检索结果-内蒙古大学图书馆

Na~＋-K~＋-ATPase α1基因全长cDNA的克隆及序列分析和表达

中国水产科学 2012年第4期19卷 594-603页

作者：刘珊李冰张成锋魏可鹏朱健南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

为了解Na+-K+-ATPase α1基因的分子结构及其在建鲤盐度调控过程中起到的作用,采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法分离克隆了建鲤(Cyprinus carpio ***)Na+-K+-ATPase α1基因全长cDNA,得到3 397 bp的全长cDNA,包括3 081 bp的开放... 详细信息

为了解Na+-K+-ATPase α1基因的分子结构及其在建鲤盐度调控过程中起到的作用,采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法分离克隆了建鲤(Cyprinus carpio ***)Na+-K+-ATPase α1基因全长cDNA,得到3 397 bp的全长cDNA,包括3 081 bp的开放阅读框(ORF),232 bp的5-末端非编码区(UTR)以及219 bp的3-末端非编码区(UTR)。对推测的该基因氨基酸序列进行同源性比对和系统分析显示:建鲤与其他鱼类该基因的氨基酸序列相似度为90.22%~95.52%,与斑马鱼(Danio rerio)相似度最高(95.52%),与虱目鱼(Chanos chanos)相似度偏低,其次是平鲷(Rhabdosargus sarba)、萨罗罗非鱼(Sarotherodon melanotheron)、底鳉(Fundulus heteroclitus)、黑鲷(Acanthopagrus schlegelii)、马苏大马哈鱼(Oncorhynchus masou)和虹鳟(Oncorhynchus mykiss),与大西洋鲑(Salmo salar)的相似度最低(90.22%),与非洲爪蟾(Xenopus laevis)和人(Homo sapiens)的相似度分别为89.62%和89.51%。以上结果表明,不同物种间的Na+-K+-ATPaseα1基因的氨基酸序列极为保守。用实时定量PCR(RT-PCR)检测该基因在建鲤鳃、肾、肠、肝、脑和脾的相对表达量,其中脑最高,其次是鳃、脾、肾、肠,肝最低,这表明脑、鳃和脾是建鲤Na+-K+-ATPase α1基因主要的表达器官。本研究旨为进一步探索建鲤的盐度调控机制奠定分子基础。

关键词：建鲤 Na+-K+-ATPase α1 克隆序列分析组织表达

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应用SSR和SRAP标记构建青虾遗传连锁图谱

引用

中国水产科学 2012年第2期19卷 202-210页

作者：乔慧吴滟傅洪拓龚永生蒋速飞熊贻伟南京农业大学渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

采用SSR和SRAP标记结合拟测交策略构建青虾（Macrobrachium nipponense）遗传连锁图谱。共有175个标记（含27个SSR、148个SRAP标记）分布在53个连锁群上。每个连锁群含2~8个标记,其中不少于3个标记的连锁群有35个,连锁对18个,平均每个... 详细信息

采用SSR和SRAP标记结合拟测交策略构建青虾（Macrobrachium nipponense）遗传连锁图谱。共有175个标记（含27个SSR、148个SRAP标记）分布在53个连锁群上。每个连锁群含2~8个标记,其中不少于3个标记的连锁群有35个,连锁对18个,平均每个连锁群的标记数为3.3个;连锁群长度在6.7~91.2 cM之间,相邻标记间最大间隔为49.0 cM,最小为1.4 cM,平均间隔为13.1 cM。青虾框架图谱长度为997.2 cM,图谱观察总长度为2 270.5cM,根据估算,青虾遗传连锁图谱预期长度为4 380.6 cM,图谱的覆盖率为51.83%。本研究构建了青虾遗传连锁图谱,该图谱也是淡水虾蟹类第一张遗传连锁图谱,可为青虾QTL定位、基因克隆、遗传选育等提供指导,并为进一步构建高密度的青虾遗传连锁图谱奠定了基础。

关键词：青虾日本沼虾 SSR SRAP 遗传连锁图谱

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建鲤IGFBP3基因多态性对生长的影响

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动物学杂志 2012年第1期47卷 96-104页

作者：魏可鹏俞菊华李红霞李建林唐永凯南京农业大学无锡渔业学院无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081

