检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2010年第10期32卷 1071-1076页

作者：黄关青华玉伟高战黄华孙中国热带农业科学院橡胶研究所、农业部橡胶树生物学重点开放实验室、国家橡胶树育种中心海南儋州571737

为高通量富集橡胶树基因编码序列,文章首次利用大肠杆菌McrBC限制修饰系统构建了巴西橡胶树基因组甲基化过滤文库。该文库未扩增和扩增后的滴度分别为2.6×106pfu/mL和9×109pfu/mL,阳性克隆率为86.4%,插入片段大小为1～2.5kb,... 详细信息

为高通量富集橡胶树基因编码序列,文章首次利用大肠杆菌McrBC限制修饰系统构建了巴西橡胶树基因组甲基化过滤文库。该文库未扩增和扩增后的滴度分别为2.6×106pfu/mL和9×109pfu/mL,阳性克隆率为86.4%,插入片段大小为1～2.5kb,平均长度为1.2kb。随机挑选100个克隆进行测序,共拼接出81个非冗余序列,其中包括6个重叠群(Contigs)和75个单一序列(Singlets),冗余度为17.35%。Blast分析发现,39.5%非冗余序列与Nr库中功能基因同源,14.81%与EST数据库中序列同源,32.1%序列为未知序列,且部分序列为开花调控、抗虫和抗病等功能相关的同源基因。橡胶树甲基化文库的建立为橡胶树重要功能基因发现和克隆提供一条重要途径。

关键词：巴西橡胶树甲基化过滤基因富集文库构建

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巴西橡胶树响应低温逆境的生理特征及其调控机制

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植物生理学报 2012年第4期48卷 318-324页

作者：王祥军李维国高新生吴春太张晓飞中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心农业部橡胶树生物学重点开放实验室海南儋州571737

低温是非传统植胶区巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)种植的重要限制因子。低温能够引起巴西橡胶树细胞结构、原生质胶体特性、水分状况、细胞渗透压、光合作用、呼吸作用、物质代谢和保护酶系统等发生一系列改变,最终影响植株的生长发... 详细信息

低温是非传统植胶区巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)种植的重要限制因子。低温能够引起巴西橡胶树细胞结构、原生质胶体特性、水分状况、细胞渗透压、光合作用、呼吸作用、物质代谢和保护酶系统等发生一系列改变,最终影响植株的生长发育。目前已从巴西橡胶树中克隆出一些抗寒相关基因,但是巴西橡胶树响应低温胁迫的调控机制仍不十分清楚。本文综述了巴西橡胶树对低温逆境响应的生理特征及其应答调控机制,以期为深入研究巴西橡胶树抗寒机制提供参考。

关键词：巴西橡胶树低温生理特征调控机制

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植物原生质体融合研究进展及其在育种中的应用

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热带作物学报 2012年第8期33卷 1516-1521页

作者：戴雪梅黄天带孙爱花周权男李哲华玉伟中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室国家橡胶树育种中心海南儋州571737

植物原生质体融合即体细胞杂交是有性杂交的重要有益补充。本文主要介绍植物原生质体融合技术(包括融合方法和融合方式)的研究进展及其在植物育种中的主要应用,并分析和探讨体细胞杂交育种在实践中存在的一些问题,同时对其应用前景作出... 详细信息

植物原生质体融合即体细胞杂交是有性杂交的重要有益补充。本文主要介绍植物原生质体融合技术(包括融合方法和融合方式)的研究进展及其在植物育种中的主要应用,并分析和探讨体细胞杂交育种在实践中存在的一些问题,同时对其应用前景作出展望。

关键词：原生质体融合体细胞杂交育种研究进展应用

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橡胶树种质资源描述规范及共享试点建设

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热带作物学报 2009年第5期30卷 631-636页

作者：胡彦师曾霞安泽伟华玉伟黄华孙中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室国家橡胶树育种中心海南儋州571737

我国橡胶树种质资源缺乏系统全面的描述规范,共享工作进展缓慢,共享效率较低。本研究中,以国家橡胶树种质资源圃保存的6060份橡胶树种质资源为材料,通过对橡胶树种质资源描述规范和数据标准的制定及共享试点建设的研究,提出了橡胶树种... 详细信息

