后又恢复正常水平。另外,低氧条件下CCAP在青虾脑和眼柄内的表达变化是不同步的,低氧处理3h,CCAP在脑中表达水平立即改变,而眼柄中直到低氧处理6h才发生改变,表明脑是青虾应对低氧刺激比较敏感的反应部位。复氧12h的表达水平未恢复至原水平,表明低氧应激造成的副作用短时间内无法完全恢复。

关键词：甲壳动物心激肽缺氧日本沼虾复氧

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油酸诱导建鲤(Cyprinus carpio var. Jian)肝细胞脂肪变性模型的建立

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渔业科学进展 2017年第2期38卷 107-113页

作者：杜金梁曹丽萍贾睿王涛顾郑琰张春云骆仁军徐跑殷国俊中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部鱼类免疫药理学国际联合实验室无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081

通过对油酸诱导时间及有效作用浓度的研究,建立油酸致建鲤肝细胞脂肪变性模型。本研究以胰蛋白酶消化法获得的原代肝细胞作为实验材料,加入不同浓度油酸(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L)与肝细胞共培养24–48 h,诱导肝细胞脂肪变性... 详细信息

通过对油酸诱导时间及有效作用浓度的研究,建立油酸致建鲤肝细胞脂肪变性模型。本研究以胰蛋白酶消化法获得的原代肝细胞作为实验材料,加入不同浓度油酸(0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L)与肝细胞共培养24–48 h,诱导肝细胞脂肪变性,分别收集不同时段的肝细胞及上清液,采用试剂盒测定肝细胞中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)的含量,同时测定上清培养液中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,MTT法测定肝细胞的存活情况,确定油酸最佳诱导浓度,油红O染色法观察细胞内脂肪滴的形成情况。研究结果显示,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养48 h,可以显著提高肝细胞内TG、TC含量(P﹤0.05或P﹤0.01),极显著提高上清培养液中GOT、GPT、LDH、γ-GT的活性,显著降低上清培养液中SOD的活性,但与24 h相比有升高趋势,0.4 mmol/L油酸与肝细胞共培养24 h,光镜下可见细胞内有脂肪滴形成,以48 h最明显。综上所述,油酸浓度0.4 mmol/L、诱导时间48 h成功构建了肝细胞脂肪变性模型,为研究鱼类脂肪肝类疾病奠定了基础。

关键词：建鲤肝细胞脂肪变性油酸

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富集优势基因型的后备亲本筛选以及相关分子标记的遗传效应分析

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水生生物学报 2017年第1期41卷 79-85页

作者：张成锋苏胜彦朱健石连玉中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业与种质资源利用重点实验室无锡214081 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所农业部淡水水产生物技术与遗传育种重点实验室哈尔滨150070

选取黄河鲤新品系亲本和子代共450尾,5对微卫星引物和4个基因区段扩增引物开展基因型检测,并检测它们与体重的关联性以及分析相应的遗传效应。结果显示:Koi42和4个SNPs位点对体重有显著的影响,获得具有超过富集2个优势基因型的候选亲本... 详细信息

选取黄河鲤新品系亲本和子代共450尾,5对微卫星引物和4个基因区段扩增引物开展基因型检测,并检测它们与体重的关联性以及分析相应的遗传效应。结果显示:Koi42和4个SNPs位点对体重有显著的影响,获得具有超过富集2个优势基因型的候选亲本共13尾,富集优势分子标记基因型的候选亲本生长性能优势明显。通过多元逐步回归分析,利用AIC最佳模型筛选到COⅠ626、D-Loop253和Koi42共3个位点,发现Koi42贡献率较大,经Fisher精确性检验,发现其与性别存在关联,其加性效应接近显著水平(P<0.05)。检测的多个上位效应组分中,仅有D-Loop253和Koi42的加性效应间的互作达到显著水平。对遗传方差组分进行剖分发现,加性方差占11.4%,两个位点的加性效应构成的上位效应占到77.5%,因此这3个分子标记对体重的影响主要以上位效应为主,而且是两两加性效应的占比较大,可以推断出D-Loop 253和Koi42两个分子标记的上位效应起主要作用。综上所述结果提示Koi42及与其有互作的D-Loop253可用于黄河鲤新品系的标记辅助选择,可以开展多个分子标记的富集选择。

关键词：黄河鲤新品系基因型体重关联分析上位效应

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团头鲂(Megalobrama amblycephala)caspase3基因克隆及其在高温胁迫中的表达分析

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基因组学与应用生物学 2017年第10期36卷 4090-4099页

作者：孙盛明朱健戈贤平石连玉程磊张武肖苏艳莉中国水产科学研究院黑龙江水产研究所农业部淡水水产生物技术与遗传育种重点实验室哈尔滨150070 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部种质淡水渔业与种质资源利用重点实验室无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院无锡214081

采用RACE技术克隆获得团头鲂caspase3基因cDNA序列全长,并对该序列进行分析。结果显示,团头鲂caspase3基因全长为2 077 bp,开放阅读框长837 bp,5'非编码区长155 bp,3'非编码区长1 085 bp,命名为Ma Casp3。推测该基因编码278个... 详细信息