胰岛素样生长因子结合蛋白3(insulin-like growth factor binding protein,IGFBP3)是调节动物生长和代谢的重要基因。本实验查找了建鲤(Cyprinus carpio ***)IGFBP3s基因上的SNP位点。使用PCR-RFLP检测了其中5个位点(IGFBP3a-I3_G-253T、IGFBP3b-I2_G30T、IGFBP3b-I3_A-341G、IGFBP3b-E4_C54T、IGFBP3b-E4_C72G)在931尾(485♂,446♀)建鲤中的基因型分布。基因型与增重的相关性分析结果显示,5个位点均与雌性鱼种阶段增重呈极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)相关,增重快个体的基因型分别为TT型、GG型、AG型、CC型和CG型;与雄性鱼种阶段增重显著(P<0.05)相关的只有G30T,其中GG型个体增重显著较TT型快;C72G和A-341G两个位点与雌、雄成鱼增重呈极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)相关,C72G的CG型增重显著快于CC型和GG型个体,A-341G的AG型和GG型雄性个体增重显著(P<0.05)较AA型快,但雌鱼中增重最快个体的基因型为AG型;此外,与雌性成鱼增重相关的位点还有G30T,其GG型和GT型增重显著(P<0.05)快于TT型个体,在雄性成鱼中也是GG型鱼长得较快,只是不显著;G-253T的GT型雄性成鱼增重极显著(P<0.01)快于GG和TT型个体,但在雌鱼中没有这种趋势。在雌雄鱼中均增重快的个体是G30T的GG型、A-341G的AG型和C72G的CG型,可以作为今后分子育种的标记。分析表明随富集标记个数的增多,增重也随之增大,这与数量性状特性相符。

关键词：建鲤胰岛素样生长因子结合蛋白3 单核苷酸多态性增重相关性

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海豚链球菌感染对不同品系罗非鱼血液生化指标和肝脏HSP70 mRNA表达的影响

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水产学报 2012年第6期36卷 958-968页

作者：强俊杨弘王辉徐跑柒壮林何杰南京农业大学无锡渔业学院中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室广东海洋大学水产学院

以吉富罗非鱼、新吉富罗非鱼、埃及尼罗罗非鱼和红罗非鱼为研究对象,饲养100d后,进行海豚链球菌(2.95×108CFU/mL)感染试验,分析攻毒前后各品系罗非鱼的血液生化指标和肝脏HSP70 mRNA表达量的变化规律。另从各桶中取20尾鱼进行同样... 详细信息

以吉富罗非鱼、新吉富罗非鱼、埃及尼罗罗非鱼和红罗非鱼为研究对象,饲养100d后,进行海豚链球菌(2.95×108CFU/mL)感染试验,分析攻毒前后各品系罗非鱼的血液生化指标和肝脏HSP70 mRNA表达量的变化规律。另从各桶中取20尾鱼进行同样的攻毒试验,统计攻毒后各时间点的累积死亡率。结果表明,感染海豚链球菌96h后,吉富罗非鱼和新吉富罗非鱼对病原较为敏感,累积死亡率分别达到36.67%和38.33%;埃及尼罗罗非鱼对病原敏感性较差,试验期间未见死亡。吉富罗非鱼、新吉富罗非鱼和红罗非鱼血清皮质醇和葡萄糖水平以及肝脏HSP70 mRNA的表达量在攻毒后明显提高,血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶与溶菌酶活力也呈上升趋势,碱性磷酸酶活力与甘油三酯和胆固醇水平低于攻毒前。埃及尼罗罗非鱼可以利用糖原和脂类产生的能量,提高了HSPS与一些特定免疫蛋白(溶菌酶、球蛋白等)的合成,增强了鱼体的非特异性免疫力。罗非鱼选育过程中,需要将抗病力与生长性能进行有效的结合,在注重生长速度的同时也要增强其抗应激能力,从而为罗非鱼产业的可持续发展提供保证。

关键词：罗非鱼海豚链球菌血液生化指标 HSP70 mRNA表达

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鲤IGF2b基因内含子的克隆、基因组序列分析及慢病毒载体构建

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中山大学学报（自然科学版） 2012年第2期51卷 77-85页

作者：苏胜彦董在杰袁新华梁政远曲疆奇张建桥刘伟马良骁徐跑南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心∥农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 南京农业大学动物科技学院江苏南京210095

为了了解鲤IGF2b基因与鲤生长性状之间的关系,以建鲤为试验材料,克隆了IGF2b基因内含子,分析其基因组序列的特点,构建了IGF2基因的慢病毒载体,同时观察其在293T细胞中的表达活性。结果获得鲤IGF2b 5 173 bp长度的基因组DNA序列(HM75589... 详细信息