我国橡胶树种质资源缺乏系统全面的描述规范,共享工作进展缓慢,共享效率较低。本研究中,以国家橡胶树种质资源圃保存的6060份橡胶树种质资源为材料,通过对橡胶树种质资源描述规范和数据标准的制定及共享试点建设的研究,提出了橡胶树种质资源主要性状鉴定技术方法和分级标准,建立了橡胶树种质资源数据库结构,为建立统一、规范的橡胶树种质资源数据库,实现橡胶树种质资源的充分共享和高效利用奠定了基础。

关键词：巴西橡胶树种质资源描述规范标准化整理共享平台

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巴西橡胶树HbRPS6-2基因的克隆与生物信息学分析

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热带作物学报 2011年第11期32卷 2048-2053页

作者：涂敏蔡海滨华玉伟黄华孙中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室国家橡胶树育种中心海南儋州571737

从巴西橡胶树甲基化过滤文库中筛选到一个与RPS6同源性较高的基因片段,根据该基因片段序列信息,设计特异引物,利用RACE进行特异片段的5'和3'扩增,获得长度为1 327 bp的HbRPS6-2基因克隆。生物信息学分析表明,该基因包含483 bp... 详细信息

从巴西橡胶树甲基化过滤文库中筛选到一个与RPS6同源性较高的基因片段,根据该基因片段序列信息,设计特异引物,利用RACE进行特异片段的5'和3'扩增,获得长度为1 327 bp的HbRPS6-2基因克隆。生物信息学分析表明,该基因包含483 bp的开放阅读框,5'非翻译区为357 bp,3'非翻译区为475 bp,编码161个氨基酸。在HbRPS6-2氨基酸序列中没有预测到信号肽和跨膜区,二级结构分析表明其属于混合型蛋白。HbRPS6-2在N端前18个氨基酸区域内有一个较强的疏水区,但整条多肽链表现为亲水性。对15个RPS6系统进化分析发现,巴西橡胶树的RPS6-2基因与多杀性巴氏杆菌的RPS6基因亲缘关系最近,而与拟南芥和玉米等亲缘关系相对较远。

关键词：巴西橡胶树 HbRPS6—2 基因克隆序列分析

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橡胶树原生质体培养研究进展

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热带作物学报 2011年第10期32卷 1973-1976页

作者：戴雪梅黄天带孙爱花周权男李哲华玉伟中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室国家橡胶树育种中心海南儋州571737

原生质体培养植株再生体系的建立,可为利用生物技术对橡胶树育种进行品种改良提供良好的受体系统。综述橡胶树原生质体培养的研究进展,并分析影响橡胶树原生质体再生的主要因素:(1)原生质体分离的起始材料;(2)原生质体的分离和纯化;(3)... 详细信息

原生质体培养植株再生体系的建立,可为利用生物技术对橡胶树育种进行品种改良提供良好的受体系统。综述橡胶树原生质体培养的研究进展,并分析影响橡胶树原生质体再生的主要因素:(1)原生质体分离的起始材料;(2)原生质体的分离和纯化;(3)培养基成分;(4)培养方法;(5)品种基因型。

关键词：橡胶树原生质体原生质体培养生物技术育种

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橡胶树胶乳均一化全长cDNA文库的构建与EST测序分析

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中国农业科学 2011年第4期44卷 683-690页

作者：曾日中段翠芳聂智毅代龙军黎瑜中国热带农业科学院橡胶研究所/农业部橡胶树生物学重点开放实验室/省部共建国家重点实验室培育基地

【目的】构建橡胶树胶乳均一化全长cDNA文库,降低胶乳中存在的高丰度表达基因的拷贝数,提高胶乳表达基因的分离鉴定和EST测序分析效率。【方法】以橡胶树无性系热研7-33-97的胶乳为材料,将胶乳全长cDNA与Gateway供体载体pDONR222重组,... 详细信息