采用RACE技术克隆获得团头鲂caspase3基因cDNA序列全长,并对该序列进行分析。结果显示,团头鲂caspase3基因全长为2 077 bp,开放阅读框长837 bp,5'非编码区长155 bp,3'非编码区长1 085 bp,命名为Ma Casp3。推测该基因编码278个氨基酸,预测分子量为30.92 ku,理论等电点为6.15。同源性和系统进化分析发现,Ma Casp3基因与斑马鱼(Danio rerio)caspase3氨基酸相似性最高,与其他节肢动物caspase3家族基因聚为一类。荧光定量RT-PCR结果显示,Ma Casp3基因在肝脏中的相对表达量最高,在肌肉中表达量最低。与常温对照组相比,高温胁迫7 d后该基因在团头鲂肝脏中的表达量显著升高,表明Ma Casp3基因可能参与团头鲂高温胁迫的应答并引发细胞凋亡级联反应。此外,高温胁迫7 d与胁迫前比较团头鲂幼鱼肝脏组织呈现肝细胞肿大、混浊变性、细胞核溶解、肝细胞空泡化现象,因此实际生产中应密切关注养殖水体水温变化以减少温度应激导致的组织损伤。

关键词：团头鲂高温肝脏 Caspase3 基因克隆

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广西石漠化贫困地区渔业发展现状问题与对策

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中国渔业经济 2018年第3期36卷 36-42页

作者：叶香尘吕业坚董在杰朱文彬黄维张盛滕忠作张玉阁郑恺广西壮族自治区水产引育种中心广西南宁530031 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业农村部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 田东县水产技术推广站广西百色531500

论文采用函调、座谈和现场调研方式,全面收集广西石漠化贫困地区渔业主产业布局情况、产业发展中的主要问题以及产业需求等资料与信息,通过归纳分析,详细阐述了广西石漠化贫困地区渔业发展现状,并从资金、技术、环境、种业建设等方面探... 详细信息

论文采用函调、座谈和现场调研方式,全面收集广西石漠化贫困地区渔业主产业布局情况、产业发展中的主要问题以及产业需求等资料与信息,通过归纳分析,详细阐述了广西石漠化贫困地区渔业发展现状,并从资金、技术、环境、种业建设等方面探讨了制约地区渔业发展的关键问题,针对性地提出了筹集加大渔业发展资金、因地制宜开展特色种养技术示范、加大科技力量投入、培植发展经济合作组织和龙头企业等促进广西石漠化贫困地区渔业可持续发展的对策和建议,为"十三五"广西"精准扶贫"工作提供参考。

关键词：石漠化贫困地区渔业对策脱贫

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泽泻提取物对油酸诱导建鲤脂肪肝细胞损伤中生化指标及CYP1A蛋白表达的影响

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西南农业学报 2017年第1期30卷 226-232页

作者：杜金梁曹丽萍贾睿徐跑殷国俊中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部鱼类免疫药理学国际联合实验室江苏无锡214081 南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081

为了研究中药泽泻提取物对油酸诱导建鲤脂肪肝变性细胞的保护作用,本实验以0.4 mmol·L-1油酸来构建建鲤原代脂肪肝细胞损伤模型,然后用不同浓度的泽泻提取物处理肝细胞24和48 h后,分别收集细胞和细胞培养液,然后测定谷丙转氨酶(GPT... 详细信息

为了研究中药泽泻提取物对油酸诱导建鲤脂肪肝变性细胞的保护作用,本实验以0.4 mmol·L-1油酸来构建建鲤原代脂肪肝细胞损伤模型,然后用不同浓度的泽泻提取物处理肝细胞24和48 h后,分别收集细胞和细胞培养液,然后测定谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、碱性磷酸酶(AKP)、胆碱酯酶(CHE)、细胞色素酶P4501A1(CYP1A1)和细胞色素酶P4502E1(CYP2E1)的含量等生化指标以及CYP1A的蛋白表达情况。结果显示,0.4 mmol·L-1的油酸与原代肝细胞共培养48 h可以显著提高肝细胞培养上清中GPT、GOT、TG、TC、AKP、CHE、LDH、CYP1A1和CYP2E1的含量(P<0.01或者P<0.05),可以诱导肝细胞中CYP1A的蛋白表达。将不同浓度的泽泻提取物(0、1、5、10、20、50μg·m L-1)与脂肪肝细胞共培养24~48 h发现,泽泻提取物能不同程度抑制油酸诱导的GOT、GPT、TG、TC、LDH、AKP、CHE水平和CYP1A1、CYP2 E1含量的升高(P<0.01或者P<0.05),不同程度降低肝细胞中CYP1 A蛋白表达,以作用时间48 h效果较好。研究证实了泽泻提取物对油酸诱导的鱼类脂肪肝细胞损伤具有保护作用,而泽泻提取物作为鱼类脂肪肝的防治药物还需要进一步的在体研究。

关键词：建鲤肝细胞油酸泽泻提取物

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