为了了解鲤IGF2b基因与鲤生长性状之间的关系,以建鲤为试验材料,克隆了IGF2b基因内含子,分析其基因组序列的特点,构建了IGF2基因的慢病毒载体,同时观察其在293T细胞中的表达活性。结果获得鲤IGF2b 5 173 bp长度的基因组DNA序列(HM755899),共有3个内含子,4个外显子;在3'非翻译区存在2个CpG岛,在5'端非翻译区存在(T)n重复序列;除此之外,成功构建了慢病毒载体质粒Lenti-IGF2b-IRES-EG-FP,转染293T细胞后,产生的重组慢病毒颗粒出现高表达绿色荧光,荧光定量PCR检测发现IGF2b基因在293T细胞中高表达。这些结果将为研究IGF2b基因在多态性、表达方面与鲤生长性状之间的关联奠定基础。

关键词：鲤 IGF2b 内含子慢病毒载体

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美洲鲥的人工繁殖及胚胎发育的研究

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海洋科学 2012年第7期36卷 89-96页

作者：徐钢春张呈祥郑金良顾若波中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 长江珍稀鱼类保护研究中心江苏江阴214431 江阴市水产指导站江苏江阴214431

2007～2009年,利用深井水及设有钢架保温大棚的土池成功进行了美洲鲥(Alosa sapidissima)的亲鱼培育与人工繁殖的研究,同时观察了美洲鲥的胚胎发育过程。结果表明:2龄美洲鲥在池塘中经专池培育并采用激素+不饱和脂肪酸+维生素E投喂、水... 详细信息

2007～2009年,利用深井水及设有钢架保温大棚的土池成功进行了美洲鲥(Alosa sapidissima)的亲鱼培育与人工繁殖的研究,同时观察了美洲鲥的胚胎发育过程。结果表明:2龄美洲鲥在池塘中经专池培育并采用激素+不饱和脂肪酸+维生素E投喂、水流刺激等培育措施使雌雄鱼的性腺成熟率达60%～80%。性腺成熟的亲鱼经生态调控促使产卵或人工催产繁殖,生态调控促使产卵中水温保持在16～23℃,池水始终保持流动状态,50对美洲鲥亲鱼自4月中下旬至5月底陆续产卵,共收集鱼卵9.0万粒,平均受精率10%,孵化率70%～80%;人工催产试验中,采用LHRH-A2+鱼类催产助剂、LHRH-A2+HCG+DOM+鱼类催产助剂和LHRH-A2+HCG+鱼类催产助剂3种催产剂配伍,背鳍基部两针注射法,催产率20%～100%,获卵10.57万粒,受精率0～21.5%,孵化率0～70%。美洲鲥受精卵呈卵圆形,卵膜径为(4.03±0.25)mm,根据胚胎的外形与内部主要特征,胚胎发育分为7个生理阶段30个具体发育时期,在水温(20±1)℃下,历时约71 h40 min完成整个胚胎发育过程。

关键词：美洲鲥(Alosa sapidissima) 人工繁殖胚胎发育

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刀鲚不同组织的乳酸脱氢酶同工酶及DNA含量研究

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上海海洋大学学报 2012年第4期21卷 481-488页

作者：徐钢春董晶晶聂志娟徐跑顾若波中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081 南京农业大学渔业学院江苏无锡214081

采用同工酶技术和流式细胞术研究了刀鲚肝脏、眼睛、肾脏、肌肉、鳃和血清6个组织的乳酸脱氢酶(LDH)及尾鳍、鳃、肌肉、性腺和肝脏5个组织的细胞核DNA含量,旨在为刀鲚遗传背景和种质标准的建立提供技术参数。结果显示:(1)刀鲚不同组织的... 详细信息

采用同工酶技术和流式细胞术研究了刀鲚肝脏、眼睛、肾脏、肌肉、鳃和血清6个组织的乳酸脱氢酶(LDH)及尾鳍、鳃、肌肉、性腺和肝脏5个组织的细胞核DNA含量,旨在为刀鲚遗传背景和种质标准的建立提供技术参数。结果显示:(1)刀鲚不同组织的LDH同工酶呈现一定的组织特异性,眼睛是LDH表达较为典型的组织;除肌肉和血清没有LDH2条带外,其余组织均出现了5条同工酶酶带,并且相对迁移率一致,各组织中均未见LDH-c基因的表达。(2)刀鲚鳃、肌肉和肝脏3个组织的细胞核DNA含量不存在显著差异(P>0.05),但都显著低于尾鳍、卵巢细胞DNA含量(P<0.05);测定的鳃、肌肉和肝脏组织细胞核的DNA含量与单倍体的精子细胞的比值依次为2.16、2.19和2.22,即刀鲚为二倍体鱼类。此外,肝脏细胞容易从组织上脱落,较易制成单细胞悬液,是用流式细胞仪进行倍性分析的适宜试材;如果要保持生物体健康存活状态,则剪取小部分尾鳍进行倍性分析为宜。研究亮点:首次报道了刀鲚的乳酸脱氢酶同工酶酶带相对迁移率、组织分布、活性扫描及细胞核DNA含量。研究发现,刀鲚眼睛是LDH表达较为典型的组织;刀鲚是二倍体鱼类,肝脏细胞是进行倍性分析的适宜试材,这为刀鲚遗传背景和种质标准的建立提供了科学依据。