【目的】构建橡胶树胶乳均一化全长cDNA文库,降低胶乳中存在的高丰度表达基因的拷贝数,提高胶乳表达基因的分离鉴定和EST测序分析效率。【方法】以橡胶树无性系热研7-33-97的胶乳为材料,将胶乳全长cDNA与Gateway供体载体pDONR222重组,构建了橡胶树胶乳的非剪切型全长cDNA原始文库,经检测原始文库的滴度为6.0×106 cfu/mL,平均插入片段长度大于1.5 kb,重组率约为100%,全长cDNA比例约为76%;利用基因组DNA饱和杂交技术对胶乳原始cDNA文库进行均一化处理,构建橡胶树胶乳的均一化全长cDNA文库。【结果】胶乳均一化全长cDNA文库的总库容量(总CFU)为1.87×105,重组率大于95%。定量RT-PCR检测表明,橡胶树胶乳2个高丰度表达基因,即小橡胶粒子蛋白(SRPP)和橡胶延长因子(REF)基因,在均一化cDNA文库中的表达量均下降了约1 000倍。【结论】构建了均一化效果良好的橡胶树胶乳全长cDNA文库,并对文库中随机的12 000个克隆进行了测序,获得高质量的有效EST(expressed sequence tag)序列为11 951条,经拼接共获得单一基因(unigene)为3 394个,其中包括片段重叠群(contig)2 061个和单一EST序列(singlet)1 333个。此cDNA文库将可用于橡胶树功能基因组研究、新基因筛选、高通量EST测序以及橡胶树胶乳cDNA芯片的制备。

关键词：橡胶树胶乳均一化全长cDNA文库

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应用酵母双杂交系统筛选橡胶延长因子REF的互作蛋白

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热带亚热带植物学报 2011年第5期19卷 400-406页

作者：曾日中李先昆聂智毅代龙军黎瑜段翠芳中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学重点开放实验室省部共建国家重点实验室培育基地海南儋州571737

利用酵母双杂交系统,以橡胶树(Hevea brasiliensis)橡胶延长因子基因REF的开放阅读框(ORF)构建无自激活性的诱饵表达载体pBD-GAL4-REF,并筛选以pAD-GAL4-2.1载体构建的橡胶树胶乳cDNA文库,对阳性克隆的cDNA插入片段进行测序及生物学功... 详细信息

利用酵母双杂交系统,以橡胶树(Hevea brasiliensis)橡胶延长因子基因REF的开放阅读框(ORF)构建无自激活性的诱饵表达载体pBD-GAL4-REF,并筛选以pAD-GAL4-2.1载体构建的橡胶树胶乳cDNA文库,对阳性克隆的cDNA插入片段进行测序及生物学功能分析。通过酵母双杂交筛选,共获得5种可能与REF互作的候选蛋白质,它们分别为与诱饵蛋白REF高度同源的REF家族成员、小橡胶粒子蛋白(SRPP)、翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)、激发子响应蛋白和泛素耦联酶E2,这表明橡胶延长因子REF除了与自身高度同源蛋白质可能存在相互作用之外,还可能与TCTP和激发子响应蛋白等其它蛋白质发生相互作用。这些结果有助于揭示橡胶粒子的生物学功能。

关键词：橡胶树橡胶延长因子REF 橡胶生物合成酵母双杂交系统

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根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立

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作物学报 2010年第10期36卷 1691-1697页

作者：黄天带李哲孙爱花周权男华玉伟黄华孙中国热带农业科学院橡胶研究所/国家橡胶树育种中心/农业部橡胶树生物学重点开放实验室/省部共建国家重点实验室培育基地/海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737

为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不... 详细信息

为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。

关键词：橡胶树根癌农杆菌花药愈伤组织遗传转化次生体胚发生

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木本植物超低温冷冻保存研究进展

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中国农学通报 2010年第6期26卷 93-96页

作者：周权男孙爱花李哲姜泽海中国热带农业科学院橡胶研究所国家橡胶树育种中心农业部橡胶树生物学重点开放实验室国家重要热带作物工程技术研究中心海南儋州571737 海南大学农学院海南儋州571737

综述了国内外木本植物种质资源超低温保存方面的最新研究成果,主要从材料选择、冰冻方法两个方面总结超低温保存的原理、影响因素以及对比不同冻存方法的优缺点,并展望了木本植物种质资源超低温保存技术的应用前景。

关键词：木本植物种质超低温冷冻保存

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