关键词：刀鲚乳酸脱氢酶 DNA含量

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基于micro CT扫描技术的鲤骨骼和显微结构分析

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南方水产科学 2012年第6期8卷 44-49页

作者：张宁苏胜彦董在杰马庆男袁新华南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

了解活体鲤(Cyprinus carpio)骨结构、形态、连接、空间分布以及骨骼矿物质组成对鲤的选育、行为学研究以及肉品加工有重要的意义。X射线显微CT技术(micro CT)对样品没有破坏,可实现活体检测,并能获取活体任意形态的结构参数。因此,文... 详细信息

了解活体鲤(Cyprinus carpio)骨结构、形态、连接、空间分布以及骨骼矿物质组成对鲤的选育、行为学研究以及肉品加工有重要的意义。X射线显微CT技术(micro CT)对样品没有破坏,可实现活体检测,并能获取活体任意形态的结构参数。因此,文章通过这项技术来研究活体鲤的骨骼状况。结果显示,脊椎骨与头、尾相连,胸鳍位于头骨后,背鳍、腹鳍和尾鳍与整个脊椎骨并不相连。骨体积分数和骨小梁厚度在腹鳍较高,头尾较低;骨表面积体积比、骨小梁数量和骨小梁间隔在头部较高,腹鳍较低;骨矿物质含量、骨矿物质密度和组织矿物质含量在背鳍最高;骨体积分数在腹鳍最高,胸鳍、背鳍和尾鳍次之,头尾较低。骨小梁厚度、矿物质含量等在背鳍、腹鳍部位较高,这可能与鲤的运动有关,而头骨表面积体积比、骨小梁数量和骨小梁间隔较高可能与头部的复杂结构密切相关。

关键词：鲤 micro CT 骨显微结构

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盐度对鱼类胚胎及仔鱼发育影响的研究进展

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江苏农业科学 2012年第5期40卷 187-192页

作者：王杰李冰张成锋朱健南京农业大学无锡渔业学院江苏无锡214081 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室江苏无锡214081

盐度是影响鱼类胚胎及仔鱼发育的重要生态因子之一,盐度对受精卵的沉浮分布,胚胎的渗透调节、孵化率、畸形率、能量收支以及仔鱼的生长发育均有影响。就盐度对鱼类胚胎及仔鱼发育影响的研究进展进行了综述。

关键词：盐度胚胎仔鱼渗透调节孵化率 SAI值

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刀鲚精巢发育的组织学研究

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华中农业大学学报 2012年第2期31卷 247-252页

作者：徐钢春聂志娟张呈祥魏广莲徐跑顾若波中国水产科学研究院淡水渔业研究中心/农业部淡水渔业和种质资源利用重点实验室无锡214081 南京农业大学渔业学院无锡214081 江苏省江阴市水产指导站江阴214431

采用石蜡切片,HE组织染色方法研究性成熟刀鲚的精巢结构、精巢发育规律和精子形成过程。结果表明:刀鲚的雄性生殖腺由精巢(生精部)、贮精囊和输精管等组成,精巢为典型的小叶型结构,由精小叶、精小囊、小叶间质、小叶腔和输出管构成。精... 详细信息

采用石蜡切片,HE组织染色方法研究性成熟刀鲚的精巢结构、精巢发育规律和精子形成过程。结果表明:刀鲚的雄性生殖腺由精巢(生精部)、贮精囊和输精管等组成,精巢为典型的小叶型结构,由精小叶、精小囊、小叶间质、小叶腔和输出管构成。精小叶由各期生精细胞和支持细胞构成,各期生精细胞和支持细胞组成了精小囊,成熟的精子从精小囊中释放出来,进入小叶腔中,经由精小叶间形成的临时通道进入输出管,再由输出管送达贮精囊。贮精囊为网状管腔结构,管腔内壁由分泌细胞组成。精子发生经历了精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞及精子细胞和成熟的精子5个阶段,根据精巢的外形、色泽、体积、血管分布状况等特征分为6个时期。

关键词：刀鲚精巢发育形态组织学

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